# !'' (!'8
" .( "
3$ $ $ 3$)$$/!
$-$($#$ ), >?>@A
$2- $
$+ $*$++$ +$ , *+$,$ , $+*, $ , % $+,, $-+* # +% $$+-#+ *$ # .9<%6±57%;/%4$* $$ +$ +, + + $$ $#,,&,
+,&,#,,$
,%&$,
$ &,./ 3,.
G
/-2!0
#,%4$$+$ +,+ $# +, +$,$ $,$ ,$# # + *$#
+$-#*% $*, $, ,$,
&,% ,$, *$ $,%
34 "-+*,$ ,- , -#-#-+$ , , %
#/F4 /$!
+$$ $<D 1$ +-%$$% <%4-*C0%$4$4%CH% ! C%07%9DG(! G(G!
L(%-D%-%$$%W$4<%$4%
&$' , !D ( X*H%5-%4%-4$$%$$% 3904-$+--$$/
(!F
* %%&%&'), 9%& &&) '0%' '%&'1*-' .1%,& ) '))%-- %'&2 (),%..%'**.1,, -'%')1%, ,-%(&+, ' O%..%' ,'% %&), -%(&2,,* %%&-%(&D7E%& ''G* ,%+ '-.*-%(&, (&& ( ','%.%-%& & ',* ..(. %' XY2,&,'% %& ,%/,%&0) ,)%,&%&),.%- '+%& &&, 0%.. (%..%'**. , G 2% G7%')%'1%, '%'),& G &G* %&(.&%'- G%'//&) ( .%-%'9(GXY23**J% ..GOWW)%') (.&1%..'&.-,*% G%')%' '/ *&%&'%')%'1%,%))', %&%&2
!
),'%7 %&X"Y2,&%')..&*&'
%',%'-%'(.%)G.. '! ..%' %'%'/ (")4"4&(**&&%') ,&3&*'&X"Y2
' ** ,&(G%'/,, '%&)7 %('* ,./G %& ' .G& , *,'G*% *&%%' ) *%*, . . .%-!%-.(0G**(. %'&),'% ..G%')* %'& XP+Y2 -%(& ' .G&& ) *%*, . . '(. ..&D;E)* %'&1%,,'% ,* %%&, .'-&% .&(.&XY2 %'-&%/ &'& '%* . '), !..&(&&. &&%',L %X+Y+1, &,&&,1 '%' & '&%/'%)% ', '/&X +Y2'.G+%, &' &,1', '), &'&)&(,%-/'&(.& %&,) , ,'%,* %%&*&'& G' % &%&)%& && &+* %(. .G1,'-%1) *&*%)%(&!,&%' %'&XY2,G, -&,1', '/&%'**(. %'&)%(. %'/.G*,G& ''.G%'* %'&( .&%', .,G %&1, &'-1%,.&&)3/2,&, '/& '&%&) &%',*' /&)αβ
..& ' '%' &%',
'..&
%'/,γδXY2
',%&&(G+1, - ' .G>,*%*, .. .G*,G&DE)%))'* %'&1%,,'% ,* %%&%' ' ')('%))'&''.G%'
L
**(. %'&+ ( .& %' , ..
**(. %'2
! !
(;$7)O* %'&DO .& ') .& 1'G &."G &. ', ') 2O±$E1%,,'%7%')%' '$, .,G %'%-%( .&1%,(7+,* %%&-%(&D7E ' 7%')%'1(&23..* %'&1 % %))',&*% .&%', '+ '+1'PP$! PP"2,&* %'&1&*&%%-)&3/ ' &'/ %-)7 '7+(&%'// ''0'%0 % .0%23..* %'&, 7%')%') . &#',&)&.%'+ %'/,
,&*% .&+ '1 &&%/'%'1/(*& &'3*&%%-'/ %-D .E2,& * %'&, ' . '/)3D 2P±$2"E2
=2$$274.1GG ' .G&%&1 &' ' 4 & ' 1%, 1 .& ) ).(&%' %&,%G ' D4E '*,GG,%'DE!. . '%%& / %'& L
+ L + L + L
+L- '
L3!
bD'%0%'&'E2..&DJE1 ' .G>
(&%'/&)1 D'%0%'&'E2
($$"$")2"7 1* 1%,' . &(9&(&%'/ ' .G&%&%)- % 'D373E2
#
()")&$")$%)!)" 73..* %'& D'_OE(&%',%&&(G1%')1%,7) . &#',& ' ..1&3/*&%%-D .E2 * %'&%'/(*1*&%%-)3/D'_E '&D'_E1'/ %-2 .3/ 1 &&'%',%&/(*2:&%/' ,%&/(*, %('. '*, &)7%')%'2'' &+, 8(*D'_$E+ ..* %'&1*&%%-)3 ' ..1'/ %-)3/DJ** %'&, 13/*&%%-E2
"$"$")/2&!2$$7%' 1,, 'G* %(. %('*,'G*%*)%.& (. &&% 1%,%& &(&+,* %'& *&%%'1* 1%,'., .,G %'%-%( .&2 3& &,1' %' 4%/( + & %&% ..G &%/'%)% '(%'1 &&'%',*' /)
..&D*\2OE &1.. &..&D*\2E%' ..
* %' & * 1%, $ '. &(9&2 ' ' &+ &%/'%)% '%' &%',*' /) ..&D*\2OE1 &&'%')* %'&2
,%))'&1&'%',*' /&), &(&)..&DEC..&D
L
E
'3! 0&1'&%/'%)% '2
/(*)* %'&24%/(&,1&,%&%(%')
.G*,G&(&&1'1/(*&),'% 7* %'&23&%/'%)% '%' &%'*' /) ..&D*\2E1 &&'%'/(*, -%'/
3b1,'* 1%,/(*D3!E2 3.&+%'/(* &%/'%)% ' &)..&
1 &&-2
4%/( &,1&, ,%' . %'1' %' &)..& ' &)
..&%'
/(* * %'&2 &(, . %' 1 & &' 1'..& '
..&D
'&,1'E2&%/'%)% '%))'&1&' 1' 'G),1/(*&1%,&*..& %'/, %- %' 03!2
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
:, -)(', ,%('*,'G*%*)%.& )* %'&1%))'), .,G'&1%, &%/'%)% ' &%'..&+&*% ..G
..& ' &%/'%)% '%' &%',
..&D4%/(
E2:,',*,'G*%*)%.&),/(*&1 * 1%, ,,+&(,, '/&1
%' '%'/(*, '/(*D4%/(E2,& , '/& G ('),*&' &') 3/ ',-.*')32
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
, '-&% .*&/ %'/
L
%%'* %'&1%,,'%7%')%'2 %'-&%/ &XY&,1%, &%' & 'G,&&,1', '/& ..%'L % XY2 , & ' &,1' , (%'/ G, &'-&%' *, &+ , *' / )
.G*,G&+ *%' '.Gαβ
..&
X+OY &&21-+%)* %'& %'! 3/!'/ %-)#',& ),,* %%&). + &%/'%)% '%' &%'γδ! %'/..&),
+6%,% . '-%./% ., %&%)* %'&1%,,'%,* %%&-%(& ,%)&.%'
C+6
3;<%$?4$
80
70
60
50
40
30
%C
ell
Normal
Patient
20
10
0
CD3+/CD19- CD3+/CD4+ CD3+/CD8+ CD3-/CD19+ CD3-/CD56/16+ CD3+/HLA-DR+
< . D 3 3 3
4 P b ! ! ; P b ! ! 4 " b ! !
; b ! !
O ; b b ! # ; O b b ! $ ; O b b ! " 4 $ b b ! P 4 O b b b
; $ b b b
4 b ! b
; b ! b
; " b ! b ; " b ! b
O ; b ! b
# 4 OO b ! b $ 4 O b ! b " ; " b ! b P ; $ b ! b
4 b ! b
; O b ! b ; " b ! b
4 O b ! b
; b ! b
C%6
C)6
70
60
50
40
30
%C
ell
Group I
Group II
20
10
0
CD3+/CD19- CD3+/CD4+ CD3+/CD8+ CD3-/CD19+ CD3-/CD56/16+ CD3+/HLA-DR+
100
0 5 10 15
%CD19
%C
D3
20 25 30 35 40 80
60
40
20
0
'&(&&2..&1%,γδ*, ('
)WOW)%'' .,( '.+, -'&,1'GJ% / %'& '() /& X#+$Y2:, -&,1', (&),&%/'%)% ' &)
..&,%& %%' &&D2O#%'
' . -&2 2#P %' * %'&E2 : , - &' . %'1',%' &)
..&+
', &)..&%'/(** %'&
1%, 3 *&%%-2 &(, . %' 1 & &-%'/(*1%,3'/ %-, ..&2&&+''.G, %)L%'7 %')%'%&%* '( .&, %)
L
*. G& .%','%7%')%'2
#
8-P-;C&4M%<%$/4$ <%*$ D 1%* 3<%$ #P _$` 4-*%0%$$0$$?4$ $+$%DO0+C566:DG(
)8C4&C3MC%-3<$ <<%- - -*<* <<4-%$ 4 $%$<%$ /4$?%-;<%$566; D(G
1%$8CH7C3:$)C%-4H(-< -- $<$ <%$ % <%$ D % % % %/% $ 4 $<$ <%$ /4$C ;<%-*
566= D (G
#(&&CL-%$$LC;%$-PCL$$91 % --$ * <%$ /4$ &%56;< DF(
L-%$$LC#(&&CL$$91C%-L/ 9%$%-$<%$/%-K+ %%4-4%%<%-* <%$/4$0K%-+%)N)+
56;8 D!(
! &(&LC%-%$%%1C&<538C;% +# ;<%$ /4$ K+ -/ % - --$ <%$ <%% K+
56;< D(
F ]CK%3+C1-:&C;--7 ;<%$ /4$ K+ 4-% --$ % %%-*$$$4$$<$<-%/ % $ / % - K + $
56;: GD F(F
K%%%4[CK%:)#CK%:)74%-<-%$ <%$$4%%;$+H--$ ;?%$?%-;<%$5667 D(
G 34 3(1C &-% ](7 0<%- H(-- $4$$
%$*<%<%$(/4$%$3--4-56;: GD(F
$%&4-%$$/%-<%$D?*%$8KC$%&C;%-; _$`?%- ;<%$ % &/ $%$ K]:D 84=)%C56;8D(!!
H%$;3CC#48C%-4% $4<<$$ H --$ <%$ /4$ 4 -/ $%$;<%-*56;9 D(
+-9% 8&1C 1-- 1C K%4/ K?C %74% %%5% <<% --*<*$ ;$+ %$ 3- L9< 4-56;: !D G(F
#$ 78C #% )HC 0-- #0 44-%*H--$$4$$<%$ /4$ D -4 $94%-* ;<%-*56;< DG(
#%*$8C8C?%<41)4<<$$--4-/$%$&%56;< D
1-#C31C)a-7C%-#---$ %<$%<%$0K%-+%)N)+5667 G D !(
! 3%3CL$8C)<-#C%-L9<$$ <%%/%<%$/4$$ 64 / % < % ?
-56;7 !D
F )-;C)%-C)%--;H<(34: <%$/4$$%$%-$64$ $$%-$*$$%$<$$ <%$ 4 /4$ %
?-56;7 !DF
1-#C31C)-7C%-#---$ %<$%<%$<K%-+%)N)+5667 G D !
G 1-#C$C;4$C1%4*%%H#-H -- -% <$$ <%$ /4$ 4566< D!
$ <%$ % 4 4--%4j0K%-+%) N)+566@ FD!GG
H%$ ;3C 1 C P% C 1% ?4$($ %<%$/4$) &/$56;; D
1-#C31[C;4$&C$LH $ <%$ < % % 4-% 4 $<$ 4-%<$D % %$ <$$
4-566; !D(
1%4*%%HC1&%-%+C&)C%-H$-* <%$/$3-/$
41(3C)%4PC)%%HC%-%$
64*3d3 #Od*H-*<*$ %4 <%$ /4$
;<%-566< DG(
K:-<4-4?C):4-$+CH<4-$[C%-+ %$ 4 4-%γδ H3#d --$ <%$/%-<%$7L1)4-11-566= D(
! )4LC%%:%LC7$0C%-;4%?γG?δH -- <(?γδ -*<*$ $ $<* %4 4: -*<% --$
4-566@ D(