Subprocesso “Subtipagem molecular”

O sexto subprocesso mapeado foi “Subtipagem molecular”, um dos métodos genotípicos mais utilizados atualmente. A disseminação de métodos de análise do DNA tem feito com que os métodos genotípicos sejam cada vez mais utilizados na tipagem de estirpes bacterianas, em função das dificuldades apresentadas serem menores e da maior reprodutibilidade e capacidade de discriminação de linhagens bacterianas do que os observados nos métodos clássicos. Dentre as técnicas existentes, o laboratório no qual o estudo de caso foi conduzido utiliza a eletroforese em campo pulsado (Pulsed-field gel electrophoresis, PFGE). De acordo com Campioni (2013), esta técnica é altamente efetiva por ser aplicável a todas as espécies bacterianas. A mesma se baseia na digestão do genoma por uma enzima de restrição, com posterior corrida dos fragmentos gerados em um gel de agarose no qual o campo elétrico é fornecido em pulsos que se alternam a partir de um conjunto de eletrodos, permitindo um alto nível de resolução.

Tal subprocesso é executado por dois colaboradores do laboratório, capacitados para a realização de tal tarefa. Na primeira reunião realizada foi possível identificar as etapas constituintes do subprocesso, bem como agrupá-las e sequenciá-las (Quadro 32).

Quadro 32 - Formulário de identificação das etapas do subprocesso “Subtipagem molecular” FORMULÁRIO DE IDENTIFICAÇÃO DAS ETAPAS DO PROCESSO

Participantes: Setor: Assinatura:

Processo:

Diagnóstico de micro-organismos envolvidos em doenças transmitidas por alimentos

Subprocesso:

Subtipagem molecular

Equipe executora do subprocesso:

Colaboradores capacitados para a realização de tal atividade

Objetivo do subprocesso:

Avaliar a relação filogenética entre cepas bacterianas, através de eletroforese em campo pulsado.

O subprocesso está sendo executado? Sim ( x ) Não ( )

Existe fluxograma do subprocesso? Sim ( ) Não ( x )

Quais são as etapas executadas para o desenvolvimento do subprocesso?

1. Promover crescimento bacteriano em ágar nutriente (overnight); 2. Preparar blocos com o DNA bacteriano;

3. Extrair DNA;

4. Digerir DNA bacteriano com enzimas de restrição; 5. Realizar eletroforese;

6. Realizar fotodocumentação; 7. Fazer avaliação filogenética;

8. Enviar dados para a Base de Dados Regional (novos perfis gênicos);

Há procedimentos definidos para todas as etapas do subprocesso? (citar documentação relacionada)

Sim. POP-XXXXXX-04.005 – Subtificação molecular de XXX por eletroforese em campo pulsado

Fonte: elaborado pela autora

A representação gráfica construída com base nas informações descritas no “Formulário de identificação das etapas do processo” é ilustrada pela Figura 16.

Figura 16 - Representação gráfica do subprocesso “Subtipagem molecular”

Fonte: elaborado pela autora

Neste subprocesso foi identificado um problema relevante, conforme ilustrado no Quadro 33, que pode impactar no prazo de emissão do laudo de análise, ou seja, na eficiência do subprocesso.

Quadro 33 - Problemas identificados no subprocesso “Subtipagem molecular” Problema 1: Degradação do DNA bacteriano

Fonte: elaborado pela autora

O Quadro 34 ilustra a causa para o problema identificado, levantada durante a análise de causa e efeito. Também descreve a ação proposta.

Quadro 34 - Causas e ações propostas para os problemas do subprocesso “Subtipagem molecular”

PROBLEMA TIPO DE

AÇÃO DESCRIÇÃO DA AÇÃO

1: Degradação do DNA bacteriano

Causa raiz: Existem diferentes causas que

podem resultar na ocorrência de degradação de DNA sendo de natureza mecânica, técnica ou genética.

Correção Realizar nova análise Ação

corretiva

Registrar continuamente as atividades contidas no programa de manutenção preventiva dos equipamentos para evitar falha mecânica

Fonte: elaborado pela autora

Propôs-se para o subprocesso em questão os indicadores de desempenho “Percentual de amostras analisadas dentro do prazo previsto”, “Tempo médio da análise de subtipagem molecular” e “Percentual de retestes” (Quadros 35, 36 e 37).

Os três indicadores propostos são relevantes por permitirem a mensuração de problemas que têm impacto na eficiência dos serviços prestados pelo laboratório, no que diz respeito ao tempo necessário para emissão do resultado do teste e ao custo da análise realizada, já que a realização de retestes demanda mão-de-obra e utilização de insumos.

Para ser possível a medição destes indicadores, dois importantes controles a serem efetuados no subprocesso “Subtipagem molecular” são o registro das datas de início e final da análise e também o registro das análises que não puderam ser finalizadas, demandando reanálise. É importante registrar também os motivos que levaram ao atraso, de modo a possibilitar a tomada de ações.

Quadro 35 - Ficha do indicador 12 FICHA DE INDICADOR

Nome do subprocesso Subtipagem molecular

Nome do indicador Percentual de amostras analisadas dentro do prazo previsto

Descrição do indicador Tal indicador demonstra o percentual de amostras analisadas dentro do prazo previsto, considerando os tempos de análise e incubação

Unidade de medida Percentual

Tipo Eficiência

Forma de cálculo (Número de amostras analisadas dentro do prazo/ número total de amostras analisadas) x 100

Fonte das informações A definir

Interpretação Maior-melhor

Meta A definir

Responsável pela medição A definir

Periodicidade de medição Mensal

Responsável pelo resultado Gestor do laboratório

Periodicidade de avaliação Trimestral

Fonte: elaborado pela autora Quadro 36 – Ficha do indicador 13

FICHA DE INDICADOR

Nome do subprocesso Subtipagem molecular

Nome do indicador Tempo médio da análise de subtipagem molecular

Descrição do indicador Tal indicador demonstra quanto tempo (dias) está sendo gasto além do previsto para realização da análise de subtipagem molecular

Unidade de medida Dias

Tipo Eficiência

Forma de cálculo Somatório do número de dias gastos em cada análise realizada/número total de análises realizadas

Fonte das informações A definir

Interpretação Menor-melhor

Meta A definir

Responsável pela medição A definir

Periodicidade de medição Mensal

Responsável pelo resultado Gestor do laboratório

Periodicidade de avaliação Trimestral

Quadro 37 - Ficha do indicador 14

FICHA DE INDICADOR

Nome do subprocesso Subtipagem molecular

Nome do indicador Percentual de retestes

Descrição do indicador Tal indicador aponta o número de análises que necessita ser repetida em função dos problemas apontados

Unidade de medida Percentual

Tipo Eficiência

Forma de cálculo (Número de amostras que demandam reteste/número total de amostras analisadas) x 100

Fonte das informações A definir

Interpretação Menor-melhor

Meta A definir

Responsável pela medição A definir

Periodicidade de medição Mensal

Responsável pelo resultado Gestor do laboratório

Periodicidade de avaliação Trimestral

Fonte: elaborado pela autora