OBJETIVOS:
1. Quais as principais necessidades metabólicas dos organismos e sua importância?
2. Diferencie AUTÓTROFICOS de HETEROTRÓFICOS.
3. Diferencie fotolitotróficos, fotorganotróficos, quimiolitotróficos e quimiorganotróficos.
4. Diferencie RESPIRAÇÃO de FERMENTAÇÃO; RESPIRAÇÃO AERÓBICA de ANAERÓBICA.
5. Fale sobre metabolismo (Diferencie anabolismo de catabolismo) 6. Qual a importância da via Glicolítica de EMBDEM MEYERHOFF.
7. Descreva etapa por etapa a via Glicolítica de EMBDEM MEYERHOFF indicando as enzimas de regulação e a ação dos reguladores.
8. Indique os principais caminhos do piruvato.
9. Dê a importância para a célula do ciclo de Krebs e seus pontos de regulação. 10.Quais as reações envolvidas no ciclo de Krebs, destaque aquelas em que há
produção de NADH, FADH2, GTP.
11.Dê a importância industrial da via glicolítica e do ciclo de Krebs.
12.Dê a importância, para a célula, da Cadeia transportadora de elétrons e como ela pode ser inibida.
13.Descreva etapa por etapa a Lançadeira de Elétrons, também conhecida como Lançadeira Glicerol-Fosfato, e sua importância no balanço energético para a célula.
14.Balanço energético para a célula de Sccharomyces cerevisiae , em condições
METABOLISMO
MEIOS
NUTRITIVOS
CÉLULA
PRODUTOS
BIOTECNÓLOGO
ENERGIA
ALIMENTOS
BEBIDAS
BIOPIGMENTOS
FÁRMACOS
Antibióticos
Vitaminas
Anti-ácidos
Quimioterápicos
Hormônios
CONSERVANTES
CARACTERÍSTICAS MICROBIANAS
A CÉLULA
PROCARIOTAS X EUCARIOTAS
EUBACTÉRIAS
Archaeabacterias
PROCARIOTAS
BACTÉRIAS
Características :
Envoltório celular : peptideoglicano
Reprodução: principal fissão binária
Algumas apresentam movimentos: flagelos
Podem ser: Gram (+) ou Gram (-)
EUCARIOTAS
São :
Fungos (
Aspergillus, Peniclilium
)
Leveduras(Ca
ndida; Sacharomyces
)
Protozoários (amebas)
Algas (são fotos-sintéticos; parede celular:
celulose)
METABOLISMO - INTRODUÇÃO
Biotecnologia:
Aplicação de processos biotecnológicos desenvolvidos porcélulas animais ou vegetais ou microbianas ou parte destas, entre elas, as enzimas.
Engenharia BIOQuímica tem como finalidade:
Obter bens e serviços de processos biológicos
Otimizar esses processos tornando-os economicamente viáveis
Projetar a planta industrial levando em conta
Substratos e produtos a serem obtidos
condições do processo: aeróbio ou anaeróbio, pH,
Temperatura ....,
Biorreatores
Com ou sem agitação
material de construção
Controle e automação
Planta de recuperação (caríssima)
BIORREATOR NATURAl: A CÉLULA
O homem imita as diferentes condições fisiológicas da célula, através do conhecimento
do seu metabolismo, dando condições para que a mesma “trabalhe” a seu favor. Essas
condições podem ser favoráveis a célula ou estressantes, no entanto tanto em uma condição quanto em outra a célula pode produzir bens economicamente viáveis.
Célula
Produz novas células
Libera produtos
Durante o crescimento Após fase estacionária
(Fase exponencial)
Fase estacionária
A biotecnologia busca explorar os princípios básicos de sobrevivência
e manutenção da(s) espécie(s) obtendo bens:
Etanol
Solventes
Vitaminas
Antibióticos
Fármacos e/ou Quimioterápicos
Recuperação de áreas poluídas
METABOLISMO
Conjunto de processos bioquímicos que absorve nutrientes do meio
ambiente produzindo energia e pequenas moléculas (
catabolismo
)
que serão transformados em “energia celular”, novas moléculas,
material celular (
anabolismo
).
Meio ambiente
Células
Produtos
Observa obtém
BIOTECNÓLOGO
Microrganismos
Qualquer ser 100m = 0,1mm (resolução do olho humano)
Historicamente são considerados “microbiologia” fungos,
leveduras e bactérias
Características
Bactérias
. Aeróbias ou anaeróbias
. Procarióticas
. Gram (
+)
ou (-)
. Morfologia variável
Fungos
. Aeróbios
. Eucarióticas
Leveduras
. Aeróbios ou anaeróbios
. Eucarióticas
. Morfologia variável
Metabolismo microbiano
Fontes de carbono: Heterotróficos, Autotróficos, Metanotrófico
Fontes de energia: A partir de nutrientes (Quimiotróficos) ou de energia luminosa (fototróficos)
Com relação ao mecanismo produtor de energia para a célula:
Fermentativo –sem uso da cadeia respiratória, no citosol celular Respiratório:
Aeróbio –O2 como aceptor de elétrons na cadeia respiratória
Anaeróbio- NO3 ou NO2 ou SO4 ou SO3 como aceptor de elétrons
na cadeia respiratória
Linhas gerais:
Nutrientes:
Carbohidratos, CO2,
proteínas, lipídios (Energia)
Proteínas, polissacarídeos, lipídios,
Ac. nucleicos
Catabolismo ATP,NADH, NADPH
Anabolismo
Produtos
(aminoácidos, por exemplo) CO2, H2O, NH3
(Energia )
Precursores
Aminoácidos, Ac. graxos,Butanodiol (
Enterobacter)
Etanol(Leveduras, bactérias)
PIRUVATO
LACTATO (
Leconostoc
)
Acetato, Butanol(
Clostridium
)
O processo metabólico utiliza várias fontes de carbono,
consideremos a glicose como modelo através da via
metabólica de Embden-Meyerhof-Parmas (Via glicolítica)
Via glicolítica:
Local: citosol celular
Finalidade: transformar as ligações C-H em energia útil à
célula (ATP)
Gerar poder redutor(NADH/NADPH)
Glicólise ou via Glicolítica
A Glicólise constitui a seqüência de reações nas quais a glicose é desdobrada anaerobicamente a piruvato e a partir deste, a lactato ou Etanol, com produção de ATP. Esta via ocorre no citosol celular.
Em organismos aeróbios Eucariotas, a via glicolítica fornece o piruvato que é descarboxilado nas mitocôndrias, onde através do ciclo de Krebs e cadeia transportadora de elétrons completa a oxidação do mesmo a CO2 e H2O.
Em organismos aeróbios Procariotas, a via glicolítica fornece o piruvato que é descarboxilado na membrana citoplasmática, onde através do ciclo de Krebs e cadeia transportadora de eletrons completa a oxidação do mesmo a CO2 e H2O.
A combustão total de glicose possui 2 etapas:
1ª Etapa: Glicólise
Glicose Piruvato
Local: citoplasma celular
Aldolase;5-Triosefosfatoisomerase;6-Gliceraldeído-3- Uma vez o piruvato formado, pode seguir diferentes caminhos para a formação de energia metabólica, aqui vamos estudar apenas 3 desses destinos:
1- Produção de etanol
1-piruvato descarboxilase; 2 –alcool desidrogenase
2- Produção de ácido Láctico:
(3)-lactato desidrogenase
Como a conversão de piruvato a etanol ou ácido láctico se dá em condições anaeróbicas, no citosol celular, muito mais energia será obtida quando o piruvato segue para a mitocôndria onde é descarboxilado:
3- Oxidação do Piruvato
Transferência do Piruvato para a mitocôndria (eucariotas*) onde será descarboxilado, ou melhor, oxidado a CO2 e os hidrogênios transferidos a
cadeia transportadora de elétrons. Esta constitui a 2ªetapa do metabolismo da glicose.
* No caso de Procariotas o processo ocorre na membrana interna do citosol
1 2
2ª Etapa: Condições Aeróbicas
Local: Mitocôndria Função:
Oxidar o acetil proveniente do piruvato a CO2
Liberar elétrons na forma de NADH e FADH2 que seguirão para a cadeia
transportadora de elétrons ou cadeia respiratória
Descarboxilação do piruvato
Local: ocorre na matriz mitocondrial.
(4): Complexo piruvato desidrogenase.
O acetil-CoA entra no ciclo de Krebs liberando a CoA e condensando-se com o oxaloacetato para formar o ácido cítrico, dando início ao ciclo de Krebs, ou ciclo do ácido cítrico ou ainda, ciclo do ácido tricarboxilico.
CO2
Piruvato ACETIL
CoA
1ATP 1ATP 1ATP
1FADH2 3NADH 1GTP 1ATP 2CO2 Ciclo de Krebs
Cadeia transportadora de elétrons ou cadeia respiratória
O controle Alostérico do ciclo são:
ATP inibe alostericamente a enzima citrato sintetase;
É estimulada alostericamente pelo ADP;
Inibida pelo produto succinil CoA e NADH.
Cadeia transportadora de elétrons
O NADH e FADH
2formados na Glicólise, oxidação
de ácidos graxos e ciclo do ácido cítrico são ricos em
energia porque possuem um par de elétrons com alto
poder de transferência. Quando esses elétrons são
entregues ao oxigênio molecular, uma grande
quantidade de energia é liberada que é usada para
produzir ATP.
A fosfolilação oxidativa consiste na produção de
ATP quando os elétrons vindos do NADH e FADH
2são transportados através de uma série de
carreadores até O
2. A fosforilação oxidativa ocorre
na membrana interna das mitocôndrias em
organismos eucarióticos aeróbicos ou anaeróbicos
facultativos;
No caso de microorganismos procarióticos
aeróbicos o sistema citocromo ou de transporte de
elétrons se encontra na membrana celular e nem
sempre é completo;
Numa célula eucariótica aeróbica a produção
Oxidação completa da glicose
Fornece
36
ATP,
considerando
1NADH
produzindo 3ATP e 1FADH
2. Aqui vale lembrar
que o NADH produzido no citoplasma entra na
mitocôndria através da lançadeira de eletrons.
GLICOSE +O
2
6H
2O + 6CO
2+ x ATP
X
VARIÁVEL DE ACORDO COM OS
MICRORGANISMOS (apresentarem cadeia
transportadora de e
-completa ou não )
Lançadeira de elétrons
As mitocôndrias são impermeáveis ao NADH e
NAD
+citoplasmático, assim os elétrons do NADH
são transportados através da mitocôndria usando-se
como carreador o glicerol-3-fosfato, que atravessa
a mesma, onde é oxidado a didroxiacetona fosfato
pelo FAD reduzido a FADH
2, que entrega os
Lançadeira de elétrons
CH
2OH CH
2OH
│ │
C=O H-C-OH
│ │
CH
2─O─PO
3CH
2─O─PO
3Diidroxicetona Glicerol Fosfato Fosfato
CITOSOL CELULAR
---
MITOCONDRIA CELULAR
CH
2OH CH
2OH
│ │
C=O H-C-OH
│ │
CH
2─O─PO
3CH
2─O─PO
3Diidroxicetona Glicerol Fosfato Fosfato
CADEIA
TRANSPORTADORA DE ELETRONS
NADH + H+
NAD+ NAD+
FAD+
NAD+