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Efeito de diferentes antibióticos no processo de reparo em reimplante de dentes mantidos em leite: estudo em ratos

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Juceléia Maciel

Araçatuba - SP

2014

Universidade Estadual Paulista “Júlio de Mesquita Filho”

Faculdade de Odontologia de Araçatuba

Departamento de Cirurgia e Clínica Integrada

Efeito de diferentes antibióticos no processo

de reparo em reimplante de dentes mantidos

(2)

JJuceléia Maciel

Efeito de diferentes antibióticos no processo

de reparo em reimplante de dentes mantidos

em leite. Estudo em ratos.

Dissertação apresentada à Faculdade de Odontologia do Campus de Araçatuba - UNESP para obtenção do título de “Mestre em Odontologia”- Área de Concentração em Implantodontia.

Orientador: Celso Koogi Sonoda

Araçatuba-SP

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Dados curriculares

Nascimento: 05 de dezembro de 1981 Filiação: Vera Lúcia Rolim dos Santos João Batista Maciel

2008/2011: Curso de Graduação em Odontologia pela Universidade Camilo

Castelo Branco (Câmpus de Fernandópolis).

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Dedicatória

Dedico esta Dissertação...

À

À Deus,

Enquanto percorria o meu caminho rumo a um crescimento maior, por vezes deparei com

a angústia existencial que assolava o meu íntimo, com questionamentos sem respostas,

buscas sem encontros. Foi quando elevei os olhos para o alto, recebendo de Deus a

instrução para o caminho da verdadeira sabedoria. Obrigado Senhor, pois só pelo Seu

amor foi possível chegar até aqui.

À José Leandro Mesquita, Leandro Mesquita e Julia Mesquita,

por terem acreditado no meu ideal, por todas as vezes que lamentaram a minha ausência

e escutaram minhas angústias, alegrias e decepções, sempre como se fosse a última vez.

Pelo pleno apoio e incentivo aos meus sonhos e por fazerem parte das minhas conquistas.

Amo vocês.

À minha mãe, Vera Lúcia Rolim dos Santos,

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Agradecimentos especiais

Agradecer é admitir que houve um momento em que se precisou de alguém, reconhecer

que o homem jamais poderá lograr para si o dom de ser auto-suficiente.

Ao meu orientador, PProf. Adj. Celso Koogi Sonoda,

pela oportunidade de ter sido aceita como sua orientada, por compartilhar seus

conhecimentos, pela paciência diante de minhas limitações e dificuldades e pelo auxílio

pela busca da realização plena de meus ideais profissionais e humanos.

À Professora D

Dra. Ana Paula Farnezi Bassi e Profa. Dra. Jéssica Lemos Gulinelli,

por terem aceitado prontamente compor a banca da defesa de minha dissertação.

Aos amigos

Maria del Pilar Rodriguéz Sánchez,

por ser bem mais que uma amiga, foi um anjo que Deus colocou no meu caminho,

companheira para todos os momentos, que hora era amiga, ora irmã, por vezes mãe.

Juntas sorrimos e como… Obrigada pela força, pelos conselhos e orientação profissional e

pessoal.

Leonardo Pérez Faverani.

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Aos colegas da Pós-Graduação,

Lamis,

Giovanna, Rodrigo, Gabriel, Willian, Ellen Ésper, Igor Benetti, Bianca, Timóteo,

Geraldo, André, Sabrina, Juliana, Fernanda, Patrícia, Ana Paula, Júlio Cézar, Júlio Maciel,

Rafael, Willian Caetano, Julierme, Elisa e Adrieli,

pela troca de conhecimento, pelas parcerias estabelecidas e pelos momentos agradáveis

que tivemos juntos durante esses anos. Desejo muito sucesso à todos.

Aos A

Alunos de graduação,

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Agradecimentos

À FFaculdade de Odontologia de Araçatuba – Unesp, na pessoa de sua diretora Profa. Dra.

Ana Maria Pires Soubhia, pela acolhida durante o curso de pós-graduação e pela

oportunidade de crescimento pessoal e profissional.

À ccoordenadora do programa de pós-graduação da faculdade de Odontologia de

Araçatuba – UNESP, representado pela PProfa. Dra. Maria José Hitomi Nagata, pela

oportunidade de cursar o mestrado.

Ao D

Departamento de Cirurgia e Clínica Integrada da Faculdade de Odontologia de

Araçatuba – Unesp, pela oportunidade e suporte durante todo o curso de pós-graduação.

Ao PProf. Dr. Idelmo Rangel Garcia Júnior,

pela oportunidade que a mim foi dada, pela confiança, disponibilidade em sempre ajudar

de forma paciente, pelos momentos de conversa que sempre me levam a busca de novos

desafios e conhecimento, pelo exemplo de ética e profissionalismo.

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pela confiança, generosidade em compartilhar seu conhecimento, pelo exemplo de ética e

profissionalismo e disponibilidade em sempre ajudar.

Sou imensamente grata por todos os momentos de aprendizado que acrescentaram de

forma positiva na minha formação e também de descontração que tornaram essa jornada

única.

Aos ffuncionários e amigos da FOA-UNESP

Dirce, Odair, Cleide, Gilmar e Renato,

por me acolherem de forma fraterna, pelas palavras gentis, por compartilhar de suas

experiências profissionais e pessoais que muito me ensinaram.

Paulo Gratão e Marco, pelo auxílio durante toda essa jornada.

Agradeço à todos por tornarem tão agradável os momentos de Laboratório e Biotério e

por tudo que fizeram para que a minha vivência nesta universidade fosse, não só uma

passagem, mas também a confirmação de uma grande amizade.

Aos FFuncionários da Pós-graduação: VValéria, Lilian e Cristiane

pela disponibilidade, eficiência e paciência com que me auxiliaram ao longo dessa

jornada.

À Michele, Fran, Patrícia e Camila.

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“Se és capaz de aceitar teus alunos como são, com suas

diferentes realidades sociais, humanas e culturais; se os

levas a superar as dificuldades, limitações ou fracassos, sem

humilhações, sem inúteis frustrações; se os levas a refletir

mais do que decorar; se te emocionas com a visão de tantas

criaturas que de ti dependem para desabrochar em

consciência, criatividade, liberdade e responsabilidade,

então podes dizer: sou mestre!”

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Maciel J. Efeito de diferentes antibióticos no processo de reparo em reimplante de dentes mantidos

em leite. Estudo em ratos. [tese]. Araçatuba: Faculdade de Odontologia da Universidade Estadual

Paulista; 2014.

Resumo

A utilização do meio de conservação para manutenção da viabilidade celular do ligamento periodontal e polpa após a avulsão, caso o elemento dentário não seja reimplantado imediatamente, é necessário. Se os dentes forem mantidos em meio seco ou saliva, recomenda-se o tratamento tópico com a tetraciclina antes do reimplante para favorecer a revascularização pulpar e o reparo do ligamento periodontal. No entanto faltam estudos sobre esse tratamento quando o dente avulsionado é mantido em leite. O objetivo deste trabalho foi avaliar histomorfometricamente o efeito de diferentes antibióticos no processo de reparo do ligamento periodontal e do tecido pulpar de dentes avulsionados mantidos em leite. Os incisivos superiores direito de 40 ratos Wistar (machos) foram extraídos, mantidos em leite e/ou meio seco e reimplantados. Os animais foram divididos de acordo com o meio de tratamento prévio ao reimplante: Grupo IM reimplante imediato. No Grupo DOX, o incisivo foi imerso em leite (40C) por 60 minutos e após em 10 ml de solução de Doxiciclina (0,05mg/ml) por mais 5 minutos. No grupo PEN, o incisivo foi mantido em leite (40C) associado com 10000UI de penicilina e 100mg de estreptomicina por 65 minutos. No grupo MS, o incisivo foi mantido em meio seco por 65 minutos. Os animais foram eutanasiados aos 60 dias pós-operatório, as amostras foram processadas e analisadas histomorfométricamente. Foi avaliada área de reabsorção por substituição, reabsorção inflamatória, ligamento periodontal com e sem reinserção, revascularização e reparo pulpar. O teste não paramétrico Kruskall-Wallis (p> 0,05) foi utilizado para calcular as variáveis, e o reparo pulpar foi analisado por escores. As análises estatísticas demonstraram diferenças entre grupos apontando maior reabsorção no grupo MS, assim como foi observado uma menor reabsorção inflamatória no Grupo PEN, além disso uma maior extensão de ligamento periodontal e melhor inserção nos grupos IM e PEN. Maior neovascularização pode ser observada no grupo IM. Pode-se concluir que a qualidade do reparo do ligamento periodontal foi superior quando se empregou a penicilina/estreptomicina junto com o leite. Não houve benefício quanto à revascularização pulpar com os dois antibióticos.

Palavras Chave: Reimplante dentário, Ligamento periodontal, Tetraciclina, Penicilina,

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Maciel J. Effect of different antibiotics in the repair process reimplantation in teeth maintained in

milk. Studies in rats. [thesis]. Araçatuba: UNESP – Sao Paulo State University; 2014

Abstract:

A storage media use for maintanance of cell viability after pulp and periodontal ligament avulsion, if the tooth isn ́t reimplanted immediately is necessary. If the teeth are kept in a dry medium or

saliva , it is recommended a topical treatment of the root with tetracycline before the reimplantation to promote pulp revascularization and periodontal ligament repair. However lack of studies on the treatment when the avulsed teeth is kept in milk . The aim of this research was to evaluate by histomorphological analysis the effect of different antibiotics in repair process of the ligament periodontal and pulp tissue of the avulsed tooth storage in milk. In forty rats Wistar (male) was carried out to upper right incisor extraction, were storage dry and/or salive and posterior reimplantation. The animals were divided according to the storage media before reimplantation: Group IM: immediate replantation. In the group DOX, the incisor was immerse in milk (4o) for 60 minutes, then it was immerse in 10 ml of solution of Doxycycline (0,05mg/ml) for 5 minutes. In the group PEN the incisor was storaged in milk (4o) associated with penicillin 10000UI plus 100mg of streptomycin for 65 minutes. In the group MS, the incisor was storaged in dry media for 65 minutes. The animals were euthanized after sixty days post-operation. The samples were processed and analyzed for histomorphometrically. It was evaluated reabsorption by substitution, inflammatory reabsorption, the periodontal ligament and their reinsertion, revascularization and pulp repair. The non-parametric Kruskall-Wallis (p> 0,05) test was used to evaluate the variables but pulp repair was analyzed by scores. Statistical analysis showed differences among groups pointed out major reabsorption on the Ms group, as well as was observed a minor inflammatory reabsorption in the Pen group, in addition to more periodontal ligament extension and better periodontal ligament insertion in IM and PEN groups. Higher neovascularization could be observed in the Im group. It can be concluded that the quality of the periodontal ligament ́s repair was higher when employed penicillin / streptomycin with milk. There was no benefit regarding revascularization with the two antibiotics.

Keywords: Tooth reimplantation, Periodontal ligament, Tetracycline, Penicillin, Estreptomycin,

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Lista de Figuras

Figura 1 Grupo IM: Terço médio da raiz com dentina (D) e cemento (C) íntegros. Fibras do ligamento periodontal (LP) reinseridas na camada de cemento e osso alveolar (TO). H.E. 100X

Figura 2 Grupo PEN: Fibras colágenas (FC) do ligamento periodontal inseridas na camada de cemento (C). H.E. 400X

Figura 3 Grupo PEN: Fibras colágenas (FC) do ligamento periodontal inseridas no tecido ósseo alveolar (TO). H.E. 400X

Figura 4 Fig. 4 – Grupo IM: Tecido conjuntivo frouxo com fibroblastos e vasos sanguíneos caracterizando o tecido pulpar (TP). Área de pré-dentina (asterisco) acima da camada de odontoblastos (seta). H.E. 200X

Figura 5 Grupo DOX: Ligamento periodontal(LP) com as fibras colágenas dispostas paralelamente à camada de cemento (C). H.E. 100X

Figura 6 Grupo DOX: Área de reabsorção inflamatória. Tecido conjuntivo (TC) com infiltrado inflamatório. Clastos (seta) em área de dentina (D) reabsorvida. H.E. 200X.

Figura 7 Grupo DOX: Tecido pulpar necrosado no interior do conduto radicular. H.E. 100X

Figura 8 Grupo MS: Área de reabsorção inflamatória. Presença de clastos junto à dentina reabsorvida (seta). Ligamento periodontal (LP) com fibras conjuntivas dispostas de forma desorganizada. H.E. 100X

Figura 9 Grupo MS: Tecido ósseo alveolar (TO) ocupando área de dentina (D) reabsorvida. Clastos junto à dentina reabsorvida (seta). H.E. 200X

Figura 10 Grupo MS: Camada de cemento (seta) coberta por tecido ósseo alveolar formando a anquilose. H.E. 100X

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Figura 11 Grupo MS: Tecido conjuntivo fibroso da região periapical apresentando infiltrado inflamatório agudo. H.E. 100X

Figura 12 Gráfico representativo das médias dos eventos histológicos encontrados entre os grupos.

Figura 13 Antissepsia com gaze embebido em polivinilpirrolidona-iodo.

Figura 14 Luxação do incisivo superior direito

Figura 15 Extração dentária

Figura 16 Dente extraído

Figura 17 Dentes extraídos mantidos em lâmina de cera por 65 minutos.

Figura 18 Meios de conservação.

Figura 19 Reimplante do dente avulsionado.

Figura 20 Vista do dente reimplantado

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35

50

51 50

51 51 50 50

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Lista de Tabelas

Tabela 1 Média e Desvio Padrão das áreas de reabsorção inflamatótia (R. Inf.), reabsorção por substituição (R. Sub.), reabsorção total (R. total), ligamento periodontal (L. Per.), ligamento periodontal reinserido (L.P. Rei.), ligamento periodontal não reinserido (L.S/Rei.) e anquilose (Anq.).

Tabela 2 Teste de Dunn para comparação estatística 2x2 entre os grupos segundo os critérios de análise da reabsorção inflamatória, reabsorção total, ligamento periodontal, ligamento periodontal reinserido (p<0,05).

Tabela 3 Tabela de escores segundo as áreas de tecido pulpar visualizadas nos diferentes grupos (p<0,05).

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Lista de Abreviaturas e Siglas

pH Potêncial Hidrogênionico Ltda Limitada

Farmac. Farmacêutica ml Mililitro EMSSP São Paulo

UI Unidade Internacional

qqC Graus centígrados nq Número

% Porcentagem Exp Exportação

Imp Importação

EDTA Ethylenediamine Tetraacetic Acid JVC Japan Victor Company

Tiff Tagged Image File Format IM Imediato

PEN Penicilina Fig Figura D Dentina C Cemento

LP Ligamento periodontal TO Tecido Ósseo Alveolar FC Fibras colágenas TP Tecido Pulpar

H.E Hematoxilina e Eosina DOX Doxiciclina

MS Meio Seco

R. sub. Reabsorção por Substituição R. Infl. Reabsorção Inflamatória

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L. Per. Rei Ligamento Periodontal Reinserido L. S/Rei. Ligamento periodontal não Reinserido Anq. Anquilose

p Nível de significância

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Sumário

1. Introdução...24

2. Proposição...27

3. Materiais e Métodos...29

4. Resultados...32

5. Discussão...40

6. Conclusão...44

7. Referências Bibliográficas...46

Figuras...51

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1. Introdução

Além das patologias comumente encontradas na odontologia como doença periodontal e cárie, o traumatismo dentário apresenta-se como uma das causas de perda dos elementos dentários. As agressões, os acidentes pela prática de esportes e por veículos automotores estão entre as causas mais comuns do traumatismo dentário na atualidade.(1,2) Dentre os tipos de traumatismo, a avulsão dentária desperta especial atenção, pois juntamente com a intrusão, proporciona os maiores danos ao periodonto do dente envolvido. A avulsão dentária é caracterizada pelo completo deslocamento do dente para fora do alvéolo. A melhor forma de tratamento para esses casos é o reimplante do dente avulsionado, pois pode restabelecer, mesmo que temporariamente, a estética e a função da área afetada.(1)

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bovino por sua vez apresentou-se superior aos demais meios de conservação com resultados favoráveis em vários estudos.(12-14)

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(27)

2. Proposição

(28)
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3. Materiais e métodos

O projeto foi submetido à análise no Comitê de Ética no Uso de Animais – FOA/UNESP com o Protocolo 02343/2012 (Processo 00747/2012). Para a realização do trabalho foram utilizados 40 ratos (Rattus norvegicus, Wistar) machos, com peso corporal variando entre 250 e 300 gramas, divididos em 4 grupos de 10 animais. Os animais foram obtidos e mantidos junto ao biotério da Faculdade de Odontologia de Araçatuba - UNESP e alimentados durante o período do experimento, com ração sólida triturada e água a vontade.

3.1 Procedimento cirúrgico

Para o procedimento cirúrgico nos animais, foi administrado por via intramuscular, Cloridrato de Xilazina (Anasedan AgriBrands Ltda) na dosagem de 10mg/Kg de peso corporal, para promover um relaxamento muscular. Na seqüência foi empregado o Cloridrato de Ketamina (Dopalen AgriBands Ltda) na dosagem de 70mg/Kg de peso corporal para obtenção do efeito sedativo. Posteriormente, foi realizado a antissepsia da porção anterior da maxila, com polivinilpirrolidona-iodo (Riodeine – Ind Farmac. Rioquímica Ltda), sindesmotomia, luxação e extração do incisivo superior direito com auxílio de instrumental especialmente adaptado.

Após a extração no Grupo IM, os dentes foram reimplantados imediatamente sem tratamento dos canais. No grupo DOX, os dentes foram imersos em 20ml de leite bovino integral longa vida (Parmalat) por 60 minutos e posteriormente imersos por mais 5 minutos em (20ml) de uma solução de doxiciclina (0,05mg/ml) (Cloridrato de doxiciclina – EMS – São Bernardo do Campos/SP, Brasil) em 20ml de soro fisiológico. No grupo PEN, os dentes foram imersos em 20ml de leite longa vida integral (Parmalat), onde foi diluído uma associação de 10000UI de penicilina e 20mg/ml de estreptomicina (Farmácia Aphoticário – Araçatuba-SP) por 65 minutos. Grupo MS, os dentes foram mantidos em meio seco, sobre a bancada. Exceto no grupo I e IV, todos os dentes foram mantidos em seus respectivos meios à 40C de temperatura.

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cureta e irrigação com soro fisiológico. Após o reimplante, todos os animais receberam doses de 20.000 U.I de penicilina G benzatina (Fontoura Wyeth S.A.) por via intramuscular 1 vez por semana, durante 3 semanas. Os animais foram submetidos à eutanásia por meio de dose excessiva de anestésico, 60 dias após o ato operatório.

3.2 Processamento Histológico

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4. Resultados

4.1Resultados Histomorfométrico

Neste estudo, os animais suportaram os procedimentos de forma adequada não sendo detectado nenhum tipo de desconforto durante todo o experimento. Cinco animais foram descartados em função de fratura radicular durante a exodontia.

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paredes dentinárias, se estendendo por todo o comprimento da polpa. Nos demais espécimes, o conduto radicular se encontrava preenchido por tecido conjuntivo necrótico. A região periapical era ocupada por um tecido conjuntivo fibroso, onde se observava um infiltrado inflamatório agudo junto ao forame apical. A parede óssea alveolar era formada por tecido ósseo maduro com a presença de osteoblastos na sua periferia.

Fig. 1 – Grupo IM: Terço médio da raiz com dentina (D) e cemento (C) íntegros. Fibras do ligamento periodontal (LP) reinseridas na camada de cemento e osso alveolar (TO). H.E. 100X

Fig. 2 – Grupo PEN: Fibras colágenas (FC) do ligamento periodontal inseridas na camada de cemento (C). H.E. 400X

Fig. 3 – Grupo PEN: Fibras colágenas (FC) do ligamento periodontal inseridas no tecido ósseo alveolar (TO). H.E. 400X

Fig. 4 – Grupo IM: Tecido conjuntivo frouxo com fibroblastos e vasos sanguíneos caracterizando o tecido pulpar (TP). Área de pré-dentina (asterisco) acima da camada de odontoblastos (seta). H.E. 200X

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paralelamente à camada de cemento (Fig. 5). Em alguns pontos essas fibras não apresentavam uma disposição definida e era possível observar um infiltrado inflamatório leve. Pequenas áreas de anquilose também foram encontrados em 3 espécimes. O comprometimento pela reabsorção radicular foi superior aos grupos PEN e IM. Em três espécimes as áreas reabsorvidas eram mais profundas e extensas. Das áreas reabsorvidas, a reabsorção do tipo inflamatória apareceu em maior proporção do que a reabsorção por substituição. Nessas áreas um infiltrado inflamatório, era encontrado no tecido conjuntivo fibroso junto à área reabsorvida. Clastos podiam ser encontrados junto à dentina reabsorvida (Fig. 6). Em todos os espécimes, o conduto radicular estava preenchido por tecido conjuntivo com características de necrose (Fig. 7). O tecido ósseo alveolar apresentava as mesmas características que o observado no grupo anterior.

Fig. 5 – Grupo DOX: Ligamento periodontal (LP) com as fibras colágenas dispostas paralelamente à camada de cemento (C). H.E. 100X.

Fig. 6 – Grupo DOX: Área de reabsorção inflamatória. Tecido conjuntivo (TC) com infiltrado inflamatório. Clastos (seta) em área de dentina (D) reabsorvida. H.E. 200X.

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Grupo Meio Seco (n=8) - Apenas alguns espécimes apresentaram tecido conjuntivo na superfície radicular. As fibras colágenas desse tecido, na maior parte dos casos, se apresentavam sem uma organização definida. Em muitas áreas, um infiltrado inflamatório que variava de leve a moderado estava presente. Foi o grupo mais comprometido pela reabsorção radicular, sendo encontrada em todos os espécimes. Houve predomínio da reabsorção inflamatória com áreas de atividade em vários pontos (Fig. 8). Dois espécimes tiveram quase toda a estrutura radicular reabsorvida por esse tipo de reabsorção. A reabsorção por substituição por sua vez esteve presente em apenas dois espécimes. A área de dentina reabsorvida era substituída por tecido ósseo alveolar. Células clásticas podiam ser encontradas junto à dentina, em vários pontos (Fig. 9). Em quatro espécimes, algumas áreas em que o cemento se apresentava íntegro estavam cobertas por tecido ósseo alveolar formando a anquilose (Fig. 10). O conduto radicular de todos os espécimes estava ocupado por tecido conjuntivo necrótico. Junto ao forâme apical observava-se um infiltrado inflamatório agudo e nas demais áreas do periápice havia um infiltrado inflamatório crônico (Fig. 11). A parede alveolar era formada por um tecido ósseo maduro com algumas áreas de neoformação. Pontos com a presença de clastos também forma encontrados.

Fig. 8 – Grupo MS: Área de reabsorção inflamatória. Presença de clastos junto à dentina reabsorvida (seta). Ligamento periodontal (LP) com fibras conjuntivas dispostas de forma desorganizada. H.E. 100X

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Fig. 10 – Grupo MS: Camada de cemento (seta) coberta por tecido ósseo alveolar formando a anquilose. H.E. 100X

Fig. 11 – Grupo MS: Tecido conjuntivo fibroso da região periapical apresentando infiltrado inflamatório agudo. H.E. 100X

Tabela 1. Média e Desvio Padrão das áreas de reabsorção inflamatória (R. Inf.), reabsorção por substituição (R. Sub.), reabsorção total (R. Total), ligamento periodontal (L. Per.), ligamento periodontal reinserido (L.P. Rei.), ligamento periodontal não reinserido (L.P.S/Rei.) e anquilose (Anq.)

R. Inf. R. Sub. R. Total L. Per. L.P. Rei. L.P. S/ Rei. Anq.

IM 8,84 (±20,31) 1,93 (±3,13) 10,78 (±23,08) 95,52 (±12,66) 80,92 (±20,5) 19,07 (±20,05) 1,17(±2,70)

DOX 18,2 (±20,86) 2,28 (±3,45) 20,48 (±22,34) 66,13 (±37,99) 22,57 (±19,25) 41,16(±27,34) 3,47(±5,35)

PEN 3,98 (±7,12) 0,36 (±0,56) 4,35 (±7,66) 90,59 (±21,13) 77,9 (±24,68) 14,51(±16,07) 0,78 (±2,48)

MS 34,24 (±25,62) 14,73 (±28,98) 48,97 (±29,08) 33,7 (±25,71) 0,87 (±2,48) 32,82(±24,99) 8,81(±10,44)

Figura 12 - Gráfico representativodas médias dos eventos histológicos encontrados entre os grupos.

0 20 40 60 80 100 120

IM DOX PEN MS

MÉDIA (%) DOS EVENTOS HISTOLÓGICOS ENCONTRADOS ENTRE OS GRUPOS:

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4.2 Resultados estatísticos

O teste de aderência à curva normal demonstrou comportamento não paramétrico das amostras, de forma que o teste de Kruskal-Wallis evidenciou diferença significativa entre os grupos. Os resultados estatísticos do teste de Dunn para comparações individuais são apresentados na Tabela 2. A análise dos resultados demonstrou não haver diferença estatisticamente significante para a ocorrência de reabsorção por substituição, ligamento periodontal não reinserido e anquilose.

Tabela 2: Teste de Dunn para comparação estatística 2x2 entre os grupos segundo os critérios de análise da reabsorção inflamatória, reabsorção total, ligamento periodontal, ligamento periodontal reinserido (p<0,05)

R. Inf. R. Total L. Per. L.P. Rei. IM vs DOX p>0,05 p>0,05 p>0,05 p<0,05 IM vs MS p>0,05 p<0,05 p<0,01 p<0,001 PEN vs DOX p>0,05 p>0,05 p>0,05 p<0,05 PEN vs MS p<0,05 p<0,01 p<0,01 p<0,001 PEN vs IM p>0,05 p>0,05 p>0,05 p>0,05 DOX vs MS p>0,05 p>0,05 p>0,05 p>0,05

Para permitir uma análise estatística adequada do reparo do tecido pulpar, houve a necessidade de conversão das medidas da porcentagem das áreas ocupadas ou não por esse tecido em escores. Assim:

x Escore 1: ausência de tecido pulpar com vitalidade.

(38)

x Escore 5: tecido pulpar com vitalidade ocupando todo o conduto radicular. Os valores obtidos foram submetidos ao teste estatístico não paramétrico de Kruskal-Wallis que demonstraram diferença estatisticamente significante. Os resultados estatísticos do teste de Dunn para comparações individuais são apresentados na Tabela 3. A ocorrência de tecido pulpar com vitalidade no grupo IM foi superior aos demais grupos.

Tabela 3: Tabela de escores segundo as áreas de tecido pulpar visualizadas nos diferentes grupos (p<0,05)

Escore IM DOX PEN MS

1 5/8 9/9 10/10 8/8

2 2/8 0/9 0/10 0/8

3 1/8 0/9 0/10 0/8

4 2/8 0/9 0/10 0/8

5 0/8 0/9 0/10 0/8

A b b b

(39)
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5. Discussão

A literatura tem demonstrado que ainda é atual o interesse pelo estudo dos meios de conservação no reimplante dentário.(17,18) A possibilidade de manter a integridade das células do ligamento periodontal fora de seu habitat natural por um determinado período de tempo permite que uma estratégia de tratamento mais adequado seja elaborada. Como observado no grupo IM, o reimplante imediato é o tratamento ideal para um caso de avulsão dentária. Mesmo assim, isso pode não ocorrer em decorrência de situações que demandem tempo adicional. Priorizar o tratamento de lesões mais severas que coloquem em risco a vida do paciente ou a distância de um hospital para atendimento mais adequado pode levar a essa necessidade.

Como observado no grupo MS deste estudo, a manutenção do dente avulsionado em meio seco ocasiona maior comprometimento pela reabsorção radicular. Isso seria consequente dos danos ao ligamento periodontal e cementoblastos em função do ressecamento.(15,19) Ainda assim, algumas áreas de ligamento periodontal foram observadas nesse grupo. No entanto é possível que algumas células possam ter sobrevivido permitindo a manutenção dessas áreas pelo período analisado.(20) No entanto, a proporção das áreas reabsorvidas encontradas demonstra que essas células não foram suficientes para permitir o reparo mais adequado das áreas lesadas. Apesar da antibioticoterapia sistêmica, houve um predomínio pela reabsorção inflamatória. Nesse caso, a presença do ligamento periodontal sem vitalidade na superfície radicular propicia condições para a liberação de enzimas e mediadores químicos inflamatórios resultantes de sua degradação, durante o processo de reparo.(21) Além disso, a necrose do tecido pulpar propicia uma fonte de bactérias e de toxinas que via forame apical e túbulos dentinários contribuem para a manutenção desse tipo de reabsorção.(22)

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periapical para a porção mais coronária do tecido pulpar. Assim, é possível que a anatomia do dente empregado no estudo tenha dificultado a revascularização. Por outro lado, nos dentes reimplantados rapidamente, o reparo pode ter sido favorecido pela breve recuperação dos vasos evitando a deterioração deste tecido enquanto fora do alvéolo.

Na análise do reparo do ligamento periodontal, observou-se que nos grupos DOX e PEN o uso do leite permitiu que os dentes avulsionados fossem mantidos em período extrabucal de 65 minutos sem que a sua vitalidade fosse comprometida. Não houve diferença significativa na extensão de ligamento periodontal com vitalidade e nos índices de reabsorção radicular encontrada entre esses grupos e o grupo IM. Propriedades como pH (6,5-7,2), osmolaridade (250 a 270 mOsm Kg) próximos a do líquido extracelular, presença de nutrientes(26) e fatores de crescimento(27) são qualidades do leite bovino integral que o torna adequado como meio de conservação. O seu uso em baixa temperatura, diminui a possibilidade de desnaturação de suas proteínas e de crescimento de bactérias.(28) Contribui também para a redução do metabolismo das células, favorecendo sua sobrevivência.(29)

Ao comparar esses dois grupos entre si, notou-se que os índices de reinserção do ligamento periodontal foram superiores no grupo PEN. A reinserção das fibras colágenas no cemento e na parede óssea alveolar é uma importante característica considerando que duas das funções do ligamento periodontal são fixar o dente no alvéolo e atenuar as forças de mastigação.(30,31) É possível que o uso tópico da tetraciclina tenha influído nesse resultado. Dependendo do meio de conservação a manutenção da vitalidade das células do ligamento periodontal é possível, mas outras funções podem ser alteradas.(12) A regeneração do ligamento periodontal depende também da capacidade de fixação na superfície radicular e acima de tudo da capacidade de se proliferar para promover o reparo da lesão.

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antibióticos, sendo um deles a tetraciclina, melhorou o índice de revascularização porém resultou em maior índice de anquilose. Atribuíram esse resultado a um possível efeito irritante da tetraciclina ao ligamento periodontal ou mesmo a um efeito estimulador de osteoblastos do tecido ósseo alveolar.(34)

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(44)

6. Conclusão

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7. Referências bibliográficas

1- Andreasen JO, Andreasen FM. Avulsões. In: Andreasen, JO, Andreasen FM. Texto e atlas colorido de traumatismo dental. Porto Alegre: Artmed; 2001. p.383-425.

2- Patil S, Dumsha TC, Sydiskis RJ. Determining periodontal ligament (PDL) cell vitality from exarticulated teeth stored in saline or milk using fluorescein diacetate. Int Endod J 1994;27:1-5.

3- Andreasen JO, Borum MK, Jacobsen HL, Andreasen FM. Replantation of 400 avulsed permanent incisors 4. Factors related to periodontal ligament healing. Endod Dent Traumatol 1995;11:76-89.

4- Poi WR, Salineiro SL, Miziara FV, Miziara EV. A educação como forma de favorecer o prognóstico do reimplante dental. Rev Assoc Paul Cir Dent 1999;53:474-9.

5- Panzarini SR, Saad Neto M, Sonoda CK, Poi WR, Carvalho ACP. Avulsões dentárias em pacientes jovens e adultos na região de Araçatuba. Rev Assoc Paul Cir Dent 2003;57:27-31.1

6- Olson BD, Mailhot JM, Anderson RW, Schuster GS, Weller RN, Comparison of various transport media on human periodontal ligament cell viability. J Endod 1997;23:676-9. 7- Marino TG, West LA, Liewehr FR, Mailhot JM, Buxton TB, Runner RR, et al. Determination of periodontal ligament cell viability in long shelf-life milk. J Endod 2000;26:699-702.

8- Andreasen JO. Effect of extra-alveolar period and storage media upon periodontal and pulpal healing after replantation of mature permanent incisor in monkey. Int J Oral Surg 1981;10:43-53.

9- Pearson RM, Liewehr FR, West LA, Patton WR, McPherson JC, Runner RR. Human periodontal ligament cell viability in milk and milk substitutes. J Endod 2003;29:184-6. 10- Courts FJ, Mueller WA, Tabeling HJ. Milk as an interim storage medium for avulsed teeth. Pediatr Dent 1983;5:183-6.

11- Blomlöf L, Otteskog P. Viability of human periodontal ligament cells after storage in milk or saliva. Scand J Dent Res 1980;88:436-40.

(47)

13- Martin MP, Pileggi R., A quantitative analysis of Propolis: a promising new storage media following avulsion. Dent Traumatol 2004; 20:85-9.

14- Hammarström L, Blomlöf L, Feiglin B, Andersson L, Lindskog S. Replantation of teeth and antibiotc treatment. Endod Dent Traumatol 1986; 2:51-7.

15- Cvek M, Cleaton-Jones P, Austin J, Khng M, Lownie J, Fatti P. Effect of topical application of doxycycline on pulp revascularization and periodontal healing in reimplanted nfionkey incisors. Endod Dent Traumatol 1990; 6: 170-176.

16- Andersson L, Andreasen JO, Day P, Heithersay G, Trope M, DiAngelis AJ, Kenny DJ, Sigurdsson A, Bourguignon C, Flores MT, Hicks ML, Lenzi AR, Malmgren B, Moule AJ, Tsukiboshi M. International Association of Dental Traumatology guidelines for the management of traumatic dental injuries: 2. Avulsion of permanent teeth. Dental Traumatology 2012; 28: 88–96.

17- Moazami F, Mirhadi H, Geramizadeh B, Sahebi S. Comparison of soymilk, powdered milk, Hank’s balanced salt solution and tap water on periodontal ligament cell survival. Dental Traumatology 2012; 28: 132–135

18- de Souza BDM, Lückemeyer DD, Felippe WT, Alves AMH, Simões CMO, Felippe MCS. Effect of milk renewal on human periodontal ligament fibroblast viability in vitro. Dental Traumatology 2012; 28: 214–216

19- Selvig KA, Bjorvatn K, Bogle GC, Wikesjo UME: Effect of stannous fluoride and tetracycline on periodontal repair after delayed tooth replantation in dogs. Scand f Dent Res 1992; 100: 200-3

20- Chen H, Teixeira FB, Ritter AL, Levin L, Trope M. The effect of intracanal anti-inflammatory medicaments on external root resorption of replanted dog teeth after extended extra-oral dry time. Dent Traumatol 2008; 24:74–8

21- Lindskog S, Pierce AM, Blomlof L, Hammarstrom L. The role of necrotic periodontal membrane in cementum resorption and ankylosis. Endod Dent Traumatol 1985; 3:96-101. 22- Andreasen JO. The effect of pulp extirpation or root canal treatment on periodontal healing after replantation of permanent incisors in monkeys. J Endod 1981;7:245-52. 23- Yanpiset K, Trope M. Pulp revascularization of replanted immature dog teeth after different treatment methods. Endod Dent Traumatol 2000;16:211–7.

(48)

25-Andreasen JO, Borum MK, Jacobsen HL, Andreasen FM. Replantation of 400 traumaticaliy avulsed permanent incisors. 2. Factors related to pulpal healing. Endod Dent Traumatol 1995;11: 59 68.

26-Blomlöf L. Storage of human periodontal ligament cells in a combination of different media. J Dent Res 1981; 60:1904-6.

27- Gauthier SF, Pouliot Y, Maubois J-L. Growth factors from bovine milk and colostrum: composition, extraction and biological activities. Lait 2006;86:99–125.

28Ashkenazi M, Sarnat H, Keila S. In vitro viability, mitogenicity and clonogenic capacity of periodontal ligament cells after storage in six different media. Endod Dent Traumatol 1999;15:149–56.

29- Barile FA. Introduction to in vitro cytotoxicology: mechanisms and methods. Boca Raton, FL: CRC Press; 1994. p. 12–4.

30- Ho SP, Marshall SJ, Ryder MI, Marshall GW. The tooth attachment mechanism defined by structure, chemical composition and mechanical properties of collagen fibers in the periodontium. Biomaterials 2007;28:5238–45.

31- Wang Y, Shun-pan GC, Xu X, Zhao S, Zhang C. The effect of cultured autologous periodontal ligament cells on the healing of delayed autotransplanted dog’s teeth J Endod 2010; 36:264–267.

32- Zhan X, Zhang C, Dissanayaka WL, Cheung GSP, Jin L, Yang Y, Yan F, Tong EHY. Storage media enhance osteoclastogenic potential of human periodontal ligament cells via RANKL-independent signaling. Dental Traumatology 2013; 29: 59–65.

33- Khin Ma M, Sae-Lim V.The effect of topical minocycline on replacement resorption of replanted monkey’s teeth. Dent Traumatol 2003;19: 96-102.

34- Quispe-Salcedo A, Ida-Yonemochi H, Ohshima H.Use of a triple antibiotic solution affects the healing process of intentionally delayed replanted teeth in mice. Journal of Oral Biosciences 2013; 55(2): 91-100.

35- Miller, E.L. Journal of Midwifery & Women’s Health. The penicillins: a review and update. v.47, n. 6, p.426-434, nov/dec, 2002

36- Katzung, G.B., Farmacologia básica e clínica. 9.ed. Rio de Janeiro: Guanabara Koogan, 2005. 991p.

37- Palomino JC, Guerra, H, Lumbreras H. A selective medium for primary isolation of South American Leishmanias. Tropenmed. Parasit. 1983; v.34, p. 229-232.

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(51)

Figuras

Ilustração do procedimento cirúrgico

Fig. 13 - Antissepsia com gaze embebido em polivinilpirrolidona-iodo.

Fig. 14 - Luxação do incisivo superior direito.

(52)

Fig. 17 - Dentes extraídos mantidos em meio seco por 65 minutos.

Fig. 18 – Meios de conservação.

Figura 19 – Reimplante do dente avulsionado. Figura 20 - Vista do dente reimplantado

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Anexo B

- Valores obtidos das mensurações de dentina total, reabsorção inflamatória, reabsorção por substituição, reabsorção total, ligamento periodontal, ligamento periodontal reinserido, ligamento periodontal não reinserido, anquilose e tecido pulpar.

Grupo Den. Total R. Infl. % R. Sub. % R. Total % L.Per. Tot. Lig. P. % L.P.Rein % L.P. S/R. % Anq. % Polpa % 1.PEN 6.154 0 0 0 0 0 0 12.924 12.924 100 9.036 69.91 3.888 30.08 0 0 0

2.PEN 5.273 0 0 0 0 0 0 9.487 9.487 100 5.614 59.17 3.873 40.82 0 0 0

3.PEN 4.748 0.966 20.21 0.080 1.68 1.046 22.03 15.077 13.016 86.33 11.908 78.98 3.108 25.57 0 0 0

4.PEN 6.390 0.881 13.78 0.057 0.89 0.938 14.67 13.945 4.541 32.56 3.938 28.23 0.603 4.32 0 0 0

5.PEN 11.260 0 0 0.053 0.47 0.053 0.47 13.758 13.758 100 13.758 100 0 0 0 0 0

6.PEN 9.776 0 0 0.060 0.61 0.060 0.61 13.267 13.267 100 13.160 99.19 0.107 0.80 0 0 0

7.PEN 6.848 0.224 3.27 0 0 0.224 3.27 12.920 11.246 87.04 7.023 54.35 4.223 32.68 1.009 7.85 0

8.PEN 6.377 0 0 0 0 0 0 11.702 11.702 100 11.702 100 0 0 0 0 0

9.PEN 7.158 0.182 2.54 0 0 0.182 2.54 13.926 13.926 100 12.418 89.17 1.508 10.83 0 0 0

10.PEN 3.467 0 0 0 0 0 0 9.648 9.648 100 9.648 100 0 0 0 0 0

Média 3.98 0.36 4.35 90.59 77.9 14.51 0.78

Grupo Den. Total R. Infl. % R. Sub. % R. Total % L.Per. Tot. Lig. P. % L.P.Rein % L.P. S/R. % Anq. % Polpa % 1.DOX 5.859 2.789 47.60 0.349 5.95 3.138 53.55 12.631 1.919 15.19 1.919 15.19 0 0 1.612 12.76 0

2. DOX 6.280 0.777 12.37 0 0 0.777 12.37 11.345 8.802 77.58 5.069 44.68 3.733 32.90 0 0 0

3. DOX 6.249 0 0 0.477 7.63 0.477 7.63 13.223 11.993 90.69 3.849 29.10 8.144 61.58 0 0 0

4. DOX 5.969 0.107 1.79 0 0 0.107 1.79 13.353 13.353 100 1.626 12.17 8.584 64.28 1.424 10.66 0

5. DOX 4.123 1.870 45.35 0 0 1.870 45.35 12.372 2.651 20.28 0 0 2.651 20.28 0 0 0

6. DOX 6.895 2.955 42.85 0.482 6.99 3.437 49.84 14.795 2.279 15.40 0 0 2.279 15.40 0 0 0

7. DOX 6.380 0.762 11.94 0 0 0.762 11.94 13.841 10.602 76.05 4.852 35.05 5.675 41.00 1.085 7.84 0

8. DOX 6.466 0 0 0 0 0 0 13.308 13.308 100 7.213 54.20 6.095 47.79 0 0 0

9. DOX 5.753 0.108 1.87 0 0 0.108 1.87 13.124 131.124 100 1.671 12.73 11.453 87.23 0 0 0

(56)

Grupo Den. Total R. Infl. % R. Sub. % R. Total % L.Per. Tot. Lig. P. % L.P.Rein % L.P. S/R. % Anq. % Polpa % 1.MS 4.579 1.042 22.75 3.537 77.24 4.579 100 9.496 0 0 0 0 0 0 1.847 19.45 0 2.MS 3.224 0.436 13.52 0 0 0.436 13.52 9.268 3.946 42.57 0 0 3.946 42.57 0 0 0 3.MS 3.849 1.007 26.16 0 0 1.007 26.16 11.344 6.455 56.90 0 0 6.455 56.90 0 0 0 4.MS 3.146 1.979 62.90 0 0 1.979 62.90 9.933 6.445 64.88 0 0 6.445 64.88 1.197 12.05 0 5.MS 3.067 0.914 29.80 0 0 0.914 29.80 7.838 4.300 54.86 0.551 7.02 3.749 47.83 0 0 0 6.MS 3.088 0 0 1.254 40.60 1.254 40.60 8.822 0 0 0 0 0 0 2.345 26.58 0 7.MS 2.748 1.123 40.86 0 0 1.123 40.86 8.179 2.821 34.49 0 0 2.821 34.49 1.018 12.44 0 8.MS 2.667 2.079 77.95 0 0 2.079 77.95 8.976 1.428 15.90 0 0 1.428 15.90 0 0 0 Média 34.24 14.73 48.97 33.70 0.87 32.82 8.81 0

Grupo Den. Total R. Infl. % R. Sub. % R. Total % L.Per. Tot. Lig. P. % L.P.Rein % L.P. S/R. % Anq. % Polpa % 1.IM 5.904 0 0 0 0 0 0 15.882 15.882 100 15.882 100 0 0 0 0 51

2.IM 7.204 0.146 2.02 0 0 0.146 2.02 12.260 12.260 100 9.300 75.85 2.960 24.14 0 0 0

3.IM 6.465 0.291 4.50 0.299 4.62 0.590 9.12 13.918 13.918 100 12.212 87.74 1.706 12.25 0 0 0

4.IM 10.443 0 0 0 0 0 0 18.341 18.341 100 18.341 100 0 0 0 0 40

5.IM 9.219 0.328 3.55 0 0 0.328 3.55 14.761 14.761 100 11.849 80.27 2.912 19.72 0.245 1.65 65

6.IM 8.343 0 0 0 0 0 0 15.855 15.855 100 15.855 100 0 0 0 0 10

7.IM 5.845 3.444 58.92 0.495 8.46 3.939 67.39 15.839 10.167 64.18 4.629 45.52 5.538 54.47 1.222 7.71 5

8.IM 5.959 0.104 1.74 0.145 2.43 0.249 4.17 12.536 12.536 100 7.273 58.01 5.263 41.98 0 0 0

(57)

Anexo C

Normas para publicação na revista Dental Traumatology.

1. GENERAL

Dental Traumatology is an international journal which aims to convey scientific and

clinical progress in all areas related to adult and pediatric dental traumatology. It aims to promote communication among clinicians, educators, researchers, administrators and others interested in dental traumatology. The journal publishes original scientific articles, review articles in the form of comprehensive reviews or mini reviews of a smaller area, short communication about clinical methods and techniques and case reports. The journal focuses on the following areas related to dental trauma:

Epidemiology and Social Aspects

Tissue, Periodontal, and Endodontic Considerations Pediatrics and Orthodontics

Oral and Maxillofacial Surgery / Transplants/ Implants Esthetics / Restorations / Prosthetics

Prevention and Sports Dentistry

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encouraged to visit Wiley-Blackwell Author Services for further information on the preparation and submission of articles and figures.

2. ETHICAL GUIDELINES

Dental Traumatology adheres to the below ethical guidelines for publication and research.

2.1. Authorship and Acknowledgements

Authors submitting a paper do so on the understanding that the manuscript have been read and approved by all authors and that all authors agree to the submission of the manuscript to the Journal. ALL named authors must have made an active contribution to the

conception and design and/or analysis and interpretation of the data and/or the drafting of the paper and ALL must have critically reviewed its content and have approved the final version submitted for publication. Participation solely in the acquisition of funding or the collection of data does not justify authorship.

Dental Traumatology adheres to the definition of authorship set up by The International

Committee of Medical Journal Editors (ICMJE). According to the ICMJE authorship criteria should be based on 1) substantial contributions to conception and design of, or acquisiation of data or analysis and interpretation of data, 2) drafting the article or revising it critically for important intellectual content and 3) final approval of the version to be published. Authors should meet conditions 1, 2 and 3.

(58)

the manuscript. Contributors who do not qualify as authors should be mentioned under Acknowledgements.

Acknowledgements: Under acknowledgements please specify contributors to the article other than the authors accredited.

2.2. Ethical Approvals

Experimentation involving human subjects will only be published if such research has been conducted in full accordance with ethical principles, including the World Medical

Association Declaration (version, 2008

http://www.wma.net/en/30publications/10policies/b3/index.html) and the additional

requirements, if any, of the country where the research has been carried out. Manuscripts must be accompanied by a statement that the experiments were undertaken with the understanding and written consent of each subject and according to the above mentioned principles. A statement regarding the fact that the study has been independently reviewed and approved by an ethical board should also be included. In the online submission process we also require that all authors submitting manuscripts to Dental Traumatology online must answer in the affirmative to a statement 'confirming that all research has been carried out in accordance with legal requirements of the study country such as approval of ethical commitees for human and/or animal research or other legislation where applicable.' Editors reserve the right to reject papers if there are doubts as to whether appropriate procedures have been used.

2.3 Clinical Trials

Clinical trials should be reported using the CONSORT guidelines available at

www.consort-statement.org. A CONSORT checklist should also be included in the

submission material.

All manuscripts reporting results from a clinical trial must indicate that the trial was fully registered at a readily accessible website, e.g., www.clinicaltrials.gov.

2.4 DNA Sequences and Crystallographic Structure Determinations

Papers reporting protein or DNA sequences and crystallographic structure determinations will not be accepted without a Genbank or Brookhaven accession number, respectively. Other supporting data sets must be made available on the publication date from the authors directly.

2.5 Conflict of Interest

Dental Traumatology requires that sources of institutional, private and corporate financial

support for the work within the manuscript must be fully acknowledged, and any potential grant holders should be listed. Acknowledgements should be brief and should not include thanks to anonymous referees and editors. The Conflict of Interest Statement should be included as a separate document uploaded under the file designation 'Title Page' to allow blinded review.

(59)

The decision on a paper is final and cannot be appealed.

2.7 Permissions

If all or parts of previously published illustrations are used, permission must be obtained from the copyright holder concerned. It is the author's responsibility to obtain these in writing and provide copies to the Publishers.

2.8 Copyright Transfer Agreement

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(60)

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2.9 OnlineOpen

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(61)

• Launch your web browser (supported browsers include Internet Explorer 6 or higher, Netscape 7.0, 7.1, or 7.2, Safari 1.2.4, or Firefox 1.0.4) and go to the journal's online Submission Site: http://mc.manuscriptcentral.com/dt

• Log-in or click the 'Create Account' option if you are a first-time user. • If you are creating a new account.

- After clicking on 'Create Account', enter your name and e-mail information and click 'Next'. Your e-mail information is very important.

- Enter your institution and address information as appropriate, and then click 'Next.' - Enter a user ID and password of your choice (we recommend using your e-mail address as your user ID), and then select your area of expertise. Click 'Finish'.

• If you have an account, but have forgotten your log in details, go to Password Help on the journals online submission system http://mc.manuscriptcentral.com/dt and enter your e-mail address. The system will send you an automatic user ID and a new temporary password.

• Log-in and select 'Author Centre.'

3.2. Submitting Your Manuscript

• After you have logged into your 'Author Centre', submit your manuscript by clicking the submission link under 'Author Resources'.

• Enter data and answer questions as appropriate. You may copy and paste directly from your manuscript and you may upload your pre-prepared covering letter.

• Click the 'Next' button on each screen to save your work and advance to the next screen. • You are required to upload your files.

- Click on the 'Browse' button and locate the file on your computer.

- Select the designation of each file in the drop down next to the Browse button. - When you have selected all files you wish to upload, click the 'Upload Files' button. • To allow double blinded review, please submit (upload) your main manuscript and title page as separate files. Please upload:

- Your manuscript without title page under the file designation 'main document' - Figure files under the file designation 'figures'.

- The title page, Acknowledgements and Conflict of Interest Statement where applicable, should be uploaded under the file designation 'title page'

• Review your submission (in HTML and PDF format) before completing your submission by sending it to the Journal. Click the 'Submit' button when you are finished reviewing. All documents uploaded under the file designation 'title page' will not be viewable in the html and pdf format you are asked to review in the end of the submission process. The files viewable in the html and pdf format are the files available to the reviewer in the review process.

3.3. Manuscript Files Accepted

(62)

tables, and figure legends, but no embedded figures. In the text, please reference figures as

for instance 'Figure 1', 'Figure 2' etc to match the tag name you choose for the individual figure files uploaded. Manuscripts should be formatted as described in the Author Guidelines below.

3.4. Blinded Review

All manuscripts submitted to Dental Traumatology will be reviewed by two experts in the

field. Dental Traumatology uses double blinded review. The names of the reviewers will

thus not be disclosed to the author submitting a paper and the name(s) of the author(s) will not be disclosed to the reviewers.

To allow double blinded review, please submit (upload) your main manuscript and title page as separate files.

Please upload:

• Your manuscript without title page under the file designation 'main document' • Figure files under the file designation 'figures'

• The title page, Acknowledgements and Conflict of Interest Statement where applicable, should be uploaded under the file designation 'title page'

All documents uploaded under the file designation 'title page' will not be viewable in the html and pdf format you are asked to review in the end of the submission process. The files viewable in the html and pdf format are the files available to the reviewer in the review process.

3.5. Suggest a Reviewer

Dental Traumatology attempts to keep the review process as short as possible to enable

rapid publication of new scientific data. In order to facilitate this process, please suggest the names and current email addresses of a potential international reviewer whom you consider capable of reviewing your manuscript. In addition to your choice the journal editor will choose one or two reviewers as well. When the review is done you will be notified under 'Manuscripts with decision' and through e-mail.

3.6. Suspension of Submission Mid-way in the Submission Process

You may suspend a submission at any phase before clicking the 'Submit' button and save it to submit later. The manuscript can then be located under 'Unsubmitted Manuscripts' and you can click on 'Continue Submission' to continue your submission when you choose to.

3.7. E-mail Confirmation of Submission

After submission you will receive an e-mail to confirm receipt of your manuscript. If you do not receive the confirmation e-mail after 24 hours, please check your e-mail address carefully in the system. If the e-mail address is correct please contact your IT department. The error may be caused by some sort of spam filtering on your mail server. Also, the e-mails should be received if the IT department adds our e-mail server

(uranus.scholarone.com) to their whitelist.

3.8. Manuscript Status

(63)

you by e-mail once a decision has been made.

3.9. Submission of Revised Manuscripts

To submit a revised manuscript, locate your manuscript under 'Manuscripts with Decisions' and click on 'Submit a Revision'. Please remember to delete any old files uploaded when you upload your revised manuscript. Please also remember to upload your manuscript document separate from your title page.

4. MANUSCRIPT TYPES ACCEPTED

Original Research Articles in all areas related to adult and pediatric dental traumatology are of interest to Dental Traumatology. Examples of such areas are Epidemiology and

Social Aspects, Tissue, Periodontal, and Endodontic Considerations, Pediatrics and Orthodontics, Oral and Maxillofacial Surgery/ Transplants / Implants, Esthetics / Restorations / Prosthetics and Prevention and Sports Dentistry.

Review Papers: Dental Traumatology commissions review papers of comprehensive areas

and mini reviews of small areas. The journal also welcomes uninvited reviews. Reviews should be submitted via the online submission site and are subject to peer-review.

Comprehensive Reviews should be a complete coverage of a subject discussed with the Editor in Chief prior to preparation and submission. Comprehensive review articles should include a description of search strategy of relevant literature, inclusion criteria, evaluation of papers and level of evidence.

Mini Reviews are covering a smaller area and may be written in a more free format.

Case Reports:Dental Traumatology accepts Case Reports but these will only be

published online and will not be included in the printed version unless specifically requested by the Editor-in-Chief.

Case Reports illustrating unusual and clinically relevant observations are acceptable, but their merit needs to provide high priority for publication in the journal. They should be kept within 3-4 printed pages and need not follow the usual division into material and methods etc, but should have an abstract. The introduction should be kept short. Thereafter the case is described followed by a discussion.

Short Communications of 1-2 pages are accepted for quick publication. These papers need not follow the usual division into Material and Methods, etc., but should have an abstract. They should contain important new information to warrant publication and may reflect improvements in clinical practice such as introduction of new technology or practical approaches. They should conform to a high scientific and a high clinical practice standard.

Letters to the Editor, if of broad interest, are encouraged. They may deal with material in papers published in Dental Traumatology or they may raise new issues, but should have important implications.

(64)

welcome, but should not be submitted via the online submission site, but send directly to the journal administrator Karin Andersson at dtoffice@qualitynet.net

5. MANUSCRIPT FORMAT AND STRUCTURE

5.1. Format

Language: The language of publication is English. Authors for whom English is a second language must have their manuscript professionally edited by an English speaking person before submission to make sure the English is of high quality. It is preferred that

manuscript is professionally edited. A list of independent suppliers of editing services can be found at http://authorservices.wiley.com/bauthor/english_language.asp. All services are paid for and arranged by the author, and use of one of these services does not guarantee acceptance or preference for publication.

Abbreviations, Symbols and Nomenclature: Abbreviations should be kept to a minimum, particularly those that are not standard. Non-standard abbreviations must be used three or more times and written out completely in the text when first used. Consult the following sources for additional abbreviations: 1) CBE Style Manual Committee.

Scientific style and format: the CBE manual for authors, editors, and publishers. 6th ed. Cambridge: Cambridge University Press; 1994; and 2) O'Connor M, Woodford FP. Writing scientific papers in English: an ELSE-Ciba Foundation guide for authors. Amsterdam: Elsevier-Excerpta Medica; 1975.

Font: When preparing your file, please use only standard fonts such as Times, Times New Roman or Arial for text, and Symbol font for Greek letters, to avoid inadvertent character substitutions. In particular, please do not use Japanese or other Asian fonts. Do not use automated or manual hyphenation. Use double spacing when writing.

5.2. Structure

All papers submitted to Dental Traumatology should include: Title Page, Abstract, Main

text, References and Tables, Figures, Figure Legends, Conflict of Interest Statement and Acknowledgements where appropriate. Title page, Conflict of Interest Statement and any Acknowledgements must be submitted as separate files and uploaded under the file designation Title Page to allow blinded review. Manuscripts must conform to the journal style. Manuscripts not complying with the journal style will be returned to the author(s).

Title Page: should be uploaded as a separate document in the submission process under the file designation 'Title Page' to allow blinded review. It should include: Full title of the manuscript, author(s)' full names (Family names should be underlined) and institutional affiliations including city, country, and the name and address of the corresponding author. If the author does not want the e-mail address to be published this must be clearly

indicated. The title page should also include a running title of no more than 60 characters and 3-6 keywords.

(65)

and Methods, Results and Conclusions. For other article types, please choose headings appropriate for the article.

Main Text of Original Articles should be divided into Introduction, Material and Methods, Results and Discussion. During the editorial process reviewers and editors frequently need to refer to specific portions of the manuscript, which is difficult unless the pages are numbered. Authors should number all of the pages consecutively.

Introduction should be focused, outlining the historical or logical origins of the study and not summarize the results; exhaustive literature reviews are inappropriate. Give only strict and pertinent references and do not include data or conclusions from the work being reported. The introduction should close with the explicit statement of the specific aims of the investigation or hypothesis tested.

Materials and Methods must contain sufficient detail such that, in combination with the references cited, all clinical trials and experiments reported can be fully reproduced. As a condition of publication, authors are required to make materials and methods used freely available to academic researchers for their own use. Describe your selection of

observational or experimental participants clearly. Identify the method, apparatus and procedures in sufficient detail. Give references to established methods, including statistical methods, describe new or modify methods. Identify precisely all drugs used including generic names and route of administration.

(i) Clinical trials should be reported using the CONSORT guidelines available at

www.consort-statement.org. A CONSORT checklist should also be included in the

submission material. All manuscripts reporting results from a clinical trial must indicate that the trial was fully registered at a readily accessible website, e.g.,

www.clinicaltrials.gov.

(ii) Experimental subjects: experimentation involving human subjects will only be

published if such research has been conducted in full accordance with ethical principles, including the World Medical Association Declaration (version, 2008

http://www.wma.net/en/30publications/10policies/b3/index.html) and the additional

requirements, if any, of the country where the research has been carried out. Manuscripts must be accompanied by a statement that the experiments were undertaken with the understanding and written consent of each subject and according to the above mentioned principles. A statement regarding the fact that the study has been independently reviewed and approved by an ethical board should also be included. Editors reserve the right to reject papers if there are doubts as to whether appropriate procedures have been used.

(iii) Suppliers of materials should be named and their location (town, state/county,

country) included.

Results should present the observations with minimal reference to earlier literature or to possible interpretations. Present your results in logical sequence in the text, tables and illustrations giving the main or most important findings first. Do not duplicate data in graphs and tables.

Referências

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