Universidade Federal do Rio de Janeiro - UFRJ Instituto de Ciências Biomédicas – ICB Programa de Graduação em Histologia

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Universidade Federal do Rio de Janeiro - UFRJ

Instituto de Ciências Biomédicas

–

ICB

Programa de Graduação em Histologia

Sangue

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Origem, Características e Propriedades Funcionais

• tecido conjuntivo

especializado de origem

mesenquimal;

• fluido e levemente alcalino:

pH 7,0;

• constitui 7% do peso corporal;

• transporta gases, nutrientes,

hormônios etc.

• realiza a remoção de produtos

do metabolismo até órgãos

excretores;

• regula temperatura corporal;

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1. Elementos Figurados

–

fase sólida (45%)

• Hemácias ou Eritrócitos

• Plaquetas

• Leucócitos Granulócitos Neutrófilos

Eosinófilos

Basófilos

Agranulócitos Linfócitos

Monócitos

2. Plasma

–

fase líquida (55%)

• Água

– 90%

• Proteinas plamáticas albumina

alfa, beta e gama-globulinas

fibrinogênio

• Eletrólitos, vitaminas, aminoácidos, hormônios, lipídios

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Hematócrito:

estima o percentual de eritrócitos no sangue

camada

leucocitária

plasma

eritrócitos

(42% a 45%)

soro

coágulo

sangue

coletado COM

anticoagulante

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Distensão Sanguinea:

observação dos elementos figurados ao MO

Colorações Sanguineas

• May-Grünwald-Giemsa

• Wright

• Leishman

Misturas dos corantes

: Romanowski:

-Azul de metileno: corante básico; cora em azul

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Distensão Sanguinea:

observação dos elementos figurados ao MO

Coloração: Giemsa 1000x

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Elementos Figurados : Eritrócitos

eritrócitos na circulação

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Eritrócitos

•

Homens: 5,5 milhões/mm3 sangue

• Mulheres: 4,5 milhões/mm3 sangue

Altitude (adaptação fisiológica)

aumento de eritropoetina (EPO) e eritrócitos

• células anucleadas

• diâmetro aproximado: 7 um

• desprovidas de organelas

• hemoglobina no citoplasma

• citoplasma acidófilo

• forma de disco bicôncavo (aumenta a capacidade de realizar as trocas gasosas)

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Eritrócitos - Microscopia Óptica

eritrócitos humanos

região central palidamente corada

eritrócitos de aves

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(11)

Eritrócitos - Microscopia Eletrônica de Transmissão

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macrócitos

micrócitos

Anisocitose: alteração tamanho dos eritrócitos

Dimensões consideradas normais: 7 micrômetros de diâmetro

diâmetro maior do que 8 micrômetros diâmetro menor do que 6 micrômetros

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esferocitose

eliptocitose

anemia falciforme

dacriocitose

Poiquilocitoses: alteração de forma dos eritrócitos

•

Desordens hereditárias ocasionadas por: - mutações proteicas na membrana plasmática dos eritrócitos ou

- mutações na síntese da molécula de hemoglobina.

• Alterações de forma ocasionam diminuição de capacidade de “deformação” da célula; incapacidade de adaptação à pressão osmótica.

(14)

Poiquilocitoses: alteração de forma dos eritrócitos

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Membrana e Citoesqueleto dos Eritrócitos

Proteinas Integrais

Proteinas Periféricas (superfície

interna da membrana)

A presença de proteinas

específicas de membrana e a

organização do citoesqueleto

conferem ao eritrócito sua forma

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Membrana e Citoesqueleto dos Eritrócitos

Citoesqueleto

submembranar:

Trama tridimensional de:

• espectrina e

• oligômeros de actina,

ancorados a moléculas de

proteina banda 3 através

de moléculas de anquirina

Proteinas associadas:

• anquirina

• proteina banda 4.2

(confere estabilidade entre anquirina e banda 3)

• Proteina banda 4.1 e

aducina

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Grupo Sanguineo ABO

Fator rH

Os diferentes antígenos (A ou B) expressos na superfície dos eritrócitos (ligados a

cadeias de carboidratos das glicoforinas) determinam os diferentes

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Grupo Sanguineo ABO

Tipo Sanguineo

Ag de superfície

do eritrócito

Anticorpo sérico

A

Antígeno A

Anti-B

B

Antígeno B

Anti-A

AB

Antígenos A e B

Sem anticorpos

Receptor universal

O

SEM antígenos A

ou B

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Outro Grupo de Antígeno Eritrocitário de Importância Clínica :

Tipo Sanguineo

Rh

Antígeno D

Rh +

Expressa

Antígeno D

Rh -

NÃO expressa

Antígeno D

eritroblastose fetal

Incompatibilidade de fator

Rh entre mãe e feto

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Estrutura da Hemoglobina

(proteina básica)

Anemia Falciforme

–

Hb S

eritrócito cadeias polipeptídicas

grupo heme que contém ferro

Variações nas Cadeias

Polipeptídicas Originam

DiferentesTipos de

Hemoglobina:

Indivíduo Adulto:

• Hb A1

–97%

• Hb A2

– 2%

• Hb F -

1%

Hb adulta

Hb fetal

Doença genética e hereditária:

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Transporte de gases pela hemoglobina

Capilares pulmonares com alta pressão de O_2:

Hb + O₂= oxi-hemoglobina

Capilares nos tecidos com baixa pressão de O_2:

Hb + CO₂= carboxi-hemoglobina

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Vida e morte dos eritrócitos

1. Medula óssea (produção de

eritrócitos)

3. Hemocaterese

–

remoção,

pelo baço, de eritrócitos da

circulação: 120 dias

2. Reticulócitos enviados para a

corrente sanguinea (1% dos

eritrócitos)

MO

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1. Elementos Figurados

–

fase sólida (45%)

• Hemácias ou Eritrócitos

• Plaquetas

• Leucócitos Granulócitos Neutrófilos

Eosinófilos

Basófilos

Agranulócitos Linfócitos

Monócitos

2. Plasma

–

fase líquida (55%)

• Água

– 90%

• Proteinas plamáticas albumina

alfa, beta e gama-globulinas

fibrinogênio

• Eletrólitos, vitaminas, aminoácidos, hormônios, lipídios

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Plaquetas:

150.000 a 400.000 / mm3 sangue

Características:

• Fragmentos citoplasmáticos;

• Derivadas de megacariócitos;

• Forma disco biconvexo (3 um diâmetro);

• Vida – 10 dias

Microscopia Óptica:

grupo de plaquetas com coloração basófila (1000x)

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Plaquetas:

Ultra-estrutura

Representação esquemática da ultra-estrutura das plaquetas

1. Hialômero

: região clara e periférica

• feixe marginal de microtúbulos (manutenção da forma)

• microfilamentos de actina e moléculas de miosina (permite contração)

2. Granulômero:

região mais central com áreas mais densas

•mitocôndrias, Golgi, grânulos de glicogênio, canalículos

comunicantes e GRÂNULOS alfa: fatores de coagulação, plasminogênio, fibrinogênio, PGDF e fator de Willebrand

delta: ADP, ATP, serotonina e histamina–facilitam a

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microscopia eletrônica de transmissão

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Coagulação Sanguinea

•

endotélio intacto (lâmina basal

íntegra): produção de prostaciclinas

impede a adesão plaquetária

•

endotélio lesado (col IV exposto): Tem

início o processo de coagulação.

Liberação de endotelinas

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Coagulação Sanguinea

Ativação Plaquetária

- a liberação do conteudo dos grânulos ocasiona:

• adesão das plaquetas à lâmina basal e agregação plaquetária : fator de von Willebrand;

• aumento da adesão e agregação plaquetária: ADP e ATP;

• proliferação das células endoteliais e musculares : PDGF;

• vasoconstricção : serotonina plaquetária e endotelina vascular;

• formação de coágulo de fibrina

Retração do Coágulo

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•

Liberação de tromboplastina endotelial e plaquetária que atuam sobre a protrombina circulante produzindo

TROMBINA;

• A trombina converte o fibrinogênio em fibrina;

• A fibrina forma uma rede que aprisiona eritrócitos e

leucócitos;

• Formação do COÁGULO de sangue ou TROMBO;

• Progressiva liberação de

ativadores de plasminogênio pelo endotélio;

• Conversão do plasminogênio em plasmina;

• Esta enzima (tem efeito

fibrinolítico) inicia a dissolução do coágulo.

Cascata de Coagulação Sanguinea

Coágulo sanguineo

ativadores de plasminogênio

plasminogênio

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Correlações Clínicas

1. Tromboembolismo:

desprendimento do coágulo com riscos de obstruções

da circulação sanguinea, podendo levar ao óbito.

2. Trombocitopenia:

redução do número de plaquetas (inferior a

150.000/mm3 sangue.

Causas: diminuição na produção de plaquetas

aumento na destruição de plaquetas (doenças auto-imunes)

3. Distúrbios da Coagulação:

Causas: adquirido: deficiência de vitamina K (cofator para fatores de

coagulação

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1. Elementos Figurados

–

fase sólida (45%)

• Hemácias ou Eritrócitos

• Plaquetas

• Leucócitos Granulócitos Neutrófilos

Eosinófilos

Basófilos

Agranulócitos Linfócitos

Monócitos

2. Plasma

–

fase líquida (55%)

• Água

– 90%

• Proteinas plasmáticas albumina

alfa, beta e gama-globulinas

fibrinogênio

• Eletrólitos, vitaminas, aminoácidos, hormônios, lipídios

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Leucócitos

• interior dos vasos: aspecto arredondado

• tecidos conjuntivos: pleomórficos

Leucometria:

contagem dos leucócitos

• Global:

contagem indiscriminada de leucócitos: concentração relativa:

5.000 à 11.000 mm3 sangue

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Leucócitos -

classificação

•

grânulos específicos

ou secundários

• grânulos não específicos ou primários

(grânulos azurófilos / lisossomas)

Seus núcleos apresentam lobulações

• grânulos não específicos ou primários

(grânulos azurófilos / lisossomas)

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Leucócitos Granulócitos

1. Neutrófilos Polimorfonucleares

55% a 75% 10 à 15 um diâmetro

•Grânulos específicos: pequenos e com fraca afinidade pelos corantes de rotina;

•Grânulos azurófilos:

(glicoproteinas sulfatadas): um pouco maiores e esparsos pelo citoplasma;

• Núcleo com 3 à 5 lobulações

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Leucócitos Granulócitos

Neutrófilos das pessoas do sexo feminino apresentam

lóbulo acessório = cromatina sexual (cromossomo X

condensado)

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Leucócitos Granulócitos

(38)

Leucócito Neutrófilo:

ultra-estrutura

Conteúdo dos grânulos:

Grânulos primários – azurófilos (0,5 um diâmetro):

hidrolases ácidas, peroxidases, elastases e defensinas.

Grânulos secundários - específicos (0,1 um diâmetro): :

lactoferrina, lisozima e outras proteases como a colagenase IV. Desempenham função

anti-bacteriana.

pseudópodos grânulos azurófilos

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Quimiotaxia de neutrófilos em um processo inflamatório

Migram para sítios de infecção onde reconhecem e fagocitam bactérias. A

migração e fagocitose requerem substâncias contidas nos grânulos

citoplasmáticos

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Neutrófilos:

Fagocitose de microorganismos - principalmente bactérias

recobertos por acs sangue

Etapas do Recrutamento de Neutrófilos:

• Macrófagos ativados produzem IL-1 e TNF-alfa estimulando a expressão de selectinas pelo endotélio. Ligação fraca das selectinas com carboidratos na superfície dos neutrófilos.

• Expressão de integrinas (Mac-1 e LFA-1) pelos neutrófilos que se ligam a moléculas de adesão endoteliais: VCAMs e ICAMs

• Rolamento do neutrófilo pela superfície endotelial

• Migração transendotelial – diapedese.

ICAM = molécula de adesão intercelular VCAM = molécula de adesão entre célula e vaso LFA-1 = leukocyte function associated antigen-1 Mac-1 = antígeno macrofágico 1; membro da família de

moléculas de adesão - integrinas

(41)

(42)

• Microorganismo é englobado por pseudópodos;

• Formação de fagossomas;

• Fusão dos grânulos azurófilos e específicos com os fagossomas;

• Eliminação de microorganismos

(material digerido pode ser exocitado ou estocado como corpos residuais)

Neutrófilos - Fagocitose

Muitos neutrófilos morrem durante este processo. O acúmulo de bactérias mortas, neutrófilos mortos e material semi-digerido constitui um exudato de cor

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Leucócitos Granulócitos

2. Eosinófilos

2% a 4% 12 um diâmetro

•Grânulos específicos: (1 um diâmetro)

numerosos e preenchem quase todo o citoplasma (maiores). Coram-se em rosa - eosinofílicos

•Grânulos azurófilos: pequena quantidade (menores)

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Eosinófilos

–

Ultra-Estrutura

Grânulos específicos -

alongados

Possuem:

Internum:

um corpo cristalino

eletrón-denso na região central

constituido pela “proteina básica

principal” = eficiente no combate a

parasitas (efeito citotóxico em

protozoários e helmintos)

Externum:

menos eletron-denso

e

c

onstituido por:

• histaminase (neutraliza a atividade

da histamina)

• aril-sulafatase (neutraliza

leucotrienos)

• “proteina catiônica eosinofílica” (é

citotóxica para protozoários,

helmintos e seus ovos).

Célula ativa em processos alérgicos e parasitários.

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Leucócitos Granulócitos

3. Basófilos

0 - 0,1% 8 a 10 um diâmetro

•Grânulos específicos: bem grandes e numerosos. Coram-se em azul escuro (são metacromáticos).

•Grânulos azurófilos: pequena quantidade (menores)

•Núcleo lobulado de forma retorcida ,frequentemente

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Basófilos

–

Ultra-Estrutura

Grânulos específicos:

• Heparina e CS

• Histamina

• Fator quimiotático para neutrófilos e eosinófilos

Propriedades Funcionais: