Revista d a S o c ie d a d e B ra sile ira d e M e d ic in a T ro p ic a l 18(4): 2 2 3 -2 2 9 , O u t-D ez, 1 9 8 5
ESTUDO PARASITOLÓGICO E ANÁTOMO-PATOLÓGICO DA FASE AGUDA
DA DOENÇA DE CHAGAS EM CÃES INOCULADOS COM DUAS DIFERENTES
CEPAS DO
TRYPAN O SO M A C R U Z I
Maria Alice Pedreira de Castro e Zigman Brener
C ã e s j o v e n s f o r a m in fe c ta d o s c o m a s c e p a s Y e C L d o T . cru z i u s a n d o - s e c o m o in ó c u lo s 1 0 7 f o r m a s s a n g ü í n e a s i n o c u l a d a s p o r via in tr a p e r it o n e a l e 2 x 1 0 3 tr ip o m a s -tig o ta s m e ta c íc lic o s o b tid o s d o in s e to v e to r e in o c u l a d o s p o r v ia c o n ju n tiv a l. A s c e p a s Y e C L i n d u z i r a m n o s c ã e s c u r v a s d e p a r a s i t e m i a to ta l m e n te d is tin ta s , c o n f ir m a n d o d a d o s p a r a s i to ló g ic o s o b tid o s e m c a m u n d o n g o s e c o e lh o s. C o m a c e p a C L a p a r a s i te m ia , c o m a m b o s o s in ó c u lo s , f o i g r a d u a l m e n t e a s c e n c io n a l a o p a s s o q u e c o m Y a p a r a s i t e m i a f o i e x tr e m a m e n te b a ix a , ir r e g u la r e, c o m f r e q ü ê n c ia , s u b p a te n te . C o m a m b a s a s c e p a s o p a r a s i t i s m o e a s le s õ e s p r e d o m i n a r a m n o m io c á r d io . E n tr e ta n to , c o m a c e p a Y a m io c a r d ite f o i s e m p r e in te n s a d e s d e a s f a s e s m a i s p r e c o c e s d a in fe c ç ã o , a o p a s s o q u e c o m a c e p a C L o p r o c e s s o i n f l a m a t ó r io to m o u - s e a c e n tu a d o s o m e n t e a p a r t i r d o 20.° d ia . F r e q ü e n te m e n te a in te n s id a d e d a m io c a r d ite o b s e r v a d a e m a lg u n s a n im a is n ã o g u a r d a v a r e la ç ã o c o m a p a r a s i t e m i a ; e m a lg u n s c ã e s c o m p a r a s i t e m i a s u b p a te n te , n o s q u a i s a in fe c ç ã o s ó f o i d ia g n o s t ic a d a p e l o x e n o d ia g n ó s tic o , a i n te n s id a d e d a m io c a r d ite f o i c o m p a r á v e l à q u e la o b s e r v a d a n o s a n im a i s c o m p a r a s i t e m i a p a te n te . I d ê n ti c a c o r re la ç ã o ta m b é m n ã o f o i a s s i n a la d a e m r e la ç ã o a o p a r a s i tis m o tis s u la r . E s s e s a c h a d o s s u g e r e m a p a r ti c ip a ç ã o d e m e c a n is m o im u n o ló g ic o s n a g ê n e s e d a s le sõ es, a in d a n a f a s e a g u d a d a
in fe c ç ã o .
P a la v ra s C h a v e s: T r y p a n o s o m a c r u z i. C e p a s Y e C L . M io c a rd ite e x p e rim en tal em cães.
O cão jo v e m te m sid o c o n s id e ra d o co m o o modelo ex p e rim en tal a d e q u a d o p a ra o estu d o d a doença de C h a g a s n a fase a g u d a pior re p ro d u z ir co m fidelidade v ário s asp e c to s d a in fec çã o h u m a n a 2 11. A lém disso, o estu d o d a fase ag u d a d a in fec çã o induzida pelo T r y p a n o s o m a c r u z i p o d e se r d e g ran d e
im portância co n sid e ra n d o q u e d iferen tes au to re s têm sugerido que m u itas d a s le sõ es ta rd ia s sã o in flu en cia das pelo cu rso d a d o e n ç a n e sse estág io d a d o en ç a^ 15. Por outro lado, o estu d o d o co m p o rta m e n to d e v árias cepas do T. c r u z i em d iferen tes h o sp e d eiro s e x p e rim entais p are ce in d ic a r q u e o p a ra s ita in flu e n cia n as características d a in fec çã o ag u d a. E n tre as d iferen tes populações d o T. c r u z i, as c e p a s Y e C L m o stra ra m no cam undongo asp e c to s p ra tic a m e n te p o la re s em re la ção à m orfologia d as fo rm a s san g ü ín ea s, cu rv a s de parasitem ia, m o rta lid a d e , su sc e p tib ilid a d e à qu im io - terápicos e d istrib u içã o d e p a ra s ita s n o s d iferen tes tecidos e células d o h o sp e d e iro ^ . N o s e stu d o s re a liz a dos m ais recen te m en te em co elh o s fo ram ta m b é m observadas d iferen ç as sig n ificativ as n as cu rv a s de parasitem ia e o u tras c a ra c te rístic a s d a in fec çã o ag u d a nos anim ais in o cu lad o s co m as c e p a s Y e C L , seja como form as san g ü ín ea s o u co m trip o m a stig o tas m etacíclicos o b tid o s do v e to r 13 14.
* C entro de P esquisas R ené R achou, F IO C R U Z , A v. A ugusto de L im a. 1715 - C .P . 1743 - 3 0 .0 0 0 - Belo H orizonte - M G - B rasil.
T rabalho realizado com auxílio do C onselho N acio n al de Pesquisas, Brasil.
Recebido para p ublicação em 1 5 /4 /8 5
T e n d o em v ista a p o ssív el im p o rtâ n cia d esses a c h a d o s e, so b retu d o , a a u s ê n c ia n a lite ra tu ra d e d ad o s m a is d e ta lh a d o s so b re o c u rso d a in fecção , do p o n to d e v ista p ara sito ló g ic o , em cã e s in o c u lad o s co m d iferen tes p o p u la ç õ e s d o T. c r u z i, e stu d am o s, a tra v és de m é to d o s p ara sito ló g ic o s e an a to m o p a to ló g ico s, o co m p o rta m e n to d e c ã e s jo v e n s in o cu lad o s co m as c e p a s Y e C L d esse p a ra sita .
M A T E R I A L E M É T O D O S
C e p a d o T. c r u z i Y , iso la d a d e u m caso
h u m a n o p o r S ilv a e N u s s e n z w e ig 17; C L , iso la d a de
T r ia to m a in fe s ta n s n atu ra lm e n te in fectad o , co leta d o em d o m icílio , no E s ta d o do R io G ra n d e d o Sul, B ra sil8 .
I n fe c ç ã o d o s c ã e s . F o ra m u tilizad o s 30 cã es m estiç o s, co m trê s m e ses d e id a d e, de am b o s o s sexos, p ro v e n ie n tes d e v á ria s n in h a d a s, p e sa n d o 3 a 4,5 kg. A p ó s o d esm a m e , os a n im ais fo ram su b m etid o s à d ie ta p a d rã o c o m ercia l a d lib i t u m , tra ta m e n to anti-
h e lm ín tico (C o m b a n trim - P fizer); v ac in a s c o n tra le p to sp iro se , cin o m o se e h e p a tite (S m ith K lin e - U S A ).
O s seg u in tes gru p o s d e an im ais fo ram estu d a dos:
C a stro M A P , B ren er Z . E s tu d o p a r a s ito ló g ic o e a n á to m o -p a to lá g ic o d a f a s e a g u d a d a d o e n ç a d e C h a g a s em cães ino-c u la d o s ino-com d u a s d iferen tes ino-c e p a s d o T rypanosom a cruzi. R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra sile ira d e M e d ic in a T ro p ic a l 1 8 :2 2 3 -2 2 9 , O u t-D ez, 1 9 8 5
in fecção , re sp e c tiv a m e n te . A c o n tag e m d o s trip o - m astig o tas foi re a liz a d a seg u n d o a té c n ic a d e B ren er^.
b ) D o is g ru p o s d e 3 a n im ais fo ra m in fec tad o s p o r v ia co n ju n tiv al c o m 2 x 10^ trip o m a stig o ta s m e tac íc lico s d a s c e p a s Y e C L p ro v e n ie n te s d e tria to m ín e o s (D ip e t a lo g a s te r m a x i m u s ) e x p e rim en ta lm e n te in fectad o s. O s p a ra s ita s fo ra m o b tid o s o u a p a rtir d a m a c e ra ç ã o d o in te stin o o u , e n tã o , d e fezes elim in a d as e s p o n ta n e a m e n te e co lh id as em so lu ç ão salin a. A co n ta g e m d o s p a ra s ita s foi re a liz a d a e m c â m a ra de N e u b a u e r. A in o c u la ç ã o d o s c ã e s foi re a liz a d a atra v é s d o au x ílio d e p ip e ta a u to m á tic a qu e p e rm itia c o lo c a r n a m u c o s a co n ju n tiv a l, g o ta s p re v ia m e n te ca lc u la d a s d o m a te ria l in fectan te.
c) U m g ru p o d e 6 c ã e s n o rm a is foi u sa d o co m o co n tro le.
E s t u d o p a r a s ito ló g ic o . A p a ra site m ia foi
o b se rv a d a d ia ria m e n te , a p a rtir d o 4 ? d ia d a in fecção , seg u n d o a té c n ic a d e B ren e r^. O x en o d ia g n ó stic o foi re a liz a d o so m e n te n o s c a so s e m q u e o p a ra s ita n ã o e ra d e te c ta d o n o san g u e p eriféric o , sen d o o e x a m e feito u tiliza n d o -se 4 0 n in fas d e te rc e iro estág io d e T. in fe s ta n s .
E s t u d o a n a to m o p a t o l ó g i c o. O s an im ais m o r to s e sp o n ta n e a m e n te o u sa c rific a d o s co m N e m b u ta l só d ic o fo ram su b m e tid o s à n e c ro p sia c o m p leta. O s cã e s fo ram e stu d a d o s ao s p a re s (u m in o c u la d o c o m a c e p a Y e o u tro c o m a c e p a C L ) 8 , 11, 1 5 ,1 7 , 19, 2 0 , 2 2 ,2 5 e 2 8 d ia s a p ó s a in fec çã o p o r v ia in tra p e rito n e a l e 30, 35 e 4 0 d ia s ap ó s a in fec çã o p o r v ia c o n ju n tiv al.
F ra g m e n to s d a s c â m a ra s a triais e v en tric u la re s, sep to e p o n ta d o c o ra ç ã o fo ra m re tira d o s, fix a d o s em form ol sa lin a a 1 0 % , in clu íd o s em p a ra fin a p a ra estu d o m ic ro sc ó p ic o e m se c ç õ e s c o ra d o s p e la h em a- to x ilin a-eo sin a co m 5 U m d e esp e ssu ra . F o ra m igual m e n te co lh id o s frag m en to s d e m ú sc u lo esq u elé tic o , ó rg ão s d o s is te m a d ig e stiv o , fígado, b a ç o , p â n c re a s , p u lm ão e siste m a n erv o so ce n tral.
O g rau d e p a ra sitis m o d o c o ra ç ã o foi estim a d o a p a rtir d a d e te rm in a ç ã o d o n ú m e ro de p se u d o c isto s o b se rv ad o s e m 5 0 c a m p o s m ic ro sc ó p ic o s x (4 0 0 ), em m icroscópio Z eiss, em c a d a u m d o s três co rte s ex a m in a dos. C o n s id e ra ra m -se co m o ( + + + + ) as p re p a ra ç õ e s n as q u ais em p ra tic a m e n te to d o s o s c a m p o s m ic ro s có p ico s fo ram e n c o n tra d o s p se u d o cisto s; ( + + ) , q u an d o era m e n c o n tra d o s 5 ou m e n o s p se u d o c isto s n os 5 0 ca m p o s m ic ro sc ó p ic o s ex a m in a d o s; ( + + + ) , graus in te rm ed iá rio s d e p a ra sitism o ; ( + ) , q u a n d o os p a ra sita s e ra m e x tre m a m e n te ra ro s, só se n d o e n c o n trad o s ap ó s ex a m e d e m ais d e 5 0 c a m p o s; ( - ) , q u a n d o p a ra sita s n ã o e ra m o b se rv a d o s m e sm o ap ó s ex a m e ex au stiv o d o co rte h isto ló g ico .
A in te n sid a d e d a re a ç ã o in fla m a tó ria foi es tim ad a seg u n d o o se g u in te critério : ( - ) , A u se n te ; ( + ) , in filtrad o in fla m ató rio d isc re to , se m fo rm a r focos; ( + + ) , in filtrad o in fla m a tó rio d isc re to , fo rm a n d o p eq u e n o s fo co s; ( + + + ) , fo co s in fla m ató rio s e x te n so s e con flu en tes em alg u m as á re a s e e sp a rso s em o u tras; ( + + + + ) , in filtra d o in fla m a tó rio d ifu so e ac en tu a d o .
R E S U L T A D O S
A s c e p a s Y e C L in d u z ira m d iferen tes c u rso s d e p a ra site m ia no cã o , in d e p e n d e n te m e n te d o in ó c u lo e v ia d e in o c u la ç ã o u tiliz a d o s. C o m a c e p a C L a p a ra site m ia to m o u -se p a te n te em to d o s os an im ais in o c u lad o s co m fo rm a s sa n g u ín ea s p o r v ia in tra p e ri to n e a l, e n tre o 7 ? e 9.° d ia d a in fecção . O s níveis p a ra sitê m ic o s fo ra m se m p re ele v a d o s e c a ra c te riz a ra m -se p o r u m a a s c e n s ã o g ra d u a l d u ra n te o c u rso d a in fec çã o , q u e se e s te n d e u d o 7? a o 2 7 ° d ia (F ig u ra 1). C o m a c e p a Y , o n ú m e ro d e p a ra sita s c irc u lan tes foi sig n ific ativ am en te m e n o r, p a ra site m ia foi d e te c ta d a em 7 d o s 9 an im a is in o c u la d o s in tra p e rito n e a lm e n te , en tre o 7 ? e 13 ? d ia d a in fecção , d e c lin a n d o ra p id a m e n te ; a c o n fig u ra ç ã o d a s cu rv a s d e p a r a site m ia foi c a ra c te riz a d a p o r p e q u e n a elev a çã o inicial, seg u id a d e p ic o s p a ra sitê m ic o s irreg u lares de b a ix a p a ra site m ia e d e u m p e río d o p a te n te b a s ta n te cu rto , n u n c a su p e rio r a 13 d ia s (F ig . 1). N o s d o is an im ais n os q u ais a p a ra s ite m ia foi su b p a te n te p a ra s ita s só fo ra m d e te c ta d o s p o r x en o d iag n ó stico .
D l » Ar o s I NDCI I LACÃO
F igura 1 - C urvas de p a ra sitem ia em cães inoculados p o r via in traperitonial com 1 0 7 fo rm a s sangüíneas d a s cepas Y e C L de T. cruzi. N o a n im a l inoculado com a cepa Y a p a ra sitem ia f o i subpatente e som ente detectada p o r xen o diagnóstico.
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C a stro M A P , B ren er Z . E stu d o p a r a s ito ló g ic o e a n á to m o -p a to ló g ic o d a f a s e a g u d a d a d oen ça d e C h a g a s em c ã e s ino c u la d o s com d u a s d iferen te s c e p a s d o T ry p an o so m a cruzi. R e v ista d a S o c ie d a d e B ra s ile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 1 8 :2 2 3 -2 2 9 , O u t-D ez, 1 9 8 5
F igura 2 - C urvas d e p a ra site m ia em cães inoculados p o r via con ju n tival com 2 x 10 3 tripom astigotas m etacíclicos o b tid o s de triatom íneos (D ipeta- logaster maximus^ experim entalm ente infectados com a s cepas Y e C L.
p a ra s ite m ia foi su b p a te n te e so m e n te d e te c ta d a p o r x en o d iag n ó stico .
O m a io r ín d ic e d e m o rta lid a d e foi v e rific ad a n os an im ais in fe c ta d o s c o m a c e p a Y . D e 4 a n im ais qu e fa le c e ra m d u ra n te o c u rso d e in fecção , 3 h a v ia m sido in fe c ta d o s c o m a c e p a Y. E n tre ta n to , n ã o foi o b se r v a d a c o rre la ç ã o en tre p a ra s ite m ia e m o rta lid a d e , em v is ta d esse s an im ais te re m a p re se n ta d o b a ix o s níveis p a ra sitê m ic o s e o ó b ito te r o c o rrid o ap ó s o d e s a p a rec im e n to d e p a ra s ita s d o sa n g u e p eriférico .
A o ex a m e m ic ro sc ó p ic o foi o b se rv a d o q u e os a n im ais in o c u la d o s c o m as c e p a s Y e C L c o m p o rta ra m -se d e m a n e ira se m e lh a n te em re la ç ã o à d istri b u iç ã o tis su la r d e p a ra s ita s , p o ré m m o stra n d o
d ife re n ç a s no q u e se refere ao s asp ec to s an ato m o - p ato ló g ic o s d a s lesõ es. C o m am b as as cep as o p a ra sitism o e as le sõ es p re d o m in a ra m n o m io c árd io e fo ra m d e in te n sid a d e v a riá v e l n o s m ú scu lo s estriad o s esq u e lé tic o s e liso s. N o s d e m a is ó rg ão s o co rreram le sõ es a p a re n te m e n te in d e p e n d e n te s d a p re se n ç a do p a ra sita . E m n e n h u m d o s a n im ais in o c u lad o s co m as c e p a s Y e C L , m e sm o n a s fase s m ais p rec o ces d a in fec çã o , fo ram d e te c ta d o s p a ra sita s em célu las m a- cro fág ic as d o b a ç o e fígado.
N o c o ra ç ã o , o p a ra sitis m o e as lesõ es tissu lares c a ra c te riz a d a s p o r u m a in fla m aç ão co m ex su d ato p re d o m in a n te m e n te m o n o n u c le a r fo ram , d esd e as fase s in iciais, n itid a m e n te m a is a c e n tu a d a s n o s átrio s, q u a n d o c o m p a ra d a s co m o p eq u e n o ou ra ro en v o l v im e n to d o s v en trícu lo s (p a re d e s, sep to in trav en - tric u la r e p o n ta ) (T a b e la s 1, 2 e 3). E n tre ta n to , as le sõ es c a rd ía c a s , in d u z id a s p o r am b as as p o p u laçõ es d o p a ra s ita , m o s tra ra m d iferen ç as. C o m a c e p a Y, a m io c a rd ite foi in te n sa d esd e a s fase s m a is p rec o ces d a in fec çã o , en q u a n to co m a c e p a C L o p ro ce sso in fla m ató rio to rn o u -se a c e n tu a d o so m e n te a p a rtir do 17.° d ia ap ó s a in o c u la ç ã o (P ra n c h a 1). N o s an im ais in o c u lad o s c o m a c e p a Y , o p a ra sitism o n o s átrio s foi b a s ta n te a c e n tu a d o a té o 15 ? d ia d a in fecção e p o d ia se r c o rre la c io n a d o co m a in te n sa m io card ite en q u a n to q u e n o s v en trícu lo s o p a ra sitism o foi re la tiv a m e n te e sc a ss o ao longo d a in fecção. H a v ia ig u alm en te d isc re to g rau d e p a ra sitism o e d a s lesõ es n o s an im ais in o c u la d o s co m a c e p a C L e ex a m in a d o s n e ste p erío d o . E n tre ta n to , a p a rtir d o 17? d ia d a in fec çã o foi o b se rv a d o q u e a m io c ard ite to rn av a -se c a d a vez m a is in te n sa , e n q u a n to q u e o p a ra sitism o d as fib ra s c a rd ía c a s e ra b a s ta n te d isc re to ou até m esm o a u sen te , in d e p en d e n te d a c e p a, in ó cu lo e v ias de in o c u la ç ã o (T a b e la s 1, 2 e 3). E s s a fa lta de re la ç ã o e n tre a in te n sid a d e d a re a ç ã o in fla m ató ria e o p a ra sitism o o b se rv a d a in ic ia lm e n te n o c o ra ç ã o foi ta m b ém d e m o n s tra d a n o s m ú sc u lo s esq u elé tic o s e lisos.
T a b e la 1 - I n t e n s i d a d e d o p a r a s i t i s m o t i s s u l a r e r e a ç ã o i n f l a m a t ó r ia n o c o r a ç ã o d e c ã e s in o c u la d o s p o r v ia c o n j u n t i v a l c o m 1 0 3 tr i p o m a s tig o ta s m e ta c íc lic o s o b tid o s d e tr i a to m ín e o s ( D . m a x im u s) e x p e r im e n t a l m e n t e ir tfe c ta d a s c o m a s c e p a s Y e C L
N.°
a n i m a l
C e p a
D i a s d e
I n fe c ç ã o P
A trio R I
V e n tr íc u lo
P a r e d e S e p to
P R I P
A p ic e R I
27 Y 30 _ + + + + __ + + + + + + +
3 9 Y 35 - + + + — + + + + +
4 0 Y 4 0 + -|—1—1—b + + + + — +
2 4 C L 30 + + + + + _ + + + + +
2 3 C L 35 - + + + + + + + ~ + +
21 C L 4 0 - + + + - + - +
C astro M A P , B ren er Z. E stu d o p a r a s ito ló g ic o e a n á to m o -p a to ió g ic o d a f a s e a g u d a d a d o e n ç a d e C h a g a s em cães ino cu la d o s com d u a s d iferen tes c e p a s d o T rypanosom a cruzi. R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra sile ira d e M e d ic in a T ro p ic a l 1 8 :2 2 3 -2 2 9 , O u t-D ez, 19 8 5
T a b e la 2 - I n te n s id a d e d o p a r a s iti s m o tis s u la r e re a ç ã o in f la m a tó r ia n o c o r a ç ã o d e c ã e s in o c u la d o s p o r v ia in tra -p e r ito n e a l c o m 1 0 6 f o r m a s s a n g ü ín e a s d a C e -p a C L d o T . cruzi.
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D ia s d e
in fe c ç ã o P
Á tr io R I
P a r e d e P
V e n tríc u lo S e p to
R I P
A p ic e R I
28 8 — - — _ ~ ~
41 11 + + + _ _ —
29 15 - + + + + + +
8 17 + + + + + + - + + + - +
1 19 + + + + + + + +
10 20 - + + + - + + _
2 22 + + + + + + — + + — +
43 25 - + + + + - + — + +
4 2 28 + + + + + + + + - +
P - P a ra sitism o tissu la r; R I - R e a ç ã o in fla m ató ria
T a b e la 3 - I n te n s id a d e d o p a r a s itis m o tis s u la r e re a ç ã o in f la m a tó r ia no c o r a ç ã o d e c ã e s in o c u la d o s p o r v ia in tra -p e r ito n e a l c o m 1 0 6 f o r m a s s a n g ü ín e a s d a C e -p a Y d e T . cruzi.
D ia s V e n tríc u lo
Np d e A tr io P a r e d e S e p to A p ic e
a n im a l in fe c ç ã o P R I P R I P R I
26 8 + + + + + + + + +
45 11 + + + + + + - + + + - + +
6 15 + + + + + + + + + + + + + +
44 17 + + + + + - + + + + +
3 19 - + + + + + + + - +
46 2 0 + + + + + - + + -
-9 22 - + + + + - + + + + + +
7 25 + + + + + - + + + + + +
4 28 - + + + + - + + - +
P - P a ra sitism o tissu lar; R I - R e a ç ã o in fla m ató ria
A s lesões d o m ú sc u lo e sq u elé tic o fo ra m se m p re m ais in ten sas e fre q ü en te s n o s an im ais in o c u la d o s co m a cep a C L , do q u e co m a Y, d esd e o início d a in fecção . A s lesõ es reg ressiv as d as c é lu la s m u sc u la re s, d e um m o d o geral, fo ram fre q ü en te s e g rav es co m o p e rd a de estriação , h ia lin iz aç ão e fra g m e n ta ç ã o d as fibras. T o d av ia, tais fen ô m en o s n em se m p re fo ram d ire ta m ente relacio n a d o s ao p a ra sitis m o lo c a l e /o u a re a ç ã o inflam atória.
A re a ç ã o in fla m a tó ria n o s p le x o s d o S iste m a N erv o so A u tô n o m o d o c o ra ç ã o e tu b o d ig estiv o estev e presen te em to d o s o s gru p o s e s tu d a d o s, sen d o m ais freqüente no c o ra ç ã o d o s a n im ais in o c u la d o s co m a cep a Y e no tu b o d ig estiv o d e an im ais in o c u lad o s co m a cep a C L . E m n en h u m d o s cã e s foi o b se rv a d o p arasitism o d as c é lu la s n e rv o sa s gan g lio n ares.
N ã o fo ram o b se rv a d a s alte ra ç õ e s h isto ló g icas significativas nos 6 an im ais c o n tro les n ã o in fectad o s.
D I S C U S S À O
C a s tr o M A P , B r e n e r Z . E s tu d o p a r a s ito ló g ic o e a n á to m o -p a to ló g ic o d a f a s e a g u d a d a d o e n ç a d e C h a g a s e m c ã e s in o c u la d o s c o m d u a s d ife r e n te s c e p a s d o T rypanosom a cruzi. R e v ista d a S o c ie d a d e B ra sile ira d e M e d ic in a T ro p ica l 1 8 :2 2 3 -2 2 9 , O u t-D ez, 1 9 8 5
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C a stro M A P , B re n e r Z . E s tu d o p a r a s ito ló g ic o e a n á to m o - p a to ló g ic o d a f a s e a g u d a d a d o e n ç a d e C h a g a s e m c ã e s in o c u la d o s c o m d u a s d ifer en te s c e p a s d o T rypanosoraa cruzi. R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra s ile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 1 8 :2 2 3 -2 2 9 , O u t-D ez, 1 9 8 5
n a c e p a C L (e ta m b é m M R ) a p re se n ta m u m a c a p a c i d ad e d e in te rio riza ção n o s te c id o s sig n ificativ am en te m e n o r qu e as fo rm as d elg ad a s p re d o m in a n te n a c e p a Y 4 6 9. H á ev id ên c ias d e q u e essa s p ro p rie d a d e s b io ló g icas estejam re la c io n a d a s a o p o lim o rfism o d o T. c ru zi. A ssim , S ch m a tz e co ls se p a ra ra m , atra v é s d e u m g rad ien te co n tín u o d e “ h y p a q u e ” , as fo rm as larg as e d elg ad as d e m io b lasto s in fec tad o s co m a c e p a Y e d em o n stra ra m q u e a s fo rm a s d elg a d a s sã o m u ito m ais in fectan tes p a ra e ss a s cé lu la s q u e a s larg as. D e o u tro lad o , as fo rm as la rg a s sa n g ü ín ea s q u e p re d o m in a m n a c e p a C L a p re s e n ta m m a io r re sistê n c ia à re sp o sta im une h u m o ral d o h o sp e d e iro q u e as fo rm a s san g ü í n ea s d elg ad a s d a c e p a Y 1®. D e u m m o d o g eral, o c o m p o rtam e n to d e s sa s d u a s p o p u la ç õ e s p a ra sitá ria s p o d e ria e x p lica r alg u m as d a s d iferen ç as e n c o n tra d a s no s cã es, a sab er: o lon g o p e río d o p a te n te e a a lta p a ra site m ia in d u z id a p e la c e p a C L q u e c o n tra sta m co m o cu rto p e río d o p a te n te e a b a ix a irre g u la r p a ra site m ia o b se rv a d a c o m Y; o fato d e q u e, in d e p en d e n tem en te d o in ó cu lo e v ia d e in o c u laç ão , p a ra sita s fo ram d e te c ta d o s em to d o s o s an im ais in o cu lad o s c o m a c e p a C L en q u a n to q u e co m a c e p a Y em 2 5 % d os an im ais a p a ra s ite m ia foi s u b p a te n te e so m en te d e te c ta d a p o r x en o d iag n ó stico ; fin alm en te , o p a ra sitis m o tis su la r c a rd ía c o m a is in te n so e m ais p reco ce e n c o n tra d o n o s a n im ais in o c u lad o s co m a ce p a Y, su g erin d o rá p id a in te rio riz a ç ã o d a s fo rm as san g ü ín eas.
E s s a s o b se rv a ç õ e s p a ra sito ló g ic a s co n firm a m m ais u m a v ez qu e em p o p u la ç õ e s d e T. c r u z i am p li ficad as p o r p assa g e n s su c e ssiv a s em an im ais ex p re s- sa-se u m a d u a lid a d e d e co m p o rta m e n to d a s fo rm as san g ü ín eas q u e p e rsiste m e sm o ap ó s p a ssa g e m d os p a ra sita s p elo v e to r e u so d o s trip o m a stig o ta s m e ta cíclicos co m o estág io s in fec tan tes. A s im p lica çõ e s d esses ac h a d o s n o c ic lo e v o lu tiv o e n a m o rb id a d e d as infecções n a n a tu re z a p e rm a n e c e m o b sc u ra s.
N o c o ra ç ã o o p a ra s itis m o e a s le sõ es tissu la re s ca ra c te riz a d a s p o r in fla m aç ão c o m e x s u d a to p red o m in a n te m en te m o n o n u c le a r fo ram , d e sd e as fases iniciais d a in fecção , n itid a m e n te m a is a c e n tu a d a s n os átrio s q u a n d o c o m p a ra d o s c o m o p e q u e n o o u ra ro en v o lv im en to d o s v en trícu lo s (p a re d e s, se p to in tra- v en tricu la r e p o n ta ). E s s e s a c h a d o s e s tã o d e a c o rd o co m a d e sc riç ã o d e A n d ra d e e A n d ra d e 1 q u e .observa ram o in ício d a m io c a rd ite n a au ríc u la d ire ita co m co n seq ü en te p ro p a g a ç ã o p a r a a p a rte d ire ita d o se p to e a p are d e livre d o v en tríc u lo d ireito . N o e n ta n to , as lesõ es c a rd ía c a s in d u z id a s p o r am b as as p o p u la ç õ e s p a ra sitá ria s m o stra ra m d iferen ç as q u a n to à s u a ev o lução. C o m a c e p a Y a m io c a rd ite foi in te n sa d e sd e as fases m ais p re c o c e s d a in fec çã o en q u a n to q u e co m a ce p a C L o p ro c e sso in fla m a tó rio to m o u -se a c e n tu a d o so m en te a p a rtir d o 1 7 ° d ia d e in fec çã o refletin d o , p ro v av elm en te, as p e c u lia rid a d e s d o p a ra sitis m o . U m asp ec to im p o rta n te foi, so b re tu d o n a s fase s m ais ta rd ia s d a in fec çã o ag u d a , a fa lta d e re la ç ã o en tre o p ara sitism o tis su la r e a in te n sid a d e d a re a ç ã o in flam ató ria no c o ra ç ã o e ta m b é m n a m u sc u la tu ra esq u elética e lisa. P o r o u tro la d o , a in te n sid a d e d a
m io c a rd ite o b se rv a d a e m alg u n s a n im ais, so b re tu d o o s in o c u la d o s com . a c e p a Y , n ã o c o rre sp o n d ia à p a ra site m ia . E m p elo m e n o s d o is c ã e s in o c u lad o s c o m e s s a c e p a e n o s q u ais a in fec çã o só foi d ia g n o stic a d a p elo x en o d ia g n ó stic o , a m io c a rd ite foi in te n sa e c o m p a rá v e l à q u e la o b se rv a d a n o s a n im ais co m p a ra s i te m ia p a te n te . E s s e s a c h a d o s su g e re m fo rte m e n te a e x istê n c ia d e m e c a n ism o s im u n o ló g ico s n a g ên ese d a s le sõ es c a rd ía c a s d e s c rita s n o n o sso m a te ria l. A d e te r m in a ç ã o d a n a tu re z a d a s cé lu la s q u e c o m p õ em o p ro c e sso in fla m a tó rio d a m io c a rd ite a g u d a n o cã o , atra v é s d e m é to d o s h isto q u ím ic o s, m o s tra q u e o q u a d ro m o rfo ló g ico p o d e ria se r in te rp re ta d o co m o u m a e x p re s sã o d e re s p o s ta im u n e c e lu l a r 1^.
S U M M A R Y
Y o u n g d o g s w e re in o c u la te d w ith T . cru z i Y a n d C L s tr a in s e ith e r b y in tr a p e r ito n e a l ro u te w ith 1 07 b lo o d f o r m s o r b y o c u la r ro u te w ith 2 x 1 0 $ v e c to r -d e r iv e d tr y p o m a s tig o te s . W ith b o th in o c u la th e p a t t e m s o f p a r a s ite m ia w e re s ig n ijlc a n tly d iffe re n t, c o n firm in g d a ta p r e v io u s ly o b ta in e d in e x p e r im e n ta lly in fe c te d m ic e a n d ra b b its. C L str a in in d u c e d a g r a d u a l a s c e n c io n a l p a r a s ite m ia w h e re a s w ith Y th e p a r a s ite m ia w a s e ith e r s u b p a te n t o r th e n u m b e r o f p a r a s ite s w a s v e ry low , r a p id ly d e c lin in g . A lth o u g h m y o c a r d itis w a s p r e s e n t in m o s t a n im a is r e g a r d le s s o f th e s tr a in u se d , th e in f la m m a to r y p r o c e s s w a s e s ta b lis h e d e a r lie r w ith th e Y s tr a in . T h e s e v e r ity o f th e m y o c a r d itis w a s n o t r e la te d to p a r a s ite m ia a n d in s o m e a n im a is in w h ic h p a r a s ite s c o u ld o n ly b e d e te c te d b y x e n o d ia g n o s is th e le s io n s w ere c o m p a r a b le to th o s e d e te c te d in a n im a is w ith h ig h n u m b e r o f b lo o d fo r m s . In a s i m i la r w a y , n o c o rre -la tio n w a s e s ta b lis h e d b e tw e e n tis s u e p a r a s iti s m a n d m y o c a r d iu m in f la m m a to r y le sio n s. T h u s, th e h e a rt tis s u e d a m a g e in th e a c u te p h a s e w a s n o t a p p a r e n tly in flu e n c e d b y th e d iffe re n c e s in t h e c o u rs e o f in fe c tio n , s u g g e s tin g a p a r tic ip a tio n o f im m u n o lo g ic a l m e c h a n is m s e v e n a t th is e a r ly s ta g e o f in fe c tio n .
K e y w o rd s: T ry p a n o s o m a cruzi. Y a n d C L stra in s . D o g 's e x p e r im e n ta l m y o c a r d itis .
R E F E R Ê N C IA S B IB L IO G R Á F IC A S
1. A ndrade Z A , A ndrade S G . A pato logia d a doen ça de C hagas experim ental no cão. M em órias do Instituto O sw aldo C ruz 75: 77-96, 1980.
2. A ndrade Z A , A n d rad e S G , Sadigursky M , L im a JA C . D o en ça de C hagas experim ental no cão. R elação mor- fológica e eletrocardiográfica n a fase aguda d a infecção. A rquivos B rasileiros de C ardiologia 3 5 :4 8 5 -5 0 0 , 1980. 3. A ndrade Z A , A ndrade S G , Sadigursky M , M anguire
JM . E xperim ental C h ag as’ disease in dogs. A patholo- gical and E C G study o f th e chronic indeterm inate phase o f the infection. A rchives o f Pathology and L aboratory M edicin e 105: 4 6 0 -4 6 4 , 1981.
C a s tr o M A P , B r e n e r Z . E s tu d o p a r a s ito ló g ic o e a n á to m o - p a to ló g ic o d a f a s e a g u d a d a d o e n ç a d e C h a g a s em c ã e s in o c u la d o s c o m d u a s d ife r e n te s c e p a s d o T rypanosom a cruzi. R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra s ile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 1 8 :2 2 3 -2 2 9 , O u t-D ez, 1 9 8 5
5. B rener Z . T h erap eu tic activity and criterion o f cure on m ice experim entally infected w ith T r y p a n o s o m a c ru z i. R evista do In stitu to de M edicina T ropical de São P aulo 4: 389 -3 9 6 , 1962.
6. B rener Z . T he behaviour o f slender and stout forms o f T r y p a n o s o m a c r u z i in th e blo odstream o f norm al and im m une m ice. A rm ais o f T ropical M edicine and Pa- rasitology 63: 2 1 5 -2 2 0 , 1969.
7. B rener Z . Intraspecific variation in T r y p a n o s o m a c r u z i: tw o types o f parasite populations presenting distinct features. In: C h ag as’ D isease, P an A m erican H ealth O rganization, Scientific P ublication n.° 347: 11-21, 1977.
8. B rener Z , C h iari E . V ariações m orfológicas observadas em diferentes am ostras de T r y p a n o s o m a cruzi. R evista do Instituto de M ed icin a T ropical de S ão P au lo 5:2 20- 2 2 7 , 1963.
9. H ow ells R E , C h iari C A . O bservations on tw o strains o f T r y p a n o s o m a c r u z i in laboratory mice. A nnals of T ropical M edicine and P arasitology 69: 4 3 5 -4 4 8 ,1 9 7 5 . 10. K rettli A U , B rener Z . Protective effects o f specific
antibodies on T r y p a n o s o m a c r u z i infection. Journal o f Im m unology 116: 7 5 5 -7 6 0 , 1976.
11. L aranja F S . A sp ecto s clínicos da m oléstia de C hagas. R evista B rasileira de M edicina 10: 4 8 2 -4 9 1 , 1953.
12. P edreira de C astro M A , B rener Z . C haracterization of inflam m atory cells in acute m yocardites o f dogs infected w ith T r y p a n o s o m a c r u z i. In: R esum os da V III R eunião A nual sobre P esquisa B ásica em D oença de C hagas, C axam bu, p. 35, 1981.
13. R am irez L E . O coelho com o m odelo experim ental no estudo da doença de C hagas crônica. T ese de D outorado, D ep artam en to de Parasitologia, Instituto de C iências Biológicas da U niversidade F ederal de M inas G erais,
1984.
14. R am irez L E , B rener Z . A cute phase o f experim ental C h ag as’ disease in rabbits: I. Parasitological aspects. In: R esum os d a V III R eunião A n u al sobre Pesquisa B ásica em D o en ça de C hagas, C axam bu, p. 29, 1981. 15. R ibeiro dos Santos R , H udson L. D enervation and
im m une response in m ice infected with T ry p a n o so m a c ru z i. C linicai and E xperim ental Im munology 44: 349 -3 5 4 , 1981.
16. Schm atz D M , B oltz R C , M urray PK . T ry p a n o so m a c ru z i. separation o f bro ad and slender trypom astigotes using a continuous hypaque gradient. Parasitology 87: 2 1 9 -2 2 7 , 1983.
