THE VACCINATION OF HUMAN BEINGS WITH A LIVE AVffiULENT
STRAIN OF
T R Y P A N O S O M A C R U Z I .
A new series of volunteers.
H u m b e r t o M e n e z e s *
F iv e h u m a n v o lu n te e r s w e re v a c c in a te d w i th a liv e a v ir u le n t s tr a in o f
T r y - p a n o s o m a c r u z ia n ã fo llo w e d u p fo r o n e ye a r. E x c e p t fo r a fe w cases o f q u e s tio n
a b le r e s u lts p r e s e n te d b y o n ly o n e L a b o ra to ry , a li th e o th e r c lin ic a i, p a ra sito
-logical a n ã sero-logical te s ts r e m a in e d n e g a tiv e d u r in g t h a t perioá.
T h r o u g h s e v e r a l e x p e r i m e n t s ( 2 - 9 ) a n a v i r u l e n t s t r a i n o f
T ry p a n o s o m a c ru zi
h a s b e e n s t u d i e d t h a t i s s u p p o s e d t o b e a m u - t a n t o f t h e v i r u l e n t Y s t r a i n , a n d f o r t h i s r e a s o n n a m e d i t P F s t r a i n ( 1 0 ) .I n 1 9 7 1 a p r e v i o u s n o t e c o n c e r n i n g t h e f i r s t t w o h u m a n b e i n g s v a c c i n a t e d w i t h s u c h a v i r u l e n t t r y p a n o s o m e w a s p u b l i s . h e d ( 1 1 ) . L a t e r t h e t w o - y e a r f o l l o w - u p o n t h e s a m e v o l u n t e e r s w a s d e s c r i b e d ( 1 2 ) .
I t w i l l b e p r e s e n t e d i n t h i s p a p e r a f e w m o r e a r g u m e n t s c o n f i r m i n g t h e n o n p a - t h o g e n i c i t y o f t h a t s t r a i n , d e s c r i b i n g t h e o n e - y e a r f o l l o w - u p o f a n e w s e r i e s o f h u m a n b e i n g s i n j e c t e d w i t h t h e P F t r y p a n o s o m e .
M A T E R I A L A N D M E T H O D S
F i v e a d u l t m a l e s , c o n v i c t s a t t h e P r i s o n o f R i b e i r ã o P r e t o , p r e s e n t e d t h e m s e l v e s a s
v o l u n t e e r s t o b e v a c c i n a t e d . A f t e r t h e l e g a l p r o c e d u r e s , c l i n i c a i a n d l a b o r a t o r i a l e x a - m i n a t i o n s o n t h e f i v e p a t i e n t s w e r e c a r - r i e d o u t .
T h e c o m p l e m e n t f i x a t i o n t e s t ( C F T ) , t h e i m m u n o f l u o r e s c e n c e t e s t ( I F T ) a n d t h e e l e c t r o c a r d i o g r a m ( E C G ) w e r e p e r f o r m e d b e f o r e t h e v a c c i n a t i o n .
F i v e d a y s l a t e r e a c h v o l u n t e e r r e c e i v e d b y s u b c u t a n e o u s r o u t e 0 . 2 m l o f a s u s p e n - s i o n o f t h e P F t r y p a n o s o m e h a r v e s t e d i n W a r r e n m é d i u m f o r 1 8 d a y s . T h e c u l t u r e m e d i u m w a s c e n t r i f u g e d a t 1 .5 0 0 r . p . m . a n d t h e s e d i m e n t w a s h e d s e v e r a l t i m e s i.n s a - l i n e s o l u t i o n . T h e f i n a l s u s p e n s i o n h a d a l m o s t 7 5 % o f m o b i l e p a r a s i t e s w i t h a t o t a l o f 1 0 ° f l a g e l l a t e s p e r m l w i t h a b o u t 4 % o f m e t a c y c l i c t r y p o m a s t i g o t e s . T h i s s a m e v a c c i n e w a s i n j e c t e d , s u b c u t a n e o u s l y i n 1 5 , 2 0 d a y - o l d m i c e .
* A s s o c i a t e P r o f e s s o r , D e p a r t a m e n t o d e G e n é t i c a e M a t e m á t i c a A p l i c a d a à B i o l o g i a , F a c u l d a d e d e M e d i c i n a . U S P . 1 4 1 0 0 R i b e i r ã o P r e t o , E s t . S . P a u l o , B r a s i l .
72
Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
Vol. VII — m 2
T h e b l o o d o f t h e s e a n i m a i s w a s s e a r c h - e d f o r p a r a s i t e s 6 , 8 , 1 5 a n d 3 0 d a y s a f t e r v a c c i n a t i o n .
T h e f i v e h u m a n v o l u n t e e r s w e r e o b - s e r v e d d a i l y d u r i n g t h e f i r s t m o n t h a n d t h e i r p u l s e a n d t e m p e r a t u r e r e c o r d e d e v e r y d a y ( T a b l e s 1 - 5 ) .
A f t e r t h e f i r s t , s e c o n d , t h i r d , f o u r t h , f i f t h , s e v e n t h a n d t w e l v e t h m o n t h , C F T , I P T , E C G , b l o o d c u l t u r e s , x e n o d i a g n o s i s a n d b l o o d i n o c u l a t i o n s i n y o u n g m i c e w e r e p e r f o r m e d . T h e b l o o d c u l t u r e s w e r e d o n e i n W a r r e n m e d i u m a n d e x a m i n e d a f t e r 3 0 d a y s . ' T h e x e n o d i a g n o s i s w e r e m a d e w i t h a t l e a s t 5 n y m p h s o f
R h o ã n iu s p ro lix u s
i n t h e 5 t h i n s t a r . T h e t r i a t o m i n a e b u g s w e r e e x a m i n e d o n t h e 3 0 t h d a y . T h e b l o o d s e r a o f t h e p a t i e n t s , a f t e r c e n t r i f u g a t i o n , h a d t h e s e d i m e n t i n o c u l a t e d i n a m i n i m u m o f f i v e y o u n g m i c e t h a t h a d b l o o d s e a r c h f o r p a r a s i t e s 8 , 1 5 a n d 3 0 d a y s a f t e r t h e b l o o d i n f e c t i o n . T h e s e r o l o g i c t e s t s w e r e p e r f o r m e d b y m o r e t h a n o n e l a b o r a t o r y ( T a b l e s 1 - 5 ) .R E S U L T S
P a t i e n t s r e s u l t s w e r e s u m m a r i z e d i n t h e T a b l e s 1 - 5 .
T h e p a r a s i t o l o g i c e x a m i n a t i o n o f t h e 1 5 m i c e i n o c u l a t e d w i t h t h e v a c c i n e w e r e a l i n e g a t i v e .
C O M M E N T S A N D C O N C L U S I O N S
T h e f i v e p a t i e n t s r e c e i v e d o n l y o n e d o s e o f t h e v a c c i n e .
T h r e e o f t h e m w e r e o b s e r v e d f o r t w e l v e m o n t h s a n d t w o f o r o n l y s e v e n m o n t h s .
O n e o f t h e t w o l a t t e r w a s l i b e r a t e d o n t h e s e v e n t h m o n t h a n d m o v e d t o a n o ü h e r c i t y a n d t h e o t h e r w a s t r a n s f e r e d t o a P r i - s o n i n a n o t h e r S t a t e .
I n a l i t h e c a s e s , t h e c l i n i c a i a n d p a r a - s i t o l o g i c a l t e s t s w e r e n e g a t i v e .
T h e s e r o l o g i c a l t e s t s w e r e a l m o s t a l i n e g a t i v e , e x c e p t f o r s o m e r e s u l t s o f o n e l a b o r a t o r y t h a t h a d i n t h e s i x p r e v i o u s m o n t h s p r e s e n t e d c o n c o r d a n t r e s u l t s w i t h t h e o t h e r l a b o r a t o r i e s ( T a b l e s 2 - 5 ) .
I t m u s t b e e m p h a s i z e d t h a t w i t h t h e s a m e b l o o d s a m p l e t h e L a b o r a t o r y B g a v e o p p o s i t e r e s u l t s ( T a b l e s 2 , 3 ) .
A s a c o n s e q u e n c e o f t h i s , o n t h e t w e l v e t h m o n t h a b l i n d t e s t w a s p e r f o r m e d u s i n g a p o s i t i v e a n d a n e g a t i v e c o n t r o l t h a t p r e s e n t e d P O S I T I V E r e s u l t s i n b o t h c a s e s i n L a b o r a t o r y B w h i l e i n t h e L a b o r a t o r i e s C , D a n d E t h e r e s u l t s w e r e w h a t h a d b e e n e x p e c t e d . T h u s , d i s c a r d i n g t h e s e l a s t d i s c r e p a n t t e s t s d o n e b y L a b . B , i t i s c o n c l u d e d t h a t a l i t h e t e s t s p e r f o r m e d o n t h e v o l u n t e e r s w e r e n e g a t i v e , g i v i n g u s t h e c o n v i c t i o n t h a t t h e P F s t r a i n , i n t h i s e x - p e r i m e n t , d e m o n s t r a t e d t o b e a v i r u l e n t f o r m e n a s i t h a d b e e n a l r e a d y s h o w n f o r l a b o r a t o r y a n i m a i s ( 2 - 9 , 1 , 1 3 - 1 4 ) .
A c k n o w l e d g m e n t s — T o t h e s e v e r a l p e o - p l e t h a t d i r e c t l y o r i n d i r e c t l y h e l p m e i n d o i n g t h i s e x p e r i m e n t , s p e c i a l l y t o t h e f i v e v o l u n t e e r s J o ã o B . ; J o s é R . ; O s v a l d o F . ; E d s o n M . e J o s é C .
R E SU M O
C inco v o lu n tá rio s h u m a n o s fo r a m v a c in a d o s co m tr ip a n o s o m a s vivo s de u m a
cep a a v ir u le n ta d e
T . c r u z ie se g u id o s d u r a n te u m ano.
E x c e to a lg u n s p o u co s r e su lta d o s serológicos c o n flita n te s a p r e s e n ta d o s por
u m m e s m o L a b o ra tó rio , e x a m e s id ê n tic o s re a liza d o s s im u ltâ n e a m e n te e m o u tro s
L a b o ra tó rio s d e r a m re su lta d o s n e g a tiv o s .
Março-Abr., 1973
Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
R E F E R E N C E S
1 . H U N G E R E R , K . D . — T h e i m m u n o - l o g y o f e x p e r i m e n t a l C h a g a ’s d i s e a s e . C o n f e r e n c e a t T h e D e p a t . D o e n ç a s I n f e c t . F a c . M e d . U S P . F e b . 1 2 , 1 9 7 2 .
2 . M E N E Z E S , H . — P r o t e c t i v e e f f e c t o f a n a v i r u l e n t ( c u l t i v a t e d ) s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a c r u zi
a g a i n s t e x p e r i m e n t a l i n f e c t i o n i n m i c e . R e v . I n s t . M e d . T r o p . S . P a u l o10:
1 - 4 , 1 9 6 8 .3 . A c t i v e i m m u n i z a t i o n o f d o g s w i t h a n o n v i r u l e n t s t r a i n o f
T. c r u z i.
R e v . I n s t . M e d . T r o p . S . P a u l o ,11:
2 5 8 - 2 6 3 , 1 9 6 9 .4 . - --- I . T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d Y s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a cru zi.
R e v . I n s t . M e d . T r o p . S . P a u l o ,
12:
6 4 - 6 8 , 1 9 7 0 .5 . --- I I . T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d Y s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a cruzi.
R e v . I n s t . M e d . T r o p . S . P a u l o ,12:
1 2 9 - 1 3 5 , 1 9 7 0 .6 . --- I I I . T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d Y s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a cruzi.
R e v . I n s t . M e d . T r o p . S . P a u l o ,
13:
1 4 - 1 7 , 1 9 7 1 .
7 . I V . T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d Y s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a c ru zi.
R e v . S o c . B r a s . M e d . T r o p .
5:
2 1 4 - 2 3 3 , 1 9 7 1 .8 . M E N E Z E S , H . & R I B E I R O , R . — V . T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d P F s t r a i n o f
T. c ru zi.
T h e e v a l u a t i o n o fp a r a s i t o l o g i c t e s t s a f t e r v a c c i n a t i o n o f d i f f e r e n t a n i m a l s p e c i e s . R e v . S o c . B r a s . M e d . T r o p .
6:
4 1 - 4 8 , 1 9 7 2 .9 . M E N E Z E S H . — V I . T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d P F s t r a i n o f
T r y p a
n o so m a c r u zi.
I n d u c e d i m m u n o t o l e - r a n c e i n m i c e b y a v e r y h i g h i n o - c u l u m . R e v . S o c . B r a s . M e d . T r o p .6:
7 9 - 8 4 , 1 9 7 2 .
1 0 . M E N E Z E S , H . & A L B U Q U E R Q U E , R . D . R . — I m u n i z a ç ã o d e c a m u n d o n g o s c o m v a c i n a v i v a a v i r u l e n t a d e
T r y
p a n o s o m a c ru zi.
I I I . V a c i n a ç ã o d o m e i o d e c u l t u r a . R e v / S o c . B r a s . M e d . T r o p . ,4:
6 9 - 7 4 , 1 9 7 0 .1 1 . M E N E Z E S , H . — A p l i c a ç ã o d e v a c i n a v i v a a v i r u l e n t a d o
T r y p a n o s o m a c ru zi
e m s e r e s h u m a n o s . N o t a p r é v i a . R e v . I n s t . M e d . T r o p . S . P a u l o ,
13:
1 4 4 - 1 5 4 , 1 9 7 1 .1 2 . M E N E Z E S , H . — T h e v a c c i n a t i o n o f h u m a n b e i n g s w i t h l i v e a v i r u l e n t v a c c i n e o f
T r y p a n o r o m a cru zi.
A t w o y e a r f o l l o w - u p o f t h e f i r s t t w o c a s e s . R e v . S o c . B r a s . M e d . T r o p . I n p r e s s .1 3 . R I B E I R O D O S S A N T O S , R . — P e r - s o n a l c o m m u n i c a t i o n . 1 9 7 2 .
1 4 . R I B E I R O D O S S A N T O S , R . — I m u n i z a ç ã o p a s s i v a d e c a m u n d o n g o s i s o - g ê n i c o s p o r l i n f ó c i t o s s e n s i b i l i z a d o s c o m a c e p a P F d e
T r y p a n o s o m a cruzi.
T A B L E
1
PATIENT — João B . .. O . . . ;
Age — 20 years;
B ody W eight — 65 Kg.
D A T E i P U L S E T E M P . A + + | B + + : C ° - - -
---27-06-72
C F T
1 1 - 0 6 - 7 1
2 1 - 0 6 - 7 1 8 0 3 6 ,4 2 2 - 0 6 - 7 1 8 2 3 6 ,7 2 3 - 0 6 - 7 1 8 0 3 6 ,0 2 4 - 0 6 - 7 1 8 0 3 6 ,0 2 5 - 0 6 - 7 1 8 0 3 6 ,0 2 6 - 0 6 - 7 1 8 0 3 6 ,0 2 7 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,0 2 8 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,0 2 9 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,0 3 0 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,0 0 2 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0 0 5 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0 0 6 - 0 7 - 7 1 7 2 3 6 ,2 0 7 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,2 0 8 - 0 7 - 7 1 8 0 3 6 ,0 0 9 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0 1 0 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0 1 2 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,2 1 5 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0
21-07-71
7 6 3 6 ,021-08-71
7 8 3 6 ,019-09-71
7 6 3 6 ,518-10-71
21-11-71
08-01-72
7 6 3 6 ,0a . c .
L A B O R A T O R I E S B L O O D X E N O B L O O D
c r D E E C G V A C
-C I N E
C U L T .
N u m b e r N u m b e r b u g s
( )
I N O C .
N u m b e r O B S .
C F T + I F T C F T + f I F T C F T + + I F T
t u b e s ( )
m i c e ( )
N
2 x l 0 5
N N
— ( 5 ) — ( 5 )
— ( 5 ) — ( 5 )
— ( 5 ) — ( 5 )
— — N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )
:
:
N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )_
„
_
_
N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )T A B L E 2
PATIENT — José R . . . B . . . P . . . ; Age — 23 years; Body Weig,ht — 75 Kg.
D A T E P U L S E T E M P . C °
A
L A B O R A
B + +
T O R I E S
C E C G V A C C I N E
B L O O D C U L T . N u m b e r
t u b e s ( )
X E N O
N u m b e r b u g s
( )
B L O O D I N O C . N u m b e r
m i c e ( )
O B S .
C F T C F T C F T + I F T
1 1 - 0 6 - 7 1 N
21-06-71
7 6 3 6 ,5 2 x 1 0 ’2 2 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,5 2 3 - 0 6 - 7 1 7 8 3 5 ,8 2 4 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 , 2
2 5 - 0 6 - 7 1 8 8 3 5 , 8 T e s t a f t e r e x e r c i s e ( F o o t - b a l l ) 2 6 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,0
2 7 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 , 0 2 8 - 0 6 - 7 1 7 8 3 5 ,9 2 9 - 0 6 - 7 1 7 6 3 5 , 8 3 0 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 , 0 0 2 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0
0 5 - 0 7 - 7 1 9 2 3 5 ,8 T e s t a f t e r e x e r c i s e ( F o o t - b a l l ) 0 6 - 0 7 - 7 1 7 8 3 5 , 6
0 7 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 , 0 0 8 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0 0 9 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0 1 0 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0 1 2 - 0 7 - 7 1 7 6 3 5 ,8 1 5 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0
21-07-71
7 6 3 6 ,0 — — — - - N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )20-08-71
_ _ _ _ .— — N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )18-09-71
7 6 3 5 , 8 -— — — N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )18-10-71
.— — — —21-11-71
— .— — —08-01-72
7 4 3 6 ,4 .— — — N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )1 ,6
> 3 , 0 ■
L i b e r a t e d
T A B L E 3
P A T I E N T — O s v a l d o F . . . R . . . ; A g e — 3 3 y e a r s ; B o d y W e i g h t — 5 6 K g .
D A T E P U L S E T E M P . C °
A
L A B O R A '
B
C F T
rO RIES
c
E C GV A C -C I N E
N e r
p a r a s i t o
B L O O D C U L T .
N u m b e r t u b e s
( )
X E N O
N u m b e r b u g s
( )
B L O O D I N O C . I N M I C E
N u m b e r m i c e
( )
O B S . C F T C F T I F T
1 1 - 0 6 - 7 1 N
21-06-71
8 0 3 6 , 7 2 x 1 0 52 2 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 , 2 2 3 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,2 2 4 - 0 6 - 7 1 8 0 3 6 , 0 2 5 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 , 0 2 6 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,0 2 7 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,7 2 8 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 , 0 2 9 - 0 6 - 7 1 7 8 3 5 ,8 3 0 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 , 5 0 2 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 , 3 0 5 - 0 7 - 7 1 7 6 3 5 , 8 0 6 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 , 4 0 7 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,2 0 8 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0 0 9 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 , 0 1 0 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0 1 2 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 , 0 1 5 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 , 0
21-07-71
7 6 3 6 ,0 _ _ — — — N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )21-08-71
7 6 3 6 ,0 — — — — N, L — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )
19-09-71
7 8 3 6 ,2_
__ N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )18-10-71
-- - - -— — —21-11-71
__ — -— —08-01-72
7 8 3 6 ,5 —z
_
N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 ) 2 ,4T A B L E 4
P A T I E N T — E d s o n M . . . S . . . ; A g e — 2 3 y e a r s ; B o d y W e i g h t — 6 0 K g .
D A T E P U L S E T E M P . C °
A B
L A B O R i
C
I T O R I E S
D E E C G V A C
C I N E
B L O O D C U L T . N u m b e r
t u b e s ( )
X E N O
N u m b e r b u g s
( )
B L O O D I N O C . N u m b e r
m i c e ( )
O B S .
C F T C F T + + C F T : I F T C F T + + 1
I F T C F T + + I F T
1 1 - 0 6 - 7 1 .— — — — N
21-06-71
7 8 3 6 ,0 2 x l 0 32 2 - 0 6 - 7 1 7 4 3 5 ,8 2 3 - 0 6 - 7 1 7 6 3 5 , 8 2 4 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,0 2 5 - 0 6 - 7 1 7 4 3 6 , 0 2 6 - 0 6 - 7 1 7 4 3 6 , 5 2 7 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 , 0 2 8 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,0 2 9 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,2 3 0 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,0
0 2 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 , 0 l . r r . K :
0 5 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0
0 6 - 0 7 - 7 1 8 0 3 6 , 0 '
0 7 - 0 7 - 7 1 8 0 3 6 ,5 0 8 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 , 2 0 9 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,2 1 2 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0 1 5 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,0
21-07-71
7 6 3 5 ,8 ■ — .— — .— N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )20-08-71
— — — N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )19-09-71
7 8 3 6 ,5 __ __ ._ _ N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )18-10-71
_
_
.±
.—21-11-71
_
a . c ._
_
21-03-72
> 3 , 0 .— —_
—27-06-72
■ — — — — —N
— ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )T A B L E 5
P A T I E N T — J o s é C . . . S . . . M . . . ; A g e — 2 3 y e a r s ; B o d y W e i g h t — 7 8 K g .
L A B O R A T O R I E S
D A T E P U L S E T E M P C °
1 1 - 0 6 - 7 1
-21-06-71
7 8 3 6 ,1 2 2 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,5 2 3 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,0 2 4 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,3 2 5 - 0 6 - 7 1 8 4 3 6 ,0 2 6 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,8 2 7 - 0 6 - 7 ) , 7 6 3 6 ,5 2 8 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,0 2 9 - 0 6 - 7 1 7 6 3 6 ,5 3 0 - 0 6 - 7 1 7 8 3 6 ,2 0 2 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,4 0 5 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,1 0 6 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,5 0 7 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 ,5 0 8 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 6 0 9 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0 1 0 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,5 1 2 - 0 7 - 7 1 7 8 3 6 ,0 1 5 - 0 7 - 7 1 7 6 3 6 021-07-71
7 8 3 6 .521-08-71
7 6 S 7 .018-09-71
18-10-71
21-11-71
08-01-72
7 8 3 6 ,31 2-0 1 - 7 2
2Z-06-72
A B C D E E C G
C F T + + C F T + H C F T + i I F T C F T + + T F T C F T + + j I F T
•
1
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N
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V A C -C I N E
B L O O D X E N O B L O O D C U L T . I N O C .
N u m b e r N u m b e r N u m b e r O B S . t u b e s b u g s m i c e
( ) ( ) ( )
> 3 , 0 —
> 3 , 0 ± > 3 , 0 > 3 , 0
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2 x 1 0
-T e s t a f t e r e x e r c i s e ( F o o t - b a l l )
N — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 ) N i — ( 5 ) — ( 5 ) — ( 5 )
N
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1
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1
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