1. Ativação da cultura pura de Staphylococcus aureus ATCC 6538 a partir de um meio sólido, que compreendeu na inoculação de uma alçada em
5.1 Avaliação Histológica sob Microscopia de Luz
Os espécimes do grupo CONTROLE mostraram feridas cirúrgicas parcialmente recobertas por epitélio pavimentoso estratificado queratinizado, principalmente no grupo de sete dias. Foi constatada ainda, presença de exsudato fibrinoso, bem como, novos vasos sanguíneos e hiperemia além de um intenso infiltrado inflamatório (Figs. 2,5), tipicamente linfocitário. De acordo com a coloração de Picrosírius, foram verificadas fibras colágenas ainda delgadas e fragmentadas de quantidade moderada no grupo de sete dias (Figs. 3 ) e de forma intensa e mais organizada no grupo de 14 dias (Figs. 6 ).
Os espécimes do grupo LASER (λ680nm) - SETE DIAS apresentaram uma pavimentação epitelial em formação (Figs. 10,16), caracterizada por tecido de granulação rico em hiperemia, edema intersticial, neoformação de vasos sanguíneos, em sua maioria se apresentando congestos e principalmente a presença de um infiltrado inflamatório intenso, predominantemente linfocitário (Figs.11,17,23). Fibroblastos também foram observados em meio ao grande tecido inflamatório. Uma matriz colágena moderada e desorganizada foi evidenciada pela reação histoquímica da colaração Picrosírius (Figs. 12,18,24 ).
Os espécimes do grupo LASER (λ790nm) - SETE DIAS apresentaram pavimentação epitelial em formação (Figs. 28,34) Um vasto tecido de granulação, rico em novos vasos sanguíneos e células típicas de um infiltrado inflamatório intenso, também linfocitário. Hiperemia, edema intersticial
50
também estavam presentes de forma bastante exacerbada (Figs. 29,35,36). Fibroblastos foram observados e pela reação histoquímica da coloração Picrosírius foi evidenciada uma matriz colágena classificada como leve (Figs. 30,36,42 ).
Os espécimes do grupo LASER (λ680nm +λ7900nm)- SETE DIAS apresentaram pavimentação epitelial completa (Figs. 46,52,58) recobrindo um tecido de granulação, rico em novos vasos sanguíneos e células típicas de um infiltrado inflamatório intenso, também linfocitário (47,53,59). Moderada hiperemia. Fibroblastos foram observados e pela reação histoquímica da coloração Picrosírius foi evidenciada uma matriz colágena classificada como intensa, com fibras maduras e organizadas (Figs. 48,54,60).
Os espécimes do grupo LASER (λ680nm) – 14 DIAS apresentaram pavimentação epitelial se apresentava completamente formada (Fig. 7). Na derme, um leve infiltrado inflamatório, basicamente linfocitário, estava presente (Fig. 8). Uma hiperemia e edema intersticial moderados também foram observados (Figs. 8,14), bem como Fibroblastos de várias formas. Através da análise histológica do Picrosírius foi evidenciada uma moderada formação de matriz colágena, com fibras bem organizadas (Figs. 9,21).
Os espécimes do grupo LASER (λ790nm) – 14 DIAS apresentaram uma pavimentação epitelial completa (Figs. 25,31,37). O tecido de granulação, com características de cronicidade, evidenciava um infiltrado inflamatório moderado, rico em linfócitos e leve hiperemia (Figs. 26,32,38). Os fibroblastos foram observados bem como, uma intensa matriz colágena, observada na análise histológica da coloração Picrosírius (Figs. 27,33,39).
Os espécimes do grupo LASER (λ680nm +λ7900nm)- 14 DIAS apresentaram completa pavimentação epitelial (Figs. 43,49,55). O tecido de granulação apresentava uma grande quantidade de novos vasos sanguíneos e células típicas de um infiltrado inflamatório leve e crônico foram observados, além de uma leve hiperemia (Figs. 44,50,56). Fibroblastos foram observados e pela reação histoquímica da coloração Picrosírius foi evidenciada uma matriz colágena classificada como intensa, com fibras maduras e bastante organizadas (Fig. 45,51,57).
52
Figura 1- Fotomicrografia do Grupo I (Controle – 07 dias). Observa-se pavimentação epitelial em formação e intenso infiltrado inflamatório com predominância de linfócitos (L) (aumento aproximado, H/E x 10), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 2- Fotomicrografia do Grupo I (Controle – 07 dias). Observa-se intenso infiltrado inflamatório com predominância de linfócitos, além de vasos congestos (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008
Figura 3- Fotomicrografia do Grupo I (Controle – 07 dias). Observa-se deposição de fibras colágenas (C) imaturas e desorganizadas e presença de novos vasos sanguíneos (V) (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008
V
E
C
V
100µm
Figura 4- Fotomicrografia do Grupo II (Controle – 14 dias). Observa-se pavimentação epitelial em (E) e infiltrado inflamatório com predominância de linfócitos (L) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 5- Fotomicrografia do Grupo II (Controle – 14 dias). Observa-se células típicas de uma inflamação crônica e vasos congestos (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 6- Fotomicrografia do Grupo II (Controle – 14 dias). Observa-se intensa formação de fibras colágenas (C) num estágio mais avançado de maturação (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
C
E
V
L
100 µm
50 µm
50 µm
54
C
Figura 8- Fotomicrografia do Grupo III ((Vermelho 10J – 14 dias). Observa-se LEVE infiltrado inflamatório com predominância de linfócitos (L) e hiperemia moderada (H) (aumento aproximado, H/E x 100),
UFPB-Figura 9- Fotomicrografia do Grupo I
(Vermelho 10J – 14 dias). Observa-se matriz colágena de forma moderada e fibras organizadas (F) (aumento aproximado, Picro x 100) UFPB-UFBA, 2008
Figura 7- Fotomicrografia do Grupo III (Vermelho 10J – 14 dias). Observa-se um epitélio estratificado pavimentoso (E), sem anexos cutâneos (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008
H
E
50 µm
50 µm
100 µm
H
Figura 10- Fotomicrografia do Grupo IV
(Vermelho 10J – 07 dias). Observa-se
pavimentação epitelial em formação, sem fâneros cutâneos (E) (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 11- Fotomicrografia do Grupo IV ((Vermelho 10J – 07 dias). Observa-se intenso infiltrado inflamatório tipicamente linfocitário (L) e novo vasos (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 12- Fotomicrografia do Grupo IV
(Vermelho 10J – 07 dias). Observa-se
proliferação fibroblástica com moderada
formação de matriz colágena (C) (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008..
E
L
V
C
50 µm
50 µm
100 µm
56
Figura 13- Fotomicrografia do Grupo V (Vermelho 20J – 14 dias). Observa-se tecido de granulação revestido por epitélio estratificado pavimentoso queratinizado (E), sem fâneros cutâneos (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 14- Fotomicrografia do Grupo V (Vermelho 20J – 14 dias). Observa-se infiltrado inflamatório leve, tipicamente linfocitário (L) e neoangiogênese (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura15- Fotomicrografia do Grupo V
(Vermelho 20J – 14 dias). Observa-se
proliferação fibroblástica (F) com moderada formação de matriz colágena (C) (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA,
E
V
L
F
C
100 µm
50 µm
50 µm
C
V
Figura18- Fotomicrografia do Grupo VI (Vermelho 20J – 07 dias). Observa-se matriz colágena em formação com presença de fibras desorganizadas (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 16- Fotomicrografia do Grupo VI
(Vermelho 20J – 07 dias). Observa-se
reepitelização (E) e um grande número de
novos vasos sanguíneos (V). (aumento
aproximado, H/E x 40),
V
E
L
50 µm
100 µm
50 µm
Figura 17- Fotomicrografia do Grupo VI (Vermelho 20J – 07 dias). Observa-se células inflamatórias tipicamente linfocitárias (L) e vasos congestos (V). (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
58
.
Figura19- Fotomicrografia do Grupo VII (Vermelho 30J - 14 dias). Observa-se úlcera
revestida por epitélio estratificado
pavimentoso queratinizado (E), sem anexos cutâneos (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 20- Fotomicrografia do Grupo VII
(Vermelho 30J - 14 dias). ). Observa-se infiltrado inflamatório com predominância de linfócitos (L) além de fibroblastos. (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
L
C
E
50 µm
50 µm
100 µm
Figura 21- Fotomicrografia do Grupo VIII (Vermelho 30J– 14 dias). ). Observa-se moderada formação de matriz colágena (C) e fibras ainda em processo de maturação. (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 23- Fotomicrografia do Grupo VIII (Vermelho 30J– 07 dias)). Observa-se
intenso infiltrado inflamatório com
predominância de linfócitos (L),
fibroblastos e vasos congestos(V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008. Figura 22- Fotomicrografia do Grupo VIII (Vermelho 30J– 07 dias). Observa-se
epitélio estratificado pavimentoso em
formação (E), sem fâneros cutâneos,
recobrindo um intenso infiltrado
inflamatório. (aumento aproximado, H/E x
Figura 24- Fotomicrografia do Grupo VIII (Vermelho 30J– 07 dias). Observa-se formação de moderada matriz colágena (C) com fibras desorganizadas (aumento aproximado, Picrossírius x 100), UFPB-UFBA, 2008.
V
E
C
L
pp
50 µm
100 µm
50 µm
60
Figura 27- Fotomicrografia do Grupo IX (Infravermelho 10J – 14 dias)). Observa-se formação de uma intensa matriz colágena (C) e a organização de suas fibras (aumento aproximado, Picrossírius x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 25- Fotomicrografia do Grupo IX (Infravermelho 10J – 14 dias). Observa-se completa pavimentação epitelial (E), com ortoqueratinização, sem anexos cutâneos, recobrindo um vasto tecido de granulação. (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 26- Fotomicrografia do Grupo IX (Infravermelho 10J – 14 dias)). Observa-se
moderado infiltrado inflamatório com
predominância de linfócitos (L) e inúmeros fibroblastos (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
E
L
C
50 µm
50 µm
50 µm
Figura 28 - Fotomicrografia do Grupo X (Infravermelho 10J – 07 dias) Observa-se o epitélio estratificado pavimentoso (E) em formação, recobrindo um tecido de granulação. (aumento aproximado H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 30 - Fotomicrografia do Grupo X (Infravermelho 10J – 07 dias)). Observa-se leve formação colágeno e fibras (C) ainda desorganizadas. (aumento aproximado Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 29 - Fotomicrografia do Grupo X (Infravermelho 10J – 07 dias). Observa-se um tecido de granulação tipicamente crônico formado por fibroblastos jovens (F) e linfócitos (L). (aumento aproximado H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
50 µm
100 µm
50 µm
F
E
L
C
62
Figura 32 - Fotomicrografia do Grupo XI (Infravermelho 20J – 14 dias). Observa-se
moderado infiltrado inflamatório com
predominância de linfócitos e formação de novos vasos (V) (aumento aproximado H/E x 100). UFPB-UFBA, 2008.
Figura 31 - Fotomicrografia do Grupo XI (Infravermelho 20J – 14 dias). Observa-se um tecido de grnulação revestido por epitélio estratificado pavimentoso (E), sem anexos cutâneos. (aumento aproximado H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
E
C
V
Figura 33 - Fotomicrografia do Grupo XI (Infravermelho 20J – 14 dias). Observa-se intensa formação de matriz colágena (C) e
novos vasos sangúineos (aumento
aproximado Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
50 µm
50 µm
100 µm
Figura 34 - Fotomicrografia do Grupo XII (Infravermelho 20J – 07 dias) apresentando uma pavimentação epitelial (E) em formação, sem anexos cutâneos, recobrindo um extenso tecido de granulação (aumento aproximado H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 35 - Fotomicrografia do Grupo XII (Infravermelho 20J – 07 dias). Observa-se um intenso infiltrado inflamatório crônico, além de novos vasos sanguíneos (V) (aumento aproximado, H/E x 100). UFPB-UFBA, 2008.
Figura 36 - Fotomicrografia do Grupo XII (Infravermelho 20J – 07 dias). Observa-se formação de matriz colágena (C) com fibras
num estágio mais avançado de
organização (aumento aproximado, Picro x 100) UFPB-UFBA, 2008.
E
V
C
50 µm
50 µm
100 µm
64
V
E
Figura 37 - Fotomicrografia do Grupo XIII (Infravermelho 30J – 14 dias). Observa-se um epitélio estratificado
pavimentoso (E) em formação,
recobrindo o tecido de granulação. (aumento aproximado, H/E x 40).
Figura 38 - Fotomicrografia do Grupo XIII (Infravermelho 30J – 14 dias). Observa-se
um moderado infiltrado inflamatório
tipicamente crônico com a presença de vasos (V) (aumento aproximado H/E x 100). UFPB-UFBA, 2008.
Figura 39 - Fotomicrografia do Grupo XIII (Infravermelho 30J – 14 dias). Observa-se intensa matriz colágena (C) (aumento aproximado, Picro x 100). UFPB-UFBA, 2008.
50 µm
C
E
V
V
Figura 40 - Fotomicrografia do Grupo XIV (Infravermelho 30J – 07 dias). Observa-se
epitélio estratificado pavimentoso
ortoqueratinizado (E), sem anexos cutâneos, recobrindo intenso infiltrado inflamatório (aumento aproximado, H/E x 40). UFPB-UFBA, 2008.
Figura 41 - Fotomicrografia do Grupo XIV (Infravermelho 30J – 07 dias). Observa-se infiltrado inflamatório com a presença de inúmeros vasos (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 42 - Fotomicrografia do Grupo XIV (Infravermelho 30J – 07 dias). Observa-se intensa angiogênese (V) de leve a moderada produção de matriz colágena (C) (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
50 µm
50 µm
100 µm
66
E
F
C
Figura 43 - Fotomicrografia do Grupo XV(Vermelho +Infravermelho 10J – 14 dias).
Observa-se epitélio pavimentoso
estratificado (E) recobrindo tecido de granulação (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 44 - Fotomicrografia do Grupo XV(Vermelho +Infravermelho 10J – 14 dias). Observa-se fibroblastos (F) e raras células inflamatórias (L) e leve produção de matriz colágena (C) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 45 - Fotomicrografia do Grupo XV(Vermelho +Infravermelho 10J – 14 dias). Observa-se intensa angiogênese (V) e leve produção de matriz colágena (C) (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
50 µm
50 µm
100 µm
V
L
C
L
E
V
Figura 47 - Fotomicrografia do Grupo XVI (Vermelho +Infravermelho 10J – 07 dias)). Observa-se tecido de granulação com infiltrado inflamatório intenso repleto de linfócitos (L) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008
Figura 46 - Fotomicrografia do Grupo XVI (Vermelho +Infravermelho 10J – 07 dias).
Observa-se epitélio pavimentoso
estratificado ortoqueratinizado (E)
recobrindo tecido de granulação com células típicas de inflamação crônica (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 48 - Fotomicrografia do Grupo XVI (Vermelho +Infravermelho 10J – 07 dias). Observa-se intensa angiogênese (V) e
produção de matriz colágena (C)
(aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
68
Figura 49 - Fotomicrografia do Grupo XVII (Vermelho +Infravermelho 20J – 14 dias). Observa-se epitélio pavimentoso estratificado ortoqueratinizado (E) recobrindo tecido de granulação com células típicas de inflamação crônica (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 50 - Fotomicrografia do Grupo XVII (Vermelho +Infravermelho 20J – 14 dias)). Observa-se tecido de granulação com infiltrado inflamatório leve e a presença de novos vasos sanguíneos (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008
Figura 51 - Fotomicrografia do Grupo XVII (Vermelho +Infravermelho 20J – 14 dias). Observa-se de intensa produção
de matriz colágena (C) (aumento
aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
E
V
C
50 µm
50 µm
50 µm
C
V
Figura 52 - Fotomicrografia do Grupo XVIII (Vermelho +Infravermelho 20J – 07 dias).
Observa-se epitélio pavimentoso
estratificado ortoqueratinizado (E)
recobrindo tecido de granulação com células típicas de inflamação crônica (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 54 - Fotomicrografia do Grupo XVIII (Vermelho +Infravermelho 20J – 07 dias). Observa-se intensa angiogênese (V) e produção de matriz colágena (C) (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008. Figura 53 - Fotomicrografia do Grupo XVIII (Vermelho +Infravermelho 20J – 07 dias). Observa-se tecido de granulação
com infiltrado inflamatório intenso
tipicamente crônico e novos vasos (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008
E
50 µm
100 µm
50 µm
V
70
E
Figura 56 - Fotomicrografia do Grupo XIX (Vermelho +Infravermelho 30J – 14 dias). Observa-se tecido de granulação com infiltrado inflamatório leve, tipicamente crônico e inúmeros novos vasos (V) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008
Figura 55 - Fotomicrografia do Grupo XIX (Vermelho +Infravermelho 30J – 14 dias). Observa-se epitélio pavimentoso
estratificado ortoqueratinizado (E)
recobrindo um vasto tecido de
granulação (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
V
C
V
Figura 57 - Fotomicrografia do Grupo XVIII (Vermelho +Infravermelho 20J – 07 dias). Observa-se intensa angiogênese (V) e produção de matriz colágena (C) (aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
50 µm
100 µm
Figura 60 - Fotomicrografia do Grupo XX (Vermelho +Infravermelho 30J – 07 dias). Observa-se intensa produção de matriz colágena (C) e suas fibras mais organizadas aumento aproximado, Picro x 100), UFPB-UFBA, 2008.
Figura 59 - Fotomicrografia do Grupo XX (Vermelho +Infravermelho 30J – 07 dias). Observa-se intenso infiltrado inflamatório com inúmeros linfócitos (L), além de hiperemia e edema (E) (aumento aproximado, H/E x 100), UFPB-UFBA, 2008
Figura 58 - Fotomicrografia do Grupo XX (Vermelho +Infravermelho 30J – 07 dias).
Observa-se epitélio pavimentoso
estratificado ortoqueratinizado (E)
recobrindo um vasto tecido de granulação (aumento aproximado, H/E x 40), UFPB-UFBA, 2008.
E
L
C
E
50 µm
100 µm
50 µm
72