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Prof. Natal Vello
www.genetica.esalq.usp.br/lgn313/nav [email protected]
LGN 313 Melhoramento Genético
Tema 13 Métodos de melhoramento de espécies autógamas: retrocruzamentos, híbridos comerciais, multilinhas
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P
1x P
2F
1x P
1( ou P
2)
F
2RC
1x P
1( ou P
2)
RC
2 ...RC
3RC
4RC
5RC
6Método dos retrocruzamentos
Híbridos comerciais
Multilinhas e blends
Melhoramento de espécies autógamas:
métodos que envolvem hibridação
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• Método eficiente para melhorar um ou poucos caracteres(defeitos) de uma cultivar elite. A cultivar elite participa de todas as gerações de retrocruzamentos, sendo denominada genitor recorrente. O
genitor que contém o alelo desejável é denominado genitor doador
e participa apenas do cruzamento inicial.
• Requisitos do genitor doador: expressão máxima do caráter de interesse e, se possível, bons caracteres agronômicos e
adaptativos.
• Em geral, são realizadas várias gerações de retrocruzamentos
com seleção para manter o(s) caracter(es) de interesse em todas as gerações.
• O resultado final é uma nova cultivar com o fenótipo muito
semelhante ao genitor recorrente, porém com o(s) defeito(s) corrigido(s).
• Atualmente, o método é muito usado para transferências de genes
exógenos (transgenes) entre as cultivares de uma espécie (p.ex. gene R de resistência ao herbicida glifosato em soja).
U S P , E S A LQ , L G N 31 3 -M E LH O R A M E N T O G E N É T IC O , P R O F . N A T A L A . V E LL O RETROCRUZAMENTOS ( RC ) P1 x P2
R : Recorrente D : Doador (genes importantes) F1 x P1 (1/2) R : (1/2) D RC1 x P1 (3/4) R : (1/4) D RC2 x P1 (7/8) R : (1/8) D RC3 x P1 (15/16) R : (1/16) D RC4 x P1 (31/32) R : (1/32) D RC5 x P1 (63/64) R : (1/64) D RC6 (127/128) R : (1/128) D RC6 = 99,22 % R : 0,78 % D + genes importantes
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RETROCRUZAMENTOS (RC) : TRANSFERÊNCIA DE UM GENE DOMINANTE (A)
Genitor recorrente ( GR ) x Genitor doador ( GD )
aa ( suscetível ) AA ( resistente ) F1 x GR Aa aa RC1 x GR (1/2)Aa : (1/2) aa aa RC2 x GR (1/2)Aa : (1/2)aa aa RC3 x GR (1/2)Aa : (1/2) aa aa RC4 x GR (1/2)Aa : (1/2)aa aa RC5 x GR (1/2)Aa : (1/2)aa aa RC6 (1/2)Aa : (1/2)aa (1/4) AA : (1/2)Aa : (1/4) aa x (1/4) AA : (1/2)Aa : (1/4) aa x PROGÊNIE ELIMINADA AA PROGÊNIE SELECIONADA
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RETROCRUZAMENTOS ( RC ) : TRANSFERÊNCIA DE UM GENE RECESSIVO ( b )
GR (BB) x GD(bb)
F1 (Bb) x GR(BB)
RC1 [ (1/2)BB : (1/2)Bb ]
Genitor recorrente ( GR ) = BB ( planta alta ) e Genitor doador ( GD ) = bb ( planta baixa )
RC1 F2 [BB e (1/4)BB : (1/2)Bb : (1/4)bb] x GR(BB) RC2 (Bb) x GR (BB) RC3 [(1/2)BB : (1/2)Bb] RC3 F2[BB e (1/4)BB : (1/2)Bb : (1/4)bb] x GR(BB) RC4 (Bb) x GR(BB) RC5 [(1/2)BB : (1/2)Bb] RC5F2[BB e (1/4)BB : (1/2)Bb : (1/4)bb] x GR(BB) continua
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RETROCRUZAMENTOS ( RC ) : TRANSFERÊNCIA DE UM GENE RECESSIVO ( b ) (continuação)
99,22% genes GR : 0,78 % genes GD + bb para planta baixa
RC6 F3(bb) Ξ Nova cultivar
RC5 F2 [BB e (1/4)BB : (1/2)Bb : (1/4)bb] x GR (BB)
RC6 Bb
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•
A “nova” cultivar já é conhecida e consagrada pelos
agricultores.
• Confere caracteres de excelência a genótipos já
excepcionais.
• É um método com alto nível de previsibilidade de
resultado, pois apenas o caráter em transferência
precisa ter herdabilidade alta.
• O programa de retrocruzamentos pode ser conduzido
fora da região e ou época de semeadura em que a
“nova” cultivar será utilizada.
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•
Tempo muito longo
para realizar todas as gerações de
retrocruzamentos, de maneira que frequentemente a
“nova” cultivar torna-se
obsoleta
quando comparada
com cultivares mais recentes desenvolvidas por outros
métodos de melhoramento.
•
É um método
muito trabalhoso
e mais adequado para
transferência de um ou poucos genes.
•
Quando a distância genética entre os genitores doador e
recorrente é muito grande, aumenta-se muito o trabalho,
exigindo etapas de
pré-melhoramento
(mais gerações de
retrocruzamentos e seleção) .
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• Em cada geração de retrocruzamento pode-se utilizar um
genitor recorrente diferente, a fim de se introduzir variabilidade genética, de maneira semelhante ao que foi anteriormente
relatado para o método da nobilização da cana - de - açúcar.
• Os diferentes genitores recorrentes compreendem diversas
cultivares elites geneticamente distintas.
• Neste caso, o método torna-se aplicável também para caracteres
com baixa herdabilidade, como por exemplo produtividade de grãos, mas a seleção torna-se mais trabalhosa.
• A nova cultivar obtida difere das cultivares elites anteriores.
Modificação 1 Uso de vários genitores recorrentes em programas de retrocruzamentos
U S P , E S A LQ , L G N 31 3 -M E LH O R A M E N T O G E N É T IC O , P R O F . N A T A L A . V E LL O • Sem marcadores:
6 gerações para recuperar 99% do genitor recorrente.
• Com marcadores :
2 a 3 gerações para introdução do caráter e recuperação do genitor recorrente.
Modificação 2 Uso de marcadores moleculares em programas de retrocruzamentos com seleção para os caracteres do genitor recorrente
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HÍBRIDOS COMERCIAIS EM AUTÓGAMAS
VANTAGENS
1. RAPIDEZ NA OBTENÇÃO DE GENÓTIPOS SUPERIORES
2. COMBINAÇÃO DE CARACTERES PRESENTES EM GENITORES DIFERENTES
3. EXPLORAÇÃO EFEITOS E INTERAÇÕES GÊNICAS QUE SÓ SE MANIFESTAM EM F1 4. UNIFORMIDADE
5. HOMEOSTASE DE DESENVOLVIMENTO E MENOR INFLUÊNCIA DA INTERAÇÃO G X E: LOCAIS, ANOS, ÉPOCAS DE CULTIVO
6. ESTIMULA O DESENVOLVIMENTO DE INDÚSTRIAS DE SEMENTES:
• SEGREDO DOS GENITORES ( PATENTE BIOLÓGICA)
• HÍBRIDO É UMA PALAVRA MÁGICA:
– GRANDE VALOR ENTRE OS AGRICULTORES
– MAIOR CONTATO DOS AGRICULTORES COM OS ENGºS AGRºS, OBTENDO
MAIS INFORMAÇÕES
KAUL, M.L.H., 1988. MALE STERILITY IN HIGHER PLANTS. BERLIN, SPRINGER – VERLAG. (MONOGRAPHS ON THEORETICAL AND APPLIED GENETICS, VOLUME 10). ≈ 1000pp.
U S P , E S A LQ , L G N 31 3 -M E LH O R A M E N T O G E N É T IC O , P R O F . N A T A L A . V E LL O HÍBRIDOS EM AUTÓGAMAS DESVANTAGENS
1. PREÇO DA SEMENTE HÍBRIDA
1.1 DIFICULDADE DE EMASCULAÇÃO
• MACHOESTERILIDADE: SORGO, ARROZ, TRIGO
• AUTOINCOMPATIBILIDADE: ESPÉCIES COM FLORES SEM NECTARINAS (TOMATE, FEIJÃO, ALFACE)
• GAMETICIDAS QUÍMICOS:
– HIDRAZIDA MALEICA, FW – 450 – ETHREL: CEREAIS
– ÁCIDO GIBERÉLICO: CEBOLA
– DCIB (SÓDIO 2,3 DICLOROISOBUTIRATO) – SÓDIO DICLOROACETATO
– PROBLEMAS: EFICIÊNCIA PARCIAL E EFEITOS TÓXICOS
1.2. TRANSFERÊNCIA OU TRANSPORTE DE PÓLEN
• ESTIGMAS EXPOSTOS: ARROZ
• ABERTURA FOLHA BANDEIRA (CORTE) E MOVIMENTO DE CORDA: ARROZ 1.3. Nº SEMENTES PRODUZIDAS POR POLINIZAÇÃO
2. INVIÁVEIS EM REGIÕES COM AGRICULTURA POUCO DESENVOLVIDA
- AMBIENTE PRECISA SER BOM / ÓTIMO
3. DIFICULDADE DE FAZER MELHORAMENTO PARA HETEROSE
- DIALELO SELEÇÃO PARA HETEROSE
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SISTEMA A, B, R DE MACHOESTERILIDADE : HÍBRIDOS DE SORGO, ARROZ E TRIGO
LINHAGENS GENITORAS OU HÍBRIDO CITOPLASMA NÚCLEO ( GENÓTIPOS PARA GENES RESTAURADORES ) FERTILIDADE DOS GRÃOS-DE-PÓLEN
LINHAGEM A MACHOESTÉRIL ms ms MACHOESTÉRIL
LINHAGEM B MACHO FÉRTIL ms ms MACHOFÉRTIL
LINHAGEM R
MACHO FÉRTIL OU
MACHOESTÉRIL
Ms Ms MACHOFÉRTIL
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SISTEMA A B R DE MACHOESTERILIDADE : HÍBRIDOS DE SORGO, ARROZ E TRIGO
Linhagem Restauradora = CF Ms Ms Linhagem Mantenedora = CF ms ms Linhagem Machoestéril = CE ms ms
DOIS LOTES ISOLADOS:
Lote 1: ♀ Linhagem A x ♂ Linhagem R
machoestéril macho - fértil
CE ms ms CF Ms Ms
sementes híbridas (agricultor)
CE Ms ms
Lote 2: ♀ Linhagem A x ♂ Linhagem B
machoestéril macho - fértil
CE ms ms CF ms ms Linhagem A machoestéril CE ms ms sementes colhidas em R R x R Linhagem R sementes colhidas em B B x B Linhagem B
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PREÇO DA SEMENTE HÍBRIDA F1 = f ( QUANTIDADE SEMENTES / PLANTA / ÁREA)
ESPÉCIE Q AUTOR
Secale cereale 15 Chase, 1971
Avena sativa 17 Chase, 1971
Triticum aestivum 21 Chase, 1971
Hordeum vulgare 24 Chase, 1971
Oryza sativa 31 Chase, 1971
Zea mays 377 Chase, 1971
Sorghum vulgare 430 Chase, 1971
Glycine max 18a Fehr, 1978
COMPRADAS SEMENTES QUANTIDADE PRODUZIDAS SEMENTES QUANTIDADE Q = a: SOJA Q = 36 (2005)
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Híbridos F
1
comerciais em tomateiro
Técnica
: cruzamentos manuais, usando os mesmos
equipamentos mostrados nas hibridações em
berinjela (
Tema 5: Sistemas Reprodutivos
).
Preço
das sementes híbridas é viabilizado por:
a) Flores grandes, de fácil manuseio, facilitando os
cruzamentos;
b) Número muito grande de sementes híbridas
obtidas em cada polinização.
Objetivo principal
: piramidização de genes
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Híbridos em tomateiro
Exemplo 1: híbrido Paty (Seminis, 2012)
Genitor 1 X verticilio (V1): gene Ve vírus do mosaico (TMV): genes Tm-1, Tm-2, Tm-3 Genitor 2 geminivirus (TYLCV): genes Ty1, Ty-2, Ty-3
F1
Hibrido comercial Paty
Resistente a 3 doenças
Verticilio (V1)
Vírus do mosaico (TMV) Geminivirus (TYLCV)
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Híbridos em tomateiro
Exemplo 2 :
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Híbridos em tomateiro
Exemplo 3
:U S P , E S A LQ , L G N 31 3 -M E LH O R A M E N T O G E N É T IC O , P R O F . N A T A L A . V E LL O
Leitura recomendada
DELLA VECCHIA, P.T.; KOCH, P.S.
Tomates longa vida: O que são, como foram desenvolvidos?
Horticultura Brasileira, Brasília, v. 18, n. 1, p. 3-4, março 2000.
•
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• São cultivares constituídas pela mistura de linhagens quase
isogênicas (isolinhas), que diferem entre si somente nos alelos de resistência a patógenos transportados pelo ar (mais comum:
ferrugem).
• Linhagens quase isogênicas ( ISOLINHAS ): obtidas por vários
programas de RC, tendo um genitor recorrente comum (constante) e vários genitores doadores (comumente, um para cada alelo de resistência).
• A produção de sementes é feita separadamente para cada isolinha
e é obtida uma mistura de sementes das várias isolinhas em proporções definidas pelo monitoramento das frequências das raças do patógeno predominantes em cada ambiente (ano
agrícola, região, ... )
• Favorecem a estabilização das raças fisiológicas do patógeno,
diminuindo a probabilidade de desenvolvimento de novas raças.
• De forma geral, são mais estáveis frente às adversidades
ambientais (doenças, pragas, seca, etc.).
U S P , E S A LQ , L G N 31 3 -M E LH O R A M E N T O G E N É T IC O , P R O F . N A T A L A . V E LL O MULTILINHAS
PROGRAMA IOWA ( ISU, USA) : V . M. RESISTENTE À FERRUGEM DA AVEIA
GENITORES RECORRENTES GENITORES DOADORES
3 LINHAGENS ADAPTADAS 1 GENE DE RESISTÊNCIA LINHAGENS EXÓTICAS de EM CADA LINHAGEM AVENA SATIVA e AVENA STERILIS
DIRTY CROP
GENITOR RECORRENTE X GENITOR DOADOR
rr ......... RR rr X F1 ... ... ... Rr rr X RC1 ... ½ Rr : ½ rr RESIST. SUSCET. RC2
RC5 RC5F2 : PLANTAS EXAMINADAS PARA RESISTÊNCIA
RC5F3 :
...
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MULTILINHAS : AVEIA, ISU (EUA)
COMPOSIÇÃO DE UMA V.M. : 3 CONJUNTOS DE INFORMAÇÕES 1. COMPORTAMENTO AGRONÔMICO DAS ISOLINHAS : SEMPRE BOM
COM FERRUGEM 2 AMBIENTES
SEM FERRUGEM
2. REAÇÕES DE PLANTAS ADULTAS DAS ISOLINHAS ÀS RAÇAS ESPECÍFICAS DE FERRUGEM: CADA ISOLINHA DEVE SER TESTADA COM TODAS AS RAÇAS
ISOLINHA 1 RAÇA 1 ISOLINHA 2 RAÇA 2 . . . . . . ISOLINHA N RAÇA N
3. VARIAÇÕES NA COMPOSIÇÃO DE RAÇAS DA POPULAÇÃO DE PATÓGENOS
• AMOSTRAS DE FOLHAS DE AVEIA COM INFECÇÃO COLETADAS EUA E CANADÁ ANUALMENTE
• NOVAS RAÇAS E PROPORÇÕES RAÇAS ANTIGAS X
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COMPOSIÇÃO DE ISOL. NA MULTILINHA E74 DE AVEIA E REAÇÕES ÀS PRINCIPAIS RAÇAS DE FERRUGEM
BROWNING, FREY(1976) Crop Sci 16: 311 – 2
CI Nº GENEALOGIA
RAÇAS FERRUGEM
CONTRIBUIÇÃO (%)
290 326 264B
9169 CI8044 2X CI7555 X CEIRCH DU BACH MR S MS 18
9170 CI8044 3X CLINTON X GARRY 2X CI8079* R R R 22
9172 CI8044 6X CIU8001* MR MS MS 4
9176 CI8044 6x ACENCAO R MR S 4
9177 CI8044 3X CLINTLAND 2X CHAPMAN 178 X CI7235 MR MS MS 4
9178 CI8044 3X BONKEE 2X CI7254 X CI7171 R MS MR 18
9179 CI8044 2X CI7555 X CI6665 MS S MS 4
9180 CI8044 2X CI7555 X CI7654 MR MR MS 4
9181 CI8044 2X CLINTON X CI8081* MR R R 22
PORCENTAGEM (R + MR + MS) 100 78 96 ∑ = 100
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• Blends de SOJA: surgiram no mercado norte-americano nos anos 60. Nos anos 90 representavam 20% das linhagens nos testes públicos e privados.
• São cultivares constituídas pela mistura de linhagens puras, as quais
diferem em vários caracteres (ex.: alelos de resistência, adaptação ao mosaico de pH do solo), porém são semelhantes para caracteres
agronômicos ( ex.: altura, arquitetura, ciclo, cor de pubescência, cor das vagens, cor e tamanho das sementes). A obtenção de blends é mais simples do que multilinhas.
• Oferece proteção à cultura: maior estabilidade frente a pragas,
doenças, nematoides e adversidades ambientais (homeostase populacional).
• Ex.: blend formado pela mistura de sementes da cultivar 1 (alta produtividade e suscetível a uma doença) e da cultivar 2 (menor produtividade e resistente).
- Na ausência da doença: produtividade média/alta (devido cultivar 1). - Na presença da doença: produtividade garantida (devido cultivar 2).
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DESTRO, D. ; MONTALVÁN, R. (eds.). Melhoramento genético de
plantas. Londrina. Editora UEL, 818p. 1999. (Cap. 21).
FREY, K.J. Plant breeding II . Ames, The Iowa State University Press, 497p., 1981:
• Parlevliet, J.E. Disease resistance in plants and its consequences for plant breeding,
p. 309 – 64 (Cap. 9)
• BORLAUG, N.E. Increasing and stabilizing food production, p. 467 – 92 (Cap. 12)