Invest igação sorológica em cães de área
endêmica de leishmaniose t egument ar,
no Est ado do Paraná, Sul do Brasil
1Se ro lo g ic surve y o f d o g s in an e nd e mic are a o f
te g ume ntary le ishmaniasis in Paraná State ,
so uthe rn Brazil
11 Pesqu isa fin an ciad a p ela Fu n d a çã o N a cion a l d e Sa ú d e e Secret a ria d e Est a d o d a Sa ú d e d o Pa ra n á . 2 Dep artam en to d e An álises Clín ica s, Un iv ersid a d e Est a d u a l d e M a rin gá . Av. Colom b o 5790, M a rin gá , PR 87020- 900, Bra sil. 3 15aRegion a l d e Sa ú d e d e M a rin gá ,
Ru a Dem ét rio Rib eiro 50, M a rin gá , PR
87020- 900, Bra sil.
Th a ís Gom es V. Silv eira 2
U eslei Teod oro 2
M a ria Va ld rin ez C. Lon a rd on i 2
M a x Jea n Orn ela s d e Toled o 2
Den n is Arm a n d o Bert olin i 2
Sa n d ra M a ra A. A. Arra es 2
Dirceu Ved ov ello Filh o 3
Resumo A crescen t e n ot ificação d e leish m an iose t egu m en t ar n o Est ad o d o Pa ran á requ er a bu s-ca d e ex p lis-ca ções p a ra o escla recim en t o d a ep id em iologia d est a d oen ça e d os m eios p a ra o seu con t role. Rea liz ou - se u m in q u érit o sorológico p a ra in v est iga r leish m a n iose t egu m en t a r em cã es d e sei s p ro p ri ed a d es a grí co la s d a Co m p a n h i a M elh o ra m en t o s N o rt e d o Pa ra n á , si t u a d a s n o s m u n icíp ios d e Ju ssa ra e Terra Boa , n o N oroest e d o Est a d o d o Pa ra n á . Fora m in v est iga d os 132 cã es, d os q u a is 24 (18,2%) a p resen t a ra m t ít u los sign ifica t iv os d e a n t icorp os a t ra v és d a t écn ica d e Im u n oflu orescên cia In d iret a (IFI). De seis cã es a p resen t a n d o lesões fora m feit a s lâ m in a s d e esfrega ço p or a p osiçã o, a s q u a is fora m n ega t iv a s p a ra Leish m a n ia sp . à m icroscop ia d iret a .
Palavras-chave Leish m a n iose; Leish m a n ia sp .; Leish m a n iose Ca n in a ; Ep id em iologia ; Z oon ose
Abst ract In crea sed rep ort in g of m u cocu t a n eou s leish m a n ia sis in t h e St a t e of Pa ra n á p oin t s t o t h e n eed for in form a t ion on b ot h t h is d isea se’s ep id em iology a n d p ert in en t con t rol m ea su res. A serologica l su rv ey w a s t h u s p erform ed , w it h in d irect im m u n oflu orescen ce (IIF) for ca n in e leish -m a n ia sis in fa r-m op era t ion s b elon gin g t o t h e Co-m p a n h ia M elh ora -m en t os N ort e d o Pa ra n á , in Ju ssa ra a n d Terra Bo a co u n t i es, i n n o rt h w est ern Pa ra n á . IIF w a s p erf o rm ed o n 132 d o gs, o f w h ich 24 (18.2%) h ad sign ifican t t it ers (≥40). Im p rin t s of six d ogs w it h lesion s w ere m ad e an d all w ere n ega t iv e for Leish m a n ia sp .
Int rodução
A leish m an iose tegu m en tar (LT) é u m a d oen ça en d êm ica n o Brasil (Cou tin h o et al., 1981; Gu i-m arães et al., 1983; Grii-m ald i et al., 1989), coi-m n ú m ero crescen te d e casos n otificad os (Vieira et al., 1990; FNS, 1993), em áreas q u e sofreram gran d es alterações an tróp icas (Dias et al., 1977; Barreto et al., 1984; Barros et al., 1985). No No-roeste d o Estad o d o Paran á a d oen ça tem p erfil en d êm ico (Verzign assi et al., 1988; Teod oro et al., 1991; Silveira et al., 1992, 1994), m as n os ú ltim os três an os a n otificação d e casos au m en -to u sign ifica tiva m en te (co m u n ica çã o p esso a l d e E. A. Fu ku i, Diretora d a 15a Region al d e Saú -d e e J. F. Kon olsaisen , Cen tro -d e Ep i-d em iologia, Secretaria d e Estad o d a Saú d e d o Paran á).
A p a rticip a çã o d e a n im a is d o m éstico s n o ciclo ep id em iológico d a LT n as Am éricas é co-n h ecid a d esd e o ico-n ício d este sécu lo (Fa lq u eto et al., 1986). No Brasil a p resen ça d e cães in fec-ta d o s p o r Leish m a n iasp. tem sid o freq ü en te
em áreas en d êm icas (Dias et al., 1977; Falqu eto et a l., 1986; Ma rzo ch i et a l., 1988; Sessa et a l., 1994). Na regiã o No ro este d o Esta d o d o Pa ra -n á, tam b ém foi co-n statad a a p rese-n ça d e cães in fectad os (Lon ard on i et al., 1993).
Na s á rea s en d êm ica s o n d e a LT o co rre em crian ças e ad u ltos d e am b os os sexos, com fre-q ü ên cia os cães estão in fectad os p or Leish m a -n ia sp. (Co u tin h o et a l., 1985; Fa lq u eto et a l., 1986) e os fleb otom ín eos são m u ito freqü en tes n o p erid om icílio (Teod oro et al., 1993).
Com o ob jetivo d e con h ecer a ep id em iologia d a LT n o Esta d o d o Pa ra n á , rea lizou se in q u érito sorológico em cã es d e seis p rop ried a -d es a gríco la s -d a Co m p a n h ia Melh o ra m en to s No rte d o Pa ra n á n o s m u n icíp io s d e Ju ssa ra e Terra Boa, n oroeste d o Estad o d o Paran á.
M at erial e M ét odos
População canina
Fo ra m in vestiga d o s 132 cã es em seis p ro p ried a ried es a gríco la s ried a Co m p a n h ia Melh o ra m en -tos Norte d o Pa ra n á , n os a n os d e 1992 e 1993. Na Fa zen d a Pa lm ita l fora m estu d a d os 32 cã es e 42 n a Fa zen d a Mu ru rê, a m b a s situ a d a s n o Mu n icíp io d e Terra Boa. No m u n icíp io d e Ju s-sa ra fo ra m in vestiga d o s 12 cã es n a Cerâ m ica An d irá , 20 n a Fa zen d a Ju ssa ra , 23 n a Fa zen d a La go a e três n a s Destila ria s Melh o ra m en to s. Estes an im ais foram exam in ad os, p rocu ran d o-se ve rifica r a e xist ê n cia d e le sõ e s, e sp e cia l-m en te n as p artes exp ostas d o corp o col-m o ore-lh as, cau d a, focin h o e escroto. As in form ações
so b re o s cã e s co n st a m d e fich a s co m n o m e, ra ça e id a d e d o cã o, n om e e en d ereço d o p ro-p rietário.
Soros
De ca d a u m d o s cã es, o b teve-se a m o stra d e san gu e ven oso. O soro san gu ín eo foi sep arad o, aliqu otad o e arm azen ad o a –18º C até o u so.
Reação de imunofluorescência indiret a para leishmaniose (IFI)
O an tígen o foi p rep arado com Leish m an ia ( Via-n Via-n ia ) b ra z ilieVia-n sis co n fo rm e Silveira et a l. (1990). A rea çã o d e IFI p a ra leish m a n io se fo i realizada con form e Gu im arães et al. (1974). In i-cia lm en te rea lizo u -se u m a rea çã o q u a lita tiva com os soros d ilu íd os a 1/ 20 em solu ção salin a ta m p o n a d a co m fo sfa to (SST ). Os so ro s q u e ap resen taram -se p ositivos n esta reação foram en tão d ilu íd os a p artir d e 1/ 20 em SST, em ra-zão 2, p ara a d eterm in ação d e seu títu lo. Utili-zo u -se co n ju ga d o a n ti-im u n o glo b u lin a G d e cão – isotiocian ato d e flu oresceín a (Sigm a) p a-d ro n iza a-d o co n fo rm e Ca m a rgo (1973). Títu lo s igu a is o u su p erio res a 40 fo ra m co n sid era d o s sign ificativos (Marzoch i et al., 1988).
Reação de Imunofluorescência Indiret a para doença de Chagas
Utilizo u -se a n tígen o d e Tryp a n osom a cru z i
(Biolab) e con ju gado an ti-im u n oglobu lin a G de cã oisotiocia n a to d e flu oresceín a (Sigm a ) p a -d ron iza-d o con form e Cam argo (1973). A reação foi realizad a con form e Cam argo (1966), sen d o os soros d ilu íd os a p artir d e 1/ 20 em SST.
Pesquisa de Leishmania sp.
Do s cã es q u e a p resen ta va m lesã o cu tâ n ea n o m om en to d a in vestigação, foi ob tid o m aterial através d e b ióp sia d a b ord a d a lesão. Este m a-teria l fo i u tiliza d o p a ra p esq u isa d e Leish m a -n iasp. a tra vés d e esfrega ço p o r a p o siçã o em
lâ m in a s, a s q u a is fora m fixa d a s em m eta n ol e co ra d a s p elo m éto d o d e Giem sa . Este m esm o m aterial, con servad o em solu ção salin a fisioló-gica con ten d o 1.000 UI d e p en icilin a e 1 m g d e estrep tom icin a p or m l, foi tritu rad o e in ocu la-d o n as p atas p osteriores la-d e h am sters.
Análise est at íst ica
Result ados
A Tab ela 1 m ostra a d istrib u ição d os cães com títu los d e an ticorp os sign ificativos n a IFI p ara LT e d os cães com lesão, n as localid ad es estu -d a -d a s. Do s 132 cã es exa m in a -d o s, 24 (18,2%) a p resen ta ra m títu lo s d e a n tico rp o s a n ti-Leis
-h m a n ia igu a is o u su p er io res a 40 a tra vés d a
técn ica d e IFI. Fo ra m o b ser va d a s lesõ es em q u atro (16,7%) d os cães com IFI p ositiva e em d o is (1,9%) d o s cã es co m IFI n ega tiva . Estes seis cães com lesões foram su b m etid os à b ióp -sia e to d o s fo ra m n ega tivo s p a raLeish m a n ia
sp. a o exa m e m icro scó p ico d ireto e o s h a m s-ters in ocu lad os com os m ateriais d as b ióp sias n ã o d esen vo lvera m LT. O p ercen tu a l d e cã es, n a Fazen d a Ju ssara, com títu los d e an ticorp os sign ifica tivos n a IFI p a ra leish m a n iose foi su -p erio r a o en co n tra d o n a Fa zen d a Mu ru rê (-p < 0,01) m a s n ã o fo i esta tistica m en te d iferen te d os p ercen tu ais en con trad os n as ou tras locali-d alocali-d es (p >0,05).
Na Ta b ela 2 sã o en con tra d os os resu lta d os d as reações d e IFI p ara LT e Doen ça d e Ch agas d os cães q u e ap resen taram títu los d e an ticor-p os 40 n a IFI ticor-p ara LT. Pod e-se ob servar qu e to-d os os 24 cães tiveram títu los to-d e an ticorp os p a-ra T. cru z iin ferio res a o s títu lo s d e a n tico rp o s
p ara Leish m an iasp.
Discussão
A leish m an iose tegu m en tar con stitu i u m p ro-b lem a d e sa ú d e n o Bra sil (Gu im a rã es et a l., 1983; Grim ald i et al., 1989), in clu sive n o Estad o d o Paran á (Verzign assi et al., 1988; Teod oro et a l., 1991; Silveira et a l., 1992; Silveira et a l., 1994). A p resen ça d e cães in fectad os em áreas en d êm ica s d e leish m a n io se tegu m en ta r tem sid o in vestiga d a , co n sid era n d o seu p a p el co -m o reser va tó rio n a ca d eia d e tra n s-m issã o d e
Leish m an iasp. n os am b ien tes d om iciliar e p e-rid om iciliar (Falq u eto et al., 1986; 1991; Barre-to et a l., 1984; Co u tin h o et a l., 1985; Sessa et al.,1994). Na região Noroeste d o Estad o d o Pa-ran á, Lon ard on i et al. (1993) registraram a p re-sen ça d e cã es in fecta d o s p o r Leish m a n ia ( Vian n ia) braz ilien sis.
A p esq u isa d e a n tico rp o s em cã es d e á rea en d êm ica d e leish m a n io se tegu m en ta r vem sen d o realizad a com o u so d a técn ica d e IFI, e títu los sign ificativos de an ticorp os têm sido de-m on stra d os ede-m cã es p orta d ores ou n ã o d e le-sões. Percen tu ais d e cães com sorologia p ositiva , sem elh a n tes a os en con tra d os n este tra b a -lh o (18,2%), foram relatados p or Marzoch i et al. (1988) em u m a zon a en dêm ica n o Rio de Jan
ei-Tab e la 1
Distrib uiç ão d o s c ãe s c o m título s sig nific ativo s d e antic o rp o s na re aç ão d e
Imuno fluo re sc ê nc ia Ind ire ta p ara le ishmanio se te g ume ntar e núme ro d e c ãe s c o m
le são , d o s 132 c ãe s e stud ad o s e m se is lo c alid ad e s d a re g ião No ro e ste d o Estad o
d o Paraná, e m 1992 e 1993.
Localidade node cães
e xaminad o s c o m IFI p o sitiva % c o m le são
1) Faze nd a Palmital 32 4 12,5 5
2) Ce râmic a And irá 12 2 16,6 1
3) Faze nd a Jussara 20 8 40,0 –
4) Faze nd a Lag o a 23 6 26,1 –
5) De stilaria Me lho rame nto s 3 1 33,3 –
6) Faze nd a Mururê 42 3 7,1 –
To tal 132 24 18,2 6
*Análise d e Pro p o rç õ e s:
1 e 2) Z= -0,359; p = 0,3599 1 e 3) Z= -2,290; p = 0,0110 1 e 4) Z= -1,289; p = 0,0988 1 e 5) Z= -0,986; p = 0,1621 1 e 6) Z= 0,780; p = 0,2177
Tab e la 2
Re sultad o s d as re aç õ e s d e imuno fluo re sc ê nc ia
ind ire ta (IFI) p ara le ishmanio se te g ume ntar e Do e nç a d e
Chag as, d o s c ãe s q ue ap re se ntaram título s 40 na imuno
-fluo re sc ê nc ia p ara le ishmanio se te g ume ntar.
Cão Tít ulo de Ant icorpos na IFI
no Le ishmanio se Do e nç a d e Chag as
33 40 20
36 320 20
37 320 80
38 320 80
44 80 20
46 160 20
56 80 20
58 160 20
63 80 20
64 80 20
66 80 20
67 160 20
69 160 40
70 160 40
76 320 40
79 40 20
84 40 20
87 80 20
90 80 20
92 80 20
96 40 20
98 80 20
113 40 20
128 80 20
2 e 3) Z= -1,379; p = 0,0840 2 e 4) Z= -0,630; p = 0,2644 2 e 5) Z= -0,645; p = 0,2593 2 e 6) Z= 1,004; p = 0,1577 3 e 4) Z= 0,971; p = 0,1657
cion a d a s a p en a s três lâ m in a s p a ra exa m e m i-croscóp ico d ireto.
Os a m b ie n t e s d o m icilia re s e p e rid o m ici-liares n a Fazen d a Ju ssara são m ais favoráveis à o co rrên cia d o ciclo d e tra n sm issã o d e Leish -m a n ia sp. p ela p resen ça d e cã es co m títu lo s
sign ifica tivo s d e a n tico rp o s e d e cã es in fecta-d os (Lon arfecta-d on i et al., 1993); além fecta-d isso, tem sid o gra n sid e o n ú m ero sid e fleb otom ín eos ca p tu -rad os n esta fazen d a (Teod oro et al., 1994).
Conclusão
O elevad o n ú m ero d e cães com sorologia p osi-tiva p ara leish m an iose tegu m en tar exp lica, em p arte, a alta en d em icid ad e d a d oen ça n a região Noroeste d o Estad o d o Paran á. Nossos resu ltad os m ostram qu e o cão p oltad e ser u m im p ortan -te reservatório d om éstico d e Leish m an ia sp. à
sem elh a n ça d o q u e a co n tece em o u tra s á rea s en d êm icas d o Brasil. No en tan to, h á n ecessid a-d e a-d e se am p liar a área a-d e ab ran gên cia a-d este ti-p o d e estu d o ti-p a ra m elh o r co n h ecim en to d a ep id em iologia d a leish m an iose tegu m en tar n o Estad o d o Paran á.
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d e a n tico rp o s m a io res o u igu a is a 40, sen d o qu e d os 11 som en te n ove ap resen tavam lesões u lcerad as. Pirm ez et al. (1988) d etectaram títu -los de an ticorp os através da IFI em 32 den tre 35 cã es co m su sp eita d e leish m a n io se tegu m en -tar, em Jacarep agu á – RJ, sen d o d em on strad a a p resen ça de Leish m an iasp. em 32 deles.
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