Seleção de Temas. Questionário - Proficiência Clínica. Área: Bacteriologia Rodada: Ago/2008. Prezado Participante,

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Seleção de Temas

Prezado Participante,

Gostaríamos de contar com a sua contribuição para a elaboração dos próximos materiais educativos. Cada

questionário desenvolve um assunto (temas) específico dentro da área proposta. Para a presente área,

quais temas você gostaria que fossem abordados nos próximos questionários?

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Sugestão de temas para os próximos questionários:

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Tema

PONTOS IMPORTANTES: LEGISLAÇÃO/NORMAS PARA GESTÃO DE UM LABORATÓRIO DE MICROBIOLOGIA CLÍNICA – COLETA DE AMOSTRAS CLÍNICAS

Elaborador

Antonia Maria de Oliveira Machado,

Médica, Patologista Clínica, Microbiologia, Doutora em Medicina.

Texto Introdutório O Gestor de um Laboratório de Microbiologia Clínica deve ter o conhecimento da necessidade do cumprimento das leis e normas para o funcionamento de laboratórios e o postos de coleta de amostras clínicas. Portanto, o plano de gestão deverá estabelecer a implantação dos serviços e processos de acordo com resoluções, portarias e normas que regem os serviços de saúde, que podem ser conferidas a nível Nacional, Estadual ou Municipal.

O laboratório clínico não pode exercer suas funções sem o Alvará Sanitário, documento expedido pelo órgão Sanitário competente Estadual, Municipal ou do Distrito Federal, que libera o funcionamento dos estabelecimentos que exerçam atividades sob regime de vigilância sanitária. Este documento só será fornecido após avaliação de documentos, instalações e processos da instituição requerente.

No Laboratório de Microbiologia é rotineira a manipulação de amostras biológicas e/ou culturas com agentes infectantes, sendo de responsabilidade da direção do laboratório dispor de condições adequadas de segurança para eliminar ou reduzir a exposição dos colaboradores e do meio ambiente ao perigo potencial dos diversos agentes infecciosos.

Baseado em normas de biossegurança o laboratório deve desenvolver seu próprio manual de segurança incluindo regras de segurança química, biológica e física, prevenção de incêndio, uso de equipamentos de proteção individual (EPI) e coletiva (EPC), risco elétrico, limpeza e desinfecção de áreas e equipamentos, especificando riscos e procedimentos básicos para minimizar ou eliminar estes riscos. Todos os colaboradores deverão tomar conhecimentos das normas estabelecidas através de capacitações.

É de grande importância também o conhecimento de algumas bactérias isoladas com menor freqüência, pois com a maior sobrevida de pacientes imunologicamente comprometidos os agentes oportunistas poderão em algum momento se tornarem patógenos importantes, e o Laboratório de Microbiologia tem que estar atento e preparado para estes eventos.

Questão 1 A área física do Laboratório de Microbiologia deve sempre ser planejada de acordo com os microrganismos que serão manipulados no local. Portanto, é correto afirmar que:

1. São estabelecidos 7 níveis de segurança recomendados para agentes infecciosos;

2. O nível de segurança 3 envolve atividades que apresentam risco moderado para os colaboradores do laboratório e para o meio ambiente;

3. O nível 3 estabelece que além do uso de EPI, todas amostras clínicas ou agentes infecciosos sejam processados em cabine de segurança biológica;

4. O nível de segurança 4 exige o cumprimento das boas práticas e um controle moderado da circulação de pessoas no setor.

Questão 2 Assinale a alternativa correta:

1. A RDC 306 publicada no Diário Oficial da União no dia 07 de dezembro de 2004 dispõe sobre o Regulamento Técnico para funcionamento de Laboratórios Clínicos;

2. A RDC 302 publicada no Diário Oficial da União no dia 14 de outubro de 2005 dispõe sobre o Regulamento Técnico para o gerenciamento de resíduos de serviços de saúde;

3. A Portaria GC-2, publicada no dia 03 de março de 2006, é de âmbito nacional e regulamenta as Diretrizes para retaguarda laboratorial em tuberculose;

4. Resíduos gerados pelas culturas e estoques de microrganismos são classificados na RDC 306 no Grupo A1, e não podem deixar a unidade geradora sem tratamento prévio.

Questão 3 O gestor de um Laboratório de Microbiologia é obrigado a conhecer as leis e normas específicas e estas devem ser rigorosamente seguidas para que o laboratório possa estar em conformidade com as exigências legais estabelecidas pelos órgãos fiscalizadores competentes. Assinale a alternativa incorreta.

1. A Portaria GC-2, publicada no dia 03 de março de 2006, publicada pelo DOU estabelece que o tempo de liberação de uma baciloscopia de pacientes atendidos em emergência é de 24 horas;

2. A IATA estabelece as codificações para cada material e também o tipo de embalagem específica, assim como seu modo de manuseio;

3. A norma da IATA determina que as substâncias infecciosas tanto para humanos como para animais devem ser rotuladas com o Nº 2814;

4. Em março de 2007 a Organização Panamericana da Saúde publicou uma síntese das regulamentações para o transporte de substâncias infecciosas.

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Questão 4 A manutenção da limpeza de toda área física do laboratório é fundamental na rotina do Laboratório de Microbiologia. Assinale a alternativa cuja definição está correta.

1. Esterilização é o processo que elimina qualquer tipo de microrganismo, mas não elimina esporos; 2. Descontaminação é o procedimento que reduz ou elimina a contaminação microbiana de maneira a

assegurar menor risco de transmissão de infecção;

3. Desinfecção é o processo que visa destruir ou inativar irreversivelmente vírus, protozoários, bactérias, fungos e esporos;

4. Anti-séptico é um germicida usado em superfície inanimada.

Questão 5 A cabine de segurança biológica é um equipamento de proteção coletiva e existem 3 classes de cabine. Assinale a alternativa correta:

1. Classe I – é uma cabine cujo fluxo de ar ocorre de fora para dentro, sem recirculação do ar. Ela oferece proteção ao profissional e ao ambiente, mas não ao produto;

2. Classe II – oferece proteção ao profissional, ao ambiente e ao produto, mas não há recirculação de ar; 3. Classe III – é uma cabine hermeticamente fechada, mas não é impermeável aos gases;

4. Classe III – é a mais utilizada nos Laboratórios de Microbiologia. Questão 6 Assinale a alternativa incorreta:

1. Ao receber a amostra biológica, o laboratório deve verificar se a amostra está devidamente identificada; 2. A coleta com “swab” deve ser evitada quando outra metodologia de coleta puder ser utilizada;

3. O laboratório deve recomendar o transporte de ponta de cateter em meio de transporte ou em meio de cultura líquido;

4. O encaminhamento de aspirado gástrico para o exame microbiológico deve ser desencorajado, ele deve ser apenas para micobactérias.

Questão 7 Assinale a afirmativa correta:

1. A coloração de Gram é utilizada para classificar as bactérias com base na morfologia, mas não pode ser utilizada para um diagnóstico presuntivo;

2. A coloração de hematoxilina é utilizada apenas para detecção de fungos em amostras clínicas;

3. A microscopia de campo escuro é utilizada apenas na detecção de espiroquetas em diferentes amostras clínicas;

4. A coloração de Ziel-Neelsen não é específica para micobactérias.

Questão 8 Um dos procedimentos mais importantes para dirigir as atividades diárias de um Laboratório de Microbiologia é um manual atualizado de procedimentos ou procedimento operacional padrão (POP). Portanto, em relação ao controle de qualidade de equipamentos é correto estabelecer em POPs específicos Equipamentos / Procedimentos / Intervalo / Limite de Tolerância:

1. Refrigeradores / Registro de temperatura / Semanal / 2ºC a 8ºC;

2. Congeladores / Registro de temperatura / Mensal / -8ºC a -20ºC ou - 60ºC a -75ºC; 3. Estufas / Registro de Umidade / Diário ou contínuo / 38,5ºC ± 1ºC;

4. Autoclaves / Teste com tiras de esporos (Bacillus stearothermophilus) / Ao menos semanalmente / O não crescimento de esporos indica corrida estéril.

Questão 9 Os microrganismos empregados para o controle de qualidade devem ser mantidos no laboratório por meio de subcultivos de isolados recuperados como parte do trabalho de rotina ou microrganismo de referência como os da ATCC.Assinale a recomendação incorreta.

1. Cada bateria de meios deve ser controlada com os quesitos mais exigentes para o crescimento ou para a produção de atividade bioquímica;

2. Cada tubo de cultura, placa de meio e reagente deve ter uma etiqueta que identifique claramente o conteúdo e as datas de preparo e vencimento, não sendo necessário o controle da esterilidade a cada lote de tubos e placas preparadas;

3. Os meios preparados devem ser visualmente avaliados para sinais de deterioração como descoloração, turvação, mudança de cor e desidratação antes de sua utilização;

4. Todos os discos para susceptibilidade antimicrobiana devem estar avaliados ao menos uma vez por semana com microrganismo padrão de qualidade, de sensibilidade conhecida como E. coli (ATCC 25922), S. aureus (ATCC 25923), S. fecalis (ATCC 29212) e P. Aeruginosa (ATCC 27853).

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Questão 10 Assinale a alternativa incorreta em relação à Listeria spp.

1. São bacilos uniformes, não ramificados, apresentando-se só ou em pequenas cadeias. A única espécie importante para o homem entre as sete espécies conhecidas é a L. monocytogenes. Móvel a temperatura ambiente (25 a 28ºC) e imóvel a 37ºC;

2. Tem importância clínica particularmente para idosos e imunocomprometidos causando meningite, encefalite ou septicemia, mas não tem importância na gravidez;

3. Crescem em ágar sangue, ágar Chocolate, CLED, ágar nutriente, TSA e ágar Mueller Hinton, mas não em Mac Conkey;

4. As colônias são pequenas, crescendo melhor entre 30 a 37ºC, e crescem também à temperatura ambiente e a 40ºC entre três a quatro dias.

Questão 11 Assinale a alternativa incorreta em relação à Nocardia spp.

1. São bacilos Gram positivos ramificados e filamentosos, aeróbios estritos, catalase positivo, móveis, que se fragmentam em bacilos e cocos irregulares, e não produz hifas aéreas à medida que o cultivo envelhece;

2. Existem 12 espécies, sendo as de maior relevância clínica as N. asteroides e N. brasiliensis, que estão associadas ao solo e aos vegetais;

3. As formas clínicas podem ser bem distintas: pulmonar (abscessos), extra-pulmonar localizada, sistêmica, sistema nervoso central (abscessos), partes moles e micetomas;

4. A amostra clínica deve ser coletada por punção, biópsia ou mesmo swab da lesão profunda, deve ser processada rapidamente.

Questão 12 Não são características da Nocardia spp:

1. A Nocardia asteroides é uréia positiva, citrato variável e gelatina negativa; 2. A Nocardia brasiliensis é uréia positiva, citrato positivo e gelatina positiva;

3. Uma característica importante é a cor das colônias em Sabourad dextrose ágar ou mesmo em outros meios. A N. asteróides forma colônias salmon ou laranja claro e a N. brasiliensis laranja escuro.

4. A bacterioscopia pode revelar bacilos regulares sem ramificações e parcialmente ou fracamente álcool-ácido resistentes pelo Ziehl ou coloração de Kinyoun.

Questão 13 O Rhodococcus spp. é uma bactéria oportunista, que causa pneumonia em imunocomprometidos. Em relação a este agente é incorreto afirmar.

1. Sua evolução é lenta e granulomatosa, com infiltrados mas não evoluem para cavitação. Pode causar também meningite, abscessos em tecido subcutâneo, linfadenite, etc;

2. O diagnóstico clínico diferencial deve ser feito com micobactérias, fungos, nocardia e actinomyces; 3. O Rhodococcus spp. pode ser isolado de Lavado bronco-alveolar (LBA), biópsias, hemocultura e mesmo

escarro;

4. Em material clínico, o Rhodococcus pode ser visualizado no interior de macrófagos e extra-celular, na forma de cocos ou coco-bacilos. Em hemoculturas, LBA e escarro eventualmente pode ser observado na forma filamentosa e a coloração pelo Ziehl ou Kinyoun pode revelar a fraca álcool-ácido resistência. Questão 14 São consideradas bactérias fastidiosas, assinale a alternativa correta:

1. Bordetella pertussis, P.aeruginosa, Haemophilus spp. e Legionella spp;

2. Stenotrophomonas maltophilia, Brucella spp., Haemophilus spp. e Legionella spp; 3. Bordetella pertussis, Brucella spp., Haemophilus spp. e complexo Burkholderia cepacia; 4. Bordetella pertussis, Brucella spp., Haemophilus spp. e Legionella spp.

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Questão 15 Assinale a alternativa incorreta.

1. É importante correlacionar a bacterioscopia com achados de cultura e dados do paciente, como quadro agudo, portador, etc. Em casos de abuso sexual é fundamental o isolamento e identificação completa, considerando que neisserias saprófitas ou mesmo Acinetobacter spp. podem ser diagnosticados erroneamente como N. gonorrhoeae;

2. N. gonorrhoeae não é sensível a variações de temperatura;

3. A identificação das espécies de neisseria baseia-se na utilização de açúcares: glicose, maltose, lactose, sacarose e frutose. Como as neisserias utilizam carboidratos por via oxidativa, a base Ágar Cistina Tripticase (CTA) adicionada de 1% de cada um dos açúcares e com indicador vermelho de fenol tem sido utilizado. No entanto, reações duvidosas podem ocorrer, por falha na detecção da acidez produzida pela bacteria, dificultando a identificação;

4. Moraxella (Branhamella) catarrhalis é um potencial patógeno de vias aéreas, principalmente em crianças e adultos jovens. Causa com maior freqüência otite, sinusite e pneumonia. Mais raramente pode causar endocardite e meningite. Cerca de 80% das cepas são produtoras de beta-lactamase, e são detectadas através do teste do Nitrocefin (cefalosporina cromogênica).

Referências Bibliográficas:

• Carmen Paz Oplustil e colaboradores. Procedimentos Básicos em Microbiologia Clínica. Savier Editora de Livros Médicos – 2004.

• Clinical and Laboratory Standarts Institute. Normas de Desempenho para Testes de Sensibilidade Antimicrobiana: 15º Suplemento informativo M100-S15. Vol 25 N º1. Disponível no endereço eletrônico: www.anvisa.gov.br/serviçosaude/manuais/clsi.asp.

• IATA Dangerous Goods Regulations - 46th Edition - Effective 1 January 2005;

• Manual de Microbiologia Clínica para o Controle de Infecção em Serviços de Saúde. Disponível no endereço eletrônico: www.anvisa.gov.br/serviçosaude/manuais/index.htm.

• Manual of Clinical Microbiology. Patrick R Murray et al. 8th edition. ASM Washinton, DC 2003.

• Nuevas regulaciones para el transporte de substancias infecciosas. Organizaaçión Panamericana de la Salud – Março de 2007.

• PORTARIA GC-2, publicada no Diário Oficial (DO), 21 de março de 2006. • RESOLUÇÃO RDC Nº 306 – Diário Oficial da União, 07 de dezembro de 2004.<!

• RESOLUÇÃO RDC Nº 302 – Diário Oficial da União, Seção 1, pg. 33, 14 de outubro de 2005.

• Richard Facklam. What Happened to the Streptococci: Overview of Taxonomic and Nomenclature Changes. Clin.Microbiol.Rev. 15(4):613, 2002.