Biofar, Rev. Biol. Farm. Campina Grande/PB, v. 9, n. 1, p. 13-17, março/maio, 2013
Revista de Biologia e Farmácia. Universidade Estadual da Paraíba. Centro de Ciências Biológicas e da Saúde.
ESTUDO COMPARATIVO DE DOIS MÉTODOS DE EXTRAÇÃO DE DNA GENÔMICO DO PEQUI (Caryocar coriaceum Wittm.)
Isaac Farias Cansanção
1, Henrique Douglas Melo Coutinho
2
RESUMO - Caryocar coriaceum Wittm. (pequi) é uma espécie abundante Floresta Nacional do Araripe (FLONA). O fruto apresenta altas concentrações de vitaminas A, B1, B2, C e E, óleo e proteínas, além de propriedades amplamente utilizadas na medicina popular. Este trabalho visou comparar dois protocolos de extração de DNA. No primeiro procedimento, o isolamento do DNA foi realizado com a maceração de folhas jovens utilizando o N
2líquido por meio do CTAB 2%.
Para o segundo protocolo, folhas jovens foram submetidas a uma maceração em liquidificador doméstico utilizando tampão de extração com proporções específicas para sua homogeneização.
Estas amostras foram quantificadas e analisadas quanto à quantidade do DNA obtido. Uma maior concentração de DNA foi observada nas amostras extraídas por maceração mecânica. A partir destes dados obtidos, o procedimento dois demonstrou ser mais simples e de menor custo, favorecendo assim seu uso laboratorial.
Unitermos: genômico, espectrofotometria, lise mecânica, CTAB.
COMPARISON BETWEEN TWO METHODS OF GENOMIC DNA EXTRACTION FROM PEQUI (Caryocar coriaceum Wittm.)
ABSTRACT - Caryocar coriaceum Wittm. (pequi) is a common plant found on the National Forest of Araripe (FLONA). The fruit presents a high content of vitamins A, B1, B2, C and E; fixed oil and proteins, being also used on the folk medicine due its biological activities. The aim of this work was compare two different protocols of DNA extraction. On the protocol 1, the DNA was isolated from young leaves macerated using liquid nitrogen and CTAB 2%. On the protocol 2, the same kinds of leaves were disrupted using a domestic blender for a mechanical lysis and homogenized with extraction buffer. The two samples were quantified and analyzed to verify the DNA quality.
Best quality and higher concentrations of DNA were observed from the protocol 2. Due this results, the protocol 2 shows to combine low costs and simplicity, being a possible method to be used on laboratories and as didactic resource on the schools.
Uniterms: genomic, spectrophotometry, mechanical lysis, CTAB.
INTRODUÇÃO
O gênero Caryocar é autóctone e ocorrente em diversas regiões do Brasil (Macedo, 2005).
Algumas espécies são encontradas em savanas, vegetação semelhante ao cerrado Brasileiro, estando presente desde a Costa Rica até o Paraguai (Franco et al., 2004). Caryocar coriaceum Wittm.
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Biólogo, Mestre em Genética, Universidade Federal do Vale do São Francisco - UNIVASF, Departamento de Ciências da Natureza, São Raimundo Nonato – PI, Brasil (isaac.farias@gmail.com);
2Biólogo, Doutor em Farmacologia, Universidade Regional do Cariri - URCA, Departamento de Química Biológica, Crato – CE, Brasil
(hdmcoutinho@gmail.com ).
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