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Biologia Molecular da Célula 1 Parte 2
Professores:
Carlos F. M. Menck
Enrique M. Boccardo Pierulivo Rodrigo Galhardo
Wellington Araujo
BIBLIOGRAFIA RECOMENDADA
Cell and Molecular Biology: Concepts and Experiments (6th Edition) by Gerald Karp Publisher: John Wiley & Sons, 2009
ISBN: 0470483377
Genes- a unidade da herança e a
Estrutura de ácidos nucleicos
Histórico
A natureza química do gene- Mendel – e suas ervilhas:
Fatores de herança e alelos.... 1866 (seu trabalho não despertou interesse), redescoberto em 1900! Nessa época os fatores foram chamados de gene!
Histórico
A natureza química do gene- Friedrich Miescher 1871 (Suiça)
Extração alcalina de células do sangue (linfócitos), para descobrir os fatores da vida:
encontrou uma substância branca, ácida, rica em fósforo- nucleína!
Fez o mesmo a partir de esperma de salmão! (90% da célula é núcleo)
Richard Altmann (seu aluno) 1889- ácido nucleico!
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Histórico
Phoebus Aaron Levene 1929:
A química do ácido nucleico 2’desoxirribonucleotídeos
Modelo para o tetranucleotídeos!!
Histórico
Frederick Griffith (1928, UK) O princípio transformante!!
Que substância era essa?
Histórico
Oswald T. Avery, Colin M. MacLeod e
Maclyn McCarty, 1944, Instituto Rockefeller.
O princípio tranformante é o DNA!
Histórico
Alfred Hershey and Martha Chase (1952, US) Bacteriófago T2- o DNA é responsável
pela multiplicação viral! (e não as proteínas!).
Nobel em 1969!
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Histórico
Heinz Fraenkel-Conrat (1955, US)
Virus do mosaico do tabaco.... Genoma de RNA!
Histórico
Regras de Chargaff (1949)
1. A composição do DNA em suas bases A, C, G, T é característica de cada espécie.
2. No DNA sempre temos A=T e C=G!
Histórico
A tripla hélice de Linus Pauling (1951)
(Pauling havia proposto a estrutura de alfa-helice em proteínas.... e foi agraciado pelo Nobel (1954) por isso!!)
Histórico
Rosalind Franklin e Maurice Witkins (1952, UK)
a “fotografia 51”... quem era responsável por ela?
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Histórico
Francis Crick e James Watson (1953, UK) A dupla hélice revelada!
Histórico
A dupla hélice levou a propostas por
Watson e Crick (1953) de como seria a replicação do DNA e a síntese de RNA!
Componentes dos ácidos nucleicos: bases nitrogenadas!
Uracil
RNA DNA
Componentes dos ácidos nucleicos: riboses e desoxirriboses!
RNA DNA
Atenção na numeração dos carbonos!
9 As desoxirriboses não são planares!
A cadeia fosfodiester forma o esqueleto externo do DNA!
As bases formam um empilhamento no interior da dupla hélice!
Nucleosídeo X Nucleotídeo
11 Nomenclatura dos nucleotídeos
Emparelhamento de bases!
1. Quantas pontes de hidrogênio tem em cada par?
2. Como seria o emparelhamento de duas purinas?
3. E duas pirimidinas?
As bases podem girar no nucleotídeo!
Qual delas está no DNA? No B-DNA é a anti!
13 Exemplo encontrado na natureza, com a lesão 8-oxoG!
Esse novo padrão pode alterar o emparelhamento no DNA?
O DNA tem cadeias antiparalelas... O que significa isso?
A estrutura B-DNA- distâncias e tamanho!
Qual o significado biológico de termos sulco maior e menor?
Qual é o mais acessível a uma proteína por exemplo?
major groove
minor groove
A estrutura B-DNA- distâncias e tamanho!
Quantas bases por volta tem no DNA?
“The Mica Experiment”
15 As estruturas do DNA!
As estruturas do DNA!
A dupla hélice pode se desnaturar!
A dupla hélice pode se desnaturar!
17 Isso provoca um efeito hiper-crômico.... Por que?
O que é Tm?
Moléculas de DNA podem ter Tm diferentes.... Por que?
Mas podemos renaturar uma molécula de DNA!
Que condições ela tem que respeitar?
Que tipo de sequencia pode resultar em renaturação?
E podemos medir a velocidade de renaturação, ou Reassociação!!!!
19 A curva de reassociação é diferente para diferentes genomas!
Por que?
O DNA de mamíferos (incluindo humano) tem curva de reassociação em duas (ou mais) fases!!! Por que?
Esse DNA repetitivo também é chamado DNA satélite pois pode apresentar densidade diferente do genoma!
Esse processo pode ajudar em várias estratégias de Biologia Molecular
21 FISH: localizando, in situ, sequencias específicas!!!
Exemplo: telomeros...
