4 POPULAÇÃO ESTUDADA, MATERIAIS E MÉTODOS
6.4 COMPARAÇÃO DO PERFIL FENOTÍPICO DE CÉLULAS SANGÜÍNEAS ANTES E APÓS CADA
Na análise comparativa das células mononuclerares do sangue periférico antes e depois da
quimioterapia com Glucantime®, imunoterapia com Leishvacin® e imunoquimioterapia
(Glucantime® + Leishvacin®), observamos que, com relação ao percentual de células CD3+,
CD4+, CD19+, CD16CD56+ e razões CD4/CD8 e CD3/CD19, não houve diferença
estatisticamente significativa depois de cada tratamento. Para os linfócitos T CD3+ depois do
tratamento, ocorre uma queda na mediana do percentual destas células, quando comparado
com os valores obtidos antes do tratamento. A mediana, após o tratamento, apresenta valor
semelhante ao observado no grupo controle. Esta observação é válida tanto para o grupo de
pacientes tratados com Glucantime® como para Leishvacin® (Fig. 29). A associação de
Leishvacin® com Glucantime® leva a uma queda no valor da mediana maior do que aquela
observada para o grupo controle. A análise dos linfócitos T, CD 4+ também não apresentou
diferença estatisticamente significativa (teste não-paramétrico Kruskal-Wallis), quando
analisamos o percentual de células após o tratamento com Glucantime®, como Leishvacin®
ou com a associação deles. A mediana apresentou uma ligeira queda quando comparada a de
antes do tratamento;, seu valor fica mais próximo daquele observado no grupo controle.
Para as células CD8+, o que foi visto, em termos de diferenças estatisticamente significativas,
foi no tratamento com Glucantime® entre os pacientes antes do tratamento com o grupo
controle, e ainda na associação do Glucantime® com Leishvacin®, depois do tratamento
Considerando-se a razão linfócitos T: B nos pacientes tratados com Glucantime®,
observamos uma ligeira redução na mediana deste percentual depois do tratamento. Nos
tratados com Leishvacin® e com a associação deste com Glucantime®, ocorreu uma elevação
da mediana deste percentual.
Após análise dos resultados, nós podemos considerar que nestes grupos estudados, nenhum
dos tratamentos em questão alterou de forma significativa o perfil fenotípico que o paciente
apresentava antes do tratamento.
A maioria dos autores analisou o sangue periférico de pacientes com LTA após a estimulação
por antígenos de Leishmania ou mitógenos (COUTINHO et al., 1998; CRUZ et al. ,1994 e
2002, AJDARY et al., 2000). Uma vez que não encontramos na literatura estudos de análise
fenotípica do sangue periférico de pacientes com LTA sem estímulos de antígenos de
Leishmania, não podemos determinar se a diferença estatisticamente significativa encontrada,
depois do tratamento, por estes autores como um aumento de linfócitos T CD8+ e uma
diminuição de células T CD4+ e da razão CD4/CD8 depois do tratamento com Glucantime®,
advém deste estímulo.
6.5 Análise comparativa do perfil fenotípico local (lesão) e sistêmico (sangue periférico)
A análise sistêmica é de grande importância, uma vez que experimentalmente já se observou
que a hematopoiese apresenta-se estimulada durante a infecção por Leishmania como citam
Quando comparamos as células presentes no sangue periférico com as do infiltrado
inflamatório do mesmo paciente, observamos que não existe correspondência entre o local da
lesão e o sangue, para a maioria dos marcadores celulares analisados. Antes do tratamento,
apenas os marcadores CD3 e CD4 tiveram valores percentuais equivalentes no sangue e na
lesão. Já os valores percentuais das células T CD8+, os linfócitos B CD19+ e CD20+ além
das razões CD4/CD8 e CD3/linfócitos B foram estatisticamente diferentes (p<0,05). (Figuras
de 40 a 46).
Na comparação feita com material coletado, depois do tratamento, apenas as células T CD3+
foram correspondentes no sangue e na lesão. Os valores percentuais das demais células (CD4,
CD8, linfócitos B, razões CD4/CD8 e CD3/Linf B) foram estatisticamente diferentes.
Em 1998, TAPIA e colaboradores mostraram valores percentuais similares aos encontrados
neste estudo quando comparam as células do sangue periférico com as da lesão, em pacientes
com LTA. Apenas o percentual das células T CD4+ na lesão foi diferente, os autores relatam
encontrar 36,9%, enquanto em nosso estudo encontramos 52,30%.
A análise local (da lesão) e sistêmica (sangue periférico), realizada neste estudo adquiriu
grande importância por considerar a resposta imune do paciente com LTA em dois
compartimentos distintos, ocorrendo, porém ao mesmo tempo (antes e depois do tratamento)
em resposta ao antígeno. Portanto, acreditamos que análises de outros marcadores celulares
possibilitarão um melhor esclarecimento da interação do parasito com o sistema imune do
7 RESUMO DE RESULTADOS
O perfil fenotípico da população de células na lesão e no sangue periférico foi avaliado em
indivíduos portadores de LTA, residentes em área endêmica, antes e após diferentes tipos de
tratamento.
A PCR da lesão foi positiva em 69% dos 39 pacientes avaliados, antes do tratamento, e em
23% deles, após o tratamento.
Houve uma redução estatisticamente significativa no percentual das populações celulares
CD3+, CD57+, CD16+, CD14+ e CD68+ presentes na lesão depois do tratamento.
Não observamos diferenças estatisticamente significativas no percentual das populações
celulares CD3+, CD4+, CD8+, CD19+, CD16+, CD56+, e razões CD4/CD8, CD3/CD19
depois de cada tratamento.
O Leishvacin® e a associação deste com o Glucantime® foram equivalentes ao tratamento
com Glucantime® em relação ao percentual das populações celulares no sangue periférico dos
pacientes depois do tratamento.
Observamos diferenças estatisticamente significativas na análise comparativa do percentual
das populações celulares CD4+, CD8+, Linfócitos B e razão CD4/CD8 no sangue periférico e
8 CONCLUSÕES
Baseado no resumo de resultados, nosso trabalho conclui que:
- mesmo após diferentes tratamentos, com diagnóstico de cura clínica, o parasito pode
persistir no local da cicatriz;
- os diferentes tratamentos não alteraram de forma significativa, o perfil fenotípico que o
paciente apresentava antes de ser tratado;
- o fenótipo celular não mostrou uma correlação direta entre o percentual das células presentes
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