Fundação Oswaldo Cruz

(1)

Diagnóstico em Virologia

C3138

Código da prova

Tecnologista em Saúde Pública

Prova Objetiva

Instruções:

 Você deverá receber do ﬁscal:

a) um caderno com o enunciado das 60 (sessenta) questões, sem repetição ou falha;

b) uma folha destinada à marcação das suas respostas.

 Ao receber a folha de respostas, você deve:

a) conferir se seu nome, número de identidade, cargo e perﬁl estão corretos.

b) veriﬁcar se o cargo, perﬁl e código da prova que constam nesta capa são os mesmos da folha de

respostas. Caso haja alguma divergência, por favor comunique ao ﬁscal da sala.

c) ler atentamente as instruções de preenchimento da folha de respostas;

d) assinar a folha de respostas.

 É sua responsabilidade preencher a folha de respostas, que será o único documento válido para a correção.

 Você deverá preencher a folha de respostas utilizando caneta esferográﬁca de tinta azul ou preta.

 Em hipótese alguma haverá substituição da folha de respostas por erro cometido por você.

 As questões da prova são identiﬁcadas pelo número que se situa acima do enunciado.

 O tempo disponível para essa prova é de 4 (quatro) horas, incluindo o tempo para a marcação da folha de

respostas.

 Durante as primeiras duas horas você não poderá deixar a sala de prova, salvo por motivo de força maior.

 Você somente poderá levar o caderno de questões caso permaneça em sala até 30 (trinta) minutos antes

do tempo previsto para o término da prova.

 Ao terminar a prova, você deverá entregar a folha de respostas ao ﬁscal e assinar a lista de presença.

(2)

Língua Portuguesa

Esta é a hora de deter a dengue

Estima-se que cem milhões de brasileiros sejam

suscetíveis de contaminação

Há dois anos, a Secretaria de Saúde fluminense previa que a entrada do vírus 4 da dengue no país seria uma questão de tempo, pela rota do “queijo suíço” da fronteira do Brasil, em Roraima, com a Venezuela. Por ali, 35.000 pessoas circulam a cada mês entre os dois países. Essa variação do vírus, conhecida como DEN4, já é detectada há dez anos no Caribe, manifestando-se com índices particularmente preocupantes no país vizinho. Quando ele aparecer, com a quantidade de mosquitos que temos, a possibilidade de uma epidemia será real, advertia-se.

O alerta emitido no início da semana pelo governo federal às Secretarias de Saúde do país, sobre evidências do retorno do vírus de tipo 4 da dengue ao Brasil, é forte sinal de que aquele pessimismo estaria para se justificar.

(....) Alertas como o emitido pelo Ministério da Saúde não devem ser entendidos como um convite ao pânico, mas precisam ser recebidos com a seriedade que o quadro exige. Este é o momento em que medidas de prevenção da dengue devem começar a ser implementadas.

(O Globo, 13/08/2010)

01

O título e o conteúdo do texto mostram que o interesse maior do texto é:

(A) provocar certo temor na população a fim de que medidas contra a dengue possam ser tomadas.

(B) informar a população e as autoridades sobre os perigos especiais de um novo tipo de dengue.

(C) alertar as autoridades e o povo sobre a possibilidade de uma epidemia e, com isso, indicar a necessidade de prevenção.

(D) divulgar as preocupações das autoridades a fim de que não se tenha um mau conceito sobre a área da Saúde. (E) mostrar as áreas de fronteira como focos da nova dengue

e aconselhar medidas de prevenção nessa área.

02

No texto há muitos termos dêiticos, ou seja, termos que só adquirem significado preciso se o leitor souber as condições de publicação do texto, como seu momento, local de produção, autoria e meio de veiculação. Assinale a alternativa em que o termo sublinhado não está nesse caso.

(A) “Há dois anos, a Secretaria de Saúde fluminense previa...”.

(B) “Por ali, 35.000 pessoas circulam a cada mês...”

(C) “...que a entrada do vírus 4 da dengue no país seria uma questão...”.

(D) “...já é detectada há dez anos no Caribe...”.

(E) “O alerta emitido no início da semana pelo governo federal...”.

03

“Há dois anos, a Secretaria de Saúde fluminense previa que a

entrada do vírus 4 da dengue no país seria uma questão de tempo...”; as duas formas verbais podem ser substituídas por

outras em correta correspondência de tempos verbais. Assinale as formas verbais em que essa correspondência

não foi respeitada.

(A) previu / será (B) tinha previsto / seria (C) tem previsto / vai ser (D) prevê / é

(E) teria previsto / fosse

04

“...pela rota do “queijo suíço” da fronteira do Brasil, em

Roraima, com a Venezuela.”; o termo “queijo suíço” se refere:

(A) ao contacto com outros povos de orientação política bastante diferente da dos países desenvolvidos, como a Suíça.

(B) à possibilidade de propagação rápida e precisa da dengue 4, tão certa como previram as autoridades, como um relógio suíço.

(C) à vulnerabilidade das nossas fronteiras em termos de vigilância sanitária, tão cheia de “buracos” como um queijo suíço.

(D) ao mesmo caminho por onde penetram milhares de produtos contrabandeados, como, por exemplo, queijo suíço.

(E) à designação dada pelo presidente venezuelano às diversas e desconhecidas possibilidades de invadir-se o território brasileiro.

05

“...manifestando-se com índices particularmente preocupantes no país vizinho.”; o termo “particularmente”:

(A) traz uma referência a um problema particular da Venezuela.

(B) equivale a um grau de intensidade do adjetivo “preocupantes”.

(C) manifesta uma opinião particular do autor do texto. (D) refere-se a uma preocupação particular do Brasil.

(E) mostra desconfiança sobre a validade dos índices venezuelanos.

06

“Quando ele aparecer, (....) a possibilidade de epidemia será

real,...”. Assinale a frase abaixo em que a forma verbal

sublinhada é inadequada.

(A) Quando as autoridades requiserem, uma nova campanha será feita.

(B) Quando a secretaria de Saúde obtiver permissão, haverá vacinação.

(C) Quando os brasileiros reouverem o tempo perdido, não haverá dengue.

(D) Quando os funcionários puderem, se terão mais vacinas. (E) Quando vierem novas epidemias, os brasileiros estarão

preparados.

07

No subtítulo do artigo, que é o texto desta prova, está escrito:

“Estima-se que cem milhões de brasileiros sejam suscetíveis de contaminação”. A frase do subtítulo tem sua mensagem

alarmante atenuada pelos seguintes recursos:

(A) a falta da indicação da autoria de quem pensa o que foi afirmado / a quantificação feita em números redondos. (B) a quantificação feita em números redondos / a

construção da frase em voz passiva.

(C) a construção da frase em voz passiva / a falta de intensificação no termo “contaminação”.

(D) a falta de intensificação no termo “contaminação” / o emprego do adjetivo “suscetíveis”.

(E) o emprego do adjetivo “suscetíveis” / a menção de um cálculo não preciso, por meio do verbo “estimar”.

(3)

“Essa variação do vírus já é detectada há dez anos no

Caribe”; considerando-se essa frase, a forma de reescrevê-la

que altera o seu sentido original é:

(A) essa variação do vírus, há dez anos já é detectada no Caribe.

(B) há dez anos, já é detectada no Caribe essa variação do vírus.

(C) no Caribe, há dez anos, já se detectou essa variação do vírus.

(D) no Caribe, essa variação do vírus já é detectada há dez anos.

(E) há dez anos já se detecta essa variação do vírus no Caribe.

09

Assinale a alternativa em que o termo sublinhado é agente (e não paciente) do termo anterior:

(A) fronteira do Brasil. (B) variação do vírus. (C) quantidade de mosquitos. (D) prevenção da dengue. (E) início da semana.

10

O texto deve ser caracterizado prioritariamente como: (A) descritivo do novo vírus da dengue, que pode trazer nova

epidemia.

(B) argumentativo, na defesa da tese de que é necessário um maior controle das fronteiras.

(C) narrativo, traçando a história das epidemias de dengue no nosso país.

(D) informativo, funcionando como apelo contra problemas da dengue.

(E) publicitário, funcionando como divulgação das medidas tomadas pelas secretarias de Saúde.

Virologia

11

Analise as afirmativas abaixo.

I. Nenhum dos vírus com genoma composto por RNA de polaridade positiva empacota sua polimerase nas partículas virais.

II. Em algumas famílias virais específicas, o genoma dos vírus RNA de polaridade positiva não necessariamente possui a estrutura CAP na extremidade 5’ ou uma cauda poli-A na extremidade 3’.

III. Para todos os vírus com genoma RNA de polaridade positiva, quando o genoma viral estiver disponível no citoplasma da célula hospedeira , este servirá imediatamente como molde para síntese protéica. Assinale:

(A) se somente a afirmativa I estiver correta. (B) se somente a afirmativa II estiver correta. (C) se somente a afirmativa III estiver correta.

(D) se somente as afirmativas I e II estiverem corretas. (E) se todas as afirmativas estiverem corretas.

Sobre o envelope viral, assinale a alternativa correta.

(A) Todos os vírus que possuem glicoproteínas em sua superfície são envelopados.

(B) Na composição do envelope dos vírus, deverá estar presente pelo menos uma glicoproteína de origem viral. (C) Todos os vírus envelopados adquirem seu envelope a

partir da membrana plasmática celular.

(D) Somente os vírus de genoma RNA possuem envelope. (E) Todos os vírus com genoma RNA de polaridade positiva

possuem envelope.

13

Sobre replicação, analise as afirmativas a seguir.

I. A replicação de todos os vírus com genoma RNA de polaridade negativa acontece no citoplasma da célula hospedeira.

II. A replicação de todos os vírus com genoma DNA acontece no núcleo da célula hospedeira.

III. A replicação de todos os vírus com genoma RNA de polaridade positiva, com exceção dos Retrovírus, é citoplasmática.

Assinale:

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Analise as afirmativas abaixo:

I. As partículas virais podem apresentar simetria helicoidal, icosahédrica e complexa.

II. Os genomas dos vírus RNA de polaridade positiva podem ser fitas únicas ou segmentados.

III. Os genomas dos vírus RNA de polaridade negativa são sempre segmentados.

Assinale:

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Assinale a alternativa incorreta.

(A) Partículas virais não envelopadas contendo genoma RNA de polaridade negativa não existem entre os vírus animais.

(B) Nos vírus animais de genoma RNA de polaridade negativa, o ácido nucléico viral juntamente com uma proteína básica que se liga ao ácido nucléico formam a estrutura básica do nucleocapsídeo.

(C) Nos vírus contendo genoma RNA de polaridade negativa, nunca é observada a matriz protéica fazendo parte da estrutura da partícula viral.

(D) Nos vírus contendo genoma RNA de polaridade negativa, as proteínas virais não estruturais que compõe a polimerase viral se associam ao nucleocapsídeo.

(E) Nos vírus contendo genoma RNA de polaridade negativa, o papel principal da proteína do nucleocapsídeo é o de estabilizar o genoma viral e protegê-lo de danos químicos, físicos e ataques enzimáticos.

(4)

16

Assinale a alternativa em que estejam descritas corretamente as famílias de vírus que possuem em sua partícula viral o envelope lipídico.

(A) Picornaviridae, Orthomyxoviridae, Paramyxoviridae. (B) Retroviridae, Orthomyxoviridae, Reoviridae. (C) Orthomyxoviridae, Flaviviridae, Adenoviridae. (D) Retroviridae, Togaviridae, Paramyxoviridae. (E) Orthomyxoviridae, Hepadnaviridae, Picornaviridae.

17

Sobre a entrada viral, analise as afirmativas a seguir.

I. A entrada dos vírus nas células hospedeiras pode se dar por endocitose, fusão direta do envelope viral com a membrana citoplasmática, passagem direta através da membrana citoplasmática.

II. Todos os processos de entrada dos vírus nas células hospedeiras são necessariamente mediados por receptores presentes na superfície destas células. III. A entrada viral por endocitose requer a acidificação do

endossoma para a liberação do genoma viral no citoplasma das células hospedeiras.

Assinale:

18

I. A expressão inicial das proteínas não estruturais e posterior expressão das proteínas estruturais a partir de mRNA sub-genômico é a estratégia utilizada pelos Calicivirus a fim de garantir a expressão de suas proteínas.

II. Os Retrovírus utilizam dentre outras, splicing diferencial e

frameshift como estratégias que garantirão a expressão

de todas as proteínas virais.

III. A expressão de uma única poliproteína que será posteriormente clivada por proteases virias e celulares para dar origem tanto às proteínas estruturais quanto não estruturais é a estratégia utilizada pelos Togavirus a fim de garantir a expressão de suas proteínas.

Assinale:

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Assinale a resposta incorreta.

(A) Uma das estratégias utilizadas pelos vírus para evadir o sistema imune do hospedeiro é a inibição da expressão de MCH-I na superfície das células infectadas.

(B) Somente os vírus com genoma composto por RNA dupla-fita geram um estado anti-viral nas células infectadas. (C) Os estado anti-viral nas células de um tecido infectado

está relacionado, dentre outros fatores, à expressão dos genes de resposta aos interferons.

(D) As células Natural Killers têm importante papel no combate às infecções virais e sua atividade é estimulada pelos interferons do tipo I.

(E) Anticorpos da classe IgG são os mais importantes na neutralização direta das partículas virais no organismo infectado.

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I. Os receptores do tipo Toll (Toll-like receptors - TLR) que percebem as infecções virais são: TLR3; TLR 8 e 7; TLR-9.

II. Estes TLR estão sempre localizados na membrana citoplasmática das células hospedeiras.

III. Estes TLR são de grande importância para a resposta inata às infecções virais, pois são os únicos que reconhecem Padrões Moleculares Associados à Patogenos (PAMPs) virais nas células infectadas.

Assinale:

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Assinale a alternativa correta.

(A) A expressão das proteínas dos Herpesvirus se dá por um mecanismo de cascata, iniciando-se com a expressão das proteínas iniciais, que estão envolvidas com a replicação do DNA viral.

(B) A replicação dos vírus DNA nas células hospedeiras tem um grande potencial de transformação celular (oncogênese), umas vez que a integração dos genomas virais aos genomas celulares ocorre com alta freqüência. (C) O ciclo replicativo dos Hepadnavirus é estritamente

citoplasmático e a síntese do DNA genômico viral é dependente de uma transcriptase reversa.

(D) A expressão de dois genes iniciais do HPV interfere com a função das proteínas celulares Rb e p53, que são controladoras do ciclo celular.

(E) Todos os vírus com genoma DNA codificam suas próprias DNA polimerases dependentes de DNA.

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Analise as afirmativas abaixo.

I. IgA é uma classe importante de imunoglobulina que atua no controle das infecções virais pois está relacionada à imunidade de mucosa.

II. O único mecanismo de neutralização direta das partículas virais por imunoglobulinas IgG está relacionado ao bloqueio das proteínas virais responsáveis pela ligação aos receptores na superfície da célula hospedeira por estas imunoglobulinas.

III. Durante uma infecção viral primária as imunoglobulinas da classe IgG são as primeiras a serem observados no soro dos pacientes, enquanto que as imunoglobulinas da classe IgM somente irão aumentar em título após a fase de convalescença.

Assinale:

(5)

Na taxonomia dos vírus, os nomes para gênero, subfamília, família e ordem, devem ser todos palavras únicas terminando respectivamente com os sufixos:

(A) -virus; -virinae; -virales; -viridae. (B) -virus; -viridae; -virinae; -virales. (C) -virinae; -virales; -viridae; -virus. (D) -virus; -virinae; -viridae; -virales. (E) -virales; -virinae; -viridae; -virus.

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(A) O processamento dos antígenos virais durante a via de apresentação pelo MHC-I acontece no interior dos endossomas.

(B) As células dendríticas infectadas, expressando proteínas virais, irão apresentar os peptídeos virais somente através das moléculas de MCH-II.

(C) As moléculas de MHC-II recém-sintetizadas são inibidas de se associar com peptídeos em conseqüência de sua associação com a cadeia invariante (Ii).

(D) Os peptídeos virais provenientes de partículas virais ou de restos de células infectadas, quando endocitados por células apresentadoras de antígenos, são apresentados através das moléculas de MHC-I.

(E) A apresentação de antígenos através do MHC-II é reconhecida pelos linfócitos T citotóxicos (TCD8+).

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Sobre vacinas, analise as afirmativas a seguir.

I. As vacinas compostas por vírus atenuados são menos eficazes em induzir imunidade do que as vacinas compostas por vírus inativados.

II. A atenuação viral está relacionada à adaptação através de passagens sucessivas de um determinado vírus em um sistema celular ou hospedeiro diferente de seu hospedeiro natural.

III. A vacinação com vírus inativado induz imunidade de mucosa.

Assinale:

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(A) As vacinas compostas por vírus atenuados podem ser normalmente empregadas em indivíduos portadores de imunodeficiências.

(B) Vacinas compostas por subunidades virais são as vacinas mais eficazes na indução de imunidade.

(C) Um dos principais riscos associados à utilização de vacinas compostas por vírus atenuado é o de reversão das mutações associadas à atenuação.

(D) Nenhuma vacina composta por subunidade viral já obteve sucesso em sua utilização.

(E) Não existe nenhum risco associado à utilização de vacinas compostas por vírus inativado.

Sobre glicoproteínas, analise as afirmativas abaixo.

I. As glicoproteínas presentes na superfície dos vírus envelopados tem como única função o reconhecimento dos receptores para adsorção/entrada dos vírus nas células hospedeiras.

II. As glicoproteínas presentes na superfície dos vírus envelopados são um dos principais alvos das imunoglobulinas neutralizantes.

III. As glicoproteínas virais são sintetizadas no Retículo Endoplasmático e irão sempre se localizar na membrana citoplasmatica.

Assinale:

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Sobre citocinas, assinale a alternativa correta.

(A) Citocinas são proteínas solúveis liberadas exclusivamente por células do sistema imune para combater as infecções causadas por vírus e microorganismos.

(B) As citocinas do sistema imune inato são produzidas pelas células infectadas tão logo a presença do vírus é percebida pelas mesmas.

(C) Tanto os interferons α e β quanto o interferon γ são sintetizados em resposta às infecções virais tanto por células do sistema imune quanto pelas demais células. (D) Dentre as citocinas pró-inflamatórias induzidas durante as

infecções virais, aquela que desempenha um papel de menor relevância na regulação da resposta inata é o Fator de Necrose Tumoral α (TNF-α).

(E) Tanto os interferons α e β quanto o interferon γ induzem o aumento de expressão tanto das moléculas de MHC-I quanto das moléculas de MHC-II.

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Analise as afirmativas a seguir.

I. Para uma grande parte dos vírus que infectam animais, a imunoprofilaxia mais eficiente é aquela que gera resposta principalmente contra os antígenos virais de superfície. II. É correto afirmar que, de forma geral, as imunoglobulinas

direcionadas contra os antígenos virais de superfície durante uma infecção viral natural reconhecem preferencialmente epitopos conformacionais.

III. A utilização de peptídeos ou outras formas de imunógenos na qual o sitio antigênico da proteína de superfície se apresenta desnaturado, torna a mimetização dos epitopos conformacionais muito pouco eficiente, tornando assim a imunização pouco eficiente.

Assinale:

(D) se somente as afirmativas II e III estiverem corretas. (E) se todas as afirmativas estiverem corretas.

(6)

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I. As vacinas que induzem uma eficiente resposta contra os vírus são aquelas que induzem exclusivamente a resposta humoral.

II. Em geral, as infecções virais nas quais o estabelecimento de viremia é importante para o estabelecimento da patogênese são melhor controladas pela resposta humoral .

III. A indução da resposta T citotóxica é um braço importante na imunização contra as infecções virais pois garante grande eficiência na eliminação das células infectadas. Assinale:

(D) se somente as afirmativas II e III estiverem corretas. (E) se todas as afirmativas estiverem corretas.

Diagnóstico em virologia

31

No diagnóstico laboratorial de Rubéola em amostras de gestantes assintomáticas coletas nos primeiros 28 dias de contato com caso suspeito ou confirmado de Rubéola, é correto afirmar que no caso do resultado negativo da pesquisa de:

(A) IgM descarta-se o caso.

(B) IgM, pesquisa-se IgG, no caso de IgG positiva confirma-se o caso.

(C) IgM, pesquisa-se IgG, no caso de IgG negativa, descarta-se o caso.

(D) IgM, pesquisa-se IgG, no caso de IgG positiva descarta-se o caso.

(E) IgM, pesquisa-se IgG, no caso de IgG positiva, solicitar nova amostra.

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Analise as afirmativas a seguir sobre a investigação epidemiológia da Rubéola.

I. Somente os casos de Síndrome da Rubéola Congênita (SRC) devem ser notificados e o seu diagnóstico confirmado laboratorialmente.

II. Qualquer caso suspeito de Rubéola deve ser notificado e o diagnóstico deve ser confirmado por ensaios laboratoriais pelo laboratório de referência.

III. Qualquer caso suspeito de Rubéola deve ser notificado, mas o diagnóstico laboratorial só precisa ser realizado nos casos suspeitos de SRC.

Assinale:

(D) se somente as afirmativas I e II estiverem corretas.. (E) se todas as afirmativas estiverem corretas.

33

1) Adsorção de anticorpo monoclonal contra determinada proteína viral em placa plástica de 96 poços; 2) Incubação; 3) Lavagens sucessivas; 4) Bloqueio da superfície plástica; 5) Lavagens sucessivas; 6) Adição do antígeno viral; 7) Incubação; 8) Lavagens sucessivas; 9) Adição de diferentes diluições do soro do paciente; 10) Incubação; 11) Lavagens sucessivas; 12) Adição de IgG anti-antígeno viral conjugada à enzima peroxidade; 13) Incubação; 14) Lavagens sucessivas; 15) Adição do substrato; 16) Incubação; 17) Adição do reagente de interrupção da reação da peroxidase; 18) Leitura da densidade ótica.

O procedimento acima descreve: (A) ELISA de captura.

(B) ELISA direto. (C) ELISA de inibição. (D) ELISA indireto. (E) Western-blotting.

34

Em relação à técnica de ELISA, analise as afirmativas a seguir.

I. Na técnica tradicional de ELISA, é utilizado um suporte plástico onde é adsorvido o antígeno ou o anticorpo de interesse. A amostra a ser testada é adicionada e a ocorrência da ligação específica antígeno (suporte) – anticorpo (amostra), ou vice-versa, será revelada após a adição do anticorpo detector (conjugado à uma enzima) e posterior adição do substrato específico para esta enzima. A reação catalisada por esta enzima leva ao desenvolvimento de cor pela oxidação do cromógeno incolor (substrato).

II. A técnica de ELISA indireto não deve ser utilizada para a detecção específica de anticorpos da classe IgM em conseqüência da detecção cruzada do fator reumatóide presente no soro humano, podendo assim levar a resultados falso-positivos. Logo, para a detecção de anticorpos IgM específicos por ELISA, uma alternativa é a técnica de ELISA de captura.

III. Na técnica de ELISA indireto utiliza-se uma anti-imunoglobulina conjugada a uma enzima para a detecção da ligação dos anticorpos presentes na amostra com os antígenos específicos acoplados ao suporte.

Assinale:

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São testes sorológicos para o diagnóstico das infecções virais:

(A) Teste de Hemaglutinação; Teste de Hemadsorção; Teste de Neutralização.

(B) Teste de Inibição de hemaglutinação; Wester-bloting; Teste de Interferência viral.

(C) Teste de Fixação do complemento; ELISA de captura; Teste de Inibição da hemaglutinação.

(D) Western-blotting; Teste de Inibição da Hemaglutinação; Teste de Hemadsorção.

(E) Isolamento viral; Teste de Inibição da Hemaglutinação; Imunofluorescência indireta .

(7)

Um paciente procurou o serviço médico apresentando febre, corisa e exântema máculo-papular. O médico suspeitou de infecção pelo vírus da Rubéola. Para o diagnóstico laboratorial de Rubéola, foram então coletas duas amostras de sangue deste paciente, uma nesta primeira visita médica (fase aguda dos sintomas ou amostra de fase aguda – AFA), e a segunda após o desaparecimento dos sintomas (amostra de fase de convalescencia – AFC). No laboratório, o teste diagnóstico utilizado foi o de Inibição da Hemaglutinação (HI). Os soros foram diluidos até 1:2048. Obteve-se o seguinte resultado:

AFA: formação do botão de hemáceas até a diluição do soro de 1:64.

AFC: formação do botão de hemáceas até a diluição do soro de 1:64.

Assinale a alternativa com a interpretação correta destes resultados.

(A) Tanto na AFA quanto na AFC, foram detectados anticorpos anti-Rubéola, indicando que o quadro clínico atual apresentado foi causado pela infecção vírus da Rubéola.

(B) Tanto na AFA quanto na AFC, foi detectado o mesmo título de anticorpos anti-Rubéola, indicando que este paciente já teve uma infecção prévia ou foi vacinado contra Rubéola, porém o quadro atual não foi causado pela infecção por este vírus.

(C) Tanto na AFA quanto na AFC, não foram detectados anticorpos anti-Rubéola, indicando que este paciente nunca teve uma infecção prévia ou foi vacinado contra Rubéola, e desta forma o quadro atual não foi causado pela infecção por este vírus.

(D) Tanto na AFA quanto na AFC foi detectado o mesmo título de anticorpos anti-Rubéola, indicando uma infeção recente pelo vírus da Rubéola, confirmando a suspeita clínica.

(E) Os resultados apresentados são inconclusivos, não sendo possível confirmar a suspeita clínica.

37

Sobre testes sorológicos, analise as afirmativas abaixo. I. Nos testes sorológicos, sensibilidade é definida como a

porcentagem dos resultados que serão negativos quando a amostragem for negativa.

II. Nos testes sorológicos, especificidade é definida como a porcentagem dos resultados que serão positivos quando a amostragem for positiva.

III. Nos testes sorológicos, alta sensibilidade significa que o teste apresenta um pequeno número de resultados falso-negativos e alta especificidade significa que o teste apresenta um pequeno número de resultados falso-positivos.

Assinale:

Sobre o teste ELISA, analise as afirmativas a seguir.

I. Os testes ELISA de terceira geração para detecção de anticorpos anti-HIV são baseados na técnica de ELISA sanduíche, também denominado de ELISA direto. II. A diferença entre os testes ELISA de segunda e terceira

geração para a detecção de anticorpos anti-HIV é que o primeiro detecta somente anticorpos da classe IgG, aumentando a janela imunológica, enquanto o segundo detecta tanto anticorpos da classe IgM quanto IgG. III. Os testes ELISA para a detecção de anticorpos anti-HIV

denominados de quarta geração, são aqueles que irão detectar simultaneamente anticorpos contra HIV-1 dos tipos M e O e contra HIV-2.

Assinale:

39

Sobre o diagnóstico de uma infecção viral, analise as afirmativas a seguir.

I. O diagnóstico de uma infecção viral pela técnica de

shell-vial se baseia na centrifugação da amostra clínica sobre

uma monocamada de células susceptíveis ao vírus a ser identificado, seguido da detecção do vírus após 3-4 dias, através da observação do efeito citopático.

II. O diagnóstico de uma infecção viral pela técnica de

shell-vial se baseia na centrifugação da amostra clínica sobre

uma monocamada de células susceptíveis ao vírus a ser identificado, seguido da detecção do vírus após 3-4 dias de incubação pela técnica de imunofluorescência. III. A técnica de shell-vial não permite caracterizar o agente

viral, permitindo somente identificar a presença de vírus na amostra testada.

Assinale:

40

Sobre o isolamento viral, analise as afirmativas a seguir. I. O isolamento viral é sempre, e só pode ser realizado em

sistemas de culturas celulares in vitro.

II. Para o isolamento viral em culturas celulares in vitro, deve-se deve-sempre utilizar células derivadas do tecido que é alvo principal da infecção viral no hospedeiro natural.

III. A observação da presença de replicação viral após a inoculação da amostra clínica na cultura celular se dá inicialmente pela observação do aparecimento do efeito citopático, seguido da confirmação por outras técnicas específicas, como imunofluorescência, soro-neutralização, etc.

Assinale:

(8)

41

Para a confirmação de um caso suspeito de sarampo deve-se realizar a pesquisa de anticorpos da clasdeve-se IgM no soro do paciente. Assinale a alternativa correta em relação ao procedimento de diagnóstico.

(A) Se a pesquisa de IgM tiver resultado positivo, confirma-se o caso.

(B) Se a pesquisa de IgM tiver resultado positivo, considerar última dose da vacina anti-Sarampo tomada pelo paciente, se esta tiver ocorrido entre 5-12 dias antes do início dos sintomas, confirmar o caso.

(C) Se a pesquisa de IgM tiver resultado positivo, considerar última dose da vacina anti-Sarampo tomada pelo paciente, se esta tiver ocorrido entre 5-12 dias antes do início dos sintomas, descartar o caso.

(D) Se a pesquisa de IgM tiver resultado positivo, considerar última dose da vacina anti-Sarampo tomada pelo paciente, se esta tiver ocorrido 30 dias antes do início dos sintomas, confirmar o caso.

(E) Se a pesquisa de IgM tiver resultado negativo, coletar nova amostra para confirmação.

42

I. Todas as técnicas de diagnóstico molecular das infecções virais são baseadas em uma etapa inicial de amplificação do ácido nucléico viral presente na amostra do paciente.

II. Nas técnicas de Captura Híbrida e Ensaio de DNA Ramificado, a presença do ácido nucléico viral é revelada por anticorpos conjugados à uma enzima, como a fosfatase alcalina.

III. A detecção do ácido nucléico viral através da técnica de Amplificação da Polimerase em Cadeia (PCR) permite a realização de ensaios qualitativos e quantitativos.

Assinale:

43

Sobre a quantificação de carga viral, assinale a alternativa

incorreta.

(A) Os métodos moleculares de quantificação da carga viral não são necessariamente baseados na técnica de Amplificação da Polimerase em Cadeia (PCR).

(B) A quantificação da Carga Viral de vírus com genoma constituído por RNA, com metodologias baseadas em amplificação de ácido nucléico, envolve necessariamente uma etapa de transcrição reversa.

(C) A quantificação da Carga Viral em valores relativos de cópias/unidade com qualquer das metodologias atualmente disponíveis necessita da realização de curvas-padrão durante a realização de cada ensaio.

(D) Os ensaios para a quantificação de Carga Viral podem ser realizados de forma a detectar mais de um vírus diferente em uma mesma amostra (multiplex).

(E) Só é possível realizar a quantificação da Carga Proviral para vírus compostos por genoma DNA.

44

Sobre PCR em tempo Real, assinale a alternativa que correta. (A) A metodologia de PCR em Tempo-Real é a única

metodologia de PCR quantitativo existente.

(B) É a curva de dissociação obtida ao final da corrida de PCR em Tempo-Real que permite a verificação da especificidade da amplificação obtida quando utiliza-se corantes fluorescentes, como o Syber-green.

(C) Na metodologia de PCR em Tempo-Real, a utilização de sondas marcadas com fluoróforos torna a detecção do produto amplificado mais sensível, porém menos específica do que a marcação com Syber-green.

(D) Na metodologia de PCR em Tempo-Real, é correto afirmar que quanto maior for a quantidade de DNA alvo presente em uma dada amostra um maior número de ciclos de PCR será necessário para se obter uma quantidade de fluorescência a partir desta dada amostra acima do ruído de fundo do aparelho (Ct).

(E) A técnica de PCR em Tempo-Real multiplex utiliza sondas específicas marcadas com o mesmo fluoróforo para a detecção de diferentes vírus presentes em uma mesma amostra.

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Os métodos laboratoriais atualmente empregados para diagnóstico de dengue são:

(A) isolamento viral em culturas celulares que deverá ser feito até o quinto dia dos sintomas; MAC-ELISA; ELISA de inibição; e inibição da hemaglutinação.

(B) isolamento viral em culturas celulares que deverá ser feito após o quinto dia dos sintomas; MAC-ELISA; ELISA de inibição; e inibição da hemaglutinação.

(C) isolamento viral em culturas celulares que deverá ser feito até o quinto dia dos sintomas; MAC-ELISA; ELISA de inibição; e hemaglutinação.

(D) isolamento viral em culturas celulares que deverá ser feito após o quinto dia dos sintomas; MAC-ELISA; ELISA de inibição; e hemaglutinação.

(E) isolamento viral em culturas celulares que deverá ser feito após o quinto dia dos sintomas; MAC-ELISA; ELISA indireto; e inibição da hemaglutinação.

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Sobre o valor de corte (cut-off) do teste ELISA, analise as afirmativas a seguir.

I. Uma amostra é considerada reativa pelo teste de ELISA quando o seu valor de densidade ótica é igual ou maior do que o valor de corte.

II. Existem diferentes métodos para o cálculo do valor de corte para o ELISA, a característica dos controles positivos e negativos determinará o melhor método para cada teste.

III. O valor de corte do ELISA é calculado a partir dos valores de densidade ótica dos controles positivos.

Assinale:

(9)

O estabelecimento de uma reação de PCR para o diagnóstico molecular de agentes infecciosos a partir de amostras biológicas muitas vezes apresenta como maior dificuldade a amplificação específica do fragmento genômico do patógeno de interesse. Sobre isso, analise as afirmativas a seguir.

I. Para aumentar a especificidade da amplificação pode-se utilizar a técnica de PCR aninhado (nested PCR). Nesta técnica, a utilização de iniciadores mais externos em uma primeira reação, seguida da utilização de iniciadores mais interno em uma segunda reação diminui a chance de amplificação de produtos inespecíficos e aumenta a probabilidade de amplificação do produto específico. II. Pode-se utilizar na PCR Iniciadores degenerados ou

contendo a base inosina, a fim de aumentar a especificidade da hibridação destes iniciadores com a seqüência alvo.

III. A otimização da temperatura de hibridação dos iniciadores é um dos recursos para aumentar a estringência da PCR. Temperaturas de hibridação mais baixas diminuem a chance de amplificação de fragmentos inespecíficos.

Assinale:

48

Analise as afirmativas abaixo em relação às infecções pelo vírus do Sarampo:

I. Denomina-se caso importado de Sarampo aquele cuja exposição ocorreu fora de determinado continente durante os 14 a 23 dias prévios ao surgimento do exantema.

II. Denomina-se caso autóctone de Sarampo, um caso novo surgido a partir do contato com o caso índice.

III. Denomina-se caso relacionado com importação, um caso novo ou contato de um caso secundário de sarampo, após a introdução do vírus no país.

Assinale:

49

Os resultados sorológicos a seguir foram obtidos para amostra de paciente com suspeita de infecção pelo vírus da hepatite B (HBV).

HBsAg – negativo; Anti-HBc – positivo; Anti-HBc IgM – negativo; HBeAg – negativo; Anti-HBe – positivo; Anti-HBs – negativo.

Assinale a resposta que indica a interpretação correta dos resultados.

(A) Período de incubação da infecção por HBV. (B) Hepatite B em fase aguda.

(C) Caso Indeterminado. (D) Hepatite B em fase crônica.

(E) Hepatite B em final de fase aguda (janela imunológica)

Em relação ao diagnóstico laboratorial da infecção pelo HIV, analise as afirmativas a seguir.

I. Na primeira etapa de realização do teste, ou etapa de triagem, deverá ser utilizado um teste capaz de detectar anticorpos anti-HIV-1 (incluindo o grupo O) e anti-HIV-2. Ou ainda testes que combinem a detecção de anticorpos e antígenos.

II. Além do ELISA, também é permitida a utilização das metodologias de Ensaio imunoenzimático de micropartículas (MEIA), Ensaio imunológico com revelação quimioluminescente (EQL), e Ensaio imunológico quimioluminescente magnético (CMIA), para a realização da etapa de triagem.

III. A amostra reagente no ensaio realizado na etapa de triagem (Etapa primeira), deverá ter seu laudo imediatamente liberado.

Assinale:

51

Para a vigilância epidemiológca da Hepatite B (HBV) deve-se diagnosticar laboratorialmente um caso suspeito seguindo um fluxograma determinado. Analise as afirmativas abaixo a respeito deste fluxograma.

I. A amostra de um caso suspeito de infecção aguda pelo HBV deve ser testada inicialmente para a presença de HBsAg e anti-HBc total. Se ambos forem positivos, deve-se testar, a deve-seguir, predeve-sença de anti-HBc IgM. Se este for negativo para a presença do anti-HBc IgM o diagnóstico será de infecção anterior por HBV, descartando-se assim a suspeita.

II. A amostra de um caso suspeito de infecção aguda pelo HBV deve ser testada inicialmente para a presença de HBsAg e anti-HBc total. Se HBsAg for não reagente e anti-HBc total for reagente, deve-se testar a presença de anti-HBs, se este for não reagente uma das suspeitas será a de infecção por vírus mutante.

III. Os testes de triagem para a amostra de um caso suspeito de infecção aguda pelo HBV devem ser para a presença dos marcadores HBsAg e anti-HBc IgM.

Assinale:

52

Uma amostra reagente no ELISA para a presença de anticorpos anti-HTLV foi testada por Western-Blotting obtendo-se o seguinte resultado:

Bandas encontradas no Western-blotting: p19 + p24 + gd21. Assinale a alternativa correta quanto a interpretação deste resultado:

(A) Amostra positiva para HTLV-I. (B) Amostra indeterminada.

(C) Amostra não reagente para HTLV. (D) Amostra positiva para HTLV-II.

(10)

53

Analise as afirmativas:

I. A quantificação da Carga Viral de vírus como HIV e HBV só pode ser realizado através da técnica de PCR em Tempo Real.

II. Metodologias como DNA ramificado (b-DNA), PCR-hibridização com oligonucleotídeos marcados e amplificação isotérmica do ácido nucléico mediada por transcrição são metodologias de quantificação da carga viral de vírus como HIV, HCV e HBV.

III. Em qualquer uma das metodologias disponíveis para a quantificação da carga viral de HIV-1, HCV e HBV, haverá sempre o passo inicial de transcrição reversa dos genomas virais presentes nas amostras.

Assinale:

54

Analise as afirmativas abaixo em relação à quantificação da carga viral e proviral através da técnica de PCR em Tempo Real.

I. A utilização de controles internos nas reações de PCR em Tempo-Real é importante para controlar a presença de inibidores da reação, o que poderia levar a um resultado subestimado da carga viral.

II. O controle internos pode ser uma sequência de ácido nucléico relacionada à sequência alvo do patógeno viral a ser testado. No entanto, este controle deverá ser detectado por um conjunto de iniciadores, ou uma sonda, diferente daquela que detectará a região alvo do patógeno viral a ser testado.

III. Determinados genes celulares são geralmente utilizados como controle interno em reações de quantificação da carga proviral por PCR em Tempo-Real, como por exemplo o gene da beta-globina.

Assinale:

55

O diagnóstico das infecções por HTLV é realizado: (A) por meio de isolamento viral.

(B) inicialmente com a triagem sorológica por meio de

Western-blotting ou Imunoblotting, seguido da confirmação pelo teste de ELISA ou de Aglutinação. (C) inicialmente com a triagem sorológica por meio do teste

de ELISA ou de Aglutinação, seguido da confirmação por

Western-blotting ou Imunoblotting.

(D) inicialmente por meio do teste de Inibição da Hemaglutinação, seguido da confirmação por

Western-blotting ou ImunoWestern-blotting.

(E) em uma única etapa, por meio da utilização do teste de ELISA.

56

A diferenciação entre HLTV-I ou HTLV-II na amostra clínica: (A) é realizada com a técnica de Western-Blotting.

(B) só pode ser realizada com a técnica de PCR.

(C) não é possível, com as técnicas atualmente disponíveis. (D) é realizada com RAPD.

(E) é realizada com a técnica de ELISA.

57

I. Tanto o sequenciamento da região gênica LTR quanto do gene tax podem ser utilizados para a subtipagem do HTLV-I.

II. A análise de Restriction Fragment Length Polymorphism (RFLP) da região gênica env do HTLV-I pode ser utilizada para a subtipagem deste vírus.

III. Somente com o sequenciamento do região gênica LTR pode-se subtipar o HTLV-I.

Assinale:

58

Sobre a tipagem de HTLV, analise as afirmativas a seguir. I. A diferenciação molecular entre HTLV-I e HTLV-II pode ser

feita através da técnica de Restriction Fragment Length

Polymorphism (RFLP) da região gênica de tax.

II. A mesma técnica de Restriction Fragment Length

Polymorphism (RFLP) pode ser utilizada para subtipar o

HTLV-II nos subtipos IIa e IIb.

III. A subtipagem do HTLV-II também pode ser realizada por seqüenciamento da região Gênica LTR.

Assinale:

(D) se somente as afirmativas I e II estiverem corretas. (E) se todas as afirmativas estiverem corretas

59

Sobre o HCV, analise as afirmativas abaixo.

I. O RNA viral é o primeiro marcador a aparecer durante a infecção por HCV e é utilizado para confirmar a infecção em casos agudos.

II. O diagnóstico de infecção aguda por HCV só pode ser feito com a viragem sorológica documentada.

III. A detecção de anticorpos anti-HCV em amostra de caso suspeito de infecção por HCV é definidora de definição aguda.

Assinale:

(11)

I. O diagnóstico laboratorial da febre amarela pode ser virológico, sorológico ou histopatológico.

II. O isolamento viral pode ser realizado com amostra de sangue de paciente de fase aguda do primeiro ao quinto dia de aparecimento dos sintomas e de amostras de tecidos coletadas em no máximo 12 horas pós óbito. III. O objetivo principal da vigilância laboratorial da febre

amarela é a detecção precoce da presença do vírus em primatas não humanos e outros animais que possam contribuir para a disseminação da doença e em humanos.

Assinale:

(12)