FITC IgG (Monkey Absorbed) Conjugate no EB
For In Vitro Diagnostic Use
Product Code: 504013
Intended Use
This product is intended to be used on INOVA’s Monkey tissue slides to assist in the qualitative
determination of autoantibodies in patient serum by indirect immunofluorescence. The identification
of such auto-antibodies aids in the diagnosis of autoimmune diseases. Suitability for use in other IFA
combinations has not been assessed but use in such assays should not necessarily be excluded.
Principles of the Procedure
An indirect immunofluorescence technique is used where patient samples and appropriate controls
are incubated with substrate tissue. The unreacted antibodies are washed off and then the
conjugate is applied. Unbound conjugate is washed off as before. Slides are viewed with a
fluorescence microscope and positive samples are observed as apple green fluorescence which
corresponds to the antibody of interest
1.
Reagent
Antisera is prepared by immunizing goats with human IgG fragment purified from normal human
serum. The resulting antiserum is delipidated. Affinity purified antibodies are isolated by binding to
human IgG attached to agrarose beads, followed by a proprietary elution process. The purified
antibody is then conjugated with fluorescein isothiocyanate (FITC) and unreacted fluorochrome is
removed by gel filtration. This product is diluted to an optimal concentration for use in indirect
immunofluorescence. Preservatives are added and the product 0.2µm filtered.
Warnings/Precautions
This product should only be used by suitably trained persons for the purposes stated. Adherence to
the given procedure is recommended. This product contains sodium azide and must be handled
with caution – do not ingest or allow contact with skin or mucous membranes. If contact does occur
wash with a large volume of water and seek medical advice. Explosive metal azides may be formed
with lead and copper plumbing; on disposal of reagent, flush with a large volume of water to prevent
azide build up.
Storage Conditions
This product should be stored at 2-8°C. DO NOT FREEZE. It is stable until the expiry date given on
the label. Slight precipitation can occur on storage which may be removed by centrifugation and
should not affect the performance characteristics.
Procedure
Materials provided
• 7mL FITC IgG (Monkey Absorbed) Conjugate no EB
• Product
Insert
Additional Materials Required But Not Provided
1. Substrate
slide
2.
Phosphate buffer saline (PBS)
3.
Humidity chamber for incubation steps.
4.
Negative and Positive control sera
5.
Mounting media and coverslips
6.
Fluorescence microscope with 495nm exciter filter and 515nm barrier filter.
Test Procedure
(Refer to appropriate slide insert for full details.)
Add one drop of 504013 to each well. Do not leave wells uncovered for longer than 15 seconds.
Limitations of the Procedure
The light source, filters and optics of different makes of fluorescence microscopes will influence the
sensitivity of the assay. The performance of the microscope is significantly influenced by correct
maintenance especially centring of the mercury vapour lamp and changing of the lamp after the
recommended period of time.
References
1. Bradwell
A.R.
et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd.,
Birmingham UK.
IgG FITC-Konjugat (Affen-absorbiert) nicht EB
Nur für “In-Vitro Diagnostik”
Bestell-Nr.: 504013
Verwendungszweck
Dieses Produkt kann auf Affengewebe-Gefrierschnitten von INOVA‘s verwendet werden. Es dient zum qualitativen Nachweis von Autoantikörpern in Patientenseren durch die indirekte Immunfloreszenz. Die Identifikation dieser Autoantikörper unterstützt die Diagnose von Autoimmun-Erkrankungen. Die Verwendung dieses Produktes zusammen mit anderen Substraten wurde nicht geprüft, ist aber nicht zwangsläufig ausgeschlossen.
Informationen zum Test
Der Test beruht auf der indirekten Immunfluoreszenz-Technik. Das Patientenserum und entsprechende Kontrollen werden mit dem Substrat inkubiert. In einem Waschschritt werden die nicht reagierenden Antikörper entfernt und dann das Fluoreszein-Konjugat zuge-geben. Überschüssiges Konjugat wird durch Waschen entfernt. Die Beurteilung der Objektträger erfolgt unter dem Fluoreszenzmikroskop. Positive Proben zeigen im Bereich der Bindungsstellen zwischen dem Substrat und den Antikörpern eine apfelgrüne Fluoreszenz.1
Reagenzien
Das Antiserum wird mittels Immunisierung von Ziege mit einem humanen IgG-Fc-Fragment (gereinigt aus normalem Humanserum) hergestellt. Das gewonnene Antiserum wird delipidiert. Affinitätsgereinigte Antikörper werden mittels Bindung an humanes IgG an Agarose-Beads isoliert, worauf ein eigenes Elutionsverfahren folgt. Hierauf werden der gereinigte Antikörper mit Fluoresceinisothiocyanat (FITC) konjugiert und unreagiertes Fluorochrom mittels Gelfiltrierung entfernt. Das Reaktionsprodukt (Konjugat) wird optimal für die Verwendung in der indirekten Immunfluoreszenz verdünnt, mit Konservierungsstoffen versetzt und durch einen 0,2µm Fliter filtriert.
Hinweise/Vorsichtsmaßnahmen
Dieses Produkt sollte nur von entsprechend geschultem Laborpersonal verwendet werden. Die Einhaltung der Arbeitsvorschrift wird empfohlen. Dieses Produkt enthält Natriumazid und muss mit den entsprechenden Vorsichtsmaßnahmen behandelt werden. Verschlucken sowie Kontakt mit Haut oder Schleimhäuten vermeiden. Nach Kontakt Hautstelle mit viel Wasser abspülen und ärztlichen Rat einholen. Natriumazid kann mit Blei- oder Kupferrohren explosive Metallazide bilden. Nach der Entsorgung mit aus-reichender Menge Wasser nachspülen um Azidablagerungen zu vermeiden.
Lagerung
Dieses Produkt bei 2-8°C lagern. NICHT EINFRIEREN. Es ist so bis zum auf dem Etikett angegebenen Datum haltbar. Während der Lagerung kann eine leichte Präzipitatbildung auftreten. Das Präzipitat durch Zentrifugation entfernen, die Produktqualität wird dadurch nicht beeinträchtigt.
Probengewinnung und Vorbereitung
Dieses Produkt bei 2-8°C lagern. NICHT EINFRIEREN. Es ist so bis zum auf dem Etikett angegebenen Datum haltbar. Während der Lagerung kann eine leichte Präzipitatbildung auftreten. Das Präzipitat durch Zentrifugation entfernen, die Produktqualität wird dadurch nicht beeinträchtigt.
Testdurchführung
Gelieferte Materialien
• 7mL IgG FITC-Konjugat (Affen-adsorbiert) nicht EB • 1 x Arbeitsanleitung
Zusätzlich benötigte, nicht gelieferte Materialien
1. Substrat-Objektträger2. Phosphat-gepufferte Kochsalzlösung (PBS-Puffer) 3. Feuchte Kammer für die Inkubationen
4. Negativ- und Positivkontrollseren 5. Eindeckmedium und Deckgläschen
Testdurchführung
(Detailangaben siehe spezifische Arbeitsanleitung).
Je einen Tropfen 504013 auf jede Auftragstelle geben. Auftragsstellen nicht länger als 15 Sekunden unbedeckt lassen.
Einschränkungen des Tests
Die im Fluoreszenzmikroskop verwendete Lichtquelle, Filter und Optik beeinflussen die Sensitivität des Tests. Die Qualität des Mikroskops wird maßgeblich durch die korrekte Wartung, speziell durch Zentrieren der Quecksilberlampe und deren Austausch nach der empfohlenen Brenndauer, beeinflusst.
Referenzen
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
Coniugato IgG FITC (Absorbito con tessuto di scimmia) no EB
Per uso diagnostico In Vitro
Codice Prodotto: 504013
Finalità d’uso
Questo prodotto è utilizzato sui vetrini INOVA di tessuto di scimmia come prodotto complementare nella determinazione qualitativa degli autoanticorpi nel siero umano, mediante immunofluorescenza indiretta. L’identificazione di tali autoanticorpi costituisce un sussidio nella diagnosi delle malattie autoimmuni. L’idoneità all’uso in altre combinazioni IFA non è stata valutata ma l’utilizzo in tali dosaggi non deve essere necessariamente escluso.
Riassunto e Spiegazione del test
Viene impiegata una tecnica di immunofluorescenza indiretta in cui i campioni dei pazienti e i relativi controlli sono incubati con i tessuti. Gli anticorpi non specifici sono eliminati con il lavaggio, quindi viene applicato un coniugato fluoresceinato. I vetrini vengono poi lavati come prima per eliminare il coniugato non legato. Per la lettura dei vetrini si utilizza un microscopio a fluorescenza. I campioni positivi presentano una fluorescenza di colore verde brillante che corrisponde all’autoanticorpo che si vuole determinare.1
Reagenti
Gli antisieri vengono preparati immunizzando le capre con frammento Fc delle IgG umane purificato tratto da normale siero umano. L’antisiero risultante viene delipidizzato. Gli anticorpi purificati per affinità vengono isolati mediante legame alle IgG umane attaccate alle perle di agarosio e successivo processo di eluizione proprietario. L’anticorpo purificato viene quindi coniugato con isotiocianato di fluoresceina (FITC) e il fluorocromo privo di reazione viene rimosso mediante filtrazione del gel. Il presente prodotto è stato diluito ad una concentrazione ottimale per l’utilizzo in immunofluorescenza indiretta. Vengono aggiunti infine dei conservanti ed il prodotto viene filtrato a 0,2μm.
Avvertenze/ Precauzioni
Il presente prodotto deve essere utilizzato da personale specializzato. Si raccomanda di osservare la procedura del test alla lettera. Il prodotto contiene sodio azide e deve essere trattato con cautela – non ingerire né permettere il contatto con la pelle o le mucose. In caso di contatto, lavare con molta acqua e rivolgersi al medico. Azotidrati metallici esplosivi si possono formare con il rame e il piombo; per evitare l’accumulo di tali composti, far scorrere abbondante acqua sui reagenti eliminati.
Condizioni di conservazione
Il prodotto deve essere conservato a 2-8°C ed è stabile fino alla data di scadenza indicata sull’etichetta. NON CONGELARE. In fase di conservazione si potrà osservare una lieve precipitazione eliminabile mediante centrifugazione, che non influirà sulle caratteristiche del dosaggio.
Procedura
Materiali forniti
• 7mL Coniugato IgG FITC (Absorbito con tessuto di scimmia) no EB
• Scheda tecnica
Materiale necessario ma non fornito
1. Vetrini con substrato
2. Tampone PBS
3. Camera umida per le fasi d’incubazione 4. Sieri di controllo positivi e negativi
5. Soluzioni di montaggio e vetrini coprioggetti
6. Microscopio a fluorescenza con filtro a 495nm (exciter) e filtro a 515nm (barrier)
Procedura del test
(Far riferimento alla metodica del vetrino per maggiori dettagli).
Limitazioni del test
La fonte luminosa, i filtri e l’ottica dei microscopi a fluorescenza di diverse marche influiranno sulla sensibilità del kit. La performance del microscopio è influenzata notevolmente da una corretta manutenzione, e in particolare dalla centratura e dalla sostituzione della lampada a vapori di mercurio dopo il periodo di tempo consigliato.
Bibliografia
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
Conjugado IgG FITC (Absorbido de mono) no EB
Per uso diagnostico In Vitro
Codice Prodotto: 504013
Finalità d’uso
Este producto está diseñado ser utilizado en los portaobjetos de tejido de mono de INOVA para ayudar a la determinación cualitativa de autoanticuerpos en suero de paciente mediante inmuno-fluorescencia indirecta. La identificación de estos autoanticuerpos contribuye al diagnóstico de enfermedades autoinmunes. No se ha evaluado la idoneidad del uso con otras combinaciones de IFA, aunque no debe excluirse en este tipo de ensayos.
Sumario y Explicación de la prueba
Se utiliza una técnica de inmunofluorescencia indirecta en la que las muestras de paciente y los controles correspondientes se incuban con tejido del sustrato. Los anticuerpos no reactivos se eliminan mediante lavado y, a continuación, se aplica el conjugado. El conjugado no unido se elimina mediante lavado como se ha hecho anteriormente. Los portaobjetos se examinan con un microscopio de fluorescencia. Las muestras positivas producen una fluorescencia de color verde claro que corresponde al anticuerpo en cuestión.1
Reactivos
El antisuero se prepara inmunizando cabras con el fragmento Fc de IgG humana purificada a partir de suero humano normal. El antisuero resultante se deslipida. Los anticuerpos purificados por afinidad se aíslan uniéndolos a IgG humana fijada a lechos de agarosa y realizando después un proceso de elución patentado. A continuación, el anticuerpo purificado se conjuga con isotiocianato de fluoresceína (FITC) y el fluorocromo que no ha reaccionado se elimina mediante filtración en gel. Este producto se diluye a una concentración óptima para utilizarse en inmunofluorescencia indirecta. Se añaden conservantes al producto y se pasa a través de un filtro de 0,2μm.
Advertencias/Precauciones
Este producto sólo debe ser utilizado por personal debidamente formado para los fines mencionados. Se recomienda seguir el procedimiento descrito a continuación. Este producto contiene azida sódica y debe manejarse con cuidado. No ingerir; evitar que entre en contacto con la piel o las membranas mucosas. En caso de contacto, lavar la zona con agua abundante y consultar a un médico. Pueden formarse azidas metálicas explosivas con el cobre o el plomo de las tuberías. Al eliminar el reactivo, lavar los recipientes con agua abundante para evitar la acumulación de azida en los desagües.
Condiciones de almacenamiento
Este producto debe almacenarse a 2-8°C. NO CONGELAR. Es estable hasta la fecha de caducidad que figura en la etiqueta. Puede producirse una ligera precipitación durante el almacenamiento que puede eliminarse mediante centrifugación. Ésta no debería afectar a las características de rendimiento.
Procedimiento
Materiales Suministrados
• 7ml Conjugado IgG FITC (Absorbido de Mono) no EB • Instrucciones de uso.
Material necesario no incluido
1. Portaobjetos de sustrato2. Solución salina tamponada con fosfato (PBS) 3. Cámara húmeda para las etapas de incubación 4. Sueros de control positivos y negativos 5. Medio de montaje y cubreobjetos
6. Microscopio de fluorescencia con un filtro de excitación de 495nm y un filtro barrera de 515nm
Procedimiento de ensayo.
(Consultar el folleto del portaobjetos correspondiente para obtener más detalles.)
Limitaciones del Procedimiento
La calidad de la fuente de luz, los filtros y la óptica de los microscopios de fluorescencia influirán en la sensibilidad del ensayo. El funcionamiento del microscopio depende de un correcto mantenimiento, especialmente del enfoque de la lámpara de vapor de mercurio y el reemplazo de la misma una vez transcurrido el período de tiempo recomendado.
Referencias
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
Conjugué FITC IgG (Absorbé sur singe) non EB
Uniquement pour “Diagnostics In-Vitro“
Références : 504013
Application
Ce conjugué doit être utilisé en conjonction avec les lames de tissus de singe INOVA pour la détermination qualitative des autoanticorps dans le sérum humain en immunofluorescence indirecte. L’identification de tels anticorps apporte une aide dans le diagnostic de maladies autoimmunes. L’utilisation de ces réactifs pour d’autres tests en immunofluorescence indirecte n’a pas été évaluée mais ne doit pas être nécessairement exclue.
Informations concernant le test
Une technique d’immunofluorescence indirecte est utilisée lorque les sérums et les contrôles appropriés sont incubés avec les lames de tissus. Les anticorps non fixés sont éliminés par lavage et le conjugué est déposé. Le conjugué non lié est également éliminé par lavage. Les lames sont ensuite observées sous microscope. Les sérums positifs présentent une fluorescence verte qui correspond à l’anticorps recherché.1
Reactif
L’antisérum est préparé en immunisant des chèvres avec un fragment d’IgG Fc humain purifié à partir de sérum humain sain. L’antisérum obtenu est délipidé. Les anticorps purifiés par affinité sont isolés en les liant à des IgG humaines fixées sur des billes d’agarose, puis en effectuant un processus d’élution exclusif. L’anticorps purifié est ensuite conjugué à de la fluorescéine-isothiocyanate (FITC), puis le fluorochrome inactivé est éliminé par filtration sur gel.
Le conjugué est dilué à une concentration optimale pour être utilisé en immunofluorescence indirecte. Des conservateurs sont ajoutés et le produit est filtré à 0,2µm.
Avertissements/Précautions
Ce produit doit être manipulé par des personnes compétentes en techniques de laboratoire. Il est recommandé de suivre scrupuleusement la procédure d’utilisation. Ce réactif contient de l’azide de sodium, il doit donc être utilisé avec précaution. Ne pas ingérer ou mettre en contact avec la peau ou les muqueuses. En cas de contact, laver à grande eau et consulter un médecin. Des azides de métaux explosifs peuvent se former avec le cuivre et le plomb, laver à grande eau les récipients afin d’éviter la formation des azides de métaux.
Conditions de conservation
Ces produits doivent être stockés à 2-8°C dès leur réception, ne pas congeler. Ils sont stables jusqu’à la date de péremption indiquée sur l’étiquette du flacon. De faibles précipitations peuvent avoir lieu lors du stockage qui peuvent être éliminées par centrifugation, ceci n’affecte en rien les performances des réactifs.
Procédure
Matériel fourni
• 7mL Conjugué FITC IgG (Absorbé sur singe) non EB • Fiche technique
Autre matériel nécessaire non fourni
1. Lames 2. Tampon PBS
3. Chambre humide (pour les étapes d’incubation) 4. Contrôles négatif et positif
5. Milieu de montage et lamelles
6. Microscope avec filtre excitant à 495nm et filtre barrière à 515nm
Procédure
(cf. fiche technique des lames)
Limites du test
La source lumineuse, les filtres et les optiques des microscopes influent sur la sensibilité du test. Les performances du microscope dépendent de la qualité de la maintenance (changement de la lampe).
Références
1. Bradwell A.R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
Conjugado FITC IgG (Absorvida Macaco) não EB
Para Diagnóstico In Vitro
Código do Produto:
504013
Complexidade CLIA: Elevada
Aplicação Diagnóstica
Este produto deve ser utilizado com lâminas contendo tecido de macaco da INOVA como auxiliar na determinação qualitativa de autoanticorpos no soro de doentes por imunofluorescência indirecta. A identificação destes autoanticorpos vai auxiliar o diagnóstico de doenças autoimunes. A utilização com outros métodos de I.F. não foi ainda verificada. Contudo não deve ser excluída a utilização neste tipo de testes.
Princípio do Procedimento
Quando é utilizada a técnica de imunofluorescência indirecta, as amostras e os controlos são incubadas com substrato de tecido. Os anticorpos que não reagiram são removidos através de lavagem e é aplicado o conjugado. Em seguida, as lâminas são observadas ao microscópio de fluorescência. A positividade das lâminas manifesta-se através de uma fluorescência; são observadas amostras positivas onde a “verde-maçâ” que corresponde ao anticorpo relevante.1
Reagente
Os anti-soros são preparados através da imunização de cabras com IgG humana, fragmento Fc purificado a partir de soro humano normal. O anti-soro resultante é deslipidado. Os anticorpos purificados por afinidade são isolados por ligação à IgG humana ligada a esferas de agarose, seguida de um processo de eluição proprietário. O anticorpo purificado é então conjugado com isotiacianato de fluoresceína (FITC) e o fluorocromo sem reacção é eliminado através de filtração em gel. A diluição deste produto é optimizada para ser utilizado em imunofluorescência indirecta. São adicionados conservantes e o produto é filtrado (0,2μm).
Advertências/ Precauções
Deve proceder-se a um manuseamento e métodos de inutilização adequados para todo o material potencialmente infectado e apenas a pessoal treinado adequadamente nestes métodos deverá ser permitida a execução destes procedimentos. Os componentes do kit contêm azida de sódio como conservante, pelo que terão que ser manuseados com precaução – não ingerir nem permitir o contacto com a pele ou membranas mucosas. Se ocorrer um contacto com o produto, deve-se lavar abundantemente com água e consultar um médico. Em contacto com canalizações de chumbo ou cobre, podem-se formar sais explosivos; para evitar que tal aconteça, fazer correr abundante quantidade de água aquando da inutilização dos reagentes.
Condições de Armazenamento
Este produto deve ser conservado entre 2-8°C. NÃO CONGELAR. Permanece estável até a data de validade indicada no rótulo. Pode ocorrer ligeira precipitação, esta pode ser removida através de centrifugação, o que não afecta as características da performance do produto.
Procedimento
Material fornecido
• 7mL Conjugado FITC IgG (Absorvida Macaco) não EB • Folheto de Instruções
Material Adicional Necessário Mas Não Fornecidos
1. Lâminas com Substrato 2. Tampão (PBS).
3. Câmara húmida para as etapas de incubação. 4. Soro controlo negativo e positivo.
5. Meio de Montagem e lamelas.
Procedimento do Teste
(Consultar folheto de instruções das lâminas para mais detalhes).
Adicionar uma gota de 504013 a cada poço. Não deixar os poços descobertos por mais de 15 segundos.
Limitações
A fonte emissora de luz, filtros e ópticas de diferentes tipos de microscópicos fluorescentes podem influenciar a sensibilidade do teste. A performance do microscópio é influenciada de forma significativa pela manutenção correcta do microscópio principalmente no que diz respeito à lâmpada de vapor de mercúrio e mudar a mesma após a duração recomendada.
Referências
1. Bradwell A. R. et al (2008). Atlas of Tissue Autoantibodies. Publ. The Binding Site Ltd., Birmingham UK.
Manufactured By:
Hersteller:
Fornitore:
Fabricante:
Fabricant:
Fabricado por:
INOVA Diagnostics, Inc.
9900 Old Grove Road
San Diego, CA 92131
United States of America
Technical Service (U.S. & Canada Only) : 877-829-4745 Technical Service (Outside the U.S.) : 00+ 1 858-805-7950
