XXVI Congresso de Iniciação Científica
Pintura cromossômica e análise de DNAsn U2 no gafanhoto Abracris flavolineata
Nahanna Zimmermann Menezes de Carvalho, Diogo Cavalcanti Cabral de Mello, Octavio Manuel Palacios-Gimenez, Diogo Milani, UNESP - Univ Estadual Paulista, Campus de Rio Claro/SP, Instituto de Biociências/IB, Departamento de Biologia, curso de Ciências Biológicas (noturno),
nahanna@hotmail.com, bolsista do programa PROPE-UNESP Palavras Chave: cromossomos B, microdissecção, DNAs repetitivos
Introdução
Cromossomos B são definidos como elementos dispensáveis e não homólogos ao complemento normal (complemento A), uma vez que são incapazes de se recombinar com eles. Em relação à composição, a maioria dos cromossomos B são heterocromáticos ou compostos principalmente por elementos repetitivos, como famílias multigênicas, DNAs satélites e elementos transponíves, apesar de genes que codificam proteínas terem sido reportados recentemente. Um cromossomo B submetacêntrico eucromático foi relatado no gafanhoto Abracris flavolineata. Entre os DNAs repetitivos mapeados nos cromossomos dessa espécie, o DNAsn U2, microsatélites e elementos transponíveis foram localizados em ambos braços cromossômicos do cromossomo B.
Objetivos
Compreender os padrões de evolução e elucidar o conteúdo específico do cromossomo B de A.
flavolineata.
Material e Métodos
Realizamos a microdissecção e usamos o produto amplificado em (i) experimentos com pintura cromossômica (ii) como modelo para amplificação de cinco famílias multigênicas (DNAr 18S e 5S, DNAsn U1 e U2 e histona H3). Além disso, amplificamos também as mesmas famílias multigênicas do genoma 0B, para análise comparativa para inferir a evolução da sequência nucleotídica específica no complemento A e cromossomos B.
Resultados e Discussão
Entre as famílias multigênicas somente o U2 snDNA foi detectado no cromossomo B através da PCR. O produto foi clonado e 29 clones foram sequenciados e comparados com sequências obtidas de 38 clones do genoma 0B. A análise das sequências revelou 24 haplótipos para cada amostra, ou seja, sendo oito delas compartilhadas entre o genoma de B e 0B. O número de sítios variáveis e mutações foi maior
para o cromossomo B, embora a diversidade nucleotídica e de haplótipo tenha sido similar entre as amostras. A análise filogenética recuperou uma árvore com um clado agrupando todas as sequências DNAsn U2.
Figura 1. Rede de haplótipos representando a relação entre os sete haplótipos com base nas sequências de DNA para U2 snDNA no genoma de A. Flavolineata, 0B-gDNA (verde) e o μB-DNA (vermelho).
Conclusões
Nossos resultados indicam uma similaridade entre o cromossomo B e o complemento A, além de homogenizaçao intracromossomica pro cromossomo B. A homogeneidade das sequências de U2 snDNA entre o DNA de 0B e do cromossomo B levam à possível conclusão de que essas sequências têm sido conservadas devido à possível funcionalidade no genoma de A. Flavolineata, além do processo de homogeneização por evolução em concerto.
O Hap 1 poderia representar a sequência com elevado potencial de atividade.
Agradecimentos
Ao apoio financeiro provido pela Fapesp, CNPq, PROPE-UNESP
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Camacho, J. P. M. In: Gregory TR, 2005, ed.: 223–286.
Bueno, D.; Palacios-Gimenez, O. M.; Cabral-de-Mello, D. C. PLoS ONE. 2013, 8: e66532
Teruel, M.; Cabrero, J.; Montiel, E. E.; Acosta, M. J.; Sánchez, A.;
Camacho, J. P. M.; Microdissection and chromosome painting of X and B chromosomes in Locusta migratoria 2008
