Enquête sur les événements précoces impliqués dans l'activation des cellules dendritiques humaines induite par le thimérosal : rôle du stress oxydatif. EAC : dermatite allergique de contact ERA : espèces réactives de l'azote ERO : espèces réactives de l'oxygène GB : granules de Birbeck.
I NTRODUCTION GENERALE
Par ailleurs, compte tenu de leur utilisation et pour compléter l'étude, l'effet sur les DC des NP de TiO2 irradiées (par UV ou simulateur solaire) a été évalué en termes de toxicité et d'induction de stress oxydatif. Cette partie consiste en une introduction bibliographique aux NPs et plus particulièrement aux NPs d'oxyde de titane (TiO2-NPs) dans les crèmes solaires. Les résultats sont présentés sous la forme d'un article sur les effets de ces NP TiO2 sur les mono-DC.
I NTRODUCTION BIBLIOGRAPHIQUE
Peau et Immunité cutanée
- La peau
- L’épiderme
- La jonction dermo-épidermique et le derme
- L’hypoderme
- Les acteurs de l’immunité cutanée
- L’immunité innée ou mécanisme de défense non spécifique
- L’immunité adaptative ou mécanisme de défense spécifique
- Les cellules dendritiques
- Génération in vitro de cellules dendritiques humaines
Le derme est une partie vascularisée de la peau qui lui confère une fonction importante d'alimentation de l'épiderme et de thermorégulation. Enfin, les DC sont capables de générer du LT régulateur (Treg) en produisant de l'IL-10 (Hubert et al., 2007).
Stress oxydant et hypersensibilité retardée de type IV
- L'eczéma allergique de contact
- Introduction
- Physiopathologie de l’eczéma allergique de contact
- Modèles d’études de l’eczéma allergique de contact
- Les modèles d’études animaux Le cobaye
- Les modèles d’études in vitro
- Voies de signalisation induites par les sensibilisants de contact
- Activation des DCs en réponse au LPS et au TNF-
- Activation des DCs en réponse aux allergènes
- Stress oxydant
Dans le modèle de Jacobs et al. (2006), le nickel induit la migration des CL depuis l'explant. Enfin, l'activation de la voie NF-B est retrouvée dans les mono-DC en réponse au nickel (Aiba et al., 2003).
Stress oxydant et physiopathologies cutanées
Introduction
Le stress oxydant
Les radicaux libres sont produits physiologiquement en très petites quantités dans la chaîne respiratoire mitochondriale au cours du métabolisme normal de l'oxygène. Mentionnons enfin l'acide lipoïque, cofacteur essentiel du cycle de Krebs, qui possède in vitro des propriétés antioxydantes vis-à-vis de OH et RO2·.
Le stress oxydant dans le vieillissement
Une augmentation de la sécrétion de cytokines pro-inflammatoires et la modification de l'expression de certaines protéines nécessaires à leur migration (CCR7, E-cadhérine) sont également observées (pour revue, Banchereau et al., 2000). L'inflammation des voies respiratoires est causée par la production de ROS (Dworski, 2000), produites et sécrétées par les cellules inflammatoires (Kanazawa et al., 1991 ; Vachier et al., 1992).
Conclusion et perspectives
Stress oxydant et pathologies cutanées
Il est désormais établi que de nombreuses pathologies cutanées comportent une composante radicalaire comme le psoriasis, la dermatite atopique, l'acné et le vitiligo (Fuchs et al., 2001) et que les ROS participent également à la physiopathologie des réactions allergiques (Okayama, 2005). La place des DC dans les réactions allergiques médiées par des lymphocytes T spécifiques étant centrale, l’effet des ROS sur ces cellules a été étudié, ainsi que le rôle du stress oxydatif dans le processus d’activation des DC induit par les sensibilisants de contact.
Stress oxydant et activation des cellules dendritiques
Mizuashi et al. (2005) ont également démontré le rôle du stress oxydatif dans la transduction des signaux en réponse aux allergènes. Bruchhausen et al., (2003) montrent que seuls les antioxydants à fonctionnalité thiol (NAC et cystéine versus vitamines E et C) sont capables d'inhiber la phosphorylation des tyrosines induite par le MCI/MI, le DNCB et le thimérosal.
Stress oxydant et voies de signalisation
- Voies MAPKs et NF-B
- La voie de signalisation Keap1/Nrf2/ARE
Le DNFB induit, en mono-DC, l'expression de plusieurs gènes sous le contrôle de la séquence ARE (Ryan et al., 2004). L'accumulation de Nrf2 induite par le DNCB dans le THP-1 a également été démontrée ( Megherbi et al., 2009 ).
A RTICLE 1
Responsiveness of human monocyte-derived dendritic cells to thimerosal and mercury derivatives
Any questions or concerns that have arisen during the processing of your manuscript are listed below and flagged in the proof. Check your proof carefully and mark all corrections in the appropriate place in the proof (for example using on-screen annotations in the PDF file) or compile them into a separate list. Uncited references: References that appear in the reference list but not in the text. Place each reference in the text or remove it from the list.
Missing references: References listed below have been noted in the text but are missing from the reference list - complete the list or remove the references from the text.
UNCO
RRECT
ED PROO F
ARTICLE IN PRESS
RRECTED
PRO OF
Cite this article as: Migdal, C., et al., Responsiveness of human monocyte-derived dendritic cells to thimerosal and mercury derivatives, Toxicol. 276 Thimerosal and EtHgCl also induced IL-8 and TNF-α secretion, but EtHgCl had a lesser effect than thimerosal. Similarly, exposure to DNCB, thimerosal, and EtHgCl caused a transient induction of ROS that returned to the same level as untreated cells after 1 h.
Please cite this article as: Migdal, C., et al., Responsiveness of human monocyte-derived dendritic cell to thimerosal and mercury derivatives, Toxicol.
ED PROO
Development of an in vitro 555 skin sensitization assay using human cell lines: the human cell line activation assay (h-CLAT).
A RTICLE 2
Sensitization effect of thimerosal is mediated in vitro via reactive oxygen species and calcium signaling
76 Ce travail démontre l'importance du stress oxydatif en tant qu'événement précoce dans la signalisation cellulaire responsable de l'activation de l'U937 et souligne l'importance des groupes thiol dans la réponse des CD aux allergènes.
UNCORRECTED PROOF
Dose-response experiments after 24 hours (gray histogram) and 48 hours (black histogram) of treatment with chemicals compared to control (untreated cells). A) CD86 expression assessed by flow cytometry was reported as CD86 MFI and was calculated as a percentage of the control ((MFI of treated cells/MFI of untreated cells) × 100). Thiol content was expressed as a percentage of the control (MFI of treated cells compared to MFI of untreated cells normalized to 100%). ROS induction, assessed by flow cytometry, was expressed as a percentage of the control (MFI of treated cells compared to MFI of untreated cells normalized to 100%).
Mitochondrial superoxide generation was expressed as a percentage of control (MFI of treated cells compared to MFI of untreated cells normalized to 100%).
A RTICLE 3
U937 apoptosis induced by sensitizers is independent of CD86 expression and is elicited by mitochondrial ROS pathway: Protecting effect of thiol-
Materials and Methods
After treatment, cells were loaded with 5 µM CaspACE FITC-VAD-FMK for 20 min at room temperature in the dark. Before analysis, cells were rinsed twice in PBS, and caspase 3 and 7 staining was immediately detected using the FL2-H wavelength band of a FACScan flow cytometer. In some experiments, cells were pre-incubated with antioxidants, NAC (10 mM) or vitamin E (10 µM) for 1 h before chemical exposure.
The cells were then resuspended at 10 cells/ml and treated with chemicals for 15 minutes to 6 hours.
Results and Discussion
As previously described (see Table 1 ), caspase activation was detected in DNCB- and thimerosal-exposed U937, as also reported in DNCB-treated U937 ( Ade et al., 2006 ). Thimerosal, a calcium inducer (for review see Elferink, 1999 ), induced intracellular calcium mobilization in U937 ( Woo et al., 2006 ). The relationship between mitochondrial oxidative stress and calcium flux has been reported previously (for review see Chakraborti et al., 1999).
These data suggest that overexpression of CD86 induced by sensitizers is independent of apoptosis induction as previously reported for U937 (Ade et al., 2006).
Conclusion
A critical role for p38 mitogen-activated protein kinase in the maturation of human blood-derived dendritic cells induced by lipopolysaccharide, TNF-alpha, and contact sensitizers. Implication of the MAPK pathways in the maturation of human dendritic cells induced by nickel and TNF-alpha. Oxidation of cell surface thiol groups by contact sensitizers causes the maturation of dendritic cells.
Contact allergens and irritants show discrete differences in the activation of human monocyte-derived dendritic cells: Implications for in vitro detection of contact allergens.
DISCUSSION
Impact de nanoparticules hybrides organiques-inorganiques (TiO 2 /PABA) sur les cellules dendritiques humaines
- Les nanoparticules
- Procédé de fabrication des nanoparticules
- Risques pour la santé
- Les nanoparticules d’oxyde de titane
- Oxyde de titane et rayonnement ultra-violets
- Les rayonnements ultra-violets : rappel
- Pénétration cutanée des TiO 2 -NPs
- Toxicité des TiO 2 -NPs
- TiO 2 -NPs et cellules dendritiques
- Nanoparticules hybrides organiques/inorganiques
- Définition
- TiO 2 /PABA NPs
Ces NP sont insolubles, biologiquement inertes et leurs performances dépendent de leur taille (Popov et al., 2005). Wu et al. (2009) démontrent in vivo la pénétration des TiO2-NP dans les couches basales de l'épiderme cutané porcin. Bien que des travaux récents (Warheit et al., 2007) démontrent la sécurité des NP de TiO2 à l'aide d'une série de tests, notamment l'évaluation de la génotoxicité, des tests de sensibilisation et.
La capacité des CD à internaliser les NP a également été démontrée avec les NP magnétiques à base de fer (Goya et al., 2008).
A RTICLE 4
135 Les nanoparticules (NP) sont présentes dans un grand nombre de produits destinés à la consommation, comme les additifs alimentaires et les colorants, mais aussi dans les cosmétiques et notamment les crèmes solaires. La pénétration des NP à travers la peau est un sujet controversé, conduisant à des résultats contradictoires selon les modèles de recherche et le type de NP utilisés. Cependant, de ces travaux émerge l’idée selon laquelle la couche cornée de l’épiderme constitue bien une barrière efficace à la pénétration des NP, sauf dans la peau lésée.
Afin de déterminer un éventuel effet sensibilisant de ces NP TiO2/PABA, ce travail applique les modèles et techniques développés dans des articles précédents utilisant des allergènes de contact tels que le thimérosal et le DNCB.
Internalisation of hybrid titanium dioxide/para-amino benzoic acid nanoparticles in human dendritic cells did not induce toxicity and changes in
Results
Dagiti saan a nataengan a DC ket naipadamag kadagiti PABA, TiO2, wenno TiO2/PABA a mestiso nga NP nga addaan iti umad-adu a konsentrasion ti PABA: TiO2/PABA iti 7% wenno TiO2/PABA iti 20%. 145 TiO2 wenno TiO2/PABA a mestiso nga NP iti 100 μg/ml ket nagtalinaed a saan a nagbalbaliw (aniaman ti porsiento ti naisanglad a PABA). Dagiti mono-DC ket naipadamag kadagiti PABA, TiO2, wenno TiO2/PABA a mestiso nga NP ken kalpasanna na-irradiate.
148 by PI staining was detected in mono-DCs incubated with NPs before irradiation, confirming the protective effect of hybrid TiO2/PABA NPs.
Discussion
TiO2/PABA at 7% FITC-labeled NPs (NP-FITC) were internalized into mono-DCs by macropinocytosis. -DCs were assayed after incubation for 4 h at 37 C in the presence of TiO2/PABA hybrid at 7% labeled with Alexa488 at 100 μg/ml. Effect of UVA radiation on mono-DC viability after exposure to TiO2 and TiO2/PABA hybrid NPs.
161 Table 4: Effect of solar-simulated UV-irradiated TiO2 and hybrid TiO2/PABA NPs on ROS induction.
ANNEXE
In response to sensitizers, Arrighi et al. 2001) demonstrated the important role of p38 MAPK during NiSO4- and DNFB-induced mono-DC maturation, as reported by Aiba et al. Phosphorylation of JNK, p38 MAPK and Erk1/2 was detected by a rapid activated cell ELISA method (FACE™, Active Motif, Rixensart, Belgium). In parallel with sensitizer-induced DC maturation, the phosphorylation of JNK, p38 MAPK and Erk1/2 was assessed using a novel procedure, the Face™ method.
The results obtained for the phosphorylation of JNK, p38 MAPK and Erk1/2 after treatment with NiSO4, DNCB, thimerosal and SDS are summarized in Table 2.
Communications scientifiques
Implication of oxidative stress and MAPKs in phenotypic activation of dendritic cells induced by contact sensitizers. The role of oxidative stress, calcium and MAPKs in dendritic cell activation induced by contact sensitizers.
Phenotypic and functional outcome of human monocytes or monocyte-derived dendritic cells in a skin equivalent. Dual role of dendritic cells in the induction and down-regulation of antigen-specific cutaneous inflammation. MUTZ-3, a human cell line model for cytokine-induced differentiation of dendritic cells from CD34+ precursors.
In vitro evaluation of the sensitization potential of weak contact allergens using Langerhans-like dendritic cells and autologous T cells.
