INFLUENZA AVIÁRIA. Suporte laboratorial e plano de ação para diagnóstico e contenção da epidemia

(1)

INFLUENZA AVIÁRIA

Suporte laboratorial e plano

de ação para diagnóstico e

contenção da epidemia

Gerência Geral de Laboratórios de Saúde Pública

GGLAS/ANVISA

(2)

"Up to one billion people could die around

the whole world in six months....

We are half a step away from a worldwide

pandemic catastrophe."

Dmitry K. Lvov, Director, D.I. Ivanovsky

(3)

• Doença causada pelo vírus da influenza aviária (família

Orthomyxoviridea, gênero Influenza A).

• Patologia de ocorrência natural em aves selvagens,

neste caso usualmente estas são portadoras

assintomáticas.

• Aves infectadas disseminam o vírus através da saliva,

secreções nasais e fezes.

• Os pássaros contaminam-se após a exposição às

secreções (saliva, fezes e secreções nasais) e/ou

superfícies contaminadas por estas.

Introdu

(4)

• Aves domésticas podem ser infectadas por aves selvagens

contaminadas (principalmente as aquáticas, como por exemplo:

patos), por outras aves domésticas, por contato com superfícies

(ex.: gaiolas) ou materiais (ex.: água ou ração) contaminados.

z

Existem duas formas de influenza aviária em aves domésticas: Alta

patogenicidade e baixa patogenicidade;

z

A forma com baixa patogenicidade pode permanecer

desapercebida e usualmente causa somente sintomas brandos

(ex.: queda na produção de ovos e eriçamento nas plumas);

z

A forma com alta patogenicidade espalha-se rapidamente, possui

mortalidade em aves de 90-100%, ataca diversos órgãos e

Introdu

(5)

Os procedimentos atuais de

vigilância não garantem a

ausência de novos casos em

(6)

Monitoramento do vírus da gripe aviária em

Hong Kong

(7)

(8)

Influenza avi

á

ria em humanos

z

Usualmente influenza aviária se refere a o vírus

da influenza A, que ocorre principalmente em

aves, entretanto, esses agentes são capazes de

infectar humanos;

z

Geralmente o risco de infecção pelo vírus da

influenza aviária é baixa em humanos,

entretanto, desde de 1997 vários casos tem sido

reportados;

z

A contaminação pessoa a pessoa é extremamente

(9)

Influenza avi

á

ria em humanos

z

Epidemias de influenza aviária conferem risco de

contaminação no pessoal envolvido diretamente

com as aves e suas secreções e excreções;

z

Sintomas da influenza aviária humana podem

variar desde um quadro similar a um resfriado

comum, passando por infecções oculares,

pneumonia, desordens respiratórias severas,

podendo ter o óbito como desfecho. Os sintomas

irão depender do tipo de vírus que causou a

infecção;

z

Estudos sugerem que medicamentos utilizados

para a gripe humana podem vir a apresentar

resultados satisfatórios para a influenza A.

(10)

z

O H5N1 já foi detectado em porcos na China e suspeita-se de

outros animais sejam capazes de carrear o vírus.

z

Porcos podem carrear tanto o vírus da Influenza aviária, assim

como o da influenza humana, fator que pode contribuir para

ocasionar mutações que possibilitem a infecção do H5N1 em

humanos – similar ao mecanismo proposto para a gripe

espanhola.

Influenza avi

(11)

V

í

_í

rus da influenza em alimentos

_{rus da influenza em alimentos}

z

Vírus com baixa resistência ao processamento.

z

Carga viral somente pode ser detectada em animais

contaminados com cepas de alta patogenicidade – animais

que dificilmente chegam ao processamento pela rapidez do

óbito, a não ser em casos de sabotagem.

z

Baixas cargas virais ou cepas com baixa patogenicidade são

de difícil detecção.

(12)

Procedimentos recomendados para a

inativa

ç

ão do HPNAI propostas pela OIE

–

documento em an

(13)

Diagn

ó

stico da gripe avi

á

ria

Nível de biossegurança 2 (NB2)

Testes comerciais rápidos (Kits)

z

Podem gerar um resultado em 30 minutos

z

Estes testes somente são capazes de diferenciar os gêneros do vírus influenza

(exemplo: Determinar influenza A ou B na amostra).

z

Estes testes possuem baixa sensibilidade (cerca de 30% de falsos negativos)

z

Os resultados devem levar em conta a atividade da influenza na comunidade afetada.

Imunoensaios (imunofluorescência)

z

Método rápido e sensível para a detecção de influenza;

z

Pode ser utilizado para determinar os diferentes subtipos do vírus;

z

Os resultados sofrem influência significante da qualidade dos reagentes e da

experiência do técnico

Reverse Transcription Polymerase Chain Reaction Real Time(PCR-RT)

z

Método de detecção relativamente rápido – resultado em algumas horas;

z

Alta sensibilidade;

z

Grande número de amostras pode ser analisado ao mesmo tempo;

z

A contaminação com amostras positivas anteriormente analisadas é a causa mais

freqüente de falsos positivos.

Testes sorológico -

Inibição da hemoaglutinação (Teste indireto)

(14)

Diagn

ó

stico da gripe avi

á

ria

Nível de biossegurança 3+ (NB3+)

Ensaio de microneutralização

z

Usado para identificar cepas e subtipos específicos do vírus influenza A;

z

Usado para identificar anticorpos efetivos contra o vírus;

z

Utilizado na pesquisa e produção de vacinas;

z

Necessidade de animais SPF.

Isolamento do vírus

z

Uso de ovos e animais SPF (livre de patógeno específico);

z

Confere informações a respeito da circulação de subtipos e cepas do vírus;

z

Confere informações importantes para o tratamento e a quimioprofilaxia da

doença;

z

Confere material para a produção de vacinas;

z

Dá suporte a decisão a respeito de que cepa utilizar na produção de vacinas;

z

Monitora o surgimento de resistência a antiretrovirais.

(15)

Demandas laboratoriais no pa

í

_í

s

_s

z

Poucos equipamentos PCR-RT (preço aproximado U$ 42.000,00);

z

Pouco conhecimento a respeito dos kits de diagnóstico rápido

disponíveis no mercado;

z

Necessidade de animais e ovos SPF (Specific Pathogen Free);

z

Poucos laboratórios com nível de biossegurança adequada

(principalmente NB3);

z

Políticas laboratoriais unilaterais e desarticuladas entre os órgãos

(16)

Plano de a

ç

_ç

ão

_ão

z

Identificação de laboratórios no Ministério da Saúde /

Ministério da Agricultura / outros órgãos com capacidade

analítica implantada;

z

Propor a capacitação de LACENs para a realização destas

análises, pelo menos as que necessitam NB2;

z

Elaborar plano de ação para agilizar o fluxo das amostras,

minimizando o tempo de resposta do diagnóstico.

(17)

Responsabilidades

(proposta)

(18)

Lacens, Laboratórios clínicos, hospitalares, veterinários e

de produtos de pequeno porte

z

Possuir no mínimo NB2, caso contrário o laboratório deverá

somente coletar as amostras e enviá-las a outro laboratório mais

preparado;

z

Realizar imunoensaios e outros ensaios rápidos (realizado

diretamente na amostra) para determinação da doença;

z

Gerenciar a coleta e envio de amostras para a confirmação de

maneira correta ao laboratório de referência;

z

Instituir um programa de monitoramento, entre o pessoal do

laboratório envolvido com as análises (saúde do trabalhador), de

episódios de doenças respiratórias similares à gripe;

z

ESTES LABORATÓRIOS NUNCA DEVEM REALIZAR ISOLAMENTO OU

CULTURA DO VÍRUS INFLUENZA;

(19)

Laborat

ó

rios de Referência

Apenas o Laboratório de Referência Nacional e o Lanagro MG possui

NB3 e NB3+ respectivamente

z

Possuir NB3+ para testes que exijam o isolamento do vírus e

culturas em ovos embrionados;

z

Conduzir testes para a determinação de subtipos (principalmente

as que utilizam culturas de vírus);

z

Monitorar a resistência da influenza a drogas antiretrovirais;

z

Instituir um programa de monitoramento, entre o pessoal do

laboratório envolvido com as análises (saúde do trabalhador), de

episódios de doenças respiratórias similares à gripe;

(20)

Guia de

Biossegurança

da SVS

(21)

Nível central

z

Monitorar e preparar a estrutura laboratorial e pessoal para uma

possível demanda ocasionada por uma epidemia;

z

Criar um banco de dados central para a avaliação em tempo real

do quadro de influenza no país (Aproveitar o que já existe?)

z

Elaborar plano de ação, em articulação com estados e municípios,

para envio, e recepção de amostras e emissão de laudos no menor

tempo possível;

z

Disponibilizar guias e procedimentos de biossegurança para o

pessoal envolvido nas análises do vírus influenza;

z

Promover ações de esclarecimento, prevenção e cuidados

(22)

z

Redução da velocidade de evolução da epidemia

–

Identificação de casos de influenza precocemente;

–

Pronta identificação de animais selvagens e/ ou domésticos

com a presença do vírus influenza

z

Conferir suporte as ações de monitoramento em vigilância

em saúde e avaliar os resultados destas;

z

Otimizar o tratamento clínico, diferenciando um quadro de

influenza de outros agravos respiratórios similares;

z

Monitorar os subtipos prevalentes de vírus;

z

Monitorar a circulação de vírus com resistência a

Resultados esperados da estrutura

ç

ão

laboratorial para influenza

(23)

Referências bibliogr

á

_á

ficas

_ficas

z

Eric C.J. Claas1, 2 & Albert D.M.E. Osterhaus1 New clues to the emergence of

flu pandemics Nature Medicine 4, 1122 - 1123 (1998) doi:10.1038/2617

z

Organização Mundial de Saúde Animal – OIE – http://www.oie.int

z

Organização Mundial de Saúde – OMS – http://www.who.int

z

Nature - http://www.nature.com/news/archive/040823.html

z

Center for Disease Control and Prevention – CDC – http://www.cdc.gov

z

United Nations Food and Agriculture Organization – FAO –

http://www.fao.org

(24)

(25)

PROCEDURE INFLUENZA

TYPES DETECTED ACCEPTABLE SPECIMENS TIME FOR RESULTS RAPID RESULT AVAILABLE

Viral culture A and B nasal wash/aspirate, NP swab,2_{nasal aspirate, nasal swab}

and throat swab, sputum

5-10 days No

Immunofluorescence Antibody Staining

A and B nasal wash/aspirate, NP swab,2_{nasal aspirate, nasal swab}

and throat swab, sputum

2-4 hours No

RT-PCR5 _{A and B} _{nasal wash/aspirate, NP swab,}2_{nasal aspirate, nasal swab}

and throat swab, sputum Hours No

Serology A and B paired acute/convalescent serum samples 6_>2weeks_No

Rapid Diagnostic Tests

Directigen Flu A7

(Becton-Dickinson) A NP swab,

2_{throat swab, nasal wash, nasal aspirate} _{See insert} _Yes

Directigen Flu A+B7,9

(Becton-Dickinson) A and B4 NP swab

2_{, throat swab, nasal wash, nasal aspirate} _{See insert} _yes

FLU OIA7

(Thermo Electron) A and B NP swab,

2_{throat swab, nasal wash, nasal aspirate,}

sputum See insert Yes FLU OIA A/B7, 9

(Thermo Electron) A and B NP swab,

2_{throat swab, nasal wash, nasal aspirate,}

sputum See insert Yes XPECT Flu A/B7, 9

(Remel)

A and B nasal wash, NP swab 2_{, throat swab} _{See insert} _Yes

NOW Flu A Test7, 9

NOW Flu B Test7

(Binax)

A

B4 nasal wash, NP swab

2_See_insert _Yes

QuickVue Influenza A+B

Test8_(Quidel) A and B

9_NP_swab2_{, nasal wash, nasal aspirate} _{See insert} _Yes

SAS Influenza A7_,

SAS Influenza B7 A _B NP wash2, NP aspirate2 See insert Yes

ZstatFlu8_(ZymeTx) _{A and B} _{throat swab} _{See insert} _Yes

QUICK REFERENCE CHART OF INFLUENZA DIAGNOSTIC TESTS

1

(From: Prevention and Control of Influenza: Recommendations of the Advisory Committee on Immunization Practices (ACIP). MMWR 2004;53(RR-6):1-40.

1 - The list might not include all FDA-approved test kits. 2 - NP = nasopharyngeal