Determinação de aminoácidos
em plantas forrageiras
Ed Paschoal CARRAZZONI1,
Antonio Hélder PARENTE2 Resumo
Este trabalho foi realizado com o objetivo de investigar, atra-vés de cromatografia em camada fina, o conteúdo de aminoácidos em dezenove tipos de capim utilizados no esta-do de Pernambuco (Brasil), em diferentes épocas após o plan-tio, e recomendar o momento próprio para consumo imediato ou ensilagem.
Palavras-chave: aminoácidos, plantas forrageiras, ensilagem. Abstract
This study was carried out to investigate through fine layer chromatography, the amino acid content in nineteen used types of fodder in the State of Pernambuco (Brazil), at different ti-mes after plantation, recommending the proper moment for immediate consumption or ensilage.
Key words: aminoacids, fodder, ensilage. Introdução
O
principal objetivo deste de trabalho é infor-mar aqueles que utilizam as forragens sobre as características de cada uma, a fim de escolherem a que melhor se adapta às suas necessidades. São descritos os processos de extração, isolamento e identificação dos aminoácidos nos estados livre e combinado. Nem todas as forragens utilizadas pe-los agricultores apresentam teor protéico satisfatório e muitas delas carecem do conjunto de aminoácidos essenciais, razão pela qual, nessa seqüência de es-tudos, determinam-se os aminoácidos livres conti-dos nas plantas e aqueles resultantes da hidrólise de suas proteínas.Sempre que possível, as plantas foram coletadas nos estádios juvenil-indutivo e de
São relatados os resultados de 19 forragens utilizadas no estado de Pernambuco: Andropogon selloanus, Brachiaria brizantha, Brachiaria purpurascens (capim de planta), Cenchrus ciliaris, Chloris barbata (capim-bolota), Chloris gahana (capim-de-rodes), Digitaria decumbens (capim pangola), Eragrostis curvula (capim-chorão), Eriochloa punctata (capim-angolinha), Hyparrehnia diplandra (capim-jaraguá-da-mata), Hyparrhenia rufa (capim-jaraguá), Panicum maximum (capim-colonião), Panicum repens (ca-pim-de-castela), Pennisetum purpureum (capim-elefante), Setaria sphacelata (capim-marangá), Setaria viridis (capim-africano), Sorghum sudanensis, Tripsacum dactyloides (capim-guatemala) e Tripsacum laxum.
Metodologia
Todas as plantas, recém-colhidas, foram homogeinizadas em liquidificador, na proporção de 160 g para 600 ml de água desionizada durante 10 minutos, e separado o líquido por prensagem. O lí-quido obtido foi centrifugado e o sobrenadante tra-tado com acetona gelada para uma concentração final de 70% (2). A mistura foi colocada no refrige-rador durante duas horas e, em seguida, centrifugada a fim de eliminar o precipitado. O sobrenadante foi evaporado à secura em banho-maria e a vácuo, dis-solvendo-se o resíduo com água deionizada para um volume final de 5 ml.
O resíduo obtido na prensagem foi subme-tido à hidrólise ácida. Dentre os métodos citados na literatura (1), escolhemos o refluxo com HCl 6N e ácido fórmico a 90% (v/v) durante 24 horas, utili-zando-se 10 ml da mistura para cada grama de ma-terial. Concluído o tempo de hidrólise, filtramos e evaporamos à secura, dissolvendo-se o resíduo com
As soluções obtidas no final da extração dos aminoácidos livres e da hidrólise ácida fo-ram passadas através de colunas de Dowex 50W-X12, forma H (20 x 1 cm). Inicialmente, foram passados 500 ml de água desionizada e, em se-guida, os aminoácidos foram eluídos com 250 ml de hidróxido de amônia 5N. A solução amoniacal foi evaporada à secura e o resíduo, dissolvido com isopropanol a 10% para um volume total de 2 ml. Os cromatogramas foram todos desenvol-vidos à temperatura de 25 0C, utilizando-se papel
Whatman nº 1. Inicialmente foram realizados cromatogramas monodimensionais em n-butanol, ácido acético e água (4: 1: 1), com a finalidade de determinar a quantidade ótima para ser aplicada nos cromatogramas bidimensionais. Esses cromatogramas foram revelados com uma solução de ninhidrina a 200 mg%, em acetona, com 0,5 % de ácido acético, seguindo-se aquecimento em es-tufa a 100 0C, durante 5 minutos. Em seguida,
bor-rifou-se uma solução de bicarbonato de sódio a 1% no local correspondente ao Rf do aminoácido. Os cromatogramas bidimensionais foram desenvolvi-dos com n-butanol, ácido acético e água, na pri-meira direção, e fenol, água e hidróxido de amônia, na segunda direção (12). Outros cromotogramas monodimensionais foram desenvolvidos para con-firmação de alguns aminoácidos por revelação com reagentes específicos e, também, para separação de metionina da valina e de leucina da isoleucina, que não são separados nos cromatogramas bidimensionais.
Para confirmação de alguns aminoácidos, utilizamos como solvente a mistura n-butanol, ácido acético e água (4: 1: 1) e os seguintes reativos:
• reativo de Elson-Morgan (1), para açúcares aminados.
A glicosamina (açúcar aminado) foi identificada com a utilização de um sistema cromatográfico monodimensional em cunha, utili-zando-se como solvente o sistema n-propanol, acetato de etila, piridina e água (14:2:4:9), e reve-lado com o reativo de Elson-Morgan. Para separa-ção da metionina da valina, utilizamos a mistura ter-butanol, metanol e água (4:5:1). A separação de leucina da iso-leucina foi obtida com n-butanol tamponado a pH 12 (9).
Resultados e discussão
Nas tabelas com os resultados, a letra L sig-nifica a fração dos aminoácidos livres, H2O/H+
sig-nifica a fração contendo os aminoácidos resultan-tes da hidrólise ácida das proteínas (a menos do triprófano, que é obtido por hidrólise alcalina) e o sinal + representa uma relação semiquantitativa dos aminoácidos, obtida pela intensidade de cor nos cromatogramas.
Andropogon selloanus (18)
No estádio juvenil-indutivo, o Andropogon selloanus não possui cistina ou cisteína e, no está-dio de floração, estão ausentes a fenilalanina e o triptófano. As ausências foram comprovadas pela repetição dos cromatogramas com aplicação de alíquotas 5 vezes superior às demais amostras. Os aminoácidos que faltam num estádio existem no outro. A cistina ou cisteína, que não existem no período juvenil-indutivo, estão presentes no
está-• no estádio de floração, não existem a isoleucina e a leucina na fração dos aminoácidos livres, mas estão presentes na fração combinada, enquanto a arginina, asparagina, cistina ou cisteína e a tirosina, ausentes na fração combinada, estão presentes na fração dos aminoácidos livres.
Essa forragem possui, ainda, o ácido aminobutírico e a glicosamina. O ácido gama-aminobutírico está presente nas duas frações do estádio juvenil-indutivo e na fração dos aminoácidos livres do período de floração. A glicosamina está presente na fração de aminoácidos livres de ambos os estádios.
TABELA 1 Resultados obtidos na hidrólise do Andropogon selloanus
Brachiaria brizantha (8)
A análise dos resultados indica a ausência da histidina no estádio de floração e da asparagina e cistina ou cisteína no estádio juvenil-indutivo. Os aminoácidos ausentes em um estádio estão presen-tes no outro. Comparando-se as frações dos
entretanto, estão presentes na fração dos aminoácidos combinados;
• no estádio de floração, a fração dos aminoácidos livres não possui arginina e triptófano, todos eles presentes na fra-ção combinada. Por outro lado, a asparagina, cistina ou cisteína, metionina
Andropogon selloanus Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico + + +++ +++ Ácido glutâmico ++ ++ +++ +++ Ácido gama-aminobutírico + + +++ - Alanina +++ +++ ++++ +++ Arginina + + ++ - Asparagina ++ - +++ - Cistina ou Cisteína - - + - Fenilalanina ++ + - - Glicina ++ ++ ++ +++ Glicosamina ++ - ++ - Histidina + + ++ +++ Isoleucina + ++ - ++ Leucina + ++ - ++ Lisina + ++ + + Metionina + + ++ ++ Prolina + + ++ + Serina + ++ +++ +++ Tirosina + - + - Treonina + + ++ + Triptófano - + - - Valina ++ ++ ++ ++
Brachiaria purpurascens (10)
O estádio juvenil-indutivo possui todos os aminoácidos essenciais e, no período de floração, estão ausentes a asparagina, cistina ou cisteína, tirosina e triptófano. Ambos os estádios possuem o ácido gama-aminobutírico. Comparando a fração dos aminoácidos livres com aquela resultante da hidrólise das proteínas, dentro do mesmo estádio, observa-se que:
Brachiaria brizantha Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico + ++ + + Ácido glutâmico ++ +++ ++ ++ Ácido gama-aminobutírico +++ - ++++ - Alanina ++++ ++++ ++++ +++ Arginina - + - + Asparagina - - + - Cistina ou Cisteína - - + - Fenilalanina + ++ + ++ Glicina ++ +++ ++ ++ Histidina - + - - Isoleucina + ++ + + Leucina + ++ + + Lisina + ++ + + Metionina + ++ + - Prolina - + ++ + Serina ++ ++ + + Tirosina + + + + Treonina +++ +++ ++ + Triptófano - ++ - + Valina + ++ ++ -
TABELA 2 Resultados obtidos na hidrólise do Brachiaria brizantha
fração combinada, mas estão presentes na fração dos aminoácidos livres. A arginina, histidina, tirosina e treonina estão ausentes na fração dos aminoácidos livres, nas presentes na fração combina-da;
• na floração, a arginina não está presente na fração dos aminoácidos livres, mas está presente na fração combinada. A metionina está ausente na fração
combi-Cenchrus ciliaris (11)
O período juvenil-indutivo possui todos os aminoácidos essenciais, enquanto, no período de floração, estão ausentes a cistina ou cisteína, tirosina e triptófano. No período de floração, o ácido glutâmico, asparagina e metionina estão
ausentes na fração resultante da hidrólise das pro-teínas, mas estão presentes na fração dos aminoácidos livres. No período juvenil-indutivo, a fração livre possui todos os aminoácidos es-senciais. Na fração combinada, faltam aspa-ragina, cistina ou cisteína, histidina, tirosina e treonina.
Brachiaria purpurascens Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico +++ ++++ ++ + Ácido glutâmico ++ +++ ++ + Ácido gama-aminobutírico +++ - ++++ - Alanina +++ ++++ ++++ +++ Arginina - ++ - + Asparagina + - - - Cistina ou Cisteína + - - - Fenilalanina ++ +++ + ++ Glicina + +++ +++ ++ Histidina - ++ + + Isoleucina ++ +++ ++ + Leucina + +++ ++ + Lisina + +++ ++ ++ Metionina + +++ ++ - Prolina + ++ + ++ Serina ++ ++++ +++ +++ Tirosina - + - - Treonina - +++ + ++ Triptófano ++ ++ - - Valina + +++ ++ ++
Eragrostis curvula (15)
As análises cromatográficas revelaram a ausência da cistina ou cisteína no período juve-nil-indutivo e do triptófano no estádio de floração. No período juvenil-indutivo, a asparagina, metionina, tirosina, treonina e triptófano não
es-tão presentes na fração resultante da hidrólise das proteínas, mas existem na fração dos aminoácidos livres.
Na fase de floração, asparagina, cistina ou cisteína, histidina, tirosina e treonina estão ausen-tes na fração combinada, mas estão presenausen-tes na fração dos aminoácidos livres.
Cenchrus ciliaris Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico +++ ++ ++ ++ Ácido glutâmico +++ +++ ++ - Ácido gama-aminobutírico +++ - +++ - Alanina ++++ +++ ++++ +++ Arginina + + ++ + Asparagina + - + - Cistina ou Cisteína + - - - Fenilalanina + + + + Glicina ++ ++ +++ ++ Histidina + - ++ + Isoleucina ++ + ++ + Leucina ++ + ++ + Lisina +++ ++ ++ + Metionina ++ + ++ - Prolina + + +++ + Serina +++ ++ +++ ++ Tirosina + - - - Treonina + - ++ + Triptófano ++ + - - Valina + + ++ ++
Eriochloa punctata (3)
Todos os aminoácidos essenciais estão presentes no estádio de floração. No estádio ju-venil-indutivo, faltam histidina, treonina e triptófano. Comparando os aminoácidos existen-tes nas frações livre e combinada de um mesmo estádio, observa-se:
• na floração, a asparagina, cistina ou cisteína e a tirosina estão ausentes na fração resultan-te da hidrólise das proresultan-teínas, mas estão
pre-sentes na fração dos aminoácidos livres; • na fase juvenil-indutiva, a tirosina está ausente
na fração dos aminoácidos livres, mas pre-sente na fração combinada, enquanto, nessa fração, a asparagina e a cistina ou cisteína estão ausentes, mas existem na fração livre.
Em ambos os estádios, existe o ácido gama-aminobutírico, sendo que, no estádio juvenil-indutivo, está presente nas duas frações (aminoácidos livres e combinados) e, na floração, apenas na fração dos aminoácidos livres.
Eragrostis curvula Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+ Ácido aspártico + + +++ +++ Ácido glutâmico + + ++++ +++ Ácido gama-aminobutírico +++ - ++++ - Alanina ++++ ++ ++++ +++ Arginina ++ + +++ ++ Asparagina ++++ - ++++ - Cistina ou Cisteína - - + - Fenilalanina ++ + ++ ++ Glicina ++ +++ +++ + Histidina + + ++ - Isoleucina ++ + + ++ Leucina ++ + +++ ++ Lisina ++ + +++ ++ Metionina ++ - +++ ++ Prolina +++ ++ +++ + Serina + ++ ++++ +++ Tirosina + - ++ - Treonina +++ - ++ - Triptófano ++ - - - Valina ++ + +++ ++
Hyparrhenia rufa (7)
Observando o quadro, nenhum dos estádios apresenta-se completo no que se refere ao teor de aminoácidos essenciais: na floração, faltam histidina e tirosina e, no período juvenil-indutivo, faltam metionina e triptófano. Comparando os aminoácidos existentes nas frações livre e combinada, dentro de um mesmo estádio, nota-se que:
• no período juvenil-indutivo, a arginina e a lisina estão ausentes na fração dos aminoácidos livres, mas estão presentes na
fração combinada, na qual, inexistem asparagina e tirosina, estando as substâncias presentes na fração livre;
• na floração, a asparagina está ausente na fra-ção combinada, mas está presente na frafra-ção dos aminoácidos livres, enquanto, nessa fra-ção livre, estão ausentes a isoleucina e o triptófano (ambas presentes na fração com-binada);
• a glicosamina está presente nos dois estádi-os, nas frações dos aminiácidos livres e com-binados.
Eriochloa punctata Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico +++ + ++++ +++ Ãcido gama-aminobutírico ++++ ++ ++++ - Ácido glutâmico +++ +++ ++++ +++ Alanina ++++ ++++ ++++ ++++ Arginina + + ++ ++ Asparagina ++ - +++ - Cistina ou Cisteína + - + - Fenilalanina ++ ++ + + Glicina + ++ + ++ Histidina - - + + Isoleucina ++ ++ ++ ++ Leucina ++ ++ ++ ++ Lisina ++ ++ ++ ++ Metionina ++ + +++ +++ Prolina + + +++ + Serina ++ + +++ ++ Tirosina - ++ + - Treonina - - ++ ++ Triptófano - - ++ + Valina ++ + + +
Panicum maximum (13)
A observação do quadro evidencia um pre-domínio no conteúdo e no tipo dos aminoácidos no período juvenil-indutivo. Para os aminoácidos que se mostraram ausentes, os cromatogramas fo-ram repetidos com alíquotas até dez vezes o vo-lume normalmente aplicado. O Panicum maximum possui todos os aminoácidos essenci-ais no estádio juvenil-indutivo, enquanto, no es-tádio de floração, faltam asparagina, cistina ou
cisteína, histidina, tirosina, triptófano e valina. A fração dos aminoácidos livres do estádio juve-nil-indutivo possui todos os aminoácidos essen-ciais, mas, na fração combinada, não existem asparagina, cistina ou cisteína, tirosina e treonina. Na fase de floração, a fração dos aminoácidos livres não possui arginina, lisina, metionina, prolina, serina e treonina, todas elas existentes na fração combinada. O ácido gama-aminobutírico está presente nos dois estágios, na fração dos aminoácidos livres.
Hyparrhenia rufa Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico + ++ ++ ++ Ácido gama-aminobutírico ++ - ++++ ++ Ácido glutâmico ++ + +++ ++ Alanina ++++ +++ ++++ +++ Arginina - ++ + + Asparagina +++ - +++ - Cistina ou Cisteína + + + + Fenilalanina + + + ++ Glicina +++ +++ +++ +++ Glicosamina ++ +++ ++ +++ Histidina + + - - Isoleucina + ++ - ++ Leucina + ++ ++ ++ Lisina - ++ + +++ Metionina - - ++ ++ Prolina + + ++++ + Serina ++ ++ +++ +++ Tirosina + - - - Treonina ++ ++ ++ ++ Triptófano - - - ++ Valina + ++ ++ ++
Pennisetum purpureum (2,5)
Todos os aminoácidos essenciais estão pre-sentes nos dois estádios, sendo que, na floração, existem em maiores quantidades. Comparando as frações dos aminoácidos livres e combinados, den-tro de um mesmo estádio, observa-se:
• no estádio juvenil-indutivo, a fração dos aminoácidos livres possui todos os aminoácidos essenciais, enquanto, na fração combinada, estão ausentes a asparagina,
cistina ou cisteína, histidina, tirosina e treonina.
• no período de floração, o triptófano está au-sente na fração dos aminoácidos livres, mas está presente na fração resultante da hidrólise das proteínas, que, por sua vez, não possui asparagina, cistina ou cisteína e a tirosina, todos eles presentes na fração dos aminoácidos livres.
Nos cromatogramas aparece, ainda, o ácido gama-aminobutírico e a glicosamina.
TABELA 8 Resultados obtidos na hidrólise do Panicum maximum
Panicum maximum Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico +++ +++ - + Ácido alfa-aminobutírico ++++ - ++ - Ácido glutâmico +++ +++ ++ + Alanina ++++ +++ ++ ++ Arginina + + - + Asparagina ++++ - - - Cistina ou Cisteína + - - - Fenilalanina ++ ++ + ++ Glicina ++ ++ + + Histidina ++ + - - Isoleucina ++ ++ + ++ Leucina ++ ++ + ++ Lisina ++ + - + Metionina ++ + - + Prolina ++ + - + Serina ++ + - + Tirosina + - - - Treonina ++ - - + Triptófano ++ +++ - - Valina ++ + - - Não identificado + - - -
Setaria sphacelata (17)
Nenhum dos dois estádios está completo no que se refere ao teor de aminoácidos: no está-dio de floração, faltam histidina e triptófano e, no estádio juvenil-indutivo, cistina ou cisteína, fenilalanina e isoleucina. No período juvenil-indutivo, a fração dos aminoácidos livres não pos-sui histidina, leucina, metionina, prolina,
Pennisetum purpureum Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico ++ ++ +++ +++ Ácido glutâmico +++ +++ +++ +++ Alanina ++++ +++ ++++ +++ Arginina + + ++ ++ Asparagina + - +++ - Cistina ou Cisteína + - + - Fenilalanina + ++ +++ +++ Glicina + ++ ++ ++ Histidina + - ++ + Isoleucina + ++ +++ ++ Leucina ++ ++ +++ ++ Lisina + + ++ +++ Metionina + ++ +++ +++ Prolina + + +++ + Serina ++ ++ +++ +++ Tirosina + - ++ - Treonina + - ++ ++ Triptófano + ++ - +++ Valina + ++ +++ +++
TABELA 9 Resultados obtidos na hidrólise do Pennisetum purpureum
triptófano e valina, todos eles existentes na fra-ção resultante da hidrólise das proteínas. No pe-ríodo de floração, a asparagina, cistina ou cisteína e metionina não existem na fração dos aminoácidos livres, mas todos eles estão presen-tes na fração combinada. O ácido gama-amino-butírico foi identificado, apenas, na fração resul-tante da hidrólise das proteínas do estádio de floração.
Sorgum sudanensis (17)
Nessa forragem, todos os aminoácidos es-senciais estão presentes em quantidades relativa-mente grandes, no estádio juvenil-indutivo. No es-tádio de floração, faltam cistina ou cisteína, histidina e tirosina. Em ambos os estádios, estão presentes o
Setaria sphacelata Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico - ++++ + +++ Ácido glutâmico ++ ++++ ++ ++ Ácido gama-aminobutírico - - - ++++ Alanina +++ ++++ +++ ++++ Arginina + ++ ++ + Asparagina + ++ - ++ Cistina ou Cisteína - - - + Fenilalanina - - ++ ++ Glicina + ++ ++ ++ Glicosamina - ++ - - Histidina - ++ - - Isoleucina - - ++ + Leucina - + ++ + Lisina ++ ++ + + Metionina - + - + Prolina - ++ ++ + Serina + +++ ++ ++ Tirosina + + + + Treonina ++ + ++ + Triptófano - ++ - - Valina - + ++ ++
TABELA 10 Resultados obtidos na hidrólise do Setaria sphacelata
ácido gama-aminobutírico e a glicosamina. No es-tádio de floração, não existem o ácido glutâmico e a asparagina na fração dos aminoácidos combina-dos, entretanto, ambos estão presentes na fração dos aminoácidos livres. A prolina e o triptófano não existem na fração dos aminoácidos livres, mas es-tão presentes na fração combinada.
Tripsacum dactyloides ( )
No estádio juvenil-indutivo, faltam cistina ou cisteína, tirosina e triptófano: no estádio de floração, estão ausentes asparagina e cistina ou cisteína. No estádio juvenil-indutivo, a fração re-sultante da hidrólise das proteínas não tem
Sorgum sudanensis Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico ++++ ++++ ++ + Ácido glutâmico +++ ++++ +++ - Ácido gama-aminobutírico - +++ ++ - Alanina +++ ++++ ++++ +++ Arginina + ++ + ++ Asparagina - ++++ + - Cistina ou Cisteína - + - - Fenilalanina ++ ++ + ++ Glicina ++ +++ ++ +++ Glicosamina - ++ ++ - Histidina - ++ - - Isoleucina ++ ++ + ++ Leucina ++ ++ + ++ Lisina ++ ++ + ++ Metionina + + ++ ++ Prolina + ++++ - + Serina ++ ++ + ++ Tirosina - ++ - - Treonina + ++ + ++ Triptófano ++++ ++++ - + Valina ++ ++ ++ ++
TABELA 11 Resultados obtidos na hidrólise do Sorgum sudanensis
asparagina, que está presente na fração dos aminoácidos livres. No período de floração, a arginina e o triptófano não existem na fração li-vre, entretanto estão presentes na fase combina-da. A tirosina não existe na fração combinada, mas está presente na fração dos aminoácidos li-vres.
Chloris barbata (capim-de-bolota)
Estudada, apenas, no estádio de floração. Está ausente a cistina ou cisteína e existe um equi-líbrio nas quantidades dos aminoácidos, quer na fração dos aminoácidos livres, quer na fração dos aminoácidos combinados. A arginina, asparagina,
Tripsacum dactyloides Juvenil-indutivo Floração
Aminoácidos L H2O/H+ L H2O/H+
Ácido aspártico ++ + + + Ácido glutâmico ++ + +++ ++ Ácido gama-aminobutírico +++ - +++ + Alanina ++++ ++ ++++ +++ Arginina + ++ - ++ Asparagina ++ - - - Cistina ou Cisteína - - - - Fenilalanina + ++ + ++ Glicina ++ + +++ +++ Glicosamina ++ - ++ + Histidina + + + + Isoleucina + ++ + ++ Leucina + ++ + ++ Lisina ++ + ++ +++ Metionina +++ + + + Prolina ++ + ++ + Serina ++ + ++ +++ Tirosina - - + - Treonina ++ + ++ ++ Triptófano - - - + Valina +++ + ++ +
TABELA 12 Resultados obtidos na hidrólise do Sorgum sudanensis
glicina, prolina, triptófano e valina, que não existem na fração resultante da hidrólise das proteínas, estão presentes na fração dos aminoácidos livres. O nome vulgar capim-de-bolota é também atribuído à espécie Rhynchospora cephalotes Vahl (ciperácea) e, ainda, às espécies Cephastocoenus globosus, C. marginatus, Chaetospora globosa, R. pohliana e R. presleana.
Chloris gahana
Estudado, apenas, no estádio de floração. Estão ausentes a cistina ou cisteína e a tirosina e presente o ácido gama-aminobutírico na fração
Chloris barbata Floração
Aminoácidos L H2O/H+ Ácido aspártico ++++ ++ Ácido glutâmico +++ ++ Ácido gama-aminobutírico ++ - Alanina ++++ ++++ Arginina ++ - Asparagina +++ - Cistina ou Cisteína - - Fenilalanina +++ ++ Glicina ++ - Histidina +++ +++ Isoleucina ++++ ++++ Leucina ++++ ++++ Lisina ++ +++ Metionina +++ +++ Prolina ++ - Serina ++ ++ Tirosina ++ + Treonina ++ ++ Triptófano + - Valina +++ -
TABELA 13 Resultados obtidos na hidrólise do Chloris barbata
dos aminoácidos livres. Na fraçao dos aminoácidos resultantes da hidrólise das proteí-nas, estão ausentes asparagina, histidina e triptófano, todos eles presentes na fração dos aminoácidos livres.
Digitaria decumbens
Estudado, apenas, no estádio juvenil-indutivo. O resultado da análise indica a
ausên-Chloris gahana ( ) Floração
Aminoácidos L H2O/H+ Ácido aspártico +++ ++ Ácido glutâmico +++ +++ Ácido gama-aminobutírico ++ - Alanina ++++ +++ Arginina + + Asparagina ++ - Cistina ou Cisteína - - Fenilalanina ++ + Glicina + ++ Histidina ++ - Isoleucina ++ + Leucina ++ + Lisina + ++ Metionina ++ + Prolina ++ + Serina +++ ++ Tirosina - - Treonina ++ + Triptófano ++ - Valina ++ +
TABELA 14 Resultados obtidos na hidrólise do Chloris gahana
cia total da cistina ou cisteína, histidina e triptófano. A asparagina está ausente na fração combinada, mas presente na fração dos aminoácidos livres.
Hyparrhenia diplandra
Estudado, apenas, no estádio juvenil-indutivo, os resultados indicam a ausência da cistina ou cisteína, histidina e tirosina. Os estudos foram repetidos diversas vezes, aumentando-se
conside-Digitaria decumbens Juvenil-indutivo
Aminoácidos L H2O/H+ Ácido aspártico + + Ácido glutâmico ++ ++ Alanina +++ ++ Arginina + + Asparagina ++ - Cistina ou cisteína - - Fenilalanina +++ + Glicina + ++ Histidina - - Isoleucina +++ ++ Leucina +++ ++ Lisina ++ + Metionina + + Prolina ++ + Serina ++ + Tirosina + ++ Treonina ++ + Triptófano - - Valina +++ ++
TABELA 15 Resultados obtidos na hidrólise do Digitaria decumbens
ravelmente as alíquotas aplicadas nos cromatogramas, persistindo a ausência desses aminoácios. Identificou-se a presença do ácido gama-aminobutírico na fração dos aminoácidos li-vres. Na fração combinada, está ausente, também, a asparagina.
Panicum repens
Estudado, apenas, no estádio de floração. Pela análise dos resultados, nota-se a ausência da
Hyparrhenia diplandra Juvenil-indutivo
Aminoácidos L H2O/H+ Ácido aspártico +++ + Ácido glutâmico +++ ++ Ácido gama-aminobutírico ++ - Alanina +++ ++ Arginina + + Asparagina ++ - Cistina ou Cisteína - - Fenilalanina + + Glicina ++ ++ Histidina - - Isoleucina + + Leucina + ++ Lisina + + Metionina + + Prolina ++ + Serina +++ ++ Tirosina - - Treonina + + Triptófano - + Valina + +
TABELA 16 Resultados obtidos na hidrólise do Hyparrhenia diplandra
asparagina, cistina ou cisteína e tirosina. Entre os aminoácidos livres, não existe o triptófano, que exis-te na fração combinada. Na fração dos aminoácidos livres, existe, ainda, o ácido gama-aminobutírico.
Setaria viridis
Analisado, apenas, no estádio juvenil-indutivo. Dos aminoácidos considerados essenci-ais, falta, apenas, a cistina ou cisteína, quer dentre
Panicum repens Floração
Aminoácidos L H2O/H+ Ácido aspártico ++ + Ácido glutâmico +++ ++ Ácido gama-aminobutírico + - Alanina +++ +++ Arginina + ++ Asparagina - - Cistina ou Cisteína - - Fenilalanina + + Glicina + + Histidina ++ ++ Isoleucina ++ +++ Leucina + ++ Lisina ++ + Metionina + + Prolina +++ + Serina ++ +++ Tirosina - - Treonina ++ + Triptófano - ++ Valina +++ ++
TABELA 17 Resultados obtidos na hidrólise do Panicum repens
a fração dos aminoácidos livres, quer dentre aque-les resultantes da hidrólise das proteínas.
A asparagina, histidina, tirosina e triptófano estão ausentes na fração combinada. A glicosamina está presente na fração dos aminoácidos livres.
Tripsacum laxum
Estudado, apenas, no estádio juvenil-indutivo, os resultados indicam a ausência total da cistina ou cisteína e da histidina quer entre os
Setaria viridis Juvenil-indutivo
Aminoácidos L H2O/H+ Ácido aspártico +++ + Ácido glutâmico ++++ + Alanina ++++ +++ Arginina +++ ++ Asparagina ++++ - Cistina ou Cisteína - - Fenilalanina + + Glicina ++ + Glicosamina + - Histidina ++ - Isoleucina +++ + Leucina +++ ++ Lisina ++++ ++ Metionina ++ ++++ Prolina ++ + Serina ++++ + Tirosina ++ - Treonina ++ + Triptófano ++ - Valina ++ +++
TABELA 18 Resultados obtidos na hidrólise do Setaria viridis
aminoácidos livres, quer entre os combinados. Na fração resultante da hidrólise das proteínas, estão ausentes a treonina e o triptófano, que estão presentes na fração dos aminoácidos li-vres.
Tripsacum laxum Juvenil-indutivo Aminoácidos L H2O/H+ Ácido aspártico + + Ácido glutâmico ++ + Alanina ++ ++ Arginina +++ + Asparagina + + Cistina ou Cisteína - - Fenilalanina ++ ++ Glicina ++ + Histidina - - Isoleucina + ++ Leucina + ++ Lisina + + Metionina + ++ Prolina - ++ Serina ++ + Tirosina + + Treonina + - Triptófano + - Valina ++ +
TABELA 19 Resultados obtidos na hidrólise do Tripsacum laxum
Conclusões
1. Um hábito utilizado por, praticamente, todos os agricultores é o de cortar a forragem para ensilamento quando a planta está no estádio de floração. Os resultados experimentais demons-tram que essa não é a melhor solução para a maioria das forragens.
2. Foram analisadas 19 forragens: 12 de maneira completa (abrangendo os dois estádios da plan-ta), 3 no estádio de floração e 4 no estádio juve-nil-indutivo.
3. Apenas o Pennisetum purpureum (capim-elefan-te) possui todos os aminoácidos essenciais nos dois períodos.
Pennisetum purpureum (capim-elefante) e Sorghum sudanensis.
6. Das doze espécies estudadas nos dois estádios, cinco delas mostraram-se incompletas nos dois períodos, mas o que falta num estádio existe no outro, o que significa dizer que, para que a silagem seja praticamente perfeita, o corte da planta deve ser feito nas duas fases: cerca de 50% no estádio juvenil e 50% no estádio de floração. 7. A mistura das duas porções fornecerá aos ani-mais, qualitativamente, todo conteúdo aminoacídico de que eles precisam.
• Andropogon selloanus: no estádio juvenil-indutivo, não possui cistina ou cisteína, que existe no estádio de floração. Nesse estádio
• Eragrostis curvula (capim-chorão): no perí-odo juvenil-indutivo, não existe a cistina ou cisteína, que, por sua vez, está presente na floração. Nesse período (floração), o triptófano está ausente, mas existe no perío-do juvenil-indutivo.
• Hyparrhenis rufa (capim-jaraguá): no perío-do juvenil-indutivo, não existem a metionina e o triptófano, mas ambas as substâncias tão presentes no período de floração. No es-tádio de floração, inexistem a histidina e a tirosina, que estão presentes no estádio juve-nil-indutivo.
• Setaria sphacelata (capim-marangá): no es-tádio juvenil-indutivo, não estão presentes a cistina ou cisteína, fenilalanina e isoleucina, todas elas existentes no período de floração, que, por sua vez, não possui histidina e triptófano, que estão presentes no estádio ju-venil-indutivo.
8. Das 12 espécies estudadas nos dois estádios, apenas o Tripsacum dactyloides (capim-guatemala) mostrou-se incompleto nos dois pe-ríodos. Na fase juvenil-indutiva, faltam cistina ou cisteína, tirosina e triptófano, sendo que a cistina ou cisteína, também, não existem no es-tádio de floração.
9. O estudo não é conclusivo nas outras sete es-pécies estudadas por ter sido analisado ape-nas um estádio (Chloris barbata, Chloris gahana, Digitaria decumbens, Hyparrhenia diplandra, Panicum repens, Setaria viridis e Tripsacum laxum). Entretanto, pode-se con-cluir, como definitivo, que nenhuma delas, nos estádios analisados, possui o teor de aminoácidos completo.
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