VIRUS EN EL CEREBRO Y GLANDULAS SUBMAXILARES, Y CUERPOS DE NEGRI, EN ANIMALES SOSPECHOSOS DE HABER MUERTO
DE RABIA NATURAL*f-
N. VEERARAGHAVAN, M.B., BS., D.Sc., A. BALASUBRAMANIAN, M.B., B.S., Y R. RANGASWAMI
Instituto Pasteur de la Indz‘a Meridional, CóonooT, India
Los datos sobre la proporción de animales sospechosos de rabia que se demuestra haber muerto de esta enfermedad por el examen de laboratorio, y el porcentaje de los mismos que c’ontienen virus en las glándulas salivales, es indispensable para un cálculo, aunque sea aproximado, del riesgo de una población expuesta a la rabia. Se estudió un grupo escogido de 92 perros sospechosos de haber muerto de rabia con el objeto de determi- nar: a) el porcentaje de los que tenían virus en el cerebro, b) el número de los que lo tenían en las glándulas submaxilares, c) las variaciones de contenido de virus en el cerebro y en las glándulas submaxilares de animales, individualmente y por grupo, d) la proporción de los animales que contenían cuerpos de Negri en el cerebro y e) la posible correlación entre los signos clínicos y el hallazgo de virus en las glándulas salivales.
Materiales y métodos. Entre los 92 perros sospechosos de haber muerto de rabia, 22 tuvieron signos de rabia furiosa y otros 21 los tuvieron de rabia muda. En los demás, no hubo síntomas típicos.
El hipocampo mayor, el cerebelo y el mesencéfalo se enviaron, en una solución de bicromato de potasio al 3% y que contenía un 5% de ácido acético, para su examen microscópico. Se examinaron como mínimo 6 secciones seriadas de todas las áreas, des-
* Los autores desean expresar su profundo agradecimiento al Consejo de Investigaciones MBdicas de la India, por la subvención concedida para cubrir parte de los gastos relacionados con el presente estudio, y al Dr. Bertie A. D’Souza, al Dr. M. S. Ganapathy y al Dr. K. P. C. Nair, del Colegio de Veterinaria de Madrás, Madrás, por haber facilitado el material utilizado en el estudio.
i Publicado en inglés en el Bulletin of the World Health Organization. Vol. 18, No. 3, 1958.
pués de colorearlas por la técnica de Mann, antes de que la muestra se considerara negativa.
Asimismo, se enviaron los cerebros y glándulas submaxilares de los animales, en una solución salina estéril con glicerol al 50%, para la prueba biológica. Una vez recibidos en el Instituto (dos o tres días más tarde), se guardaron en el congelador a una temperatura de -20°C. hasta el mo- mento de examinarlos.
Para la titulación de virus se adoptó el método siguiente. Se preparó una suspensión al 10% de cerebro, o de glándula submaxi- lar, en una solución salina estéril normal que contenía 2 mg. de estreptomicina y 500 unidades de penicilina por ml. La suspensión se dejó reposar durante 30 minutos y luego se centrifugó durante dos minutos a mil revoluciones por minuto. Al sobrenadante se le asignó una dilución 10-l y se hicieron diluciones logarítmicas en una solución salina normal al 2 % de suero inactivado de cobayo normal. El material se conservó en hielo, y se inocularon las diversas diluciones por vía intracerebral en grupos de cinco ratones. Estos animales estuvieron en observación durante 45 días, y se confirmó que las muertes que ocurrieron durante este período se debieron a rabia, según demostraron los cuerpos de Negri en frotis o secciones del cerebro, o en ambos. El número de DLhO de virus contenido en las inoculaciones se calculó por el método de Reed y Muencha.
El contenido de virus de las glándulas submaxilares de todos los animales se titu- ló en ratones. Sólo pudo ser titulado el contenido de virus de los cerebros de 60 de los animales antes mencionados, ya que los
a Reed, L. J., y Muench, H.: Am. Jour. Hyg., 27: 493, 1958.
70 BOLETIN DE LA OFICIYA SAhXTdRI.4 PASAMERICANA
CUADRO No. l.-Frecuencia de cuerpos de Negri
?/ hallazgo de virus en el cerebro y gldndula salivales.
Cerebro
Virus en &n- Porcentaje de
Cuepi de dulas salivales CBSOS
e Virus
+ + 58,7
- + 736
- - 33,7
+ + 33,7
-t - 25,0
- + 5,4
+ + 39,l
+ - 27,2
32 cerebros restantes se recibieron en estado de descomposición y por consiguiente no se prestaban a una titulación de virus fide- digna. La presencia de virus en estos últimos se comprobó mediante la inoculación a ra- tones, por vía intracerebral, de la dilución 10-r.
Resultados. En 1955 se publicó un informe preliminar de esta laborb. En el cuadro No.
1 se presenta un análisis de los datos. Entre una serie de 92 animales sospecho- sos de haber muerto de rabia, 61 contenían virus en el cerebro. De estos 61, 36 (59%) tenían virus en las glándulas submaxilares.
Los tftulos de virus de los cerebros oscila- ron entre <10-l y 10e6, y los de las glándu- las submaxilares entre <10-l y 10-6f6. En 25 casos el título de virus de las glándulas submaxilares fue de 10m2 6 mayor.
En 7 animales (30,4%) de los 23 en que se pudo obtener tanto el título de virus del cerebro como el de las glándulas submaxi- lares, el de éstas fue mayor que el del cere-
b Veeraraghavan, N., Balasubramanian, A. y Rangaswami, R. (1955) Studies on the virus con- tent of the brains and submaxillary glands of animals which die of natural rabies infection. En: Instituto Pasteur de la India Meridional, Scientific Reporl 1954, Madrás, pág. 37.
CUADRO Xo. 2.-Signos cl+nicos 2/ presencia de virus en los cerebros 1, glándulas submaxila~ss de
animales rabiosos.
____-____
1 Furiosos 22 20 22 15
2 Mudos 21 18 21 15
3 Atípicos 49 16 18 6
---~
Total 92 54 61 36
bro. Hubo un caso (4,4%) en que ambos títulos fueron iguales, y en 15 (65,2%), el de las glándulas submaxilares fue inferior al del cerebro.
Los cuerpos de Negri pudieron hallarse en los cerebros de 54 de los 92 animales examinados. Entre ellos, 31 (57,4 %) tenían virus en las glándulas submaxilares. En cinco de 38 casos (132%) se comprobó el virus en las glándulas submaxilares, si bien no se encontraron cuerpos de Negri en el cerebro.
En el cuadro KO. 2 se presenta la relación entre los signos clínicos y el hallazgo de cuerpos de Negri y el contenido de virus de los cerebros y de las glándulas submaxilares.