REDVET Rev. electrón. vet. http://www.veterinaria.org/revistas/redvet -http://revista.veterinaria.org Vol. 11, Nº 03, Marzo/2010– http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n030310.html
Un a t é cn ica pa r a la e x t ir pa ción de los ór ga n os v om e r on a sa le s
e n e l a r m a dillo Ch a e t oph r a ct u s v illosu s. Abor da j e de sde la
ca v ida d bu ca l
A sur gical pr ocedur e for t he ablat ion of t he Vom er onasal Or gans in t he
ar m adillo Chaet ophr act us v illosus. Appr oach fr om or al cav it y
I odice , O. H ., Ce r v in o, C. O. y Affa n n i, J. M .: I nst it ut o de Neur ociencia,
Facult ad de Medicina, Univer sidad de Morón. Machado 714, 5t o piso. ( 1408) Mor ón, Pcia. de Buenos Aires, Argent ina.
Cont act o: oiodice@unim or on.edu.ar
Re su m e n
Se describen los pasos de un procedim ient o quir úr gico par a la ext irpación bilat er al de los ór ganos v om er onasales del ar m adillo Chaet ophr act us v illosus ( Mam m alia, Xenar t hr a) . Cada ór gano est á ubicado en el piso de la cavidad nasal, adosado a cada lado del t abique nasal. Los órganos se abor dan a t r avés de una aber t ur a pr act icada en el t echo de la cav idad bucal. Est e pr ocedim ient o se realiza baj o lupa est er eoscópica y per m it e una v isualización dir ect a de los órganos Los m ism os se dest r uyen por m edio de una fr esa accionada por un t or no. De est e m odo se t iene la cer t eza de una ablación t ot al. La post er ior v erificación por m edio de cort es hist ológicos no es por lo t ant o necesar ia. Est o represent a una vent aj a im port ant e puest o que las car act eríst icas físicas del hueso de est os anim ales r equier en per íodos largos de ablandam ient o ( gener alm ent e alr ededor t r es m eses) .
Pa la br a s cla v e : arm adillo | ór gano v om er onasal | ablación
Abst r a ct
of t he bone of t hese anim als r equir e long per iods of soft ening ( usually around t hr ee m ont hs) .
Ke y w or ds: ar m adillo | vom er onasal or gan | ablat ion |
I N TROD UCCI ÓN
El ór gano vom er onasal ( OVN) es una est r uct ur a par ubicada a cada lado del sept um nasal sobr e el piso de la cav idad nasal. Cada ór gano del par posee una est r uct ura cilíndrica, con una ext r em idad ant er ior abier t a hacia el ex t er ior m ient r as que su ext r em o caudal t erm ina en fondo de saco ciego.
El OVN es obj et o de crecient e at ención por par t e de los fisiólogos en razón del im por t ant e papel que desem peñan en la reproducción y alim ent ación de cier t os m am íferos ( Est es, 1972; Winans y Pow er s, 1977; Beaucham ps y col., 1982; Wy socki y col., 1983; Kudj ak ova y col., 2007; Mar t el y Baum , 2007; Thom pson y col., 2007) . Affanni y Cer v ino ( 2004) dem ost r aron que la ablación de los OVN pr ovoca un dram át ico cam bio en la expr esión elect r ofisiológica del sueño par adój ico del ar m adillo Chaet ophr act us villosus. Los m encionados ór ganos son el punt o de par t ida de im por t ant es afer encias cer ebr ales. Est udios realizados por Scalia y Winans ( 1975) en conej o, opossum y r at a dem ost rar on afer encias del OVN hacia en el núcleo am igdalino m edial, la r egión pr eópt ica hipot alám ica y la par t e post er om edial del núcleo am igdalino cort ical Conex iones con la am ígdala fueron t am bién dem ost r adas por Mohedano- Mor iano y col. ( 2007) .
Par a aver iguar la función del OVN se ha r ecur r ido a la sección de los ner vios v óm er onasales en su t ray ect o int r acraneal o nasal ( Mat t hes, 1932; Planel, 1953; Winans y Pow ers, 1977) . El inconv enient e de est os procedim ient os es que pueden dañar ot r as est ruct ur as nerviosas adem ás de de los ner v ios v om er onasales ( bulbo olfat orio, ram as del ner v io t erm inal, t rigém ino y ór gano sept al) . Por est e m ot iv o ot ros aut ores r ecur rier on a la ext ir pación del ór gano. En est e sent ido m erecen dest acar se, las t écnicas desarr ollada por Vaccar ezza y col. ( 1979) . Ést os aut or es desar r ollar on dos t écnicas para la r at a por m edio de lesiones elect r olít icas o t ér m icas ut ilizando dos vías de abor daj e a saber : a) un v ía super ior que int r oduce elect r odos par a lesiones elect rolít icas a t r avés de las fosas nasales y b) una vía inferior que lesiona a los ór ganos con t erm ocaut er io a t r avés de una aber t ur a pr act icada por v ía bucal en el hueso m ax ilar .
pr ofundizar el conocim ient o del ór gano. En est e sent ido, el arm adillo C. v illosus apar ece com o un excelent e m odelo para est e t ipo de est udios en r azón del considerable t am año de los OVN y de su bien definido y conspicuo bulbo olfat orio accesorio que const it uye el pr im er núcleo de r elev o de las fibr as del ner vio vóm er onasal ( Fig. 1) . Su gran r esist encia a las int ervenciones quirúr gicas com plej as ( algo que no sucede, por ej em plo, con Dasypus hibr idus o con D. novencinct us) es ot ra car act er íst ica im por t ant e. Usufruct uando esas propiedades, hem os desar r ollado una t écnica
que perm it e ext ir par fácilm ent e los OVN de C. villosus. La m ism a per m it ir á em pr ender fut ur os est udios sobr e su papel funcional.
Figu r a 1 . Cor t e vért
ico-t r ansv er sal de los bulbos olfat or ios en Chaet ophr act us villosus. La flecha señala el bulbo olfat orio accesor io. BO, bulbo olfat or io pr incipal; N CF, neocor t ex fr ont al.
M ATERI AL Y M ÉTOD OS
Se ut ilizaron ej em plar es de C. v illosus ( Mam m alia, Dasypodidae, Xenar t hra) , denom inados vulgar m ent e en Ar gent ina “ peludos” .
Los ej em plares prov inieron de la Colonia de ar m adillos y m arsupiales del I nst it ut o de Neur ociencia. Fact ores com o condiciones de caut ividad, t ipos de j aulas ut ilizadas, alim ent ación y cuidados generales, y a fuer on publicados por nosot r os ( I odice, 1986, I odice y Affanni, 1988) .
Figu r a 2 . Cort e t ransver sal de la r egión de
nasal ( cn , cavidad nasal) de Chaet ophr act us villosus, donde puede obser v ar se el sept um nasal ( sn ) y los dos ór ganos v om er onasales ( ovn )
Realizada est a t ar ea prelim inar , se procedió de acuer do con los siguient es t iem pos
quir úr gicos:
1 . Tie m po An e st é sico:
• Se ut ilizó clorhidr at o de ket am ina a una dosis de 50 m g/ k g, com binado con x y lacina a dosis de 3 m g/ kg, diazepán a dosis 10 m g/ kg y sulfat o
de at r opina a dosis de 0,1 m g/ kg vía int r am uscular.
2 . Tie m po de D ié r e sis:
• Se ubicó el anim al en el aparat o est ereot áxico para ar m adillos const ruido ad- hoc por Dav id Koppf I nc. New Yor k ( Fig. 3) . Se rot ó el m ism o de m odo que quedase en decúbit o dorsal.
Figu r a 3 . El ar m adillo en el apar at o est er eot áxico, const ruido por David Koopf
( New York) . A. El apar at o est ereot áx ico ha sido gir ado 180° de m odo que el anim al quedase en decúbit o dor sal. Not ar que el ayudant e del experim ent ador , con una m ano desvía la lengua hacia un cost ado y con un hilo separ a el m axilar infer ior par e m ant ener la boca abier t a. B. Vist a del t echo de la boca en la que puede obser v arse la m ucosa palat ina.
• Un ayudant e m ant uv o lat er alizada la lengua para no herirla dur ant e pr ocedim ient o quir úr gico. Par a est e fin la cogió con los dedos por m edio de una gasa.
• Se ubicó el t echo de la boca dent r o del cam po v isual de una lupa est ereos-cópica ( Fig. 3B) .
• Se realizó la incisión con bist ur í de la m ucosa bucal cuyos bor des se separ ar on con ganchos at ados a un hilo.
• Se pr ocedió al legr ado del hueso m axilar .
• Se pr act icó un orificio r ect angular , en el hueso m axilar de 4 m m de ancho y 15 de largo ( Fig. 4A)
3 . Tie m po de e x é r e sis:
• Se ident ificó el bor de infer ior del sept um nasal y de los OVN.
• Se pinzar on los ex t rem os de cada órgano con fór ceps de cir ugía ocular.
• Se ext r aj o cada ór gano m ediant e cor t e con una t ij er a curva de cir ugía ocular .
• Se ver ificó baj o lupa la int egr idad del ór gano ex t ir pado.
4 . Tie m po de sín t e sis:
• Se pr ocedió al cierr e con acrílico dent al de la abert ura ósea ( Fig. 4B) .
• Se sut ur ó la m ucosa bucal con aguj a at r aum át ica e hilo m onofilam ent o 3/ 0 ( Fig. 4C) .
Figu r a 4 . Pasos de la cir ugía de ext ir pación del ór gano vom er onasal. A. Vist a del
5 . La v a do post - qu ir ú r gico:
• Com o dur ant e el pr ocedim ient o quirúr gico se der r am a una buena cant idad de sangr e que ent r a en las fosas nasales y se coagula, aconsej am os dej ar pasar una hora y luego elim inar los coágulos m ediant e lavado con solución fisiológica t ibia. Para est e últ im o paso se debe colocar al anim al en decúbit o vent r al en un plano inclinado caudo- or al. A cont inuación se aprox im a una cánula cur v ada en uno de sus ex t rem os ( Fig. 5) que se engancha en las coanas y a t r avés de la cual se hace pasar la solución fisiológica que fluir á por los or ificios nasales.
Figu r a 5 . Cánula de m et al
cur vada en uno de sus ex t rem os para la inst ilación de fluidos por las cavidades nasales.
Deseam os señalar que ese lavado no debe realizarse nunca int r oduciendo cánulas en los or ificios nasales pues ést os se encuent r an er izados de unas com plej as for m aciones ( Fig. 6) ( Affanni y col., 1982, 1986, 1987) que pueden ser lesionadas por el procedim ient o. Est as form aciones j uegan un im por t ant e papel al im pedir que par t ículas de t ierra ent r e en las fosas nasales cuando est os anim an cav an ( son poder osísim os cav adores) .
Figu r a 6 . Vist a la cav idad nasal
6 . Cu ida dos post - qu ir ú r gicos:
• Luego de la int ervención se adm inist ró com o t er apia ant ibiót ica y ant iinflam at or ia enr oflox acina al 5 % a dosis de 10 m g/ k g com binada con bencidam ina a dosis de 10 m g/ kg por vía int r am uscular cada 24 hor as durant e 5 días.
Al finalizar la int er vención, los ej em plares ut ilizados fuer on anest esiados y se procedió a la per fusión por vía cardíaca con soluciones fij ador as, para el post er ior est udio de las m uest r as.
RESULTAD OS Y D I SCUSI ÓN
Con est a t écnica los anim ales apar ecieron en m uy buen est ado y a desde el m ism o día de la oper ación y fuer on capaces de r espirar por la nariz. Las est ruct ur as recept or as olfat or ias per m anecieron conservadas. Est o quedó dem ost rado por: 1) el est udio hist ológico de la m ucosa nasal que r ev eló ausencia de lesiones. 2) la pr esencia de t odos los t ipos de act ividad ( act ividad sinusoidal inducida, int rínseca, lent a de Ot t oson y r hino- cent r al ( Affanni y Cervino, 2005) que fuer on descript os en est e anim al. Los m ism os cont inuar on pr esent es aun después de un m es de r ealizada la oper ación ( Fig. 7) .
Figu r a 7 . Act ividad eléct rica de los bulbos olfat or ios durant e la vigilia ant es
( izquier da) y después ( der echa) de un m es de haber ext irpado los ór ganos v om eronasales. Est o dem uest r a que el apar at o olfat or io pr incipal per m anece funcionant e.
t arden apr ox im adam ent e t r es m eses en sur t ir efect o. Se ret ar da así not ablem ent e el pr oceso de diagnóst ico. En r esum en, nuest r a t écnica ofr ece un m ét odo r ápido y seguro par a la ext irpación del OVN y la v er ificación anat óm ica de la m ism a.
Queda así abier t a la posibilidad de una invest igación sist em át ica sobr e el papel biológico del m encionado ór gano en est a especie de arm adillo.
BI BLI OGRAFÍ A
1. Affanni, J. M., García Sam ar t ino, L., Casanave E., Flor in- Christ ensen, J. Fenóm enos fisiológicos observados dur ant e el ent err am ient o. Act a Physiol. Lat inoam ., 1982, vol. 32, p. 78- 79.
2. Affanni, J. M., Gar cia Sam ar t ino. L, Casanav e, E. B., Dezi, R. Absence of apnea in arm adillos cov ered by soil. Respirat ion Physiology., 1987, vol. 67, p. 239- 245.
3. Affanni, J. M., Casanav e, E. B., Gar cía Sam art ino, L., Fer rar i, R. Neocor t ical and olfact ory bulb act ivit y in arm adillos in arm adillos subm it t ed t o cov er ing by soil. Arch. I nt ernat . Physiol. Biochem ., 1986, vol. 94, p. 273- 279.
4. Affanni, J. M., Cervino, C. O. I nfluencia de la desafer ent ación olfat oria per ifér ica, de la ablación de los ór ganos v om er onasales y de la elim inación sim ult ánea de am bos sist em as sobr e la act ividad eléct rica del sist em a olfat or io principal dur ant e la v igilia y el sueño. Act as de Fisiología ( Ur uguay ) , 2004, v ol. 9, p. 42.
5. Affanni, J. M., Cervino C. I nt er act ions bet w een Wakefulness, Sleep and t he Olfact ory Sy st em . En Par m eggiani, P. L., Vellut i R., ( dir .) , The phy siologic nat ur e of sleep. London ( UK) : I m perial College Press, 2005, pp. 571- 599. 6. Beaucham p, G. K., Mar t in, I . G., Wy socki, C. J., Wellingt on, J. L. The inv
es-t igaes-t or y and sexual behavior of m ale guinea pigs follow ing vom eronasal or gan r em oval. Physiol. Behav., 1982, vol. 29, p. 329- 326.
7. Est es, R. The r ole of t he v om eronasal or gan in m am m alian r epr oduct ion. Mam m alia, 1972, vol. 36, p. 315- 341.
8. I odice, O. H. On t he im port ance of ar m adillos and m arsupials in biom edical r esear ch. Their m aint enance and r epr oduct ion in labor at or y condit ions. Act as del Regional / I nt er nat ional Meet ing on Labor at or y Anim als. I CLAS- CEMI B-FESBE, Aguas de Lindia ( Brasil) , 1986. pp. 292- 301.
9. I odice, O. H., Affanni, J. M. Anim ales de laborat orio no t r adicionales. Mant enim ient o y repr oducción en condiciones de biot erio del géner o Chaet ophract us ( Xenar t hr a = Edent at a, Dasypodidae) . Act as del VI Congr. Ar g. de Cs. Vet erinar ias, Buenos Aires, 1988.
aft er ext irpat ion of t he v om eronasal organ ( VNO) . Dokl. Biol. Sci., 2007, vol. 41, p. 208- 211.
11. Mar t el, K. L., Baum , M. J. Sexually dim or phic act ivat ion of t he accessor y, but not t he m ain, olfact ory bulb in m ice by urinar y v olat iles. Eur . J Neur osci., 2007, vol. 26, nº 2, p. 463- 475.
12. Mat t hes, E. Weit ere ger uchsdr essur en an neer schw einchen. Z. ver gl. Physiol., 1932, v ol. 17, p. 464- 490.
13. Mihalkovics, V. Nassenhuhle und Jacobsonsches or gan. Anat . Heft e., 1898, vol. 11, p. 1- 1070.
14. Mohedano- Moriano, A., Pro- Sist iaga, P., Ubeda- Banon, I ., Cr espo, C., I nsaust i, R., Mar t ínez- Mar cos, A. Segr egat ed pat hw ays t o t he v om eronasal am ygdala: differ ent ial pr oj ect ions from t he ant er ior and post erior divisions of t he accessor y olfact ory bulb. Eur . J Neur osci., 2007, v ol. 25, nº 7, p. 2065-2080.
15. Planel, H. Et udes sur la phy siologie de l'or gane de Jacobson. Ar chs. Anat . Hist ol. Em br yol., 1953, v ol. 36, p. 199- 205.
16. ScaI ia, F., Winans, S. S. The differ ent ial pr oj ect ions of t he olfact ory bulb and accessory olfact or y bulb in m am m als. J. Com p. Neur., 1975, vol. 161, p. 31- 56.
17. Thom pson, R.N., Napier, A., Wek esa, K. S. Chem osensor y cues fr om t he lacrim al and preput ial glands st im ulat e pr oduct ion of I P3 in t he v om eronasal organ and aggression in m ale m ice. Phy siol. Behav., 2007, v ol. 90, nº 5, p. 797- 802.
18. Vaccar ezza, O. L., Reguero, M., Ber ra, M., Tram ezzani, J. H. Techniques for t he lesion of t he vom er onasal or gan of t he r at . Act a Physiol. Lat inoam ., 1979, vol. 29, p. 95- 99.
19. Winans, S. S., Pow ers, J. B. Olfact ory and v om eronasal desafferent at ion of m ale ham st ers: hist ological and behavioral analysis. Br ain Res., 1977, vol. 126, p. 325- 340.
2 0 . Wysocki, C. J., Kat z, Y., Ber nhar d, R. Male v om er onasal or gan m ediat es
fem ale- induced t est ost erone sur ges in m ice. Biol. Repr od., 1983, vol. 28, p. 917- 922.
Reseña Curricular de los Autores
I OD I CE, Om a r H é ct or . • Médico Veterinario.
• Argentino, nacido en Buenos Aires.
• Egresado de la Facultad de Ciencias Veterinarias. Universidad de Buenos Aires (UBA). • Ex Docente de la Cátedra de Fisiología Animal Comparada. Facultad de Ciencias
Exactas y Naturales. UBA.
• Miembro del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnicas (CONICET) como Profesional Principal en la Carrera de Apoyo a la Investigación.
• Veterinario de la Colonia de Armadillos y Marsupiales del Instituto de Neurociencia (INEUCI – CONICET), 1982 – 2002.
• Veterinario del Bioterio Central de la Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. UBA, 2002 – 2003. • Publicación de varios trabajos y dictado de numerosas conferencias sobre:
o Nuevos modelos en experimentación biomédica, y o Armadillos y Zarigüeyas como modelos experimentales.
• Profesor Invitado al Curso sobre Animales de Laboratorio (según programa Federación de Asociaciones de Ciencia de Animales de Laboratorio de Europa). Bioterio Central. Fac. Cs. Ex. y Naturales. UBA. 1998 – 2009.
AFFAN N I , Jor ge M a r io.
• Médico. Obtuvo el titulo de Doctor en Medicina en la Universidad de Buenos Aires. • Realizó su formación como neurofisiólogo en el Instituto de Fisiología de la Universidad
de Pisa, Italia, bajo la dirección de G. Moruzzi.
• Completó esa formación en Cambridge, UK (Ed Adrian), Estocolmo, Lyon-Paris, Bruselas y Oxford.
• Actualmente es Investigador Superior del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnica de Argentina.
• Ex Profesor Titular de Fisiología Comparada de la Universidad de Buenos Aires.
• Ex Vicepresidente del Consejo Nacional de Investigaciones Científicas y Técnica. Ex Miembro de su Directorio.
• Ex Director del Instituto de Neurociencia de la Universidad de Buenos Aires.
• Actual Director del Instituto de Neurociencia de la Facultad de Medicina de la Universidad de Morón (Buenos Aires, Argentina).
• Es autor de varios libros sobre su especialidad.
• Es autor de más de un centenar de trabajos muchos de lo cuales se refieren a Fisiología, Anatomía e Histología de mamíferos sudamericanos.
CERV I N O, Cla u dio Osv a ldo.
Dr. en Ciencias Biológicas (Universidad de Buenos Aires – Argentina). • Orientación Fisiología – Suborientación Neurofisiología.
• Ex Docente de la Cátedra de Fisiología Animal Comparada. Facultad de Ciencias Exactas y Naturales. UBA.
• Profesor Asociado Regular de Fisiología (Facultad de Medicina – Universidad de Morón – Argentina).
• Profesor Titular de Fisiología Animal Comparada y de Etología (Facultad de Ciencias Exactas, Químicas y Naturales – Universidad de Morón – Argentina).
• Ha publicado libros, trabajos científicos y capítulos en libros de edición internacional en Fisiología, Neurofisiología y Biomedicina.
• Profesor Invitado al Laboratorio de Biofluidos (Charite Facultad de Medicina – Universidad Humboltd de Berlín – Alemania).
• Premio “PROF. DR. EDUARDO DE ROBERTIS”, al mejor trabajo de Neurociencia Básica (Buenos Aires, Argentina – 1999). Trabajo presentado: “Nuevo ritmo alfa y actividad gamma en los bulbos olfatorios de un
armadillo sudamericano: cuantificación y perspectivas futuras”.
RED V ET: 2 0 1 0 , V ol. 1 1 N º 0 3
Recibido: 11.08.2009 – Ref. prov. JUL0920 – Revisado: 10.10.2009 - Aceptado: 15.12.2009 Ref. def. 031014_REDVET - Publicado: 01.03.2010
Este artículo está disponible en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n030310.html concretamente en http://www.veterinaria.org/revistas/redvet/n030310/031014.pdf
REDVET®Revista Electrónica de Veterinaria está editada por Veterinaria Organización®.
Se autoriza la difusión y reenvío siempre que enlace con Veterinaria.org® http://www.veterinaria.org y con REDVET®
