Glicose

De acordo com a Figura 6, os animais tratados com ITTp e a dieta padrão reduziram a glicemia de jejum quando comparados ao grupo de ratos com obesidade não tratados, que continuaram consumindo a dieta HGLI. Além disso, essa figura também mostra a dispersão / homogeneidade dos dados, demonstrando que o grupo tratado com ITTp apresentou resultados menos dispersos e mais homogêneos.

Figura 6. Glicemia de jejum em ratos Wistar após 10 dias de tratamento. Eutrófico / dieta padrão (animais eutróficos recebendo dieta Labina® + água por gavagem). Obeso / dieta HGLI (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de água por gavagem), obeso / dieta padrão (animais obesos que recebem dieta Labina® + água por gavagem) e dieta obesa / HGLI + TTIp (animais obesos que recebem dieta HGLI + 1 mL de ITTp por gavagem a 730 µg / kg). Todos os grupos representam experimentos com cinco animais. Dieta HGLI: Mistura composta por Labina®, leite condensado e açúcar (1: 1: 0,21); Dieta padrão: ração Labina®. HGLI: Dieta de alto índice e carga glicêmica. ITTp: Inibidor de tripsina purificado de tamarindo (Tamarindus indica L.).

2.2.3.4 Perfil lipídico

Os grupos com obesidade tratados com ITTp e dieta padrão apresentaram as menores concentrações de TG (76,20 ± 18,73 e 62,2 ± 18,0 mg / dL) e VLDL-c (15,24 ± 3,75 e 12,4 ± 3,6 mg / dL), respectivamente (Figuras 7A, B), quando comparado ao grupo com obesidade sem tratamento (Kruskal-Wallis p = 0,0108). Em relação às concentrações de TG, o grupo tratado com ITTp apresentou resultados menos dispersos e mais homogêneos.

Figura 7.Perfil lipídico de ratos Wistar após 10 dias de tratamento. (A) TG: triglicerídeos. (B) VLDL-C: lipoproteína de muito baixa densidade. (C) LDL-C: lipoproteína de baixa densidade. (D) colesterol total. (E) HDL-C: lipoproteína de alta densidade. Eutrófico / dieta padrão (animais eutróficos recebendo dieta Labina® + água por gavagem). Obeso / dieta HGLI (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de água por gavagem), obeso / dieta padrão (animais obesos que recebetam dieta Labina® + água por gavagem) e obeso / dieta HGLI + ITTp (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de ITTp por gavagem a 730 µg / kg). Todos os grupos representam experimentos com cinco animais. Dieta HGLI: Mistura composta por Labina®, leite condensado e açúcar (1: 1: 0,21); Dieta padrão: comida Labina®. HGLI: Dieta de alto índice e carga glicêmica. ITTp: Inibidor de tripsina purificado de tamarindo (Tamarindus indica L.). * Diferença estatística entre os grupos com o teste de Kruskal-Wallis, seguido pelo teste post-hoc de Dunn, com p <0,05.

2.2.3.5 TNF-α

Todos os animais com obesidade tratados com TTIp apresentaram concentrações indetectáveis de TNF-α plasmático (Tabela 6), semelhante ao grupo eutrófico que recebeu a dieta padrão (grupo saudável). Isso não foi observado nos outros grupos com obesidade estudados.

Tabela 6. TNF-α plasmático em ratos Wistar submetidos a diferentes tratamentos por 10 dias.

Parâmetro Eutrófico/ Dieta _padrão Obeso/ Dieta _HGLI Obeso/ Dieta _padrão Obeso/ Dieta HGLI _{+ ITTp} TNF-alfa Indetecável 5.86 ± 0.43 6.53 ± 0.96 Indetecável

Eutrófico / Dieta padrão (animais eutróficos recebendo dieta Labina® + água por gavagem). Obeso / dieta HGLI (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de água por gavagem), obeso / Ddieta padrão (animais obesos que receberam dieta Labina® + água por gavagem) e obeso / Dieta HGLI + ITTp (animais obesos que receberam

dieta HGLI + 1 mL de ITTp por gavagem a 730 µg / kg). Todos os grupos representam experimentos com cinco animais. Dieta HGLI: Mistura composta por Labina®, leite condensado e açúcar (1: 1: 0,21); Dieta padrão: comida Labina®. HGLI: Dieta de alto índice e carga glicêmica. ITTp: Inibidor de tripsina purificado de tamarindo (Tamarindus indica L.).

A expressão relativa de mRNA de TNF-α no tecido adiposo perirrenal foi menor nos animais com obesidade tratados com a dieta padrão (p = 0,014) e ITTp (p = 0,025) quando comparados ao grupo com obesidade não tratado (Figura 8).

Figura 8. Expressão relativa do mRNA de TNF-α no tecido adiposo perirrenal em ratos Wistar após 10 dias de tratamento. Eutrófico / dieta padrão (animais eutróficos recebendo dieta Labina® + água por gavagem). Obeso / dieta HGLI (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de água por gavagem), obeso / dieta padrão (animais obesos que receberam dieta Labina® + água por gavagem) e obeso / dieta HGLI + ITTp (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de TTIp por gavagem a 730 µg / kg). Todos os grupos representam experimentos com cinco animais. Dieta HGLI: Mistura composta por Labina®, leite condensado e açúcar (1: 1: 0,21); Dieta padrão: comida Labina®. HGLI: dieta de alto índice e carga glicêmica. ITTp: Inibidor de tripsina purificado de tamarindo (Tamarindus indica L.). GAPDH: Desidrogenase de gliceraldeído-3-fosfato (Rn01775763_g1). TNF-α: fator de necrose tumoral alfa (LOC103694, Rn01525859_g1). Diferença estatística entre os grupos, com o teste de Mann-Whitney e p <0,05.

2.2.3.6 Imuno-histoquímica de TNF-α

A imuno-histoquímica mostrou uma discreta imunocoloração de TNF-α no tecido adiposo de animais com obesidade tratados com ITTp e dieta padrão, com imunocoloração negativa (0) por densidade óptica (Tabela 7). Ao contrário do grupo não tratado, que apresentou intensa coloração dessa citocina nos compartimentos de tecido perirrenal avaliados (Figura 9)

Figura 9. Imunocoloração de TNF-α no tecido adiposo de ratos Wistar após 10 dias de tratamento. Todos os grupos representam experimentos com n = 5 animais. a) Adipócitos perirrenais no grupo eutrófico / dieta padrão; (b) adipócitos perirrenais na grupo obeso / dieta HGLI; (c) adipócitos perirrenais no grupo obeso / dieta padrão; (d) Adipócitos perirrenais no grupo obeso / dieta HGLI + ITTp. As barras indicam 1000 µm. Dieta HGLI: Mistura composta por Labina®, leite condensado e açúcar (1: 1: 0,2); ITTp: Inibidor de tripsina purificado de sementes de Tamarindus indica L..

Tabela 7. Escore da imuno-histoquímica de TNF-α em tecido adiposo de ratos wistar submetidos a difefentes tratamentos durante 17 semanas.

Todos os grupos representaraem os experimentos com n= 5 animais. TNF-α: fator de necrose tumoral alfa. a_Dieta

padrão: comida Labina®. b_{Dieta HGLI: Mistura composta por Labina®, leite condensado e açúcar (1: 1: 0,21).}

ITTp: Inibidor de tripsina purificado de tamarindo (Tamarindus indica L.)

2.2.3.7 PPAR-γ

Não houve diferença entre os grupos estudados para a expressão relativa de mRNA de PPAR-γ nos tecidos adiposos perirrenais (Figura 10).

Figura 10. Expressão relativa do mRNA do PPAR-γ no tecido adiposo perirrenal em ratos Wistar após 10 dias de tratamento. Eutrófico / dieta padrão (animais eutróficos recebendo dieta Labina® + água por gavagem). Obeso / dieta HGLI (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de água por gavagem), obeso / dieta padrão (animais obesos que receberam dieta Labina® + água por gavagem) e obeso / dieta HGLI + ITTp (animais obesos que receberam dieta HGLI + 1 mL de TTIp por gavagem a 730 µg / kg). Todos os grupos representam experimentos com cinco animais. Dieta HGLI: Mistura composta por Labina®, leite condensado e açúcar (1: 1: 0,21); Dieta padrão: ração Labina®. HGLI: dieta de alto índice e carga glicêmica. ITTp: Inibidor de tripsina purificado de tamarindo (Tamarindus indica L.). GAPDH: Gliceraldeído-3-fosfato desidrogenase (Rn01775763_g1). PPAR-γ: Receptores ativados por proliferadores de peroxissoma.

Eutrófico/

Dieta padrãoa Obeso/ Dieta _HGLI b Obeso/ Dieta _{padrão HGLI + ITTp}Obeso/ Dieta c

Negativo (0) 4 - - 5

Menos positive (+1) 1 1 3 -

Positivo (+2) - 4 1 -

Muito positive (+3) - - 1 -

2.2.4. Discussão

Em estudos anteriores, Medeiros et al. (2018) purificaram o ITTp (inibidor da tripsina do tipo Kunitz de tamarindo). Neste estudo, o ITTp foi novamente obtido, conforme visualizado pelo SDS-PAGE. Foi avaliado seu efeito sacietogênico, parâmetros bioquímicos e moleculares em ratos Wistar com obesidade e dislipidemia.

No presente estudo, em animais com obesidade, o ITTp exerceu seu efeito sacietogênico de maneira semelhante a quando foi parcialmente purificado (CARVALHO et al., 2016). O processo de purificação de uma proteína pode influenciar diretamente na sua bioatividade. Assim, o isolado proteico, parcialmente purificado (ITT), quando totalmente purificado (ITTp), poderia ter perdido as bioatividades anteriormente apresentadas (CARVALHO et al., 2016; MEDEIROS et al., 2018; COSTA et al., 2018), uma vez que essas atividades nas proteínas estão diretamente relacionadas às suas estruturas e conformações (COX; NELSON, 2008).

No estudo de Lima et al. (2016), o isolado proteico de sementes de Erythrina velutina apresentou alta atividade para elastase neutrofílica humana (ENH), uma característica que não foi observada por Machado et al. (2013), ao purificar o isolado proteico de Erythrina velutina (EVTI) usando cromatografia líquida de alta eficiência (HPLC) após a coluna de afinidade Trypsin-Sepharose CNBr 4B. No estudo, o EVTI mostrou alta eficiência inibitória na tripsina e não inibiu a HNE.

No presente estudo, os ratos Wistar com obesidade apresentaram menor consumo alimentar quando tratados com ITTp, em comparação aos demais grupos avaliados. Vale ressaltar que, dos quatro grupos, dois continuaram consumindo, durante os dez dias de experimento, a mesma dieta capaz de induzir a obesidade e, apenas, um grupo passou a consumir a dieta padrão (nutricionalmente adequada). Assim, nesse caso, por aderirem a uma dieta nutricionalmente adequada, os animais com obesidade diminuíram seu consumo, semelhante ao efeito causado pelo uso do ITTp.

Em relação ao ganho de peso, foi observado uma consistência entre os resultados obtidos com o consumo alimentar, mas não houve diferença estatística significativa entre os grupos. No entanto, houve um aumento no ganho de peso no grupo que consumiu a dieta HGLI sem tratamento. Além disso, foi observada uma redução do ganho de peso nos grupos de animais tratados com ITTp e dieta padrão, mas não significativa.

A redução na ingestão alimentar e a consequente perda de peso observada em estudos com inibidores de tripsina são mais comuns em animais eutróficos, embora tenham sido

administradas em um curto período e esses efeitos sejam atribuídos principalmente ao efeito secretagogo e consequente aumento plasmático de CCK (KOMARNYTSKY; COOK; RASKIN, 2011; NAKAJIMA et al., 2011; CHEN et al., 2012; SERQUIZ et al., 2016).

No entanto, observa-se que em roedores com obesidade, o efeito sobre a saciedade em comparação com animais eutróficos ocorre independentemente da concentração plasmática de CCK quando estimulado por diferentes secretagogos desse hormônio (STOECKEL et al., 2008; DUCA; ZHONG; COVASA, 2013; COSTA et al., 2018).

No estudo de Costa et al. (2018), em ratos Wistar, a redução na ingestão alimentar por ITT (25 mg / kg) administrada por 10 dias foi independente do aumento plasmático de CCK. Essa redução pode ter sido causada por uma diminuição significativa na concentração plasmática de leptina nesses animais, um efeito também atribuído ao ITT (COSTA et al., 2018), uma vez que a leptina influencia diretamente o efeito sacietogênico de CCK (BARRACHINA et al., 1997; MATSON et al., 2000; GOMEZ; ENGLANDER; GREELEY, 2004).

Medeiros et al. (2018) em um estudo com ITTp (730 µg / kg) constataram o mesmo efeito de redução da leptina plasmática em ratos, sem ação na CCK, também descrita por Costa et al. (2018) usando a mesma molécula, ainda parcialmente purificada. Portanto, o efeito satietogênico apresentado pelo ITTp neste estudo também pode ser justificado pela melhora da sensibilidade à CCK, independentemente de seu aumento plasmático, que é condicionado pela redução da leptina, que geralmente é alta na obesidade. No entanto, a leptina plasmática foi reduzida em animais tratados com ITTp (MEDEIROS et al., 2018).

Além disso, os inibidores enzimáticos atuam regulando não apenas os hormônios, mas também vários parâmetros bioquímicos. Serquiz et al. (2016), em seu estudo sobre o efeito do inibidor isolado de amendoim (AHTI) em animais eutróficos, revelou sua ação na redução da glicemia de jejum. Analisando os efeitos do ITTp se obsevou uma diferença significativa entre os grupos estudados em relação à diminuição das concentrações plasmáticas de VLDL-c e TG, nos quais o grupo tratado com ITTp e a dieta padrão apresentaram concentrações mais baixas do que os grupos não tratados.

No grupo de animais em que a dieta padrão foi administrada, a redução nos parâmetros lipídicos (VLDL-c e TG) deve-se provavelmente ao fato de a dieta apresentar características normoglicêmicas e normolipídicas, diferente da dieta HGLI com alta carga glicêmica e altas concentrações de açúcar. No estudo de Pawlak et al. (2001), ratos Wistar submetidos a dietas com alto índice glicêmico (45% do valor energético total da dieta derivada de carboidratos, 20% de proteínas e 35% de lipídios) apresentaram trigliceridemia basal significativamente aumentada quando comparados aos ratos alimentados com a dieta contendo a mesma

porcentagem de composição de macronutrientes, mas com carboidratos de baixo índice glicêmico (PAWLAK et al., 2001).

A ingestão aguda de carboidratos promove sua própria oxidação, reduzindo a oxidação de gordura, que é depositada, aumentando a adiposidade corporal (GRAHAM; ADAMO,1999; BRAND-MILLER et al., 2002) Esse efeito é maior quando os carboidratos têm um alto índice glicêmico. Por exemplo, em um estudo de 32 semanas, os animais submetidos a dietas baseadas em carboidratos de alto índice glicêmico apresentaram maior ganho de peso, maior aumento na adiposidade visceral e maiores concentrações de enzimas lipogênicas, do que animais submetidos a dietas com o mesmo conteúdo de energia, mas com um índice glicêmico mais baixo (PAWLAK; DENYER; BRAND-MILLER, 2000).

Além disso, essa característica da dieta HGLI pode justificar, por exemplo, os valores absolutos médios de glicemia, VLDL-c e TG em animais que foram mantidos na dieta HGLI sem tratamento durante o experimento; bem como o estado inflamatório encontrado, com altas concentrações de TNF-α plasmático, além da própria obesidade.

Existem inúmeros estudos sugerindo que dietas hiperglicêmicas podem aumentar a trigliceridemia, favorecer a formação de partículas pequenas e densas de LDL-c e reduzir as concentrações plasmáticas de HDL-c (KATAN, 1998; KRAUSS et al., 2000; PARKS, 2001). Dois mecanismos possíveis foram identificados como responsáveis pelo aumento da trigliceridemia induzida pelos carboidratos: (1) aumento da síntese de triglicerídeos e consequente aumento da produção e liberação de VLDL-c pelo fígado e (2) diminuição da depuração de partículas ricas em TG plasmáticas (PARKS et al., 1999).

Dietas hiperlipídicas e hiperglicêmicas estimulam, consideravelmente, a lipogênese (UYEDA; YAMASHITA; KAWAGUCHI, 2002), aumentando a expressão de enzimas lipogênicas (DELZENNE et al., 2001). A estimulação de enzimas lipogênicas pode ocorrer por fatores de transcrição, como SREBP3 e ChREBP, que são ativados em resposta à alta glicemia (UYEDA; YAMASHITA; KAWAGUCHI, 2002) e à estimulação do receptor nuclear PPAR-γ (KERSTEN, 2001). A glicose em si, devido à conversão em acetil-CoA na via glicolítica, estimula a lipogênese, que é um substrato para esse processo. Além disso, a glicose plasmática estimula a lipogênese, atuando no processo de liberação de insulina. A insulina é provavelmente o fator hormonal mais importante que afeta a lipogênese, estimulando-a de maneira muito potente, aumentando a captação de glicose pelas células adiposas, recrutando transportadores de glicose para a membrana plasmática e ativando enzimas glicolíticas e lipogênicas (KERSTEN, 2001).

Mittendorfer e Sidossis (2001) submeteram indivíduos saudáveis a uma dieta hiperglicêmica (75% de energia na forma de carboidratos e 10% na forma de gorduras) e a uma dieta hiperlipídica (30% de carboidratos e 55% de gordura) e analisaram o metabolismo de VLDL-c a partir de partículas de VLDL-c marcadas isotopicamente. Concluiu-se que a maior concentração de VLDL-c ocorreu após a ingestão da dieta hiperglicêmica. A provável explicação para a maior secreção de VLDL foi a de que seria resultado da menor oxidação de ácidos graxos derivados do plasma, observada no estudo, após o consumo da dieta hiperglicídica, o que causou aumento da disponibilidade de ácidos graxos para a síntese hepática de triglicérides.

Curiosamente, o ITTp também causou a redução das concentrações de VLDL-c e TG em animais com obesidade que permaneceram na dieta HGLI. Também, se observou que os valores de glicemia de jejum dos animais com obesidade que receberam a dieta HGLI foram semelhantes aos dos animais eutróficos e aos dos ratos Wistar com obesidade tratados com a dieta nutricionalmente adequada. O ITTp pode estar atuando em algumas dessas vias, reduzindo a expressão de enzimas lipogênicas ou mesmo reduzindo a expressão de fatores de transcrição, como SREBP e ChREBP. Já que não influenciou na expressão do gene PPAR-γ e esse também se apresenta como candidato na indução da lipogênese condicionada por dietas de alto índice glicêmico(CARVALHO et al., 2016; LIU; WILLETT, 2017; SAMPAIO et al., 2007).

O PPARγ regula a expressão de vários genes envolvidos no metabolismo lipídico, incluindo a proteína adipocitária 2 (TONTONOZ; HU; SPIEGELMAN, 1994), ACIL-CoA sintetase (SCHOONJANS; WATANABE; SUZUKI, 1995) e LPL (SCHOONJANS; STAELS; AUWERX, 1996). Também controla a expressão da proteína transportadora de ácidos graxos 1 e do agrupamento de diferenciação 36, ambos envolvidos na captação lipídica pelos adipócitos (SCHOONJANS; WATANABE; SUZUKI, 1995). O PPARγ tem um papel regulador na adipogênese (BARROSO et al., 1999; REN et al., 2002). Um estudo recente sugeriu que a ativação do PPARγ pode diminuir a progressão da aterosclerose e aumentar a sensibilidade à insulina e pode ser um alvo terapêutico potencial para o tratamento de várias doenças, incluindo diabetes mellitus tipo 2 e dislipidemia (TAVARES; HIRATA; HIRATA, 2007).

Na literatura tem-se, também, o exemplo clássico, das estatinas, que são fármacos que atuam reduzindo as dislipidemias e possuem uma cinética competitiva, competindo de forma reversível com 3-hidroxi-3-metil-glutaril-coenzima A (HMG-CoA) para o sítio ativo da enzima HMG-CoA redutase, inibindo a síntese do colesterol(FONSECA, 2005). Em face desse fato, já é de conhecimento, de acordo com Medeiros et al. (2018), que o ITTp é um inibidor do tipo

competitivo para tripsina. Assim, é possível ter sua atuação de forma semelhante às estatinas, atuando, não, apenas, sobre a expressão de genes envolvidos nessa reversão, mas também agir competindo de forma reversível ou irreversível com as enzimas lipogênicas. Isso pode ser de grande relevância para a indústria farmacêutica, já que inibidores com essa característica são, em sua maioria, não competitivos (LI et al., 2004).

Neste estudo, quando o TNF-α foi analisado como marcador de inflamação, ele foi reduzido a concentrações indetectáveis em todos os animais tratados com TTIp. Esse é um resultado interessante, uma vez que o TNF-α desempenha um papel central na inflamação crônica (OUCHI et al., 2011; KANNEGANTI; DIXIT, 2012; WEISBERG et al., 2013). Além disso, considerando que as concentrações de TNF-α são indetectáveis em humanos e animais saudáveis (PETROS; PETERS, 1996; DURUM; MUEGGE, 1996), pode-se afirmar que o ITTp teve um efeito significativo na redução da inflamação em animais com obesidade, reduzindo essa inflamação a concentrações iguais às de animais saudáveis, independentemente da perda de peso. Vale ressaltar que, neste estudo, animais eutróficos, também, apresentaram concentrações indetectáveis de TNF-α.

Corroborando o que foi mencionado anteriormente, em animais com obesidade, tratados com ITTp, foi observada uma diminuição significativa na expressão relativa do tecido de mRNA de TNF-α com imunocoloração negativa no adiposo visceral. Estudos mostram que o TNF-α é uma citocina que atua diretamente no adipócito, promovendo a indução de apoptose, inibição da lipogênese e inibição da expressão de LPL de GLUT-4 e acil-CoA sintetase, cumprindo, assim, um importante papel regulador na acumulação de gordura no tecido adiposo (ARNER, 1995; PETROS; PETERS, 1996; KANNEGANTI; DIXIT, 2012; WEISBERG et al., 2013). Assim, era esperado que todos os animais com obesidade mostrassem altas concentrações plasmática de TNF-α, expressão do gene TNF-α e imunocoloração positiva para TNF-α no tecido adiposo analisado.

Sua expressão aumentada parece estar relacionada à redução da expressão de substrato-1 do receptor de insulina (IRS-1), GLUT-4 e adiponectina no tecido adiposo e estimulação da produção de PCR e IL-6. Vale salientar que, na fase aguda da inflamação, o aumento na produção de TNF-α e interleucinas como a IL-6 e IL-1β é característico. O TNF-α, a IL-6 e a IL-1β são secretadas por macrófagos e apresentam efeitos sistêmicos e locais. O TNF é responsável pela ativação de células endoteliais, estimulando a exposição de integrinas e selectinas que participam no processo de rolamento leucocitário (CARTER, 2005; KANNEGANTI; DIXIT, 2012).

O TNF-α está no topo da cascata inflamatória e é responsável pela ativação dos linfócitos, estimulação da liberação de enzimas proteolíticas pelos macrófagos e produção de outras citocinas inflamatórias como a IL-13. Assim, as citocinas desempenham um papel fundamental na perpetuação da inflamação, por meio de feedbacks que controlam a atividade imunológica, presentes em algumas doenças, como na artrite reumatoide, espondilite anquilosante, obesidade, aterosclerose, doenças inflamatórias intestinais, síndrome metabólica e diabetes melitus tipo 2 (TAY; THOMPSON; BRINKWORTH, 2015; LOZANO et al., 2016; MELO; MAGINA, 2018; MITOMA et al., 2018).

Assim, para tratamento de algumas patologias, como a artrite reumatoide, é comum a utilização alguns tipos de drogas como as drogas modificadoras da doença (DMARDs) (SILVA et al., 2003; UEHBE; PIMENTA; GIORGI, 2006; MONTEIRO; ZANINI, 2008). Esse grupo de medicamentos apresenta uma série de drogas quimicamente não relacionadas entre si, podemos citar os antimaláricos, o metotrexato, a leflunomida, antagonistas dos receptores de IL-1, agentes citotóxicos, e agentes biológicos bloqueadores de TNF-α (CICONELLI, 2005; UEHBE; PIMENTA; GIORGI, 2006; BERTOLO, 2008).

Entre os agentes biológicos aprovados para o tratamento da artrite reumatóide estão aqueles que atuam como antagonistas do TNF-α, chamados anti-TNF-α (LIM et al., 2018; MELO; MAGINA, 2018). Atualmente, três agentes que bloqueiam a ação do TNF-α estão disponíveis no Brasil: etanercept, infliximabe e adalimumabe (CACCIAPAGLIA et al., 2011; MITOMA et al., 2018). No entanto, todos esses medicamentos têm como efeito adverso, aumento de triglicerídeos, bem como o aparecimento de diabetes melittus tipo 2, além do risco de aterosclerose (CACCIAPAGLIA et al., 2011).

Vale ressaltar que, neste estudo, o ITTp atuou de forma a reduzir o TNF-α plasmático a concentrações indetectáveis e a expressão relativa de seu gene com imunocoloração negativa no tecido adiposo visceral. Esses achados demonstram que ele pode atuar como um potente anti-TNF-α, bloqueando ou mesmo como antagonista do TNF-α. Além disso, o ITTp não apenas reduziu a inflamação, mas também reduziu as concentrações plasmáticas de VLDL-c e o TG. Assim, o ITTp apresenta-se como um importante candidato a ser utilizado para diminuir o risco cardiovascular, bem como o processo lipogênico da obesidade. Isso é de grande relevância para a indústria farmacêutica; uma vez que até o momento, não existem produtos farmacêuticos anti-TNF-α conhecidos que não alterem o perfil lipídico.

2.2.5. Conclusões

Os resultados permitem concluir que animais com obesidade e dislipidêmicos, quando tratados com ITTp, reduziram a ingestão de alimentos e a inflamação crônica, reduzindo as concentrações plasmáticas de TNF-α e a expressão relativa de seu gene no tecido adiposo visceral. Além disso, o ITTp também atuou, reduzindo a dislipidemia apresentada pelos animais com obesidade induzida por uma dieta de alto índice glicêmico e alta carga glicêmica,