PREDIÇÃO DE ATIVIDADE: PASS e SEA

Na fisiologia normal do organismo, a DA é sintetizada nos neurônios dopaminérgicos, e após realizar a sua função de neurotransmissor ocorre a degradação da mesma por um conjunto de enzimas localizado nos neurônios pré-sinápticos, pós-sinápticos e na fenda sináptica. Com isso, uma das formas de tratamento é a inibição dessas enzimas, especificamente a MAO-B e a COMT com o objetivo de obter por mais tempo a concentração de DA no seu local de ação (BRUNTON et al., 2012).

Com base na fisiopatologia da DP foram consideradas as atividades biológicas relacionadas com o tratamento: a inibição da enzima MAO-B; o substrato da enzima MAO-B, pois o produto natural que apresentar essa atividade poderá ser utilizado como base para o planejamento de um inibidor; inibidor e substrato da COMT; inibidor e substrato da enzima MAO-A que é uma das isoformas da monoamina oxidase, pois poderá ser utilizada a base estrutural para identificar as regiões específicas da MAO-A e MAO-B, e assim planejar um fármaco com maior seletividade para a MAO-B; e atividade antioxidante, tendo em vista que uma das hipóteses da DP é a ação de radicais livres no sistema nervoso central.

5.6.1 PASS

A predição de atividade realizada pelo webservidor PASS se baseia na fórmula estrutural da substância, com muita precisão para mais de 3500 efeitos farmacoterapêuticos. Se Pa > 0,7, a substância é muito provável que exibam a atividade na experiência, mas a possibilidade de a substância ser o análogo de um agente farmacêutico conhecido também é alta. Se 0,5 < Pa <0,7, a substância é susceptível de exibir a atividade na experiência, mas a probabilidade é menor, e é diferente da substância em que a ação farmacêutica é conhecida. Se Pa <0,5, é pouco provável que exibam a atividade no ensaio da substância. No entanto, se a presença desta atividade é confirmada no experimento a substância pode ser uma nova entidade química (FILIMONOV et al., 1999; FERREIRA et al., 2017).

Na Tabela 5, são mostrados os resultados de predição de atividade para o medicamento padrão Selegilina e para os quatro produtos naturais. Para a Selegilina, observaram-se seis atividades relacionadas com a DP, nas quais foram inibidor da MAO com valor de Pa 0,317 e Pi 0,008 e antiparkinsoniano com valor de Pa 0,320 e Pi 0,055 sendo consideradas médias atividades, enquanto que as atividades inibidor da MAO-A com valor de Pa 0,261 e Pi 0,004, substrato da MAO-B com valor de PA 0,147 e Pi 0,018, inibidor da MAO-B com valor de Pa 0,133 e Pi 0,013, e substrato da MAO com valor de Pa 0,131 e Pi 0,029, são consideradas baixas atividades.

Para a Amburosideo A que não apresentou atividade inibitória para MAO-B, porém apresentou atividade antioxidante com significativo valor de Pa 0,649 e Pi 0,004 considerado alta atividade. A Harman apresentou no total cinco atividades relacionadas à enzima MAO, sendo inibidor da MAO com valor de Pa 0,165 e Pi 0,031, antiparkinsoniana no tratamento para o alívio da rigidez com valor de Pa 0,207 e Pi 0,128, antiparkinsoniana com valor de Pa 0,216 e Pi 0,137, inibidor da MAO-A com valor de Pa 0,038 e Pi 0,045, substrato da MAO-A com valor de Pa 0,100e Pi 0,066, todas consideradas baixa atividade.

Para Harmalina, observaram-se seis atividades relacionadas com a enzima MAO, sendo inibidor da MAO com o valor de Pa 0,151 e Pi 0,037, substrato da MAO-A com valor de Pa 0,110 e Pi 0,052, substrato da MAO-B com valor de Pa 0,080 e Pi 0,060, inibidor da MAO-A com valor de Pa 0,071 e Pi 0,045, inibidor da MAO-B com valor de Pa 0,080 e Pi 0,060, inibidor da MAO de recaptação com valor de Pa 0,179 e Pi 0,177, todas as atividades consideradas baixas. Enquanto que a Harmalol não apresentou nenhuma atividade relacionada com a DP.

Tabela 5 - Predição de atividade biológica com o webservidor PASS para o medicamento

padrão Selegilina (1) e os produtos naturais Amburosideo A (2), Harman (3), Harmalina (4) e Harmalol (5). Moléculas Pa Pi Atividade Selegilina 0,317 0,008 Inibidor da MAO 0,320 0,055 Antiparkinsoniana 0,261 0,004 Inibidor da MAO-A 0,147 0,018 Substrato da MAO-B 0,133 0,013 Inibidor da MAO-B 0,131 0,029 Substrato da MAO Amburosideo A 0,649 0,004 Antioxidante Harman 0,165 0,031 Inibidor da MAO 0,207 0,128 Antiparkinsoniana 0,216 0,137 Antiparkinsoniana 0,038 0,045 Inibidor da MAO-A 0,100 0,066 Substrato da MAO-A Harmalina 0,151 0,037 Inibidor da MAO 0,110 0,052 Substrato da MAO-A 0,080 0,060 Substrato da MAO-B 0,179 0,177 Inibidor da MAO

Harmalol Não apresentou atividade relacionada com a Doença de Parkinson.

Fonte: Elaborada pela autora, 2017.

5.7.2 SEA

No webservidor SEA são utilizados dois valores estatísticos para predizer a atividade biológica de uma molécula. O E-value é o valor da expectativa de que a semelhança não seja aleatória entre os conjuntos, em que os valores mais próximos de zero ou menor que 1x10-10 consideram que a predição da atividade não é susceptível de estar ocorrendo por acaso. Enquanto que o Coeficiente Tanimoto (Tc) é a semelhança química esperada de valor 1 (KEISER et al., 2007).

Na Tabela 6, são mostrados os resultados da predição de atividade para o programa

a DP, sendo três com ação para MAO-B com os valores de E value 5,107e-15, 2,944e-11 e 3.483e-07, para os estudos realizados em enzimas de rato, boi, e humano respectivamente, e os valores E value 1,964e-13 e 4,161e-08 foram para MAO-A de rato e humana respectivamente, e todos os estudos apresentaram o valor de Tc 0,64, todos considerados alta atividade. Para a Amburosideo A com ação na enzima COMT suína com o valor de E-value 6,6e-08 e o valor de Tc 0,30 considerada baixa atividade. E a outra foi a Harman com ação na MAO-A tendo o valor de E-value 1.014e-09 _{e o valor de Tc 0,58 considerada média atividade.}

Tabela 6 - Predição de atividade biológica com o webservidor SEA para o medicamento

padrão Selegilina (1) e os produtos naturais Amburosideo A (2), Harman (3), Harmalina (4) e Harmalol (5).

Moléculas E value Coeficiente de

Tanimoto (Tc) Atividade

Selegilina

5,107e-15 _{0,64 MAO-B rato}

2,944e-11 0,64 MAO-B bovina

3,483e-07 0,64 MAO-B humana

1,964e-13 0,64 MAO-A rato

4,161e-08 0,64 MAO-A humana

Amburosideo A 6,6e-08 0,30 COMT suína

Harman 1,013e-09 _{0,58 MAO-A humana}

Harmalina Não apresentou atividade relacionada com a DP

Harmalol Não apresentou atividade relacionada com a DP

Fonte: Elaborada pela autora, 2017

Segundo Leal e colaboradores (2005), o produto natural Amburosideo A apresentou atividade antioxidante no estudo experimental em células expostas a uma neurotoxina presente na DP, e o resultado do programa PASS confirmou essa atividade. O estudo de revisão da planta Amburana cearensis realizado por Almeida e colaboradores (2010), também apresentou que o Amburosideo A possui atividade antioxidante. Enquanto que no programa SEA, o Amburosideo A apresentou afinidade pela enzima catecol-O-metiltransferase que está na via catalítica da DA, confirmando a atividade antioxidante pelo programa PASS.

E para os alcaloides indólicos Harman, Harmalina, Harmalol de Passiflora incarnata, segundo Campos e colaboradores (2011), são responsáveis pela a atividade biológica da planta. Enquanto que Ingale e colaboladores (2014), relata que somente os alcaloides Harman

e Harmalina apresentam atividade antiparkinsoniana, sendo confirmado no programa PASS, pois pelo programa o alcaloide Harmalol não apresentou nenhuma atividade relacionada com a DP. Porém, no programa SEA, tanto a Harmalina quanto Harmalol não obteve predição de afinidade com nenhum alvo estudado relacionado com a DP, isso significa que a Harmalina interfere de outra forma na fisiopatologia da DP, ou o webservidor não calculou de forma correta a similaridade química do produto natural com o banco de dados que é utilizado para realizar a predição de afinidade por um alvo específico.