R e v ista d a S o c ie d a d e B ra sile ir a d e M edic ina T rop ica l 2 7 (3 ):1 2 7 -1 34 , ju l- s e t, 1994.
M IO CARDITE CHAGÁSICA CRÔNICA HUM ANA: ESTUDO
QUANTITATIVO DOS LINFÓCITOS C D 4+ E DOS C D 8 + NO
EXSUDATO INFLAMATÓRIO
Sebastião Tostes Junior, Edison Reis Lopes, Fausto Edm undo L im a Pereira e Edm undo Chapadeiro
E m c o rte s histo lógic os d e fra g m e n to s tra nsm urais congelado s d a p a re d e livre d o ventrículo esqu erdo, obtidos em necrópsias de 10 chagásicos crônicos cardiopatas, fo r a m co nta do s os linfócitos C D 4+ e o s C D 8+ d o infiltrado m iocãrdico. A s célu las fo r a m m arcad a s com antic orp os m o noclonais, usando-se a técnica estreptavidina-biotina. Contou-se: l ) o s linfócitos em todo o exsudato (LTE) e, separadam ente, 2) os linfócitos que estavam em co ntato ou m uito p ró x im o s d a s m iocélulas (LCMPM). F oram considerados m uito p ró x im o s aq ueles linfócitos cu jo s núc leos dista va m , d asm io célu la s, m enos que se us p ró p rio s m en ore s diâ m etros nucleares. Os linfócitos C D 8 + fo ra m m ais num erosos do que os C D 4 + , prin cip alm ente entre os L C M P M . A relaç ão C D 4/C D 8 f o i de 0 ,3 7 ± 0 ,2 0 entre o s L T E , m a s f o i m e n or q ua ndo co nsid erado s ap en as o s L C M P M (0,23 ± 0,11). D en tre os L T E , 34 ± 11% do s C D 8 + (contra 2 4 ± 12% d o s C D 4 + ) eram L C M PM . Todas essas diferenças fo r a m estatisticam ente significantes. L in fó cito s d a s d u a s su bp op ula çõ es fo r a m vistos em íntim a relação com m io células íntegra s ou rotas, e n ã o fo ra m ob serva dos pa ra sita s nos co rtes exam inados. E stes acha do s co nco rda m com a idéia d e q ue a lesão dos m iocardiócitos na fo r m a cardíaca d a do en ça d e C hagas h u m an a é m ed ia da princ ip a lm en te p o r linfócitos T citotóxicos.
P alavras-chaves: T ripanosom íase cruzi. D o ença de Chagas. M iocardite. P atogênese. L in fó cito s T.
A c a ra c te riz a ç ã o d o in f iltr a d o c e lu la r d a m io c a rd ite c h a g á sic a c rô n ic a h u m a n a (M C h C rH ) p o d e f o r n e c e r in fo rm a ç õ e s re le v a n te s p a r a o e sc la re c im e n to d a p a to g ê n e se , h is tó ria n a tu ra l, te ra p ê u tic a e p ro g n ó s tic o d a doença de C hagas (D C h ).
O s m é to d o s c o n v e n c io n a is m o stra m q u e o e x s u d a to c e lu la r n a M C h C r H é c o n s titu íd o
p re d o m in a n te m e n te d e lin fó c ito s e m acró fa g o s, ao la d o d e m e n o r n ú m e ro d e e o sin ó filo s, p la sm ó c ito s, n e u tr ó f ilo s e m a s tó c ito s 6. M a is re c e n te m e n te , e s tu d o s im u n o h is to q u ím ic o s tê m d e m o n s tra d o p re d o m ín io d e c é lu la s C D 8 + 4 7. E m u m a dessas p e sq u isa s, H ig u c h i e c o ls .4 u tiliz a ra m b ió p sias
endom iocárdicas d e v en trícu lo direito, procedim ento q u e a p re s e n ta lim ita ç õ e s e m razão d a s p eq u en as d im e n sõ e s d o s fra g m e n to s e d a sede em q u e são c o lh id o s2. N o o u tro e stu d o , R e is e c o ls .7 analisaram
C u rso d e P ó s-g rad u ação em P atologia H um ana da Facu ld ad e de M ed icin a d o T riâ n g u lo M in eiro , U b erab a, M G .
S u p o rte fin an ceiro : C N P q e N IH .
E n d e r e ç o p a r a c o r r e s p o n d ê n c ia : D r. Sebastião T o stes Junior. C urso de P ós-graduação em P atologia H um ana, H ospital E sco la. R . G etúlio G uarita 130, 3 8 0 2 5 -4 4 0 U beraba, M G .
R e c e b id o p a r a p u b lic a ç ã o e m 0 5 /0 4 /9 4 .
a m o stras tra n sm u ra is d o v e n tríc u lo e s q u e rd o e d o sep to in te rv e n tric u la r.
C o m a fin a lid a d e d e p ro c u ra r m a is ele m e n to s q u e p u d e sse m a u x ilia r n o e sc la re c im e n to d o p ap e l dos lin fó c ito s T n a g ê n e se d a s le sõ e s da s m io c é lu la s c a rd íacas n a D C h , n o s p a re c e u d e in te re sse a m p lia r os estu d o s im u n o h isto q u ím ic o s d essa s c é lu la s d o e x su d ato d a M C h C rH . P a ra is to , e m a m o stra s tra n sm u ra is d o v e n tríc u lo e s q u e rd o , q u a n tific a m o s o s lin fó c ito s C D 4 + e o s C D 8 + n ã o só d e to d o o in filtra d o , m as tam b ém , se p a ra d a m en te , os q u e se en co n tra v a m e m c o n ta to o u m u ito p ró x im o s dos
m io c a rd ió c ito s.
M A T E R IA L E M É T O D O S
P a c i e n t e s e o b t e n ç ã o d o s f r a g m e n t o s .
F ra g m e n to s d e v e n tríc u lo e s q u e rd o fo ra m o b tid o s em n e c ró p sia s co m p le ta s de 10 c h a g á sic o s c rô n ic o s c a rd io p a ta s - c o m in su fic iê n c ia c a rd ía c a c o n g e stiv a e /o u a rritm ia s - p ro v e n ie n te s d o H o sp ita l E s c o la d a
F a c u ld a d e d e M e d ic in a d o T riâ n g u lo M in e iro e do P o sto M é d ic o L eg al de U b e ra b a , c u jo s d a d o s se
en c o n tra m n a T a b e la 1.
T o ste s J u n io r S , L o p e s E R , P ere ira FEL, C ha pa deiro E. M io cardite cha g á sic a c rô n ic a h u m a n a : estu do q u a n titativ o d o s lin fó c ito s C D 4 + e d o s C D 8 + no exsu d a to inflam atório. R ev ista d a So cie d ad e B ra sile ira de M ed ic in a T ro p ica l 2 7 :1 2 7 -1 3 4 , ju l- s e t, 1994.
T abela 1 - D a d o s d o s pa c ie n te s, todo s cardiopatas, bra nc os e d o sexo m asculino.
Caso Caso Peso do coração
(gramas)
ICC
Mega-esôfago
Mega-cólon
Outros achados significativos
1 46 190 - + - broncopneumonia, desnutrição,
2 52 480 +
_
infarto cerebral HAS, infarto cerebral antigo
3 57 580 + - - tromboembolism o pulm onar
4 50 450 - + -
-5 38 450 + - -
-6* 24 350 - - -
-1 40 420 + - - broncopneumonia, cirrose hepática,
8 45 470 +
,
+etilismo crônico caquexia
9 38 240 + - - broncopneum onia, infarto cerebral
10 52 410 - + T
antigo, pielonefrite aguda bilateral
Média Desvio padrão Mediana 45 11 45 404 116 435
IC C = Insuficiência cardíaca congestiva presente em algum momento da vida. * = m orte súbita inesperada.
+ = presente. - = ausente.
HAS = hipertensão arterial sistêmica.
O d ia g n ó stic o d e D C h b a se o u -se n o s dados
c l í n i c o s e a n a t o m o p a t o l ó g i c o s m a c r o e m ic ro sc ó p ic o s e n a s reaçõ es so ro ló g ic a s (fixação
d e c o m p l e m e n t o , h e m a g l u t i n a ç ã o e im u n o flu o re sc ê n c ia ) re a liz a d as n o san g u e e /o u n o
líq u id o p e ric á rd ic o .
A s n e c ró p sia s fo ra m realiz a d as im ediatam ente a p ó s a c o m p ro v a ç ã o d o ó b ito e o p re e n c h im e n to das
fo rm a lid a d e s le g a is p a ra su a execução; qu an d o
n e c e ssá rio , o s c a d á v e res fo ra m c o n se rv a d o s em c â m a ra frig o rífic a a 4 ° C .
O s fra g m e n to s fo ra m re tira d o s d a p o rç ã o lateral d a p a re d e liv re d o v e n tríc u lo e sq u e rd o , n a ju n ç ã o
d o s te rç o s su p e rio r e m é d io , em to d a esp essu ra exceto as trabéculas cárneas, e em balados e colocados e m n itro g ê n io líq u id o , 3 a 10 h o ra s a p ó s a m o rte.
l m u n o h i s t o q u í m i c a . U tiliz a m o s a té c n ic a e s t r e p t a v i d i n a - b i o t i n a , c o m o s a n t i c o r p o s
m o n o c lo n a is m u rin o s “ D a K o T 4 ” , c ó d ig o M 7 1 6 , e
“ D a K o T 8 ” , có d ig o M 7 0 7 . 0 a n tic o rp o “ D a K o T 4 ” m a r c a c é lu la s T a u x ilia r e s /in d u to r a s , a lg u n s m o n ó c ito s d o sa n g u e p e rifé ric o , a lg u n s m acró fag o s
e célu las d e L a n g e rh a n s1. O a n tic o rp o “ D a K o T 8 ”
m a rc a célu las T c ito tó x ic a s/su p re sso ra s e célu las c ito tó x ic a s n a tu ra is 1. R e su m id a m e n te , c o rte s d e 6 m icrô m etro s de e sp essu ra e ra m o b tid o s n o c rio s ta to ,
secados ao a r, fix a d o s em a c e to n a e e m b a la d o s e a rm azen ad as a -7 0 ° C . U m a a q u a tro sem an as a p ó s,
e ra m su b m e tid o s à c o lo ra ç ã o , sen d o to d o s os
p ro c e d im e n to s re a liz a d o s à te m p e ra tu ra a m b ie n te . P rim e ira m e n te e ra m in c u b a d o s p o r 15 m in u to s co m u m do s a n tic o rp o s m o n o c lo n a is, d ilu íd o s 1 :1 0 em T B S p H 7 ,6 . C o n tin u a v a -se o p ro c e d im e n to c o m o
“k i t ” p a ra co lo ra ç ã o rá p id a “D a k o ” , có d ig o K 6 8 7 .
O s co rte s e ra m su c e ssiv a m e n te in c u b a d o s co m : 1)
im u n o g lo b u lin a b io tin ila d a a n ti-im u n o g lo b u lin a de c a m u n d o n g o ; 2) e s tre p ta v id in a lig a d a a fo sta ta se
a lcalin a e 3) u m a m is tu ra d e ta m p ã o tris, n a fto í
f o s f a to ( s u b s t r a t o ) , f u c s i n a ( c r o m ó g e n o ) e a c e le rad o r. A se g u ir, o s c o rte s e ra m c o n tra c o ra d o s co m h e m a to x ilin a d e G ill ( “ S ig m a ” ) e m ontados* C om o c o n tro le p o s itiv o foi u sa d o u m c o rte de
lin fo n o d o o b tid o d e n e c ro p s ia , e m c o n d iç õ e s
T o ste s J u n io r S , L o p e s E R , P e re ir a F EL , C h a pad eiro E. M io c a rd ite c h ag ásic a crô n ic a h u m a n a : es tu d o q u a n tita tivo d o s lin fó c ito s C D 4 + e d o s C D 8 + n o ex su d a to inflam atório. R ev ista d a S o cie d a d e B ra sile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 2 7 :1 2 7 -1 3 4 , ju l- s e t, 1994.
d e c a d a c a so , o s q u a is re c e b ia m T B S ao in v é s do a n tic o rp o m o n o c lo n a l.
C o m o re su lta d o d essa té c n ic a d e c o lo ra ç ã o , as
c é lu la s p o r ta d o r a s d o s a n tíg e n o s p e s q u is a d o s
m o s tra m c ito p la sm a s d e n sa m e n te av e rm e lh a d o s (F ig u ra s 3 A -3 F ).
Q u a n t i fi c a ç ã o d o s L i n f ó c i t o s C D 4 + e d o s C D 8 + . F o i fe ita c o m a o c u la r in te g ra d o ra Z e iss II (F ig u ra 1), aum en to d e 4 0 0 v ezes, e sim ultaneam ente a tra v é s d e d o is sistem as e m c ad a cam p o . N o sistem a 1 fo ra m c o n ta d a s as célu la s q u e esta v a m d e n tro do q u a d ra d o ( 1 ,4 x l 0 '2m m 2) o u q u e eram su p erp o stas
o u ta n g e n c ia d as p o r seu s la d o s; n o siste m a 2 fo ra m
c o n ta d a s as célu la s su p e rp o sta s o u tan g en ciad as pelas b a rras h o riz o n ta is co m traço s v erticais (F iguras
2 e 3 A ).
C o n ta v a -se o s lin fó c ito s C D 4 + e os C D 8 + in ic ia lm e n te d e to d o o in filtra d o e, p o ste rio rm e n te , apenas, a q u e le s q u e esta v a m e m c o n ta to o u m u ito
p ró x im o s das m iocélulas. F o ra m c onsiderados m uito
p ró x im o s o s lin fó c ito s c u jo s n ú c le o s d ista v a m , das
m io c é lu la s , m e n o s q u e se u s p ró p rio s m en o res d iâ m e tro s n u c le a re s (F ig u ra 3B ).
E m c a d a ca so a o b je tiv a e ra c o lo c a d a n o c en tro d o c o rte e e ra m co n ta d a s as célu la s em 100 cam pos
o b tid o s p o r m o v im e n to s h o riz o n ta is e v erticais a lte rn a d o s , sen d o d e sp re z a d o s a q u eles em q u e as
m io c é lu la s o c u p a v a m m enos d a m etad e d a á rea de c o n tag em .
A c o n ta g e m e m 100 c a m p o s fo i re a liz a d a trê s
v e z e s, n ão im e d ia ta m e n te c o n se c u tiv a s, e m c ad a
c o rte , o b te n d o -se d a í o n ú m e ro m é d io d o s su b tip o s d e lin fó c ito s p o r cam po e m c a d a c a so . C o m esses
d ad ò s fo ra m ca lc u la d o s os to ta is d o s lin fó c ito s C D 4 + e d o s C D 8 + , e a re la ç ã o C D 4 /C D 8 , em cada caso. C alcu lam o s ta m b é m as p o rc e n ta g e n s
d o s su b tip o s de lin fó c ito s, d o in fd tra d o m io c á rd ic o em g e ra l, qu e estavam em co n ta to o u m u ito p ró x im o s
das m io c é lu la s, a tra v é s d a c o m p a ra ç ão d o s n ú m e ro s m é d io s, p o r ca m p o , d e c a d a tip o e d e c a d a c aso . D e te rm in o u -se as m é d ia s, o s d e sv io s p a d rõ e s e as
m ed ian as d o s d a d o s o b tid o s.
A n á l i s e e s ta tís tic a . F o ra m u tiliz a d o s o teste "t" de S tu d en t e o te ste d e W ilc o x o n , a m b o s a u m n ív e l de
sig n ific â n c ia d e 5 % .
R E S U L T A D O S
E m to d o s os casos o m io c á rd io a p re se n ta v a in flam ação e fib ro se , q u e v a ria ra m d e m o d e ra d a a se v e ra , e não fo ra m o b se rv a d o s pa ra sita s n o s co rtes
exam inados.
N ã o h o u v e d i f e r e n ç a s e s t a t i s t i c a m e n t e sig n ific a n te s e n tre os v a lo re s d o s d o is siste m a s d e
co n ta g e m , e p o r isso n o s lim ita re m o s a a p re s e n ta r
os dad o s o b tid o s a tra v é s d o siste m a d e b a rra s h o r iz o n ta is , e x p o s to s n a s T a b e la s 2 , 3 e 4 .
T o ste s J u n io r S , L o p e s E R , P e re ir a F EL , C ha pa deiro E. M io cardite c h ag á sic a crô n ic a h u m a n a : estu d o q u a n tita tiv o d o s lin fó c ito s C D 4 + e d o s C D 8 + n o e x su d a to inflam atório . R ev ista d a S o cie d a d e B ra sile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 2 7 :1 2 7 -1 3 4 , ju l- s e t, 1994.
T o stes J u n io r S , L o p e s E R , T e r eira F EL , C hap ade iro E. M io c a rd ite c h a g ásic a c rô n ic a h u m a n a : e stu d o q u an tita tiv o d o s linfó cito s C D 4 + e d o s C D 8 + n o exsud ato inflam atório. R ev ista d a S o cie d a d e B ra sile ir a d e M e d ic in a T ro p ic a l 2 7 :1 2 7-13 4, ju l- s e t, 1994.
Tabela 2 - L in fó cito s T d o infiltrado m iocárdico. N úm eros m éd io s d a s sub po p u la çõ es e do total, p o r cam p o, e re laç ões CD4ICD8.
Barras horizontais
números médios por campo relação
Caso CD4* CD8* Total** CD 4/CD8
1 1,38 2,99 4,37 0,46
2 1,63 2,63 4,26 0,62
3 0,53 1,42 1,95 0,38
4 1,07 1,51 2,58 0,71
5 0,31 1,90 2,21 0,16
6 1,12 3,13 4,25 0,36
7 0,51 1,41 1,91 0,36
8 0,15 1,51 1,66 0,10
9 0,06 0,39 0,45 0,15
10 1,39 3,71 5,10 0,37
Média 0,81 2,06 2,87 0,37
Desvio padrão 0,57 1,02 1,51 0,20
Mediana 0,80 1,71 2,40 0,37
* Os números médios dos linfócitos CD4 e dos CD8 positivos foram obtidos pela média após três contagens de cada subpopulação em 100 campos, com aumento de 400 vezes ao microscópio.
** Resultados das somas das duas colunas anteriores, exceto as médias., os desvios padrões e as medianas.
Análises estatísticas: 1. Comparação entre o número de linfócitos CD4+ e o de CD8+ (teste "t” de Student para populações não correlatas) - o número por campo de linfócitos CD8+ foi maior que o de CD4+ (p = 0,0045).
T abela 3 - L infócito s T, do infiltrado m iocárdico, em contato ou m uito p ró x im o s da s m iocélulas*. N úm eros m édio s d a s subpo pu lações e do total, p o r cam po, e relações C D 4/C D 8.
Barras horizontais
números médios por campo
relação
Caso CD4** CD8** Total*** CD 4/CD8
1 0,29 0,84 1,13 0,35
2 0,14 0,68 0,83 0,21
3 0,12 0,30 0,41 0,39
4 0,19 0,48 0,67 0,40
5 0,12 0,75 0,87 0,16
6 0,24 1,57 1,81 0,15
7 0,13 0,68 0,81 0,19
8 0,04 0,43 0,47 0,09
9 0,03 0,18 0,21 0,17
10 0,17 0,71 0,87 0,24
Média 0,15 0,66 0,81 0,23
Desvio padrão 0,08 0,38 0,44 0,11
Mediana 0,14 0,68 0,82 0,20
* Foram considerados muito próximos os linfócitos cujos núcleos distavam, das miocélulas, menos que seus próprios menores diâmetros nucleares.
** Os números médios dos linfócitos CD4+ e dos CD8+ foram obtidos pela média após três contagens de cada subpopulação em 100 campos, com aumento de 400 vezes ao microscópio.
*** Resultados das somas das duas colunas anteriores, exceto as médias, os desvios padrões e as medianas.
Análises estatísticas: 1. Comparação entre o número de linfócitos CD4+ e o de CD8+ (teste "t" de Student para populações não correlatas) - o número por campo de linfócitos CD8+ foi maior que o de CD4+ (p = 0,0025).
T o ste s J u n io r S , L o p e s E R , P e re ir a F E L , C h a p a d eiro E . M io c a rd ite c h a g á sic a c rô n ic a h u m a n a : e stu d o q u a n tita tiv o d o s lin fó c ito s C D 4 + e d o s C D 8 + n o ex su d a to inflam atório. R e v is ta d a S o c ie d a d e B ra sile ira d e M e d ic in a T ro p ica l 2 7 :1 2 7 -1 3 4 , ju l- s e t, 1994.
Representação simplificada e esquemática dos resultados encontra-se na Figura 4.
L infócitos das duas subpopulações foram encontrados em íntima associação com miocélulas morfologicamente integras (Figuras 3C e 3D ) ou em destruição (Figuras 3E e 3F).
DISCUSSÃO
Nossos resultados demonstram que na MChCrH parte do exsudato é constituído por células C D 4 + e por células CD8 + , sendo estas últimas mais numerosas. Obtivemos relação CD4/CD 8 de 0,37 ± 0 ,20 em amostras transmurais de ventrículo esquerdo, muito próxima à de 0,36 ± 0,03 observada por Reis e cols.7 em fragmentos transmurais de ventrículo esquerdo e do septo interventricular. Valor semelhante foi também obtido por Higuchi e
cols.4, que observaram relação CD4/CD 8 de 0,3 ±
T o ste s J u n io r S, L o p e s E R , P e re ira F EL , C hap ad eiro E. M io cardite ch a g á sic a crô n ic a h u m a n a : es tu d o q u a n tita tivo d o s lin fó c ito s C D 4 + e d o s C D 8 + n o ex su d a to inflam atório. R e v ista d a S o cie d a d e B ra sile ir a de M e d ic in a T ro p ic a l 2 7 :1 2 7 -1 3 4 , ju l- s e t, 1994.
c h a g á sic o c rô n ic o n o q u e se re fe re à re la ç ã o C D 4 / C D 8 n o e x su d a to in fla m a tó rio . C ab e re ssa lta r q u e o s n ú m e r o s a b s o lu to s d e lin f ó c ito s , p o r n ó s constatados n o p resen te e stu d o , d iferem dos relatados p o r H ig u c h i e c o ls .4 e p o r R e is e c o l s .7. Isto se d ev e a q u e , n e ste s trê s tra b a lh o s , fo ra m em pregadas m e to d o lo g ia s d iv e rsa s p a ra c o n ta g e m das células.
P o r o u tro la d o , n o ssa o b se rv a ç ã o da p resen ça d e lin fó c ito s C D 8 + em c o n ta to co m m io c a rd ió c ito s em destruição sugere fortem en te u m a ação patogênica d essas célu la s n a M C h C r. E m c o n c o rd â n c ia com e ssa id é ia , v e rific a m o s q u e a fra ç ã o C D 8 + d o s lin fó c ito s fe n o tip ific a d o s fo i m a io r n a in tim id a d e d o s m io c a rd ió c ito s (C D 4 /C D 8 = 0 ,2 3 ± 0 , 1 1 ) do q u e e m to d o o e x su d a to (C D 4 /C D 8 = 0 ,3 7 ± 0 ,2 0 ) , e q u e 34 + 11% d o s lin fó c ito s C D 8 +
(c o n tra 2 4 + 12% d o s C D 4 + ) d o in filtra d o in fla m a tó rio e sta v a m em co n ta to o u m u ito p ró x im o s das m io c é lu la s c a rd ía c a s . A d em ais, além das células C D 8 + c o n s titu íre m a m a io r p a rte d o ex su d ato 4 7 e e x p re ssa re m G ra n z im a A 7, q u e é u m m a rc a d o r de f c ito to x ic id a d e e m lin fó c ito s T , a ex p re ssã o de a n tíg e n o s d e c la s s e I d o c o m p le x o m a io r d e
M sto c o m p a tib ilid a d e (C H P I) n a s m io célu las está a u m e n ta d a 8, p ro p ic ia n d o a a tiv id a d e cito tó x ic a
d esse s lin fó c ito s .H á , p o rta n to , ev id ên cias d e qu e a le sã o d o s m io c a rd ió c ito s n a fo rm a card ía c a da d o e n ç a d e C h a g a s c rô n ic a h u m a n a é m e d ia d a p rin c ip a lm e n te p o r lin fó c ito s T c ito tó x ic o s, v ia
C H P I.
N o e n t a n t o , e s t a s a v a l i a ç õ e s im u n o h isto q u ím ic a s n ão p e rm ite m c o n c lu ir q u e os
ac h ad o s se ja m os m esm os e m todo o m io c á rd io . P o r isso , n o s p a re c e n e c e ssá rio q u e n o v o s estu d o s sejam re a liz a d o s n a q u e le s lo cais o n d e o T. c r u z i o u seus a n tíg e n o s e stão p re se n te s, in c lu siv e p o rq u e tem sid o d e m o n stra d o p a ra sitism o c a rd íaco em n ú m e ro a p re c iá v e l d e caso s3 s . A lém d isso , se ria tam b ém fu n d a m e n ta l q u e e stu d o s sim ila re s fo ssem feito s em o u tra s e s tru tu ra s , c o m o p o r ex e m p lo , n o s m úsculos liso e e s q u e lé tic o , n o siste m a n e rv o so a u tô n o m o etc. É im p o rta n te re s s a lta r q u e estes c o n h ecim en to s
p o d e ria m a u x ilia r n o esc la re cim e n to da p a to g ên ese d a D C h e , p o r c o n se g u in te , n a su a o rien tação te ra p ê u tic a.
S U M M A R Y
M yocardialexsu da te C D 4+ a n d C D 8 + lymphocytes
w ere co u nted in tra nsm ural left ventricu lar f r e e w all fr o z e n sec tio ns taken fr o m 10 ne cro p sie d ch ronic cardiac chagasic pa tie n ts. The cells w e re labeled with m o n o c lo n a l a n tib o d ie s usin g a stre p ta v id in -b io tin technique. We counted: 1) lym ph ocytes in th e tota l exsudate (LTE) and, se parately, 2) the lym phocytes touching o rv ery near to m y oc ells (LTVNM). L ym pho cytes w ere co nsidered very n ea r w he never th e ir ow n nu cle a r shorte st nuc lear dia m ete r w as larger than th eir distance fr o m m yocells. C D 8 + lym phocytes w ere m ore num erous than C D 4+ lym phocytes, especially am o ng th e L T V N M . The L T E C D 4/CD 8 ratio w as 0 ,3 7 ± 0,20, bu t the L T V N M C D 4/C D 8 ratio w a s sm alle r (0,23 ± 0,11). A m on g th e L T E , 34 ± 11% o fC D 8 + (a g a in st24 + 12% o f C D 4 + ) w ere L T V N M . A ll these d iffe re n ces w ere statistically significant. B oth su bty pes o fT -ly m p h o c y te s w ere fo u n d to h a ve an intim ate relation sh ip with both ruptured and unruptu red m yocells, a n d p a r a site s w ere not seen. These fin d in g s are in acco rd an ce w ith the idea that the m yocardia l cell lesions in the ca rdiac fo r m o f hum an C h a g a s ' d ise ase a re m e dia te d m ainly by T-cytotoxic lym phocytes.
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