XXXI Congresso de Iniciação Científica
Avaliação comparativa do processo de reparo alveolar em camundongos 129/Sv-WT e 129/Sv 5-LOKO
Elisa Mara de Abreu Furquim, Mariza Akemi Matsumoto, Claudia Cristina Biguetti, Edilson Ervolino, André Hergesel de Oliva. Câmpus de Araçatuba, Faculdade de Odontologia de Araçatuba, elisafurquim13@gmail.com, bolsa PIBIC.
Palavras Chave: 5-lipoxigenase, camundongos, reparo alveolar.
Introdução
Os metabólitos da 5-‐LO, leucotrieno B4 (LTB4) e os leucotrienos peptídicos, atuam estimulando a osteoclastogênese, mais especificamente o LTB4, que possui função análoga ao RANK--‐L na diferenciação dos osteoclastos, tornando osteoclastos precursores em osteoclastos ativos. Assim, sustenta--‐se que a 5-LO seja um regulador negativo da formação óssea.
Objetivo
O presente estudo tem como objetivo analisar o reparo ósseo de alvéolos dentários de incisivos superiores recém-extraídos de camundongos geneticamente modificados para a enzima 5-LO (knockout – KO) 129/Sv 5-LOKO comparando-os com os não modificados (wild type – WT) 129/Sv WT.
Material e Métodos
Para tanto o trabalho foi aprovado pelo comitê de ética de uso de animais (CEUA/USC: 958927017), sendo utilizados 20 camundongos machos com idades variando entre 8 e 10 semanas, divididos em dois grupos contendo 10 animais da linhagem 129/Sv WT (Grupo WT) e 10 animais da linhagem 129/Sv 5-LOKO (Grupo KO). Os animais foram submetidos à exodontia do incisivo superior direito e após os períodos de 14 e 30 dias, cinco animais de cada grupo foram submetidos à eutanásia para a coleta das maxilas. Os alvéolos dos espécimes passaram por procedimentos histotécnicos para análise histopatológica em HE e os alvéolos de 30 dias foram submetidos à técnica imuno-histoquímica para marcações de RANK-L, OPG e TRAP.
Resultados e Discussão
Análise Histopatológica
Figura 1 – WT – Aos 14 dias notam neoformação óssea, com trabéculas primárias, as quais apresentam-se maduras e regulares aos 30 dias.
KO – Aos 7 dias já se nota a presença de trabéculas regulares, confirmando a neoformação óssea adiantada na ausência da 5LO. Aos 30 dias o tecido
ósseo apresenta similaridade ao do grupo WT (HE;
aumento original 100x) Análise Imuno-histoquímica
Figura 2 – Marcação imuno-histoquímica para RANK-L, OPG e TRAP. Após tratamento estatístico pelo teste Kruskal-Wallis e pós teste de Dunn’s, não detectou-se diferenças estatisticamente significantes na comparação entre os grupos no período de 30 dias para os três anticorpos. Apesar da formação óssea mais precoce do grupo WT observado na coloração HE, ao final do reparo alveolar o processo de remodelação mostra-se semelhante entre os grupos WT e KO.
Conclusões
Conclui-se que a ausência da enzima 5-LO acelera o processo de reparo alveolar sem, no entanto, influenciar o processo de remodelação óssea.
Agradecimentos
Apoio PIBIC-48676
1. Martel-Pelletier, J.; Mineau, F.; Fahmi, H.; Laufer, S.; Reboul, P.;
Boileau, C.; Lavigne, M.; Pelletier, J. P. Arthritis Rheum. 2004, 50, 3925-33.
2. Kang JH, Ting Z, Moon MR, Sim JS, Lee JM, Doh KE, Hong S, Cui M, Choi S, Chang HW, Park Choo HY, Yim M. 5-Lipoxygenase inhibitors suppress RANKL-induced osteoclast formation via NFATc1 expression.
Bioorg Med Chem. 2015 Nov 1;23(21):7069-78.
3. Shaw AT, Gravallese EM. Mediators of inflammation and bone remodeling in rheumatic disease. Semin Cell Dev Biol. 2016 Jan;49:2--‐10.
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