ESTUDO DA MICROBIOTA DA CONJUNTIVA OCULAR DE RAPOSAS (Cerdocyon thous azarae), DO HÔRTO ZOO BOTÂNICO DE
DOIS IRMÃOS, RECIFE, PERNAMBUCO
Maria Evódia de SOUSA", Fabricio Bezerra de SÁ', RinaldoAparecido MOTA'
RESUMO: A conjuntiva é exposta continuamente a agentes infecciosos como ví-rus, bactérias e fungos. Previne o ressecamento da córnea, aumenta a mobilidade das pálpebras e globo ocular e serve como barreira contra microrganismos e cor-pos estranhos. Neste trabalho o objetivo foi avaliar a microbiota aeróbia da conjun-tiva ocular de raposas(Cerdocyon thous azarae), clinicamente saudáveis ao exa-me oftálmíco. Foram utilizadas quatro raposas, das quais amostras de ambos os sacos conjuntivais foram obtidas por meio deswabs estéreis e submetidas a exa-mes bacteriológicos.Amaioria das bactérias isoladas foram Gram-negativas, das quais: 36,4% para Escherichia cofi, 18,2% para Klebsiella spp e 9,1% para outras Enterobacteriáceas. Dentre os Gram-positivos foram isoladosBacillus spp (31,8%)
e
Staphylococcus sp (4,5%),Termos para indexação: Escherichia cofi , Klebsiella spp, Bacillus spp, rapo-sas, microbiota conjuntival
CONJUNCTIVE OCULAR MICROFLORA OF FOXES (Cerdocyon Thous Azarae), OF THE HÔRTO ZOO BOTÂNICO
DE DOIS IRMÃOS, RECIFE, PERNAMBUCO
ABSTRACT: The conjunctive is exposed continuously to infectious agents as virus, bacterias and fungi. It has the function to prevent the cornea drying, increasing eyelids and eyeball mobility as well as acting as a barrier against microorganisms and strange bodies. The aim of this work was to evaluate aerobic conjunctive ocular microflora of foxes(Cerdocyon thous azarae) clinically healthy to an ophthalmic exam. Using sterile swabs, sam pies of both conjunctive sacks were obtained from four foxes and submitted to bacteriological exams. The most of the ísolated microorganisms were Gram negative: Escherichia cofi (36.4%), Klebsiella spp (18.2%) and other Gram-negative microorganisms (9.1%). Bacillus spp (31.8%) and Staphylococcus sp (4.5%) were the Gram-positive organisms isolated.
Index Terms: Escherichia cofi, Klebsiella spp, Bacillus spp, foxes, conjunctival mi-croflora.
INTRODUÇÃO
A conjuntiva ocular é uma membrana fina, transparente, através da qual a escle-ra e os tecidos subconjuntivais são claescle-ra-
clara-mente visualizados (STADES et aI., 1999). Reveste a face interna das pálpebras (con-juntiva palpebral), e reflete-se nos fórnices conjuntivais superior e inferior cobrindo a esclera até o limbo. Sobrepõe também as
, Med. Vet., curso de Pós-Graduação - UFRPE - Ciência Veterinária; Rua Gov; Luis Cavalcante, 209, Alto do Cruzeiro, 57312-000,Arapiraca-AL. • Autor para Correspondência.
2 Med. Vet., Dr., Prof<>. Adjunto, Oepto. de Morfoiogia e Fisiologia Animal. UFRPE, , Med. Vet., PhO Prof<>. Adjunto. Oepto, de Medicina Veterinária. UFRPE.
faces anterior e posterior da terceira pálpe-bra (PENTLARGE, 1996). Constitui-se de epitélio não queratinizado e por uma subs-tância própria a qual possui uma camada glandular e outra fibrosa. As células calici-formes de seu epitélio são produtoras de muco, o que contribui para o filme lacrimal pré-ocular. Possui imunoglobulinas para defesa local e captura material estranho e residuos (MOORE, 1998).
A conjuntiva desempenha um papel im-portante na dinâmica da lágrima, proteção imunológica do olho, movimento ocular e cicatrização corneana (GALERA et ai., 2000 a).
E
exposta continuamente a agentes in-fecciosos como virus, bactérias e fungos. Assim, o saco conjuntival geralmente não é estéril (STADES et aI., 1999).Em todos os animais existe uma micro-biota bacteriana conjuntival. Acredita-se que esses microrganismos exerçam papel na manutenção da saúde ocular prevenindo o desenvolvimento de organismos potencial-mente patogénicos. Alterações na microbio-ta, principalmente após o uso prolongado de antimicrobianos tópicos, favorecem a infec-ção por organismos oportunistas, resultan-do em afecções corneanas ou conjuntivais (DAVIDSON et aI., 1994). A população micro-biana normal da superficie ocular interfere com a invasão de organismos patogénicos, privando-os de nutrientes e secretando subs-tâncias com propriedades antibióticas (HSU eWISEMAN, 1967; FREDERICKSON,1977). O conhecimento das bactérias que com-põem a microbiota conjuntival normal é im-prescindível para o diagnóstico e para a con-duta terapéutica adequada, pois é elevado o número de alterações oculares causadas por bactérias. Adicionalmente, são restritos os trabalhos enfocando o estudo da micro-biota conjuntival em animais silvestres.
Embora as mucosas sejam mais deli-cadas que a pele, também se constituem em barreiras mecânicas apresentando mecanismos e produção de substâncias quimicas contra a invasão de microrganis-mos. A mucosa conjuntival, nasal e bucal produzem a lisozima, enzima capaz de cin-dir a camada mucopeptídica da parede
ce-lular de determinadas bactérias (CORREA e CORREA, 1992).
A lágrima (filme lacrimal) é composta por trés camadas: a superficial, a mediana e a profunda. A camada oleosa superficial, muito fina, é derivada principalmente das glândulas tarsais (ou de Zeís). Diminui a taxa de evaporação e previne o transbor-damento de lágrimas sobre a face. A ca-mada fluida mediana é a principal porção do filme lacrimal e, na maioria dos animais domésticos, é derivada principalmente da glândula lacrimal orbital (61 %), da glândula da terceira pálpebra (35%) e das glândulas acessórias (3%). A camada mucosa pro-funda é secretada pelas células calicifor-mes (ou de Globet) do epitélio da conjunti-va palpebral e fórnice.
E
distríbuida sobre a superficie corneana pelos movimentos de piscar, possibilitando que a porção aquosa (mediana) se distribua uniformemente, mantendo a umidade normal da córnea (McEWEN et aI., 1958; EICHENBAUM et aI., 1987; RANZANI, 2000).Bistner et aI. (1969) coletaram amos-tras da conjuntiva de cães sadios, através de swabs estéreis umedecidos, isolando as seguintes bactérias: Staphy/ococcus au-reus, Staphy/ococcus epidermidis, Strep-tococcus spp, Bacillus sp, Neisseria spp, Moraxelfa spp e Pseudomonas spp.
Urban et aI. (1972), utilizando swabs se-cos, coletaram amostras do saco conjunti-vai de 150 cães clinicamente sadios, dos quais 137 amostras foram positivas para as seguintes bactérias: Staphy/ococcus epidermidis (55%), Staphy/ococcus aureus (45%), Streptococcus á-hemolitico (34%), Diphtheroids (30%), Neisseria spp (26%), Pseudomonas spp (14%), Streptococcus não hemolitico (12%), e Streptococcus â-hemolitico. Outros organismos foram iso-lados com baixa freqüéncia. Em 8,7% das amostras não foi observado isolamento bacteriano.
Mcdonaid e Watson (1976) coletaram amostras de um dos sacos conjuntivais de 100 cães, sem enriquecimento prévio. A maioria das bactérias isoladas foram Gram-positivas, das quais Staphy/ococcus sp,
Bacillusspp e Corynebacterium spp ocor-reram em mais de 75% do total dos isola-dos. Bactérias Gram-negativas compreen-deram 8,4% do total. Somente uma linha-gem de C/ostridium sp foi isolada.
Costa et aI. (1989), utilizando swabs secos, isolaram bactérias de ambos os olhos de cães clinicamente sadios. As bac-térias freqüentemente isoladas foram: Sta-phy/ococcus aureus(24,7%), Staphy/ococ-cus intermedius(15,29%), Escherichia coli (8,23%), Streptococcus spp (7%) e Sta-phy/ococcus epidermidis (5,8%). Não hou-ve crescimento bacteriano em 11,76% dos 70 cães estudados.
Em estudo da microbiota conjuntiva I de macacos Bugiu (Alouatta caraya) clinica-mente saudáveis, foram colhidas amostras dos dois olhos de quatro animais, machos e fémeas, isolando-se apenas bactérias Gram-negativas (GALERA, 2000a).
A partir de amostras coletadas dos dois olhos de oito macacos-prego (Cebus apel/a), machos e fêmeas, clinicamente saudáveis, foram encontradas apenas bac-térias Gram-negativas, isolando-se Proteus manganel/a em ambos os olhos de um mesmo animal e K/ebsiel/a sp nos olhos direitos de dois animais e no olho esquerdo de um animal (GALERA, 2000 b).
No presente estudo o objetivo foi avaliar a microbiota aeróbia conjuntival de raposas clinicamente saudáveis, provenientes do Hõrto Zõo Botânico de Dois Irmãos, Reci-fe, Pernambuco.
MATERIAL E MÉTODOS
Foram utilizadas quatro raposas, clini-camente saudáveis ao exame oftálmico, pertencentes ao Hõrto Zõo Botânico de Dois Irmãos - Recife/PE, das quais foram cole-tadas amostras utilizando swabs estéreis, pressionando-os levemente com movimen-tos rotatórios em ambos os sacos conjun-tivais inferiores de cada olho.
• Oxoid, Brain Heart Inlusion. , Oxoid, Blood Agar Base.
• Oxoid, Levine Eosin Methylene - Btue Agar.
Os swabs foram encaminhados, sob refrigeração (4-8°C), ao Laboratório de Doenças Infecciosas da Universidade Fe-derai Rural de Pernambuco para cultura microbiana inoculados em tubos contendo caldo BHI' e incubados em condições de aerobiose, a 37° C, por 24 horas. Após a turvação nos tubos, realizou-se o plaquea-menta em ágar-sangue ovino (8%)' e ágar Levine', mantidos em aerobiose, a 37' C, por 48 horas.
Os microrganismos isolados foram classificados segundo caracteristicas morfo-tintoriais, bioquímicas e de cultivo (CARTER, 1988).
Os dados relativos ás freqüências de bactérias isoladas dos sacos conjuntivais das raposas foram registrados em proto-colos individuais e submetidos, posterior-mente, á estatisticas descritas básicas (SAMPAIO, 1998).
RESULTADOS
Em todas as amostras conjuntivais hou-ve crescimento bacteriano (Tabela 1), com predominio de bactérias Gram-negativas. Resultado semelhante foi obtido por Sousa (2001) em cães que viviam em canis e ti-nham maior cantata com o solo e ambien-te exambien-terno, e por Galera et aI. (2000a, b) estudando a microbiota conjuntival de A/ouatta caraya e Cebus apel/a, respecti-vamente. Tal fato poderia ser justificado pelo hábito de cavar destes canídeos, facilitan-do a infecção por enterobactérias facilitan-do ambi-ente. Bistner et aI. (1969), Urban et aI. (1972), Mcdonald e Watson (1976), Costa et aI. (1989) e Sousa (2001) isolaram bac-térias Gram-positivas com maior freqüên-cia do que Gram-negativas, em estudos similares. Estes resultados podem ser atri-buídos á diferença de ambiente e hábitos dos animais doméstícos, comparativamen-te ás raposas, visto que a microbiota da pele e conjuntivas dos animais é
Tabela 1 - Ocorrência de bactérias isoladas dos sacos conjuntivais de raposas (Cerdo-cyon thous azarae), do Hôrto Zoo Botânico de Dois Irmâos, Recife, Pernam-buco,2001 Microrganismos Escherichia coli Bacil/us spp K/ebsiel/a spp Bastonetes Gram-negativos' Staphy/ococcus coagu/ase(+) TOTAL II não identificados Número 8 7 4 2 1 22 Freqüência % 36,4 31,8 18,2 9,1 4,5 100,0
da intensamente pelos gêneros Staphy/o-coccus e StreptoStaphy/o-coccus, ambos Gram-po-sitivos.
CONSIDERAÇÕES FINAIS
Os resultados do presente estudo são de suma importância para espécies silves-tres, dada a escassez de dados desta natu-reza, principalmente no que se refere ao tra-tamento e controle de afecções oculares.
Sugere-se que outros estudos sejam conduzidos com maior número de animais enfocando a microflora aeróbia e anaeró-bia conjuntiva I de raposas, assim como tes-tes de sensibilidade antimicrobianain vitro
para as bactérias isoladas, visando respal-dos â instituição da terapia em afecções oculares na espécie.
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