4.5 SECAGEM POR ASPERSÃO DAS SUSPENSÕES DE NANOCÁPSULAS E
4.5.1 Estudo de estabilidade dos pós
Para o estudo de estabilidade das amostras secas foram avaliados o diâmetro de partícula e índice de polidispersão das amostras em pó após a redispersão em água bem como o teor do fármaco. As análises foram realizadas por 90 dias e durante esse tempo as amostras foram mantidas em diferentes condições de armazenamento, tais como temperatura ambiente, refrigeração e estufa.
O diâmetro de partícula do pó após a redispersão em água mostrou recuperar o tamanho nanométrico, conforme as suspensões originais. O diâmetro inicial foi de 175,9 ± 3,7 nm e manteve-se sem variação significativa ao longo do período e em todas as condições de armazenamento testadas (figura 46).
Figura 46 - Diâmetro médio de partícula das NCs com sinvasvatina secas. Dados expressos com
média ± desvio padrão (DP). Os valores com p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos
O índice de polidispersão inicial foi de 0,22 ± 0,01, esse valor indica uma boa homogeneidade para as formulações (KHARE et al, 2016; CEGNAR, KOS,
115 KRISTL, 2004). Durante todo o período de análise, não houve variação significativa em nenhuma condição analisada. Isto demonstra que as formulações permaneceram estáveis e apresentaram uma uniformidade das partículas durante a estocagem (figura 47).
Figura 47 - Índice de polidispersão das NCs com sinvasvatina secas. Dados expressos com
média ± desvio padrão (DP). Os valores com p<0,05 foram considerados estatisticamente significativos
O teor inicial de sinvastatina quantificado nas amostras de nanocápsulas secas foi de 82,88 ± 2,15 %. As amostras que permaneceram em temperatura ambiente diminuíram gradativamente o teor com o passar do tempo. Ao final do período de análise (90 dias) o teor foi de 43,71 ± 1,18 %. Já as amostras armazenadas sob refrigeração, mantiveram o teor sem grande variação até o período final de análise quando se quantificou 69,58 ± 2,21 % de sinvastatina nas amostras de nanocápsulas secas. A quantificação do fármaco nas amostras que ficaram armazenadas em estufa decaiu severamente ao longo do tempo, sugerindo que houve degradação do fármaco. Ao final do experimento, apenas 5,25 ± 0,99 % de sinvastatina foi quantificada nas amostras (figura 48).
116
Figura 48 - Teor de sinvastatina nas NCs em suspensão e secas por aspersão. Dados expressos
com média ± desvio padrão (DP). Os valores com *(p<0.05), **(p<0,01) e ***(p<0,001) foram considerados estatisticamente significativos.
Teor NC Sinvastatina em Pó
TA GE ES 0 20 40 60 80 100 Inicial 15 Dias 30 Dias 60 Dias 90 Dias**
***
*
**
***
Condições de armazenamento T e or ( % )Percebe-se que a condição sob refrigeração foi a que melhor manteve o teor do fármaco sem diminuição ao longo do tempo. A figura 49 mostra a comparação desse parâmetro nas suspensões de nanocápsulas e nas nanocápsulas submetidas ao processo de secagem.
Figura 49 - Análise da variação do teor nas suspensões de NCS e nas NCS secas por spray
117 As suspensões de nanocápsulas apresentaram um teor inicial de 98,20 ± 2,20 % de sinvastatina enquanto as nanocápsulas secas, 82,88 ± 2,15 %. Nota-se que o teor das nanocápsulas secas foi menor do que das suspensões o que pode ter ocorrido devido à degradação do fármaco durante o processo de secagem ou pelo método de extração do fármaco no pó não ter sido tão eficiente.
Apesar disso, para as amostras armazenadas em temperatura ambiente, o decaimento no teor do fármaco das amostras secas foi muito menor do que nas suspensões. Nas amostras em pó, em 90 dias, ainda quantificava-se 43,71 ± 1,18 % de sinvastatina, enquanto para as suspensões, apenas 11,87 % e essa quantificação foi possível apenas em 1 lote.
Resultados melhores, em relação ao teor do fármaco, também foram encontrados comparando-se as amostras que foram armazenadas sob refrigeração. Nessa condição, ao final de 90 dias, o teor de sinvastatina nas suspensões foi de 56,61 ± 2,86 % enquanto nas nanocápsulas secas por spray
drying foi de 69,58 ± 2,21 %.
A diferença para as amostras armazenadas em estufa é ainda maior. Enquanto para as suspensões o teor foi quantificado apenas até 15 dias, e em apenas um dos lotes, sendo equivalente a apenas 5,09 %, nas amostras secas o fármaco ficou protegido da degradação por muito mais tempo. Diminuiu gradativamente ao longo do tempo e ao final do período de análise, 90 dias, foi possível quantificar ainda 5,25 ± 0,99 % de sinvastatina.
Destaca-se que o processo de secagem das nanocápsulas por spray
drying foi eficiente e garantiu uma melhor estabilidade para a formulação visto que
manteve as características de diâmetro de partícula sem alterações e protegeu o fármaco da degradação precoce.
Um recente estudo relatado na literatura demonstrou que essa técnica é eficiente para manter o teor de um antifúngico sem alterações ao longo do tempo garantindo assim, um aumento da estabilidade. Ribeiro e colaboradores (2016) avaliaram a estabilidade, por 30 dias, de nanocápsulas e nanoemulsões contendo tioconazol, secas por spray-drying. As amostras em análise permaneceram estocadas em um dessecador durante o período de análise. Eles observaram que não houve diminuição do teor do fármaco para as nanocápsulas em relação ao teor inicial e houve um decréscimo de 29 % do teor do tioconazol nas
118 nanoemulsões. Essa diminuição pode estar relacionada à instabilidade físico- química do sistema e pode estar relacionada também à importância da parede polimérica para manter a concentração do fármaco constante durante o processo de secagem (RIBEIRO et al, 2016).
119
CONSIDERAÇÕES FINAIS E PERSPECTIVAS
Este trabalho foi concluído com êxito tendo em vista que seu objetivo geral foi atendido: produziu-se uma blenda polimérica de poli (metil metacrilato)-poli (etilenoglicol) (PMMA-PEG), a partir dela desenvolveu-se um nanocarreador, no caso nanocápsulas, sua aplicação em liberação sustentada de um fármaco modelo (a sinvastatina) foi investigada e ainda, produziu-se um produto farmacêutico intermediário.
A blenda polimérica foi produzida por uma metodologia simples na qual o PMMA foi polimerizado por polimerização via radicais livres e a seguir foi dissolvido com o PEG 400 em um mesmo solvente. A técnica foi eficiente, resultando em um produto com 94 % de rendimento e sem geração de subprodutos.
As nanocápsulas produzidas com a blenda PMMA-PEG pela técnica de deposição interfacial do polímero pré-formado tiveram características físico- químicas adequadas para a estrutura proposta. As nanocápsulas sem o fármaco apresentaram diâmetro médio de partícula de 198,2 ± 1,4 nm e índice de polidispersão de 0,08 ± 0,01 e as nanocápsulas com a sinvastatina, usada como fármaco modelo, mediram 194,4 ± 1,7 nm e o índice de polidispersão foi de 0,07 ± 0,00.
Além disso, a eficiência de encapsulação da sinvastatina nessa nanoestrutura foi elevada: 98,64 ± 0,00 % e o teor também foi alto, 98,20 ± 2,20 %. Indicando que essas nanocápsulas são promissores veículos para carrear este fármaco.
O estudo de estabilidade das suspensões demonstrou que a melhor condição para armazenamento dessas nanocápsulas é em baixa temperatura, ± 4 ºC, ou seja, de forma refrigerada. Dessa forma, é possível garantir a manutenção das características físico-químicas sem grandes variações até 90 dias.
Os testes de cito e genotoxicidade demonstraram que as nanocápsulas produzidas pela blenda de PMMA-PEG não foram citotóxicas, na concentração de 50 µM. E em alguns testes, como carbonilação de proteínas e hemólise, demonstraram ser menos citotóxicas do que aquelas produzidas pela PCL, um polímero comercial, biodegradável, aprovado pelo FDA para via parenteral e
120 amplamente empregado em carreadores de fármacos. Além disso, o teste cometa indicou que não houve dano ao DNA, o que indica que essas nanocápsulas não são genotóxicas. Entretanto, mais testes são necessários para confirmar esses resultados e garantir a segurança para o paciente.
Os testes de liberação in vitro indicaram que a nanoencapsulação da sinvastatina promove uma liberação mais sustentada do que o fármaco na forma livre. A sinvastatina livre é 100 % liberada em 17 h, enquanto a encapsulada em nanocápsulas de blenda PMMA-PEG libera 45 % em 24 h. Importante ressaltar ainda, que o PEG influencia na liberação do fármaco das nanocápsulas, tendo em vista que a sinvastatina liberada das nanocápsulas de PMMA atingiu uma taxa de liberação de 34 % em 24 h.
Por fim, a secagem das suspensões pela técnica de spray drying também foi concluída com êxito. O melhor adjuvante de secagem foi a lactose e a metodologia desenvolvida permitiu a produção de nanocápsulas com um rendimento de 66 %, diâmetro do pó de 1,84 µm e 143,70 nm após a redispersão em água.
A secagem dos pós foi muito eficiente para melhorar a estabilidade das suspensões de nanocápsulas, principalmente o teor; este foi mantido em porcentagens muito mais elevadas nas nanocápsulas secas do que nas suspensões. Essa manutenção do teor evidencia-se principalmente quando se compara as suspensões e os pós mantidos em temperatura ambiente (± 25 ºC) e expostos ao calor (± 40 ºC). As suspensões, nessas condições, degradam mais rapidamente e os pós conseguem manter por mais tempo o teor.
Portanto, pode-se sugerir que essa blenda inédita de PMMA-PEG é um material com promissoras aplicações para a indústria farmacêutica e ainda pode ser melhor explorada para outros usos biomédicos. As nanocápsulas produzidas mostraram-se eficientes e seguras para a liberação sustentada e prolongada da sinvastatina e com isso pode melhorar a biodisponibilidade desse fármaco.
Este trabalho ainda deixa inúmeras possibilidades de continuidade de pesquisa. Entre elas, pode-se destacar na engenharia de materiais, a pesquisa sobre as propriedades mecânicas dessa blenda e o seu uso em outras áreas biomédicas, como por exemplo, em implantes.
121 Na área farmacêutica, a produção de comprimidos ou cápsulas contendo as nanocápsulas de sinvastatina, visto que o produto intermediário já foi produzido e a metodologia definida.
Os estudos de liberação desse produto farmacêutico final a fim de comparar com as suspensões iniciais e também os testes de cito e genotoxicidade desses produtos finais.
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