IMUNIZAÇÃO DE CAMUNDONGOS COM «VACINA» VIVA AVI- RULENTA DO TRYPANOSOM A CRUZI III VARIAÇÃO DO MEIO DE CULTURA

(1)

IMUNIZAÇÃO DE CAM UNDONGOS COM «VACINA» VIVA AVI-

RULENTA DO TRY PA N O SO M A CRUZI

III — VARIAÇÃO DO MEIO DE CULTURA

H um berto M enezes * e R osa D. R. A lbuquerque **

Os a u to re s d e m o n s tr a m a tr a v é s de te s te s e m c a m u n d o n g o s q u e va r ia n d o

o m eio d e c u ltiv o a a v ir u lê n c ia d a ce p a Y , c u ltiv a d a , do T ry p a n o s o m a c ru z i se c o n serv a in a lte ra d a .

D ia n te da p o ssib ilid a d e d e que se tr a te de u m m u ta n te da m e s m a lin h a  g e m Y v ir u le n ta , m a n tid a e m a n im a is, su g e re m a d esig n a çã o d e PF (P edreira de F re ita s) p a ra essa n o v a cepa.

INTR OD U ÇÃ O

A d m itin d o -s e que os p ro cesso s de t r a n sição, no ciclo v ita l dos tr ip a n o s o m a s , e n vo lv am a lg u m a fa se ou fa se s c r ític a s t e r - m o se n sív e is q u e p o ssa m se r in d u z id a s po r m o d ific a ç õ e s do m eio n u tr ie n te (12) e que vário s f a to r e s lig a d o s ao m eio de c u ltu r a in flu e n c ie m a in fe c tiv id a d e de fo rm a s de c u ltu r a (3), p ro p u s e m o -n o s v e r if ic a r o c o m p o rta m e n to d a a v iru lê n c ia d a c e p a Y, m a n tid a em c u ltu r a em d if e r e n te s m eios.

M A TERIA L E M ÉTODOS

U tiliza m o s a c e p a Y, iso la d a p o r S ilva & N ussenzw eig (11), sob a su a fo rm a av i- r u le n t a d e s c rita p o r u m de n ó s (4, 5 ).

E ssa c e p a do T ry p a n o so m a cruzi, a lé m do cu ltiv o e m m eio sólido de P a c k - c h a n ia n (1 0 ), foi ta m b é m c u ltiv a d a n os m e io s líq u id o s de W a rre n (13) e de N õl- le r (9). Nos dois p rim e iro s , os re p iq u e s fo ra m fe ito s c a d a 15 d ia s e no ú ltim o c a d a 8 dias. As c u l tu r a s f o ra m m a n tid a s à te m p e r a t u r a a m b ie n te que e m R ib e irã o P rê to v a rio u de 10,5°C a 42,0°C. As e x p e riê n c ia s fo ra m c o n d u z id a s n a s é p o c as de m a io r e d e m e n o r elev a çã o t é r m ica.

As c u ltu r a s com 20 a 25 dias, n o m eio de P a c k c h a n ia n , com 15 d ia s no de W a r re n e com 8 d ia s no de N o lle r f o ra m c e n tr if u g a d a s e la v a d a s v á r ia s vêzes em so lu ç ão sa lin a , a té se o b te r u m s o b r e n a d a n - te lím pido.

A c o n c e n tra ç ã o f in a l dos trip a n o s o m a s

v a rio u de 2,5 x 101’» a 5 x 10s p a r a s ita s p o r m l. O p e r c e n tu a l de fo rm a s m e ta c íc lic a s foi de a p ro x im a d a m e n te 5 p o r c e n to n o m eio de W a rre n , 2,5 p o r c e n to n o de N oller e de c ê rc a de 10 p o r c e n to n o de P a c k c h a n ia n .

As “v a c in a s ” fo ra m u tiliz a d a s logo após o seu p r e p a ro e tin h a m se m p re fo rm a s vivas, c u ja p e rc e n ta g e m v a rio u d e 50 a 90 p o r ce n to . As e x p e riê n c ia s fo ra m c o n d u z id a s em c a m u n d o n g o s a lb in o s d e u m a m e sm a li n h a g e m , m a n tid a h á 16 a n o s n o B io tério d a F a c u ld a d e de M e d icin a de R ib e irã o P rê to . Os a n im a is e r a m to d o s do sexo m a s cu lin o e p e s a v a m , no in íc io d a e x p e rim e n ta ç ã o , 10 g, em m é d ia. (* ) U .S .P. D e p a r t a m e n t o d e P a t o l o g i a . F a c u l d a d e d e M e d ic in a d e R i b e i r ã o P r ê t o , Sã o P a u l o , B r a s i l . (* * ; D e p a r t a m e n t o d e C i ê n c i a s B io ló g ic a s . F a e . F a r . O d o n t . R i b e i r ã o .P rêt o. R e c e b i d o p a r a p u b l i c a ç ã o e m 29-10-69.

(2)

70 Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

Vol. IV — N'-' 2

F o ra m u tiliz a d o s 156 ca m u n d o n g o s, d i vididos em 4 gru p o s.

No p rim e iro g ru p o h a v ia 36 a n im a is que f o ra m “v a c in a d o s p o r v ia s u b c u tâ n e a com 0,2 m l d a “v a c in a ” p r e p a r a d a em m eio de P a c k c h a n ia n . Com a “v a c in a ” de W a r re n fo ra m im u n iz a d o s 22 c a m u n d o n g o s e com a do m eio de N o lle r 19. Q u a tro s e m a n a s após, to d o s os a n i m a is “v a c in a d o s ” e m a is 79 o u tro s, to m a dos com o c o n tro les, f o ra m in o c u la d o s com trip a n o s o m a s d a c e p a Y, v ir u le n ta , do T r y -

p a n o so m a cruzi. m a n tid a em c a m u n d o n 

gos.

O in ó cu lo foi o m e sm o p a r a to d o s os a n im a is, i.e., 5.000 p a r a s ita s p o r g r a m a de pêso c o rp o ral.

A n te s d a in fe c ç ã o v ir u le n ta foi fe ito x e n o d ia g n ó stic o e m 10 dos c a m u n d o n g o s im u n iz a d o s com a “ v a c in a ” do m eio de N oller e em 8 dos do m eio de W a rre n .

C inco n in f a s de R h o d n iu s p ro lix u s fo  r a m a p lic a d a s a c a d a a n im a l do p rim e iro g ru p o e cinco n in f a s de R h o d n iu s n e g le c - tu s a c a d a u m dos 8 a n im a is do se g u n d o g ru p o . T odos os tria to m ín e o s se m o s t r a r a m ise n to s d e trip a n o s o m a s q u a n d o fo r a m e x a m in a d o s 30 d ia s depois. P a r a s ite m ia s dos c a m u n d o n g o s in f e c ta dos fo ra m r e a liz a d a s se g u n d o a té c n ic a de P iz z i-B re n e r (1 ), nos 8.°, 15.° e 30.° d ia s a p ó s a in o c u la ç ã o . Os p e r c e n tu a is de m o r ta lid a d e f o ra m re fe rid o s a e ssa s d a ta s e a s e x p e riê n c ia s f o r a m c o n s id e r a d a s e n c e r r a d a s no 30.° dia, e m b o ra , em a lg u n s casos, os a n im a is t i vessem sido o b se rv a d o s a té 90 dias, se m m o d ific aç õ es nos re su lta d o s.

RESULTADOS

A T a b e la 1 e os G rá fic o s I e I I r e s u m e m os d a d o s o btidos.

E v id e n c ia -s e pelos m e sm o s u m a n íitd a e f o rte p ro te ç ã o , c o n fe rid a s p e la s 3 v a c i

n a s que n ã o d ife re m s ig n ific a tiv a m e n te e n tr e si.

O n e r c e n tu a l de m o rta lid a d e foi in s ig n if ic a n te e n t r e os a n im a is im u n iza d o s Q l p o r ce n to , 4 p o r c e n to e 0 p o r ce n to ) m a s em c o n tra p o s iç ã o m o s tro u -s e e x tr e m a m e n te elevado (81 p o r c e n to ) e n tre os a n im a is co n tro les.

D ISCU SSÃO E CONCLUSÕES

U m de nós (6. 7) já d e m o n s tro u que em h o sp e d e iro s v e rte b ra d o s, a f o rm a a v i- r u le n t a do T r y p a n o s o m a c ru zi co n se rv a su a a v iru lê n c ia , a d esp eito dos v á rio s m eios em p re g a d o s, s e ja p a r a d im in u ir a r e s is tê n c ia do h o sp e d e iro s, s e ja p a r a e x a c e r

b a r a v iru lê n c ia do flag e lad o .

M o n te iro (8 > co n seg u iu d e m o n s tr a r que ta m b é m no h o sp e d e iro in v e rte b r a d o o tr ip a n o s o m a d a c e p a a v ir u le n ta n ã o é c a p a z de r e to r n a r à s u a p r im itiv a v ir u lê n cia p a r a c a m u n d o n g o s.

Com o p r e s e n te tr a b a lh o v e rific a m o s que, pelo m e n o s com os m eios de c u ltu r a e m p re g a d o s, a a v iru lê n c ia do tr ip a n o s o m a se m a n té m in a lte ra d a , q u a n d o se fa z v a r i a r o m eio n u tr ie n te .

E m b o ra n o s f a lte m e s tu d o s c ito -g e n é ti- cos, e s ta m o s c a d a vez m a is in c lin a d o s a a d m itir que a c e p a c u ltiv a d a , com a q u a l te m o s tr a b a lh a d o , r e p r e s e n ta u m m u t a n te d a c e p a Y q u e a té h o je se te m m a n tid o a l ta m e n te v iru le n ta , p o r su c essiv as p a s s a gens, em c a m u n d o n g o s.

D êsse m odo e caso essa su p o sição se v e ja c o n f irm a d a p o r e s tu d o s la b o ra to ria is a d e q u a d o s , ju lg a m o s ju s to c o n s id e ra r a c e p a a v iru le n ta com o u m a n o v a lin h a g e m p a r a a q u a l su g e rim o s d esd e logo a d e s ig n a ç ã o P F em h o m e n a g e m a P e d r e ir a de F re ita s (2 ), que c h e fio u a eq u ip e que e s tu d o u a p a c ie n te de qu em a c e p a Y foi iso la d a .

S U M M A R Y

T h e a u th o r s th r o u g h e x p p e r im e n ts in m ic e h a v e d e m o n s tr a te d t h a t th e a v iru le n c e o f th e Y s tr a in o f T. cruzi, d escrib e d b y one o f th e m (H.M .) r e m a m u n a lte r e d i f th e c u ltu r e m é d iu m is c h a n g e d .

A c c e p tin g t h a t th e r e are s tr o n g e v id e n c e s t h a t s u c h s tr a in r e p re se n ts a m u t a n t o f t h e v ir u le n t Y s tr a in , k e p t in m ic e , th e a u th o r s su g g e st th e d e s ig n a tio n P F fo r th e n e w s tr a in , as a n h o m a g e to th e la te P ed reira d e F reita s w h o ã isc o ve red a n d e x a m in e d t h e ja p a n e s e p a tie n t fr o m w h o m th e Y str a in o f t h e T ry p a n o s o m a c ru z i w a s iso la ted .

(3)

EM 5 m m J O E S A N G U E

M arço/Abril, 1970

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

71

G R A F I C O t - A - À ' A - V A C . M E I O ^ A C K C H A N I A N ■ ■ M m V A C- M E i 0 W A R R E N ... V A C . M E i 0 N Ô L L E R — C O N T R O L E S 1 5 0 Í A S A P 0*S I N F E C Ç Ã O 3 0

(4)

T A B E L A

M eio de c u ltu r a N ú m ero de

8.° d ia p ó s infec.

d a v a c in a

c a m u n

-dongos P a r a s ite m ia_{( m e d ia n a )} _{m o rte s}N.°

P a c k c h a n ia n 36 87 0

W a rre n 22 0 0

N oller 19 0 0

T o ta l de v a c in a d o s 77

(5)

1

15.° d ia pós in fec. 30.° dia pós in fec .

P a r a s ite m ia N.° P a r a s ite m ia N.° (m e d ia n a ) m o rte s (m e d ia n a ) m o rte s 4 0 2 0 1 35 0 0 0 0 0 0 2940 34 0 64

(6)

M arço/Abril, 1970

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

73

S S A F 1 . C 0 n LJ o ec a « 50 □ [ A S A P O S B I B L I O G

1. BRENER , Z. — C o n trib u iç ã o ao e s

tu d o d a te r a p ê u tic a e x p e r im e n ta l d a D o e n ç a de C h a g a s. T ese. F ac. F a rm . O d o n t. U niv. M in a s G erais, B elo H o riz o n te , 1961.

2. F R EITA S, J.L .P .; LION, M .F, & P A R -

TA RI, J.T.A . — R e s u lta d o s de u m a in v e s tig a ç ã o sô b re M o lé stia de C h a g as re a liz a d a n o M u n icíp io de M a rí- lia e o u tro s, com e s tu d o clín ic o de d ois ca so s a g u d o s d a d o en ç a. Rev. H osp. C lín ic as (S. P a u lo ). 8:81-92, 1953.

3. G EIG Y , R. & KAUFM ANN — O n th e in fe c tiv ity o f c u ltu re tr y p a n o s o m a of th e T . b ru c e i g ro u p . 8 '11 I n t. C ongre. T ro p . M e d . M a lá ria , T e h e ra n , 1968 ( A b s tra c ts R eview s, p á g . 324). 4. M ENEZES, H. — P ro te c tiv e e ff e c t oí

a n a v i r u l e n t (c u ltiv a te d ) s t r a í n of

T. c ru zi a g a in s t e x p e r im e n ta l in f e c -

tio n in m ice. Rev. I n s t. M ed. T ro p . S. P a u lo . 10:1-4, 1968. □ V A C . M E I O P A C K C H A N í A N § V A C . M E I O 'M A R R E N V A C . M E I O N C L L E R ■ C O N T R O L E S 33 í N F E C Ç A 0 R A F I A

5. M ENEZES, H. — A ctive im m u n iz a tio n

of dogs w ith a n o n a v iru le n t s tr a i n o f T ry p a n o so m a cruzi. R ev. In s t. M ed.

T ro p . S. P au lo . 11:258-263, 1969.

6. M ENEZES, H . — I — T h e a v iru le n c e

of th e c u ltiv a te d Y s t r a i n o f T r y p a 

n o so m a cruzi. Rev. I n s t. M ed. T rop.

S. P a u lo — No p relo .

7. M ENEZES, H. — I I — T h e a v iru le n c e

o f th e c u ltiv a te d Y s tr a i n o f T r y p a 

n o so m a cruzi. R ev. I n s t. M ed. T ro p .

S. P a u lo — No prelo. 8. M O N TEIR O , J.C . — A a v iru lê n c ia d a c e p a Y c u ltiv a d a , do T. c r u z i, no h o sp e d e iro in v e rte b ra d o . E m e la b o ra ç ã o . 9. NÕLLER, W. — B lu t u n d I n s e k te n - f la g e lla te n Z ü c h tu n g a u f P la tte n . Arc. S c h iffs. u. T ro p e n . Hyg. 21:53-

94, 1917.

10. PACKCHANIAN, A. — O n th e c u ltí-

v a tio n o f se v en sp e cie s of T r y p a n o -

so m e s in v itro . S cien ce. 80:407-408,

(7)

74 Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

Vol. IV —

2

11. SILVA, L.H.P. de C. & N U SSEN -

ZW EIG , V. — S ô b re u m a c e p a de

T. c ru zi a lta m e n te v ir u le n ta p a r a o

c a m u n d o n g o b ra n c o . F o lia. C lin. Biol. (S. P a u lo ) . 20:191-208, 1953.

12. SILVA, L.H. P E R E IR A ; & CAM AR

GO, E.P. — D if f e r e n tia tio n in th e

life cycle of try p a n o so m e s. Rev. I n s t. M ed. T ro p . S. P a u lo . 6:188-192, 1964.

13. W ARREN, L.G. — M e tab o lism of

S c h iz o try p a n u m cruzi. C h a g a s. I — E ff e c t o f c u ltu re a g e a n d e o n c e n - t r a t i o n o n r e s p ir a to ry r a te . J. P a - r a s it. 46:529-539, 1960.