Após a análise e discussão dos resultados apresentados neste estudo, podemos concluir que:
• Ficou caracterizado o quadro de LLC familiar com três de 26 membros afetados pela doença, que tiveram o diagnóstico confirmado com base nos dados clínicos, imunofenotípicos e citogenéticos.
• A presença de LBM ou LLC assintomática pode ser afastada em cinco dos 23 dos membros da família considerados como não– afetados (21,7%) com base na investigação por meio de hematimetria e imunofenotipagem de sangue periférico.
• A avaliação do prognóstico pelo estadiamento de Raí/Binet e pelo sistema citogenético/molecular mostrou-se efetiva para os indivíduos B2 e B6 (portadores de uma doença de curso indolente) mas não para o indivíduo C8 (acometido por uma patologia mais agressiva), sugerindo que esses modelos de estratificação de risco devem ser reestudados no contexto da LLC familiar.
• A antecedência de três décadas na idade de diagnóstico e o comportamento mais agressivo da LLC no indivíduo C8 caracterizaram a AG da enfermidade nessa família. Esse fenômeno não pôde ser justificado unicamente com base na precocidade de acesso a exames laboratoriais de rotina.
• Quando aplicada nos indivíduos afetados e em comparação com a citogenética clássica e com a FISH, a CMA demonstrou ser um método bastante adequado e mais sensível para a detecção de alterações citogenéticas na LLC, sendo capaz nesse estudo de identificar pelo menos 20 CNVs adicionais além daquelas diretamente associadas a patogênese da doença.
• Embora a CMA permita uma ampla varredura do genoma e consiga caracterizar um grande número de mutações, nem
sempre é possível estabelecer uma correlação direta entre as CNVs identificadas e os mecanismos geradores ou modificadores de doença.
• Com exceção da +(12) no indivíduo B2 e da del(13q14) nos indivíduos B6 e C8, não foi possível apontar qualquer relação entre as CNVs identificadas por CMA e os mecanismos fisiopatogênicos da LLC nesta família.
• Neste estudo, a comparação do perfil de CMA obtido à partir de células mononucleares e parietais dos indivíduos afetados e não- afetados não permitiu a identificação de nenhum fator potencialmente relacionado a susceptibilidade da LLC.
• O fenômeno de AG e o comportamento mais agressivo da LLC observados em C8 podem estar relacionados ao fato de que nesse indivíduo a del(13q14) ocorreu em homozigose (deleção bialélica) o que, hipoteticamente, pode resultar em um nível de expressão excepcionalmente reduzido de miR-15-a e miR-16-1 e influenciar de maneira distinta a regulação de BCL-2 e TP53. Apesar de infreqüente e de guardar inúmeras semelhanças com a forma esporádica da doença, a LLC familiar parece ter um padrão de expressão clínica peculiar, que provavelmente resulta da associação de mecanismos moleculares já descritos, como circuito de interação “TP53-microRNA”, com outros eventos genéticos ainda não caracterizados. Incluindo o número adequado de casos, estudos futuros poderão validar o sistema citogenético- molecular de avaliação do risco no contexto da LLC familiar, e ainda acrescentar as novas informações geradas pela tecnologia de CMA. Será especialmente interessante testar o valor da AG como fator prognóstico, de maneira isolada ou em associação com os demais fatores já conhecidos, bem como buscar a elucidação das vias moleculares envolvidas com esse fenômeno e com a susceptibilidade da LLC.
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APÊNDICE
A - TERMO DE CONSENTIMENTO INFORMADO
Eu, __________________________, abaixo identificado(a) e assinado(a), declaro ter sido informado(a) pelo Dr(a). JORGE VAZ PINTO NETO, que participarei do projeto de pesquisa clínico-laboratorial intitulado "INVESTIGAÇÃO DE ALTERAÇÕES CITOGENÉTICAS RELACIONADAS A LEUCEMIA LINFÓIDE CRÔNICA FAMILIAR POR MEIO DA TÉCNICA DE ANÁLISE CROMOSSÔMICA POR MICROARRANJO".
Este estudo é parte integrante da tese de doutoramento do Programa de Pós-Graduação em Biotecnologia da Universidade Católica de Brasília, e consiste na coleta de informações pessoais para confecção de prontuário médico, bem como coleta de material biológico (sangue periférico, medula óssea, saliva) que será utilizado para realização de exames de patologia clínica, imunofenotipagem, citogenética e biologia molecular, com a finalidade precípua de pesquisar a presença de LINFOCITOSE B MONOCLONAL ou LEUCEMIA LINFÓIDE CRÔNICA.
O médico discutiu comigo as indicações, contra-indicações, principais efeitos colaterais e riscos relacionados a minha participação nesta pesquisa, e explicou que o presente estudo não inclui nenhuma forma de cobertura aos custos de tratamento de qualquer patologia eventualmente diagnosticada ou identificada. Também me foi garantido o direito de sigilo de qualquer informação clínica ou laboratorial resultante de minha participação neste projeto de pesquisa, em especial sobre as minhas informações pessoais quando da publicação dos resultados deste estudo em qualquer veículo de comunicação.
Meu consentimento a participação neste projeto de pesquisa poderá ser retirado a qualquer momento, e deverá ser feito por escrito.
Após ter recebido as informações acima e ter sanadas as minhas dúvidas pelo médico pesquisador principal, autorizo a coleta de informações e material biológico para minha participação neste projeto de pesquisa e assino este termo em duas vias, uma das quais ficará em meu poder.
Assinatura do sujeito de pesquisa: _______________________Data: ______________ Nome: __________________________________________________________ RG: _____________________ CPF:_________________________________
Assinatura do médico:__________________________________Data: ______________ Nome do médico: ______________________________________________
CRM: __________________
Assinatura da testemunha: _____________________________ Data:______________ Nome:___________________________________________________
ANEXO