Comprimidos de clonazepam contêm o equivalente a, no mínimo, 95,0% e, no máximo, 110,0% da quantidade declarada de C15H10ClN3O3.
IDENTIFICAÇÃO
A. Pesar e pulverizar os comprimidos. Transferir quantidade do pó equivalente a 10 mg de
clonazepam para funil de separação de 125 ml. Adicionar 25 ml de água, agitar por 2 minutos e extrair com 2 porções de 40 ml de clorofórmio. Filtrar utilizando sulfato de sódio anidro. Combinar os extratos orgânicos e evaporar a temperatura ambiente, com auxílio de fluxo de nitrogênio. Lavar o resíduo em 3 porções de 10 ml de hexano. O espectro de absorção no infravermelho (V.2.14) do resíduo, disperso em brometo de potássio, apresenta máximos de absorção somente nos mesmos comprimentos de onda e com as mesmas intensidades relativas daqueles observados no espectro de clonazepam SQR, preparado de maneira idêntica.
B. O tempo de retenção do pico principal do cromatograma da solução amostra, obtido no
Doseamento, corresponde àquele do pico principal da solução padrão.
CARACTERÍSTICAS
Determinação de peso (V.1.1). Cumpre o teste.
Dureza (V.1.3.1). Cumpre o teste.
Friabilidade (V.1.3.2). Cumpre o teste.
Teste de desintegração (V.1.4.1). Cumpre o teste.
Uniformidade de doses unitárias (V.1.6). Cumpre o teste.
TESTE DE DISSOLUÇÃO (V.1.5)
Meio de dissolução: água, 900 ml
Aparelhagem: pás, 75 rpm
Proceder conforme descrito em Cromatografia líquida de alta eficiência (V.2.17.4). Utilizar cromatógrafo provido de detector ultravioleta a 254 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4,6 mm de diâmetro interno, empacotada com sílica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano, mantida à 25ºC; fluxo da fase móvel de 1,0 ml/min.
Fase móvel: mistura de água, metanol e acetonitrila (40:30:30)
Solução padrão: dissolver quantidade exatamente pesada de clonazepam SQR em metanol, de modo a obter solução a 0,05 mg/ml. Diluir sucessivamente com meio de dissolução de modo a obter concentração similar àquela obtida nas cubas de dissolução após o teste.
Solução amostra: após realização do teste, utilizar alíquotas do meio de dissolução.
Procedimento: Injetar, separadamente, 100 µl das soluções padrão e amostra, registrar os cromatogramas e medir as áreas dos picos. Calcular a quantidade de C15H10ClN3O3 dissolvida no meio a partir das respostas obtidas com as soluções padrão e amostra.
Tolerância: não menos que 75% (Q) da quantidade declarada de C15H10ClN3O3 se dissolvem em
45 minutos.
ENSAIO DE PUREZA
Substâncias relacionadas. Proceder conforme descrito em Cromatografia em camada delgada
(V.2.17.1), utilizando sílica-gel GF254, como suporte, e mistura de acetato de etila e tetracloreto de carbono (1:1) como fase móvel. Aplicar, separadamente, à placa, 25 µl de cada uma das soluções, recentemente preparadas, descritas a seguir.
Solução (1): Pesar e pulverizar os comprimidos. Agitar por 1 minuto, quantidade de pó
equivalente a 10 mg de clonazepam em 20 ml de acetona. Filtrar e evaporar até a secura. Dissolver o resíduo em 0,5 ml de acetona.
Solução (2): preparar solução de 3-amino-4-(2-clorofenil)-6-nitroquinolin-2(1H)-ona SQR a 0,2
mg/ml em acetona.
Solução (3): preparar solução de (2-amino-5-nitrofenil)(2-clorofenil) metanona SQR a 0,2 mg/ml
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, deixar secar em corrente de ar seco e observar sob a luz ultravioleta (254 nm). Nebulizar a placa com ácido sulfúrico a 10% (V/V) e aquecer a 105 °C por 15 minutos. Nebulizar com nitrito de sódio a 0,1% (p/V) e secar sob corrente de ar quente. Nebulizar com sulfamato de amônio a 0,5% (p/V) e secar sob corrente de ar quente. Quaisquer manchas obtidas no cromatograma com a solução (1), diferente da principal, não são mais intensas que àquelas obtidas com a solução (2). A diminuição da intensidade da fluorescência na placa é observada. A mancha principal obtida com a solução (1) corresponde em posição, cor e intensidade àquela obtida com as soluções (2) e (3).
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Cromatografia líquida de alta eficiência (V.2.17.4). Utilizar cromatógrafo provido de detector ultravioleta a 254 nm; coluna de 250 mm de comprimento e 4 mm de diâmetro interno, empacotada com sílica quimicamente ligada a grupo octadecilsilano (5µm); fluxo da fase móvel de 0,6ml/minuto.
Fase móvel: mistura de tampão fosfato de amônia dibásico, metanol e tetrahidrofurano
(60:52:13). Filtrar e degaseificar.
Diluente: água, metanol e tetrahidrofurano (60:52:13)
Solução tampão: dissolver 6,6 g de fosfato de amônia dibásico em 950 ml de água, ajustar pH
para 8,0 com ácido fosfórico 1N ou hidróxido de sódio 1N e completar o volume com água.
Solução padrão: pesar quantidade suficiente de clonazepam SQR para balão volumétrico de
modo a obter 100 µg/ml. Dissolver em metanol, levar em banho de ultrassom por aproximadamente 15 minutos, completar o volume com diluente.
Solução amostra: pesar e pulverizar 20 comprimidos. Transferir quantidade de pó equivalente
5,0 mg de clonazepam para balão volumétrico de 50 ml. Solubilizar, inicialmente, em 20 ml de metanol, levar a banho de ultrassom por 15 minutos e completar o volume com diluente. Homogeneizar e filtrar.
Procedimento: injetar, separadamente 20 µl das soluções padrão e amostra, registrar os
cromatogramas e medir as áreas dos picos. Calcular o teor de C15H10ClN3O3 nos comprimidos a partir das respostas obtidas com as soluções padrão e amostra
EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO
ROTULAGEM
Observar legislação vigente.
CLONAZEPAM SOLUÇÃO ORAL
Contém, no mínimo, 95% e, no máximo, 115% da quantidade declarada de C15H10ClN3O3.
IDENTIFICAÇÃO
Proceder conforme descrito em Cromatografia em camada delgada (V.2.17.1), utilizando sílica-gel GF254, como suporte, e mistura de tolueno, acetato de etila e ácido fórmico anidro (60:40:5) como fase móvel. Aplicar, separadamente, à placa, 10 µl de cada uma das soluções, recentemente preparadas, descritas a seguir.
Solução (1): em tubo de centrífuga, diluir 2 ml da amostra com 10 ml de HCl 0,1 M. Adicionar 1
g de cloreto de sódio e agitar até a dissolução, por aproximadamente 2 minutos. Adicionar 5 ml de acetato de etila, agitar 3 minutos e centrifugar por mais 3 minutos. Utilizar a fase orgânica.
Solução (2): dissolver 20 mg de clonazepam SQR em 20 ml de acetato de etila.
Desenvolver o cromatograma. Remover a placa, deixar secar em corrente de ar seco por 10 minutos e observar sob a luz ultravioleta (254 nm). A diminuição da intensidade da fluorescência na placa é observada. A mancha principal obtida com a solução (1) corresponde em posição, cor e intensidade àquela obtida com a solução (2).
CARACTERÍSTICAS
Determinação de volume (V.1.2). Cumpre o teste.
pH (V.2.19): 3,6 a 4,1. Determinar em solução a 50% (V/V) da amostra em água.
TESTE DE SEGURANÇA BIOLÓGICA
Contagem de micro-organismos viáveis totais (V.5.1.6). Bactérias totais: no máximo 1000 UFC/ml. Fungos e leveduras: no máximo 100 UFC/ml.
DOSEAMENTO
Proceder conforme descrito em Doseamento da monografia de Clonazepam comprimidos. Preparar solução padrão e amostra como descrito a seguir.
Solução padrão: pesar quantidade suficiente de clonazepam SQR para balão volumétrico de
modo a obter 100 µg/ml. Dissolver em metanol, levar em banho de ultrassom por aproximadamente 15 minutos, completar o volume com a diluente.
Solução amostra: Transferir para balão volumétrico de 50 ml, volume de solução oral contendo
o equivalente a 5,0 mg de clonazepam de modo a obter solução de 100 µg/ml. Solubilizar, inicialmente, em 20 ml de metanol, levar em banho de ultrassom por 15 minutos e completar o volume com diluente. Homogeneizar e filtrar.
Procedimento: injetar, separadamente 20 µl das soluções padrão e amostra, registrar os
cromatogramas e medir as áreas dos picos. Calcular o teor de C15H10ClN3O3 na solução oral a partir das respostas obtidas com as soluções padrão e amostra.
EMBALAGEM E ARMAZENAMENTO
Em recipientes bem fechados, de vidro âmbar e em temperatura inferior a 25 °C.
ROTULAGEM