1 2 8
Revista da Sociedade Br asileir a de Medicina Tr opical 3 7 ( 2 ) :1 2 8 -1 3 0 , mar-abr, 2 0 0 4
Estudo comparativo entre o xenodiagnóstico artificial realizado
imediatamente e quatro horas após a coleta de sangue
Comparative study between artificial xenodiagnosis performed immediately
and four hours after venous punch
Cleudson Castr o1, Mar tinho Candido A. Santos2 e Celeste Aida Silveir a1
RESUMO
Fo i re a liza do xe n o dia gn ó stic o a rtific ia l, im e dia ta m e n te e q u a tro ho ra s a pó s a c o le ta do sa n gu e , e m 63 pa c i e n te s, se n do 29 ( 4 6 %) d o se x o m a sc u li n o e 3 4 ( 5 4 %) d o se x o f e m i n i n o . A i d a d e m í n i m a f o i 1 8 a n o s e a m á x i m a 6 8 , se n d o a i d a d e m é d i a 3 9 a n o s. On ze ( 1 7 ,5 %) p a c i e n te s a p re se n ta ra m re su lta d o s p o si ti vo s, se n d o 8 ( 1 2 ,7 %) n o e x a m e i m e d i a to e 7 ( 1 1 ,1 %) n o e xa m e 4 ho ra s a pó s. Os o i to pa c i e n te s do e xa m e i m e di a to a pre se n ta ra m 17 po o ls po si ti vo s e o s se te do xe n o di a gn ó sti c o de q u a tro ho ra s m o stra ra m 11 po o ls po sitivo s ( p = 0,34) . Qu a tro pa c ie n te s fo ra m po sitivo s e xc lu siva m e n te n o xe n o dia gn ó stic o i m e di a to , trê s so m e n te n o e xa m e de 4 ho ra s e q u a tro po si ti vo s e m a m b o s. Os da do s a u to ri za m re a li za r o xe n o di a gn ó sti c o , a té q u a tro h o ra s a p ó s a e x tra ç ã o d o sa n gu e , se m p re ju í zo n o re su lta d o d o e x a m e .
Palavr as-chave s: Xe n o di a gn ó sti c o a rti f i c i a l. Xe n o di a gn ó sti c o . Di a gn ó sti c o pa ra si to ló gi c o . Do e n ç a de Cha ga s.
ABSTRACT
Arti f i c i a l xe n o di a gn o si s wa s pe rf o rm e d i m m e di a te ly a f te r b lo o d ve n o u s pu n c h a n d the n f o u r ho u rs la te r o n 63 pa ti e n ts; 29 ( 46%) we re m a le a n d 34 ( 54%) fe m a le , m e a n a ge 39 ye a rs ( ra n ge 18 to 68 ye a rs) . Ele ve n ( 17.5%) pa tie n ts pre se n te d po sitive e x a m s, o f wh i c h e i gh t ( 1 2 .7 %) we re f ro m i m m e d i a te x e n o d i a gn o si s a n d 7 ( 1 1 .1 %) x e n o d i a gn o si s f o u rs h o u rs a f te r. Ei gh t p a ti e n ts sh o we d 1 7 p o si ti ve p o o ls f ro m i m m e d i a te x e n o d i a gn o si s a n d 7 p a ti e n ts wi th x e n o d i a gn o si s f o u r h o u rs la te r sh o we d 1 1 p o si ti ve p o o ls ( p = 0 .3 4 ) . Fo u r p a ti e n ts we re p o si ti ve o n ly o n i m m e d i a te x e n o d i a gn o si s, th re e o n ly o n xe n o di a gn o si s 4 ho u rs a f te r a n d f o u r we re po si ti ve i n b o th. The da ta de m o n stra te tha t xe n o di a gn o si s c a n b e pe rf o rm e d u p to f o u r h o u rs a f te r b lo o d c o lle c ti o n wi th o u t i m p a i ri n g th e te st re su lts.
Ke y-wor ds: Arti f i c i a l xe n o di a gn o si s. Xe n o di a gn o si s. Pa ra si to lo gi c a l di a gn o si s. Cha ga s’di se a se .
1 . Núc leo de Medic ina Tr o pic al e Nutr iç ão da Univer sidade de B r asília, B r asília, DF. 2 . Ho spital Univer sitár io de B r asília da Univer sidade de B r asília, B r asília, DF.
En de r e ço par a cor r e spon dê n ci a:Pr o f. Cle udso n Castr o . Núc le o de Me dic ina Tr o pic al/UnB , Caixa Po stal 0 4 - 6 7 1 , 7 0 9 1 9 - 9 7 0 B r asília DF, B r asil. Fax: 5 5 6 1 2 7 3 -2 8 1 1
e -mail: c le udso nc astr o @ ho tmail. c o m Re c e b ido par a pub lic aç ão e m 2 5 /2 /2 0 0 3 Ac e ito e m 1 2 /2 /2 0 0 4
O xe no diagnó stic o2 ( xe no ) no s último s ano s passo u po r
algumas mo dific aç õ e s e m ge r al favo r áve is ao b e m e star do
pac ie nte o que se m dúvida te m diminuído a r e sistê nc ia par a
esse exame, fazendo c o m que o pac iente ac eite repeti-lo c erto
de q ue n ã o lh e c a us a r á pr o b le m a s . Es s a s m o dific a ç õ e s
mater ializadas no xeno ar tific ial tem sido aplic adas no exame fe ito no lab o r ató r io mas po uc o e mpr e gado no tr ab alho de
c ampo . Alguns gr upo s de inve stigaç ão sub stituír am o xe no
natural4 quando os barbeiros sugam o pac iente através da pele,
pelo xeno ar tific ial3 5 9 1 0 1 2 que c o nsiste na extraç ão do sangue,
o fe r tando -o ao s tr iato míne o s. Outr o r a a po pulaç ão da zo na
r ur al te mia c o lhe r sangue po r c ausa do tr auma das agulhas
metálic as r o mb udas, atualmente quando o s ser viç o s de saúde tem-se feito presentes no interior do país o receio de colher sangue praticamente desapareceu e o aperfeiçoamento de agulhas e seringas facilitou esse procedimento.
De sde 1 9 9 5 , te mo s fe ito o xe no diagnó stic o ar tific ial no lab o r ató r io e quer emo s aplic á-lo tamb ém na zo na r ur al o nde nem sempre há energia elétric a disponível para fazer func ionar o apar elho de xeno ar tific ial que usamo s. Imaginamo s que na zo na r ur al, e m vár ias c ir c unstânc ias, te r e mo s que c o lhe r o sangue , par a r e alizar o xe no algum te mpo de po is. Po r isso nosso objetivo nesse trabalho foi c omparar o xenodiagnóstic o ar tific ial fe ito ime diatame nte à c o le ta do sangue c o m aque le feito quatr o ho r as apó s.
1 2 9
Ca str o C e t al
MATERIAL E MÉTODOS
Os participantes do estudo foram atendidos no ambulatório e nas
diversas clínicas do Hospital Universitário de Brasília, tinham duas reações sorológicas positivas para infecção chagásica, eram de ambos
os sexos e podiam estar em qualquer forma clínica da doença. Os
dados clínicos foram registrados em ficha que continha o nome,
registro, idade, sexo, profissão, naturalidade, proc edênc ia e manifestações da doença. Em princípio os pacientes não deviam ter
sido tratados especificamente. O sangue de cada paciente foi colhido
em dois tubos vacutainer heparinizados, em cada tubo foi colhido sete
mililitros, suficientes para realizar os exames. Do sangue de um dos tubos foi realizado o xenodiagnóstico artificial imediatamente à coleta.
O outro tubo permaneceu à temperatura ambiente por quatro horas,
quando então foi realizado o xenodiagnóstico, após aquecimento do
sangue em banho-maria a 370C.
Para realizaç ão de c ada xeno diagnó stic o , fo ram utilizadas
4 0 ninfas de pr im e ir o e stágio da e spé c ie Di p e ta lo ga ste r
m a xim u s ec lo didas há pelo meno s sete dias. Os inseto s fo ram c oloc ados em rec ipiente plástic o c ilíndric o de aproximadamente
se te c e ntíme tr o s de altur a po r no ve c e ntíme tr o s de diâme tr o , c o b e r to po r uma te la de filó pr e sa à ab e r tur a supe r io r do
fr asc o po r fita e lástic a. No inte r io r de ste r e c ipie nte , fo r am
c o lo c ado s pedaç o s de papelão que serviam de supo rte para o s
tr iato míne o s alc anc ar e m o ar te fato de vidr o que c o ntinha o sangue a se r sugado . O dispo sitivo par a o xe no diagnó stic o
artific ial foi similar ao usado por Silva1 4 e c onsiste em aparelho
de banho-maria adaptado para essa finalidade. Os triatomíneos
permanec eram uma ho ra em c o ntato c o m o sangue através do e quipame nto , se ndo de po is r e tir ado s e c o lo c ado s e m e stufa
r e gulada a 2 80C. Apó s se r e m r e alizado s, o s xe no diagnó stic o s
foram identific ados c om o nome do pac iente, registro, data do
exame e um número aleatório, c ódigo que indic ava se o exame fo i r ealizado imediatamente o u quatr o ho r as apó s a c o leta do
sangue . Os e xaminado r e s do xe no diagnó stic o não tive r am
a c e s s o a o s ignific a do do c ó digo . Os tr ia to m íne o s fo r a m
mantido s na e stufa po r 4 5 dias. Apó s e sse pe r ío do , fo r am e x a m in a do s e m p o o l de c in c o in s e to s p o de n do o últim o
po o l c o nte r me no s de 5 tr iato míne o s, de mo do que c ada
xenodiagnósitc o teve no máximo oito pools. A téc nic a do exame
c o n s i s ti u n a r e ti r a da do c o n te ú do i n te s ti n a l de c i n c o
tr iato míne o s que fo i de po sitado e m lâmina e he mo ge ne izado
c om uma gota de salina. O material foi c oberto c om lamínula de
3 2 por 2 4 milímetros e examinado ao mic rosc ópio c om aumento de 1 0 0 x o u e m c aso de dúvida c o m aume nto de 4 0 0 x, até a
de te c ç ão do par asito . O e xame fo i c o nside r ado ne gativo se
apó s 1 0 a 1 5 minuto s, te mpo sufic ie nte par a o b se r var to da a
lâmina, não se enc o ntr o u o Trypa n o so m a c ru zi.
Após o estudo, os dados foram coletados tabulados e analisados
através do programa Epi-info versão 6 .0 2 , 1 9 9 4 . Os resultados
dos xenodiagnósitcos de cada paciente foram comparados conforme
os objetivos propostos, sendo aplic ados os testes apropriados.
A investigaç ão limitou-se à c oleta de 1 4 ml de sangue por punç ão venosa c om material desc artável. A c ada partic ipante foi
explic ado o motivo da c oleta de sangue e seu propósito. Todos
assinaram um termo de c onsentimento. Os resultados dos exames
foram colocados nos prontuários correspondentes. Foi proposta aos pacientes com parasitemia, que estavam na forma indeterminada,
a realização de tratamento específico como sugerido pelo Ministério
da Saúde8.
RESULTADOS
Foram examinados 6 3 pacientes, sendo 2 9 ( 4 6 %) masculinos e
34 ( 54%) femininos. Quanto à idade, a mínima foi 18 anos, a máxima 6 8 e a média 3 9 anos. Os pacientes eram naturais de cinco estados
brasileiros sendo 1 9 ( 3 0 ,2 %) da Bahia, 1 6 ( 2 5 ,4 %) de Goiás, 2 5
( 3 9 ,7 %) de Minas Gerais e um ( 1 ,6 %) de cada um dos estados de
Pernambuco, Piauí, e Tocantins. No período do exame exerciam diversas profissões, sendo as mais freqüentes, do lar ( 12) , domésticos
( 8 ) , lavradores ( 6 ) e pedreiros ( 5 ) . No xeno imediato, foram
examinados 2 1 0 6 triatomíneos, uma média de 3 3 ,4 por paciente o
que resultou no exame de 4 4 7 pools. No xeno de 4 horas, foram examinados 2141 triatomíneos com uma média de 33,9 por paciente
o que resultou no exame de 4 4 9 pools. Onze ( 1 7 ,5 ) pacientes
apresentaram exames positivos, sendo 8 ( 1 2 ,7 %) no xeno imediato
e 7 ( 11,1%) no xeno quatro horas após, ( Tabela 1) . Os oito pacientes do xenodiagnóstico imediato apresentaram 1 7 pools positivos e os
7 pacientes do xeno de quatro horas mostraram 1 1 pools positivos
( p = 0,34; Tabela 2) . Quatro pacientes foram positivos exclusivamente
Ta b e la 1 - Id e n ti f i c a ç ã o e c a ra c te rí sti c a s d e 1 1 p a c i e n te s q u e a p re se n ta ra m x e n o d i a gn ó sti c o s p o si ti vo s.
Re gistr o N0 de Idade Se xo Pr o c e dê nc ia Xe no diagnó stic o
o r de m ( ano s) ( e stado ) imediato 4 ho r as
1 8 3 7 4 4 1 2 4 F GO +
-1 2 5 6 -1 8 3 6 2 M B A - + 1 6 4 0 5 1 5 3 7 F B A - + 1 6 0 0 3 3 1 0 5 4 F TO + + 1 7 1 0 3 7 1 9 3 8 M MG + -3 9 6 9 9 6 2 5 4 3 M GO + -2 6 8 -2 8 7 2 8 4 2 F B A + -1 8 6 0 4 4 3 8 2 7 M MG + + 1 8 2 9 7 6 4 3 2 0 F MG - + 2 9 3 4 6 6 4 4 2 1 M B A + + 3 3 8 2 1 7 6 1 4 2 F GO + +
Ta b e la 2 - Núm e ro de po o ls po sitivo s no xe no dia gnó stico im e dia to e de 4 ho ra s.
Núme r o de po o ls po sitivo s N0
de o r de m xe no ime diato xe no de 4 h
1 1 0
3 0 1
5 0 1
1 0 1 1
1 9 1 0
2 5 3 0
2 8 2 0
3 8 7 5
4 3 0 1
4 4 1 1
6 1 1 1
Total 1 7 * 1 1 *
1 3 0
Re vista da So cie da de Br a sile ir a de Me dicina Tr o pica l 3 7 : 1 2 8 -1 3 0 , ma r- a br, 2 0 0 4
no xeno imediato, três somente no xeno de quatro horas e quatro
foram positivos em ambos.
DISCUSSÃO
Os trabalhos de investigação envolvendo o xeno artificial estão em expansão. Inic ialmente, c omparou-se o xeno artific ial c om o
natur al, sendo mo str ada sua equivalênc ia5 1 0 1 3; em sequênc ia,
e stão sur gindo tr ab alho s c o m o xe no ar tific ial c o mpar ando
me to do lo gias dife r e nte s1 7 e assim, paulatiname nte , o xe no
ar tific ial vai substituindo o natur al.
Em 1 9 9 7 , em trabalho no interior do Munic ípio de Mambaí
realizamos em um indivíduo xenodiagnóstic o natural, ao mesmo
te m po q ue c o lhe m o s sangue e 4 ho r as apó s r e alizam o s
xenodiagnóstic o artific ial ao c hegar à sede do munic ípio. Ambos o s e xame s fo r am po sitivo s e c o m núme r o de po o ls mais o u
me no s se me lhante s. Daí sur giu a idé ia de c o mpar ar o xe no
ar tific ial, r e alizado ime diato à c o le ta do sangue , c o m aque le
r ealizado quatr o ho r as apó s.
O ideal seria que o xenodiagnóstic o artific ial, à semelhanç a
do que oc orre c om a hemoc ultura6, fosse realizado logo após a
c oleta do sangue, o que nem sempre é possível por diversos
motivos inerentes ao trabalho na zona rural. Os resultados obtidos
neste trabalho mostram que o perc entual de positividade foi
idêntic o em ambos os exames, não havendo diferenç a estatístic a na positividade nem no número de pools entre o xeno imediato e
o feito quatro horas após a c oleta do sangue. O número de pools
positivos foi um pouc o maior no xeno imediato, em relaç ão ao de quatro horas, mas sem signific ado estatístic o. Em nosso c aso
particular do trabalho em Mambaí, quatro horas é tempo suficiente
para c olher o sangue dos pac ientes no interior do munic ípio e
voltar à sede para realizar o exame. Esse tempo pode ser maior ou menor em c ada situaç ão partic ular c onforme as distânc ias e
dific uldades de c ada região. O tempo máximo após a c oleta de
sangue, que um xenodiagnóstico artificial pode fornecer resultado
positivo, é tema a ser pesquisado. Os dados obtidos neste trabalho
autorizam realizar o xeno, pelo menos, quatro horas após a extraç ão do sangue, sem prejuízo no resultado do exame, o que
em muitas c irc unstânc ias pode fac ilitar o trabalho de c ampo na
zo na r ur al.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
1 . Almeida TTC. Estudo c o mpar ativo de duas meto do lo gias de xeno diagnó stic o ar tific ial aplic adas simultane ame nte e m pac ie nte s c hagásic o s c r ô nic o s, r e side nte s na c idade de São Paulo , B r asil. Te se de me str ado , Unive r sidade de São Paulo , São Paulo , SP, 2 0 0 0 .
2 . B r um pt E. O xe n o dia gn o s tic o . Aplic a ç ã o a o dia gn o s tic o de a lgum a s infe c ç õ e s par asitár ias e e m par tic ular á Tr ypano so mo se de Chagas. Annae s Paulistas de Me dic ina e Cir ur gia 3 : 9 7 - 1 0 2 , 1 9 1 4 .
3 . Ce dillo s RA, To r e alb a JW, To nn RJ, Mo sc a W, Or te go n AE. Xe no diagno stic o a r tific ia l e n la e nfe r m e da d de Cha ga s. B o le tin de la Ofic ina Sa nitá r ia Paname r ic ana 9 3 : 2 4 0 -2 4 9 , 1 9 8 2 .
4 . Dias E. Té c nic a do xe no diagnó stic o na mo lé stia de Chagas. Me mó r ias do Instituto Oswaldo Cr uz 3 5 : 3 3 5 - 3 4 5 , 1 9 4 0 .
5 . Fr e itas J LP, Nusse nzwe ig V, Amato Ne to V, So ntag R. Estudo c o mpar ativo e ntr e o xe no diagno stic o pr atic ado ï n vi vo e i n vi tro e m fo r mas c r o nic as da mo le stia de Chagas. O Ho spital 4 7 : 1 8 1 - 1 8 7 , 1 9 5 5 .
6 . Luz ZMP, Co utinho MG, Canç ado J R, Kr e te lli AU. He mo c ultur a: té c nic a se nsíve l na de te c ç ão do Tryp a n o so m a c ru zi e m pac ie nte s c hagásic o s na fase c r ô nic a da do e nç a de Chagas. Re vista da So c ie dade B r asile ir a de Me dic ina Tr o pic al 2 7 : 1 4 3 - 1 4 8 , 1 9 9 4 .
7 . Martins LPA, Castanho REP, Rosa JA, Tokumo MO, Godoy CAP, Rosa RM. Estudo c omparativo entre duas téc nic as de xenodiagnóstic o artific ial aplic adas em pac ientes c hagásic os c rônic os. Revista de Patologia Tropic al 3 0 :6 1 -6 8 , 2 0 0 1 . 8 . Ministé r io da Saúde . Tr atame nto e tio ló gic o da do e nç a de Chagas. 2a
e diç ão p. 3 2 , B r asília, 1 9 9 7 .
9 . Nus s e n zwe ig V, So n ta g R . Xe n o dia gn ó s tic o a r tific ia l. No vo pr o c e s s o . Primeiro s resultado s po sitivo s. Revista Paulista de Medic ina 4 0 :6 9 -7 1 ,1 9 5 2 . 1 0 . Pineda JP, Luquetti A, Castro C. Comparaç ão entre o xenodiagnóstic o c lássic o e ar tific ial na fase fase c r ô nic a da do e nç a de Chagas. Re vista da So c ie dade B r asile ir a de Me dic ina Tr o pic al 3 1 : 4 7 3 - 4 8 0 , 1 9 9 8 .
1 1 . Ro maña C. Enfe r me dad de Chagas. Lo pe z Lib r e r o s Edito r e s, B ue no s Air e s, p. 8 8 , 1 9 6 3 .
1 2 . Ro maña C, Gil J. Xeno diagno stic o ar tific ial. Anales del Instituto de Medic ina Re gio nal ( Tuc uman) 2 : 5 7 - 6 0 , 1 9 4 7 .
1 3 . Santo s AH, Silva IG, Rassi A. Estudo c o mpar ativo e ntr e o xe no diagnó stic o natural e o artific ial, em c hagásic os c rônic os. Revista da Soc iedade B rasileira de Me dic ina Tr o pic al 2 8 : 3 6 7 - 3 7 3 , 1 9 9 5 .
