26 a 29 de novembro de 2013
EFEITOS DO PESTICIDA ATRAZINA
EPIDERME
Brenda Batista Ferreira1; Juliana Matos Fabio de Jesus Castro4.
1
Aluna do curso de Biologia, Campus de Araguaína, e
4
Oirientador do Curso de Biologia; Campus de Aragu
Para suprir a grande demanda mundial por alimentos, o uso massivo de pesticidas na agricultura tornou-se uma importante estratégia para se alcançar maior produtividade.
a agricultura intensiva, como as culturas de cana
de herbicidas da classe das triazinas (ametrina, atrazina e a simazina
intensiva destes insumos tem papel fundamental na contaminação ambiental presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos
efeitos nocivos do pesticida atrazina sobre o lambari,
interessante para estudos ecotoxicológicos e possível candidato a espécie bioindicadora utilizado o herbicida GESAPRE
controle de pragas em culturas como o milho, a cana
a atrazina. Um teste preliminar foi desenvolvido para determinar a concentração letal do herbicida e a partir dele, calcular os valores das concentrações definitivas a serem utilizadas para se encontrar a concentração letal (CL
determinação da CL50-96h, exemplares de lambaris foram submetidos a um novo protocolo experimental, utilizando-se uma concentração sub
concentração subletal estimulou a proliferação de células mucosas na epiderme dos animais contaminados. O trabalho foi realizado na
EMVZ/UFT em Araguaína.
Palavras-chave: Contaminação, Pesticida, Toxicidade, Xenobióticos
Para suprir a grande demanda mundial por alimentos, o uso massivo de pesticidas na agricultura tornou-se uma importante estratégia para se alcançar maior produtividade. No entanto, é do conhecimento geral que estes agentes químicos poluem e causam grandes
26 a 29 de novembro de 2013 – Campus de Palmas
EFEITOS DO PESTICIDA ATRAZINA EM CÉLULAS MUCOSA
EPIDERME DO LAMBARI, Astyanax SP
Juliana Matos Visnoveski G. de Oliveira2; Sandro Estevan Moron
Aluna do curso de Biologia, Campus de Araguaína, e-mail: brendaportinary@hotmail.com Oirientador do Curso de Biologia; Campus de Araguaína; e-mail: fabiuscastrus@yahoo.com.br
RESUMO
grande demanda mundial por alimentos, o uso massivo de pesticidas na se uma importante estratégia para se alcançar maior produtividade.
a agricultura intensiva, como as culturas de cana-de-açúcar e soja, utiliza grandes quanti de herbicidas da classe das triazinas (ametrina, atrazina e a simazina
intensiva destes insumos tem papel fundamental na contaminação ambiental
presente trabalho teve como objetivo avaliar os efeitos de toxicidade, bem como os potenciais efeitos nocivos do pesticida atrazina sobre o lambari, Astyanax SP por ser uma
interessante para estudos ecotoxicológicos e possível candidato a espécie bioindicadora utilizado o herbicida GESAPREME 500 CIBA-GEIGY®, que é um seletivo indicado para o controle de pragas em culturas como o milho, a cana-de-açúcar e o sorgo, cujo princípio ativo é Um teste preliminar foi desenvolvido para determinar a concentração letal do tir dele, calcular os valores das concentrações definitivas a serem utilizadas para se encontrar a concentração letal (CL50-96h) do herbicida para a espécie em estudo.
, exemplares de lambaris foram submetidos a um novo protocolo se uma concentração sub-letal de atrazina. L
estimulou a proliferação de células mucosas na epiderme dos animais rabalho foi realizado na Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia em Araguaína.
Contaminação, GESAPREME 500 CIBA-GEIGY Pesticida, Toxicidade, Xenobióticos
INTRODUÇÃO
Para suprir a grande demanda mundial por alimentos, o uso massivo de pesticidas na se uma importante estratégia para se alcançar maior produtividade. No entanto, é do conhecimento geral que estes agentes químicos poluem e causam grandes
CÉLULAS MUCOSAS DA
Astyanax SP.
Sandro Estevan Moron3;
brendaportinary@hotmail.com, bolsista PIBIC/UFT fabiuscastrus@yahoo.com.br
grande demanda mundial por alimentos, o uso massivo de pesticidas na se uma importante estratégia para se alcançar maior produtividade. No Brasil açúcar e soja, utiliza grandes quantidades de herbicidas da classe das triazinas (ametrina, atrazina e a simazina). Porém, a utilização intensiva destes insumos tem papel fundamental na contaminação ambiental. Com isso o de toxicidade, bem como os potenciais por ser uma espécie bastante interessante para estudos ecotoxicológicos e possível candidato a espécie bioindicadora. Foi , que é um seletivo indicado para o açúcar e o sorgo, cujo princípio ativo é Um teste preliminar foi desenvolvido para determinar a concentração letal do tir dele, calcular os valores das concentrações definitivas a serem utilizadas ) do herbicida para a espécie em estudo. Após a , exemplares de lambaris foram submetidos a um novo protocolo . Logo a exposição à estimulou a proliferação de células mucosas na epiderme dos animais Escola de Medicina Veterinária e Zootecnia –
GEIGY®,Herbicida,
Para suprir a grande demanda mundial por alimentos, o uso massivo de pesticidas na se uma importante estratégia para se alcançar maior produtividade. No entanto, é do conhecimento geral que estes agentes químicos poluem e causam grandes
26 a 29 de novembro de 2013
alterações nos mais variados ambientes, afetando os organismos que neles vivem, bem como a própria população humana (PEÑA et al., 2001).
Os pesticidas quando aplicados diretamente no solo podem ser degradados por vias químicas, fotólise ou ação de microrg
podem permanecer no ambiente, sem sofrer qualquer alteração. Essas moléculas podem ser adsorvidas nas partículas do solo, dessorvidas, sofrendo lixiviação e atingindo as águas superficiais e subterrâneas (KLAASSEN, 1995). Uma vez que atinge o ambiente aquático os pesticidas e outros xenobióticos de maneira geral podem atuar de várias maneiras e nos mais variados órgãos, tecidos e células dos peixes. Os efeitos destes agentes podem ser tanto diretos como indiretos e se manifestar nos níveis de organização bioquímico, fisiológico e morfológico do organismo, ou ainda refletir
(TEH et al., 1997; PEÑA et al., 2001).
Com o intuito de estudar os efeitos causados os peixes pela ação dos pesticidas foram utilizados lambari (Astyanax sp
trabalho, Esta espécie de peixe pode ser encontrada nas Bacias Amazônica, Ara Tocantins, São Francisco, Prata e Atlântico Sul. Além disso, o lambari tem se tornado uma espécie economicamente atrativa, sendo apreciado principalmente como aperitivo pela população (HAYASHI et al., 2004; MEURER et al., 2005).
Para o desenvolvimento dos experimentos, exemplares de lambari,
coletados em pisciculturas e lagos da região de Araguaína/TO. Os animais utilizados nos testes estavam em idade adulta. Foram transportados ao Laboratório de Bioquímica do Tec Animal (EMVZ/UFT) e mantidos em dois tanques de 1000L cada, recebendo suprimento de água constantemente aerada e renovada. Foi respeitado o tempo de aclimatação dos peixes às novas condições laboratoriais, sendo a temperatura mantida em torno de 25°C e
de 12L:12D. Os animais foram alimentados duas vezes ao dia com ração comercial extrusada contendo 40% de proteína. Os parâmetros de qualidade de água, como o nível de pH e oxigênio dissolvido, foram constantemente monitorados durante este pe
Um teste preliminar foi desenvolvido para determinar a concentração letal do herbicida e a partir dele, calcular os valores das concentrações definitivas a serem utilizadas para se encontrar a concentração letal (CL
animais experimentais foram subdivididos em seis grupos de dez animais cada, sendo que cada 26 a 29 de novembro de 2013 – Campus de Palmas
alterações nos mais variados ambientes, afetando os organismos que neles vivem, bem como a própria população humana (PEÑA et al., 2001).
Os pesticidas quando aplicados diretamente no solo podem ser degradados por vias químicas, fotólise ou ação de microrganismos. Entretanto, muitas moléculas de alta persistência podem permanecer no ambiente, sem sofrer qualquer alteração. Essas moléculas podem ser adsorvidas nas partículas do solo, dessorvidas, sofrendo lixiviação e atingindo as águas râneas (KLAASSEN, 1995). Uma vez que atinge o ambiente aquático os pesticidas e outros xenobióticos de maneira geral podem atuar de várias maneiras e nos mais variados órgãos, tecidos e células dos peixes. Os efeitos destes agentes podem ser tanto diretos como indiretos e se manifestar nos níveis de organização bioquímico, fisiológico e morfológico do organismo, ou ainda refletir-se nas estruturas e dinâmicas das populações e comunidades (TEH et al., 1997; PEÑA et al., 2001).
Com o intuito de estudar os efeitos causados os peixes pela ação dos pesticidas foram
Astyanax sp), a espécie íctia proposta como objeto de estudo no presente
trabalho, Esta espécie de peixe pode ser encontrada nas Bacias Amazônica, Ara Tocantins, São Francisco, Prata e Atlântico Sul. Além disso, o lambari tem se tornado uma espécie economicamente atrativa, sendo apreciado principalmente como aperitivo pela população (HAYASHI et al., 2004; MEURER et al., 2005).
MATERIAIS MÉTODOS
ra o desenvolvimento dos experimentos, exemplares de lambari,
coletados em pisciculturas e lagos da região de Araguaína/TO. Os animais utilizados nos testes estavam em idade adulta. Foram transportados ao Laboratório de Bioquímica do Tec Animal (EMVZ/UFT) e mantidos em dois tanques de 1000L cada, recebendo suprimento de água constantemente aerada e renovada. Foi respeitado o tempo de aclimatação dos peixes às novas condições laboratoriais, sendo a temperatura mantida em torno de 25°C e
de 12L:12D. Os animais foram alimentados duas vezes ao dia com ração comercial extrusada contendo 40% de proteína. Os parâmetros de qualidade de água, como o nível de pH e oxigênio dissolvido, foram constantemente monitorados durante este período.
Um teste preliminar foi desenvolvido para determinar a concentração letal do herbicida e a partir dele, calcular os valores das concentrações definitivas a serem utilizadas para se encontrar a concentração letal (CL50-96h) do herbicida para a espécie em estudo. Para tal, os animais experimentais foram subdivididos em seis grupos de dez animais cada, sendo que cada alterações nos mais variados ambientes, afetando os organismos que neles vivem, bem como a
Os pesticidas quando aplicados diretamente no solo podem ser degradados por vias anismos. Entretanto, muitas moléculas de alta persistência podem permanecer no ambiente, sem sofrer qualquer alteração. Essas moléculas podem ser adsorvidas nas partículas do solo, dessorvidas, sofrendo lixiviação e atingindo as águas râneas (KLAASSEN, 1995). Uma vez que atinge o ambiente aquático os pesticidas e outros xenobióticos de maneira geral podem atuar de várias maneiras e nos mais variados órgãos, tecidos e células dos peixes. Os efeitos destes agentes podem ser tanto diretos como indiretos e se manifestar nos níveis de organização bioquímico, fisiológico e morfológico se nas estruturas e dinâmicas das populações e comunidades
Com o intuito de estudar os efeitos causados os peixes pela ação dos pesticidas foram ), a espécie íctia proposta como objeto de estudo no presente trabalho, Esta espécie de peixe pode ser encontrada nas Bacias Amazônica, Araguaia-Tocantins, São Francisco, Prata e Atlântico Sul. Além disso, o lambari tem se tornado uma espécie economicamente atrativa, sendo apreciado principalmente como aperitivo pela
ra o desenvolvimento dos experimentos, exemplares de lambari, Astyanax sp, foram coletados em pisciculturas e lagos da região de Araguaína/TO. Os animais utilizados nos testes estavam em idade adulta. Foram transportados ao Laboratório de Bioquímica do Tecido Animal (EMVZ/UFT) e mantidos em dois tanques de 1000L cada, recebendo suprimento de água constantemente aerada e renovada. Foi respeitado o tempo de aclimatação dos peixes às novas condições laboratoriais, sendo a temperatura mantida em torno de 25°C e o fotoperíodo de 12L:12D. Os animais foram alimentados duas vezes ao dia com ração comercial extrusada contendo 40% de proteína. Os parâmetros de qualidade de água, como o nível de pH e oxigênio
Um teste preliminar foi desenvolvido para determinar a concentração letal do herbicida e a partir dele, calcular os valores das concentrações definitivas a serem utilizadas para se ) do herbicida para a espécie em estudo. Para tal, os animais experimentais foram subdivididos em seis grupos de dez animais cada, sendo que cada
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grupo foi alocado em aquário individual. Os grupos foram, então, assim designados: controle, 10, 20, 25, 30 e 40 mg/L do herbicida GESAPRIM 500 CIBA
permaneceram nos aquários durante o período de 96h, o número de animais mortos foi quantificado a cada 24 h. O experimento foi realizado em aquários de vidro de 170L, em sistema semi-estático, água fo
subdivididos em sete grupos de oito animais, cada grupo em aquário individual
melhor controle e confiabilidade este protocolo experimental foi repetido duas vezes (réplica). O programa computacional utilizado para determinação do valor da CL
Spearman-Karber.
Após a determinação da CL protocolo experimental, utilizando
dos efeitos do pesticida nos parâmetros sanguíneos e teciduais. Assim, a partir da determinação da CL50-96h foi escolhida uma concentração sub
experimentais foram semelhantes aos adotados na determinação
que será investigada apenas uma concentração de atrazina, além do controle.
os animais experimentais foram rapidamente capturados e transferidos para um aquário contendo 0,01% de benzocaína, a fim de que se
utilizadas para análises dos parâmetros sanguíneos. Após a coleta de sangue, os peixes foram sacrificados por secção da coluna vertebral. Amostras de pele da região superior da cabeça foram coletadas com auxílio d
Para microscopia de luz, amostras de pele foram fixadas em solução Bouin por 24h a temperatura ambiente. Esta solução fixada
desidratadas com uma serie alcoó montadas sobre lâminas e
determinação das análises histopatógicas. Para a determinação do número de células mucosas no epitélio branquial e epiderme, os cortes histológicos foram corados com
PAS(método do ácido periódico de schiff), que cora esp
Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média, para n = 8 peixes em cada tratamento ou tempo de amostragem. Foi aplicado o teste não paramétrico com pós teste de Kruskal-Wallis, utlizando o programa estatístico (GRAPHPAD
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grupo foi alocado em aquário individual. Os grupos foram, então, assim designados: controle, 40 mg/L do herbicida GESAPRIM 500 CIBA
permaneceram nos aquários durante o período de 96h, o número de animais mortos foi quantificado a cada 24 h. O experimento foi realizado em aquários de vidro de 170L, em estático, água foi renovada a cada 24h, os animais experimentais foram subdivididos em sete grupos de oito animais, cada grupo em aquário individual
melhor controle e confiabilidade este protocolo experimental foi repetido duas vezes (réplica). ional utilizado para determinação do valor da CL
Após a determinação da CL50-96h, exemplares de lambaris foram submetidos a um novo protocolo experimental, utilizando-se uma concentração sub-letal de atrazina
dos efeitos do pesticida nos parâmetros sanguíneos e teciduais. Assim, a partir da determinação escolhida uma concentração sub-letal do pesticida. Os procedimentos experimentais foram semelhantes aos adotados na determinação da CL50
que será investigada apenas uma concentração de atrazina, além do controle.
os animais experimentais foram rapidamente capturados e transferidos para um aquário contendo 0,01% de benzocaína, a fim de que sejam anestesiados. Amostras de sangue foram utilizadas para análises dos parâmetros sanguíneos. Após a coleta de sangue, os peixes foram sacrificados por secção da coluna vertebral. Amostras de pele da região superior da cabeça foram coletadas com auxílio de bisturi e imersas em soluções fixadoras de Bouin.
Para microscopia de luz, amostras de pele foram fixadas em solução Bouin por 24h a Esta solução fixada foi removida com etanol70%. As amostras foram desidratadas com uma serie alcoólica, logo após inclusas em parafina e cortadas em micrótomo
e coradas com corantes de rotina (hematoxilina + eosina) para determinação das análises histopatógicas. Para a determinação do número de células mucosas
ial e epiderme, os cortes histológicos foram corados com periódico de schiff), que cora especificamente este tipo celular.
Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média, para n = 8 peixes em cada tratamento ou tempo de amostragem. Foi aplicado o teste não paramétrico com pós
lis, utlizando o programa estatístico (GRAPHPAD-RESULTADO E DISCUSSÃO
grupo foi alocado em aquário individual. Os grupos foram, então, assim designados: controle, 40 mg/L do herbicida GESAPRIM 500 CIBA-GEIGY. Os peixes permaneceram nos aquários durante o período de 96h, o número de animais mortos foi quantificado a cada 24 h. O experimento foi realizado em aquários de vidro de 170L, em animais experimentais foram subdivididos em sete grupos de oito animais, cada grupo em aquário individual. Para um melhor controle e confiabilidade este protocolo experimental foi repetido duas vezes (réplica). ional utilizado para determinação do valor da CL50-96h foi o Trimmed
, exemplares de lambaris foram submetidos a um novo letal de atrazina para avaliação dos efeitos do pesticida nos parâmetros sanguíneos e teciduais. Assim, a partir da determinação letal do pesticida. Os procedimentos 50-96h, com a diferença de que será investigada apenas uma concentração de atrazina, além do controle. Para amostragem, os animais experimentais foram rapidamente capturados e transferidos para um aquário Amostras de sangue foram utilizadas para análises dos parâmetros sanguíneos. Após a coleta de sangue, os peixes foram sacrificados por secção da coluna vertebral. Amostras de pele da região superior da cabeça
e bisturi e imersas em soluções fixadoras de Bouin.
Para microscopia de luz, amostras de pele foram fixadas em solução Bouin por 24h a foi removida com etanol70%. As amostras foram lica, logo após inclusas em parafina e cortadas em micrótomo coradas com corantes de rotina (hematoxilina + eosina) para determinação das análises histopatógicas. Para a determinação do número de células mucosas ial e epiderme, os cortes histológicos foram corados com o método
ecificamente este tipo celular.
Os resultados foram expressos como média ± erro padrão da média, para n = 8 peixes em cada tratamento ou tempo de amostragem. Foi aplicado o teste não paramétrico com
26 a 29 de novembro de 2013 Nos testes para determinação da CL
aumentou de acordo com os incrementos nas concentrações do herbicida
Apenas no grupo controle e na concentração de 10mg/L não houve mortalidade após as 96h de exposição, indicando que a espécie íctia
da concentração em relação ao herbicida, conforme mostra a Tabela 1. Tabela 1: Mortalidade de Lambaris,
concentrações do herbicida GESAPARIM 500.
CONCENTRAÇÃO NÚMERO DE ANIMAIS EM (mg/L) 24h CONTROLE 0 10 0 15 1 20 4 23 6 25 7 30 15 *valor de CL50-96h= 18,60 mg/L.
Este resultado indica uma maior resistência dessa espécie, em relação a outras espécies como o tambaqui
tilápia (Tilapia mossambicus
comparado à carpa (Cyprinus carpio; resistência semelhante.
A exposição de Astyanax sp
proliferação de células mucosas na epiderme dos animais contaminados, conforme mostra a Figura 1. A proliferação deste tipo celular é marcadamente mais evidente após 72 horas de exposição ao herbicida (Figura 1).
0 2 4 6 8 10 24 h N ú m er o to ta l d e cé lu la s m u co sa (N /µ m )
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Nos testes para determinação da CL50-96h verificou-se que a mortalidade dos animais aumentou de acordo com os incrementos nas concentrações do herbicida
no grupo controle e na concentração de 10mg/L não houve mortalidade após as 96h de exposição, indicando que a espécie íctia Astyanax sp segue um padrão de resposta dependente da concentração em relação ao herbicida, conforme mostra a Tabela 1.
: Mortalidade de Lambaris, Astyanax sp, submetidos a diferentes concentrações do herbicida GESAPARIM 500.
NÚMERO DE ANIMAIS EM EXPOSIÇÃO TOTAL DE PEIXES MORTALIDADE 48h 72h 96h INICIAL FINAL 0 0 0 16 16 0 0 0 16 16 1 0 0 16 14 4 1 0 16 7 6 0 1 16 3 7 0 2 16 0 1 0 0 16 0 = 18,60 mg/L.
Este resultado indica uma maior resistência dessa espécie, em relação a outras espécies como o tambaqui (Colossama macropomum; CHAPADENSE et al., 2009) e a
Tilapia mossambicus; PRASSAD & REDDY, 1994). Por outro lado, quando Cyprinus carpio; NESKIVICK et al., 1993), o lambari possui
Astyanax sp à concentração subletal de atrazina estimulou a
proliferação de células mucosas na epiderme dos animais contaminados, conforme A proliferação deste tipo celular é marcadamente mais evidente após 72 horas de exposição ao herbicida (Figura 1).
48 h 72 h 96 h
Tempo de exposição ao herbicida N° de Células/Comp. de tecido
se que a mortalidade dos animais aumentou de acordo com os incrementos nas concentrações do herbicida atrazina na água. no grupo controle e na concentração de 10mg/L não houve mortalidade após as 96h de segue um padrão de resposta dependente
, submetidos a diferentes MORTALIDADE (%) 0 0 12,5 56,25 81,25 100 100
Este resultado indica uma maior resistência dessa espécie, em relação a outras ; CHAPADENSE et al., 2009) e a ; PRASSAD & REDDY, 1994). Por outro lado, quando NESKIVICK et al., 1993), o lambari possui
à concentração subletal de atrazina estimulou a proliferação de células mucosas na epiderme dos animais contaminados, conforme A proliferação deste tipo celular é marcadamente mais evidente após
96 h
Controle Contaminado
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FIGURA 1- Valores médios (± EPM) do numero total de células mucosas por comprimento (CM_PAS+, N/µm), na epiderme de Astyanax sp
NORTOX 500 SC ) e amostrado após a contaminação em (24 HAC) (P <0,0001) ***, (48 HAC) (P <0,0007) *** (72 HAC) (P < 0,0001)***, (96 HAC) (P < 0,0001)***, indicam diferença significativa em relação com o controle.
Outras análises morfológicas do tecido epitelial, branquial e renal darão continuidade ao presente projeto de pesquisa e que contribuirão para uma visão mais ampla dos efeitos da atrazina sobre células e tecidos de
REFERÊNCIA B
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"O presente trabalho foi realizado com o apoio da UFT” 26 a 29 de novembro de 2013 – Campus de Palmas
Valores médios (± EPM) do numero total de células mucosas por comprimento (CM_PAS+,
Astyanax sp contaminado com 0 mg/L (controle) e 10 mg/L de (ATRAZINA
NORTOX 500 SC ) e amostrado após a contaminação em (24 HAC) (P <0,0001) ***, (48 HAC) (P <0,0007) *** (72 HAC) (P < 0,0001)***, (96 HAC) (P < 0,0001)***, indicam diferença significativa em
Outras análises morfológicas do tecido epitelial, branquial e renal darão continuidade ao presente projeto de pesquisa e que contribuirão para uma visão mais ampla dos efeitos da atrazina sobre células e tecidos de Astyanax sp.
REFERÊNCIA BIBLIOGRÁFICAS
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"O presente trabalho foi realizado com o apoio da UFT”
Valores médios (± EPM) do numero total de células mucosas por comprimento (CM_PAS+, contaminado com 0 mg/L (controle) e 10 mg/L de (ATRAZINA NORTOX 500 SC ) e amostrado após a contaminação em (24 HAC) (P <0,0001) ***, (48 HAC) (P <0,0007) *** (72 HAC) (P < 0,0001)***, (96 HAC) (P < 0,0001)***, indicam diferença significativa em
Outras análises morfológicas do tecido epitelial, branquial e renal darão continuidade ao presente projeto de pesquisa e que contribuirão para uma visão mais
CHAPADENSE, P.F.G.; CASTRO, F.J.; ALMEIDA J.A.; MORON, S.E. Toxicity of . Revista Brasileira de Saúde e Produção
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