Dissertação de Mestrado - Shirley Margareth Buffon da Silva
Programa de Pós-Graduação em Ciências Genômicas e Biotecnologia - UCB
RESUMO
Duas estirpes de Bacillus thuringiensis isoladas de amostras de solo brasileiro nomeadas S701 subsp. kurstaki e S1265 subsp. morrisoni, foram caracterizadas a nível bioquímico, molecular e quanto a atividade contra insetos-praga da ordem Lepidoptera (Spodoptera frugiperda e Anticarsia gemmatalis), Diptera (Culex quinquefasciatus) e Coleoptera (Tenebrio molitor). A CL50 das estirpes contra as larvas de segundo ínstar de S.
frugiperda, A. gemmatalis e C. quinquefasciatus, apresentaram alto potencial contra esses insetos, não tendo apresentado toxicidade contra os insetos da ordem coleoptera. Através da microscopia eletrônica de varredura foram identificados cristais bipiramidais, cubóides e esféricos na estirpe S701, e cristais bipiramidais e esféricos na estirpe S1265. As misturas esporo-cristal dos isolados foram analisadas por SDS-PAGE. A estirpe S701 apresentou padrão similar ao da estirpe de B. thuringiensis subsp. kurstaki HD-1 (toxinas de aproximadamente 130 e 65 kDa), e a estirpe S1265 apresentou apenas um polipeptídeo de aproximadamente 130 kDa. Através da amplificação de DNA por PCR utilizando como molde DNA total e conjuntos de oligonucleotídeos gerais e/ou específicos foram encontrados genes cry1 para ambas as estirpes, os quais foram parcialmente clonados e seqüenciados. Os genes encontrados foram cry1Aa, cry1Ac, cry2Ab e cry5 para a estirpe S701 e os genes cry1D e cry2Ad para a estirpe S1265.
Palavras-chave: Bacillus thuringiensis, Spodoptera frugiperda, Anticarsia gemmatalis, controle biológico, proteínas cristal, genes cry
