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Hemoculturas para o diagnóstico parasitológico da fase crônica da doença de Chagas.

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Academic year: 2017

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HEMOCULTURAS PARA O DIAGNÓSTICO PARASITOLÓGICO NA

FASE CRÔNICA DA DOENÇA DE CHAGAS *

O t o G . M o u r ã o * e O d e n i C. M e l l o * *

O s a u t o r e s a p r e s e n t a m o r e s u l t a d o d e h e m o c u l t u r a s d e 20 c h a g á s i c o s c r ô n i-n o s , e m m e i o L I T .

U s a r a m c o m o i n ó c u l o o c o n c e n t r a d o d e c é l u l a s d e 10 m l d e s a n g u e , la v a d o e m s o l u ç ã o f i s i o l ó g i c a a p ó s r e m o ç ã o d o p l a s m a p o r c e n t r i f u g a ç ã o a 3 . 0 0 0 r . p . m . A p a p a , a s s i m o b t i d a , f o i s e m e a d a e m p o r ç õ e s i g u a i s e m d o is t u b o s c o n t e n d o , c a d a u m , 5 m l d e L I T .

C o m u m a ú n i c a h e m o c u l t u r a o b t i v e r a m 6 c a s o s p o s i t i v o s ( 3 0 % ) . N ú m e r o s v a r i á v e i s d e h e m o c u l t u r a s , 1 a 14, n o s 20 p a c i e n t e s , p o s s i b i l i t a r a m a p o s i t i v i d a d e d e 9 c a s o s ( 4 5 % ) . S u b m e t e n d o 7 p a c i e n t e s a 4 o u m a i s h e m o c u l t u r a s (4 , 5 , 6, 10 e 1 4 ), 5 d e n t r e e l e s m o s t r a r a m - s e p o s i t i v o s ( 7 1 ,4 % ) .

R e c o m e n d a m o m é t o d o p a r a a r o t i n a p o r s e r p r á t i c o e d e f á c i l e x e c u ç ã o .

IN T R O D U Ç Ã O

E m b o r a e m 1949 P if a n o O) t e n h a r e l a ­ ta d o 5 h e m o c u l t u r a s p o s itiv a s e m 80 c h a ­ g á sic o s c r ô n ic o s (6 ,2 5 % ), o c o n c e ito q u e v e m p r e v a le c e n d o é o d e q u e a h e m o c u l t u ­

r a é i m p r a t i c á v e l n a f a s e c r ô n ic a d a m o ­ lé s tia d e C h a g a s . P a r a is to m u ito c o n t r i ­ b u ír a m o s t r a b a l h o s d e F r e i t a s (4,5,6) e m 1947, 1952, 1958 q u e r e i t e r a d a m e n t e m o s ­ t r a r a m r e s u lt a d o s n e g a tiv o s n o s m e io s d e B o n a c c i e N .N .N .

E m 1966 C h i a r i & B r e n e r (2); u s a n d o o L IT , o b tiv e r a m 9 c a s o s p o s itiv o s (25 ,7 % ) e m 35 p o r t a d o r e s d a d o e n ç a d e C h a g a s c r ô ­ n ic a . P a r a o b t e r e s s e s r e s u lt a d o s s e m e a ­ r a m 15 m l d e s a n g u e d e c a d a p a c ie n t e e m 8 tu b o s , 3 c o m o s a n g u e t o t a l , 3 c o m o so- b r e n a d a n t e e 2 c o m o s e d im e n to d e u m a a liq u o ta c e n t r i f u g a d a .

N e ss e m e s m o a n o , u m d e n ó s , M o u ­ r ã o <7), r e la to u , u s a n d o m e io p r ó p r io , p o ­ s itiv id a d e d e 83,3% e m 50 p a c ie n te s . E sse t r a b a l h o , n o e n t a n t o , é d e s titu íd o d e v a lo r, p o r q u e fic o u p r o v a d o q u e o té c n ic o , q u e c o la b o r o u n a p e s q u is a , in tr o d u z iu tr ip a n o - s o m a s n o m e io .

E m 1972, A lb u q u e r q u e e c o ls (D r e l a t a ­ r a m o r e s u lt a d o d e h e m o c u ltu r a s s e r ia d a s d e 38 c a s o s , e m m e io d e W a r r e n , c o m p o ­ s itiv id a d e d e 100% . N a s n o s s a s m ã o s , p o ­ r é m , o m é to d o n ã o s e re p r o d u z iu .

C o n c lu i-s e , p o r t a n t o , q u e a h e m o c u ltu ­ r a n a f a s e c r ô n ic a d a m o lé s tia d e C h a g a s é p o s s ív e l, p o d e n d o a p o s itiv id a d e a l c a n ­ ç a r n ív e is d e 2 5 ,7% , c o n f o r m e o b tiv e r a m C h ia r i e B r e n e r (2)

O p r e s e n t e t r a b a l h o p o s s ib ilita a c u l t u ­ r a e m a p e n a s 2 tu b o s e p r o c u r a a u m e n t a r e s s a p o s itiv id a d e , p e la r e m o ç ã o d o p la s m a

» T r a b a l h o r e a l iz a d o n o D e p a r t a m e n t o d e C l ín i c a M é d ic a d a F a c u l d a d e d e M e d ic in a d a U . F . M . G . , S e r v iç o d e I n v e s tig a ç & o d a D o e n ç a d e C h a g a s s o b a d i r e ç ü o d o P r o f . J . R o m e u C a n ç a d o .

** P r o f . A d j u n t o d o D e p a r t a m e n t o d e C l ín i c a M é d ic a d a F a c u l d a d e d e M e d i c i n a d a U . F . M G . U n i v e r s i t á r i a d a F a c u l d a d e d e M e d i c i n a d a U . F . M . G .

(2)

S A N G U l ' N E A S , L A V A D A S , D E C H A G A S I C O S C R Ô N I C O S

P O S I T I V I D A D E P O R P A C I E N T E

1 2 3 4 5 6 7 8 9 1 0 1 1 1 2 1 3 1 4

G . G . S . P P P P N P P N P N P N N N

F. S . P . P

R . L . A . N

J P . C . C - N P

M . C . S . N

O . D . R . P P P

W . A . C . N P N N P

R . Q . V . N N N N N N N N N N — --- --- —

L . C . S - N N N

O . P . S . N

A . A - N N N

----M - F . O . P N R - A - C . N N

S * A - 0 - N N N N N

M . C . O . ' N N N

1 . G - C . N N N —

---A . M . N N N N N P

A . F . M . P P P P N P

F. F. S . N N N

A - M - L . P N N N

P = P O S I T I V A N = N E G A T I V A

C A D A H E M O C U L T U R A C O N S T A D E 2 T U B O S C O N T E N D O C A D A U M 5 M L D E L I T . E O C O N C E N T R A D O D E C É L U L A S D E 5 M L D E

(3)

Julho-Agosto, 1975

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

185

e la v a g e m d o s e le m e n to s f ig u r a d o s d o s a n ­ g u e, n a t e n t a t i v a d e e l i m in a r o u p e lo m e ­ n o s r e d u z i r a a ç ã o d e s u b s t â n c i a s n o c iv a s ao c r e s c im e n to c o m o : c o m p le m e n to , p ro - p e r d in a , b e t a l i s i n a , lis o z im a e p o s s iv e lm e n ­ te a n tic o r p o s c o n t r a o T r i y p a n o s o m a c r u z i .

M A T E R IA L E M É T O D O S

1. P A C I E N T E S

E s ta p e s q u is a fo i r e a l i z a d a e m 20 p a ­ c ie n te s p o r t a d o r e s d e d o e n ç a d e C h a g a s , n a f a s e c r ô n ic a , to d o s c o m a r e a ç ã o d e G u e r r e ir o - M a c h a d o r e a t i v a , 11 d e n t r e e le s i n t e r n a d o s n o H o s p ita l d a s C lín ic a s d a F a ­ c u ld a d e d e M e d ic in a d a U . F . M . G . , s e le ­ c io n a d o s p e lo x e n o d ia g n ó s tic o p o s itiv o , p a ­ r a e n s a io s t e r a p ê u t i c o s d a d o e n ç a .

2 . M E I O U S A D O

L I T (3) d i s tr ib u íd o e m d o is tu b o s n a q u a n t i d a d e d e 5 m l e m c a d a tu b o .

3. C O L H E I T A , P R E P A R O E S E M E A D U R A

a ) D e z m l d e s a n g u e , c o lh id o s c o m o s d e v id o s c u id a d o s d e a s s e p s ia , ( la v a g e m d o a n t e b r a ç o c o m á g u a e s a b ã o s e g u id a , c o m o lo c a l a i n d a ú m id o , d e a p lic a ç ã o d e é te r - a c e t o n a e m e r t i o l a t o ) s ã o t r a n s f e ­ rid o s , e m q u a n t i d a d e s ig u a is ( 5 m l) , p a r a c a d a u m d e 2 tu b o s d e c e n t r í f u g a d e 15 m l d e c a p a c id a d e , c o n te n d o 1,5 m l d e s o lu ç ã o d e h e p a r i n a d e 5 . 0 0 0 u . i . / m l , d ilu íd a a 6 /1 0 0 0 e m s o ro fis io ló g ic o , p r e v ia m e n t e a u - to c l a v a d o s .

b ) O s t u b o s s ã o , e m s e g u id a , c e n t r i f u ­ g a d o s a 3 .0 0 0 r . p . m . d u r a n t e m e ia h o r a . O s o b r e n a d a n t e é re m o v id o , e m c o n d i­ ç ã o a s s é p tic a , p o r in t e r m é d i o d e s e r in g a d e 10 m l e a g u l h a d e 8 x 80, te n d o - s e o c u i­ d a d o d e n ã o a t i n g i r a c a m a d a d e p la q u e - t a s e le u c ó c ito s .

c ) S ã o , a s e g u ir a c r e s c e n ta d o s a c a d a tu b o , e m c o n d iç õ e s a s s é p tic a s , 5 m l d e s o ro fis io ló g ic o p r e v ia m e n t e a u to c l a v a d o .

N a m e d i d a d o p o s s ív e l, o m a t e r i a l é h o - m o g e in iz a d o e c e n tr i f u g a d o n o v a m e n te , a 3 . 0 0 0 r . p . m . p o r 15 m i n u to s .

d ) A p ó s r e m o ç ã o d o s o b r e n a d a n t e , c u i­ d a n d o a i n d a e m n ã o r e t i r a r a c a m a d a ‘d e p l a q u e t a s e le u c ó c ito s , o s e d im e n to é s e ­

m e a d o p o r in te r m é d io d e p i p e t a d e 5 m l, e m 2 tu b o s c o n te n d o c a d a u m 5 m l d e L IT .

e) O s tu b o s s ã o in c u b a d o s a 28°C e e x a m in a d o s a o s 30, 45 e 60 d ia s .

f) O e x a m e m ic ro s c ó p ic o é fe ito e m p e q u e n a g o ta , r e m o v id a d o f u n d o d o tu b o , p o r m e io d e a l ç a d e p l a t i n a e d is p o s ta e n ­ t r e l â m i n a e l a m í n u l a ( a u m e n to d e x 4 5 0 ).

A p ó s 60 d ia s , o m a t e r i a l d o s tu b o s n e ­ g a tiv o s é c e n tr i f u g a d o e o s e d im e n to e x a ­ m in a d o .

R E S U L T A D O S

N a t a b e l a I v e r if ic a - s e q u e d o s 20 p a ­ c ie n te s , 9 (4 5 % ) m o s tr a r a m - s e p o s itiv o s .

S e is ( 3 0 % ) , d o s 20 c a s o s , p o s itiv a r a m - se n a p r i m e i r a h e m o c u l t u r a .

N a t a b e l a I I s ã o a p r e s e n ta d o s o s r e s u l­ t a d o s d o s 20 p a c ie n t e s v a r ia n d o o n ú m e r o d e h e m o c u l t u r a s p o r p a c ie n te . D e zo ito , d e n t r e ele s, f o r a m s u b m e tid o s in d iv id u a l­ m e n t e a e n t r e u m a a se is h e m o c u ltu r a s ; d o s d o is r e s t a n t e s , u m a p a c ie n te s u b m e te u - -se a 10 e o u t r a a 14. N o s c a s o s e m q u e se fe z m a is d e u m a h e m o c u ltu r a , a s s e g u in te s f o r a m s u c e s s iv a s , n a m a io r ia d a s v e z es , p o ­ r é m n u n c a c o lh id a s n o m e s m o d ia .

E m 13 p a c ie n te s , p ro c e d e n d o a n ú m e r o s v a r iá v e is d e h e m o c u ltu r a s , p o r é m a c im a d e 2 (3, 4, 5, 6, 10 e 1 4 ), c o n s e g u im o s p o s i­ t i v a r 6 c a s o s (4 6 ,1 % ) .

S e te p a c ie n t e s s u b m e tid o s ta m b é m a n ú m e r o s v a r iá v e is d e h e m o c u ltu r a s , p o ré m a c im a d e 3 (4, 5, 6, 10 e 1 4 ), m o s t r a r a m 5 c a s o s p o s itiv o s (71 ,4 % ) .

A p a c ie n t e e m q u e fiz e m o s 10 h e m o c u l­ t u r a s a p r e s e n t o u t o d a s n e g a tiv a s , a e m q u e fiz e m o s 14 a p r e s e n t o u 8 p o s itiv a s ( t a ­ b e la I ) .

A t a b e l a I I I m o s t r a a p o s itiv id a d e p o r tu b o s ; f o r a m o b tid o s 25 tu b o s p o s itiv o s

(1 7 % ) n o t o t a l d e 146.

N a m e s m a t a b e l a s ã o a p r e s e n t a d a s as v a r ia ç õ e s d a p o s itiv id a d e p o r te m p o d e i n ­ c u b a ç ã o . T r ê s tu b o s (1 2 % ) p o s itiv a r a m - s e a o s 30 d ia s , 8 (3 2 % ) a o s 45 d ia s e 14 (5 6% ) a o s 60 d ia s . A p o s itiv id a d e d e 6 tu b o s ( 2 4 % ) , s o m e n te fo i o b t i d a a p ó s c e n tr if u - g a ç ã o d o m a t e r i a l c u ltiv a d o .

D IS C U S S Ã O

(4)

TABELA H

R E S U L T A D O D O C U L T I V O D O T R Y P A N O S O M A C R U Z I A P A R T I R D O C O N C E N T R A D O D E C É L U L A S S A N G U Í N E A S L A V A D A S , V A R I A N D O - S E O N Ú ­ M E R O D E H E M O Ç U L T U R A S P O R P A C I E N T E

N I O E H E M O C U L T U R A S

P O R P A C I E N T E

T O T A L D E P A C I E N T E S

R E S U L T A D O / P A C I E N T E

P O S I T I V O N E G A T I V O

1 4 1 3

2 3 . 2 1

3 6 1 5

4 1 1 O

5 2 1 1

6 2 2 0

1 0 1 O 1

1 4 1 1 O

c io u c o m C h ia r i o e s tu d o d e h e m o c u l t u r a s s e r ia d a s e m m e io L IT . o r s e u lt a d o d e s s a

p e s q u is a q u e se a c h a e m p u b lic a ç ã o (3), ao p o s s ib ilita r o d ia g n ó s tic o p a r a s ito ló g ic o d e 13 d e 15 p a c ie n te s , p a r e c e d e m o n s t r a r q u e o p a r a s i t a p o d e s e r c u ltiv a d o , s i s te m a t ic a ­ m e n te , a p a r t i r d o s a n g u e d e e n f e r m o s c r ô ­ n ic o s d a d o e n ç a d e C h a g a s e q u e a p o s iti- v ita d e é f a t o r d e p e n d e n te d o n ú m e r o d e 'h e m o c u ltu r a s p r a ti c a d a s .

O p ro c e s s o , in f e liz m e n te , e m b o r a e f i­ c ie n te p a r a d e m o n s t r a r a p a r a s i te m ia , é m u ito tr a b a lh o s o . P a r a o b t e r a p o s itiv id a - d e d o s 13 p a c ie n te s , a in v e s tig a ç ã o s e e s ­ te n d e u p o r c e r c a d e u m a n o ; f o r a m e x a ­ m in a d o s 1 .3 3 7 tu b o s , p o r 3 v e z e s c o n s e ­ c u tiv a s (30, 45 e 60 d ia s > , p a r a a o b te n ç ã o d e 54 tu b o s p o s itiv o s ( 4 % ) .

É d if íc il c o m p a r a r - s e a p o s itiv id a d e p o r n ó s a l c a n ç a d a e a o b t i d a p o r C h ia r i e B re - n e r (2). E n q u a n to o n o s s o in ó c u lo é c o n s ti­ tu íd o p e lo c o n c e n t r a d o d e c é lu la s d e 10 m l d e s a n g u e , p a r a a s e m e a d u r a d e 2 tu b o s , o d a q u e le s a u t o r e s é c o n s titu íd o p e lo s e d i­ m e n to , p e lo s o b r e n a d a n t e e p o r u m a f r a ­ ç ã o i n t e g r a l ( 1 /5 ) , d e 15 m l d e s a n g u e d e c a d a p a c ie n te .

C o m p a r a n d o - s e a p e n a s a p o s itiv id a d e q u e o b tiv e m o s e m u m a ú n i c a h e m o c u ltu r a , 3 0% , v e r if ic a m o s q u e o s n o s s o s r e s u lta d o s s ã o s u p e r io r e s p o r q u e t r a b a l h a m o s c o m m e n o s tu b o s e fiz e m o s n ú m e r o m e n o r d e e x a m e s . E n q u a n to a q u e le s a u t o r e s s e m e a ­

r a m 280 tu b o s e o b tiv e r a m 15 p o s itiv o s (5 ,3 6 % ), n ó s e x a m in a m o s , n o c o n j u n t o d e h e m o c u l t u r a s d o s 20 p a c ie n te s , 146 tu b o s e o b tiv e m o s 25 tu b o s p o s itiv o s (1 7 % ).

P o d e -s e c o n c lu ir d e s s a d is c u s s ã o q u e , e m b o r a o t r a b a l h o d e C h i a r i e B r e n e r (2) e M o u rã o e C h i a r i («) s e j a m f u n d a m e n t a i s p a r a a d e m o n s t r a ç ã o d a s p o s s ib ilid a d e s n o c u ltiv o d o T r y p a n o s o m a c r u z i , n a f a s e c r ô ­ n ic a d a d o e n ç a d e C h a g a s , a p a r t i r d o s a n ­ g u e , s ã o im p r a t i c á v e i s p e lo v u lto d o t r a b a ­ lh o q u e e x ig e m .

O p ro c e s s o o r a e x p o s to , a n ã o s e r p e la s d if ic u ld a d e s i n e r e n t e s a o p r e p a r o d o L IT , é p r á tic o , d e e x e c u ç ã o r e l a t i v a m e n t e f á c il, s e n d o r e c o m e n d á v e l p a r a o d ia g n ó s tic o p a r a s ito ló g ic o n a f a s e c r ô n ic a d a d o e n ç a .

E v id e n te m e n te s e r ia m a i s p r á ti c o a s e ­ m e a d u r a d i r e t a d o s a n g u e e m m e io L IT , p o r é m e m e x p e r iê n c ia s a n t e r i o r e s , n ã o p u ­ b lic a d a s , n ã o fo m o s c a p a z e s d e c u l t i v a r o t r ip a n o s o m a , q u a n d o e m p r e g á v a m o s v o lu ­ m e s d e s a n g u e , c o m o o s 5 m l p a r a c a d a t u ­ b o , d a p r e s e n t e e x p e r iê n c ia . P o r e s s e m o ­ tiv o n ã o in c lu ím o s n e s t a s é r ie h e m o c u l t u ­ r a s s i m u lt â n e a s d e s a n g u e e c o n c e n t r a d o d e c é lu la s . I s t o n o s im p e d e d e c o n c lu ir se a p o s itiv id a d e a l c a n ç a d a r e s u l t a d e s u b s ­ t â n c i a s n o c iv a s a o c r e s c im e n to , c o n tid a s n o p l a s m a .

(5)

Julho-Agosto, 1975

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

187

T A B E L A

1

I t

C U L T I V O D O T R Y P A N O S O M A C R U Z I A P A R T I R D O C O N C E N T R A D O D E C É L U L A S L A V A D A S , D O S A N G U E D E C H A G A ' S I C O S C R O N I C O S , E M M E I O L I T .

P O S I T I V I D A D E P O R T U B O

V-

PACIENTES I D A D E S E X O X E N O D I A GNDSTIÇO REAÇAO

DE G.M.

T U B O S

OUANTIDADE

DE TUBOS POSi T

d i as d 30

I V O S

e i n c u b 45

i ç ã o

6 0

N E G A T I V O S

apos60di as de jncub§ção e apos c e n t r i f u g a ç a o

1 G . G . S . 3 8

9

+ R 1 2 6 1 4 2 3

2 F. S . P. 4 0

cr

+ R 0 1 0 1 2

3 R . L . A . 5 5

o•

. . . R 0 0 0 2 2

4 J P . C . C . 4 1

cr

+ R 0 0 1 3 4

5 M . C . S . 4 7

9

+ R 0 0 0 2 2

6 O . D . R . 3 5

9

. . . R 0 3 1 2 6

7 W . A . C . 1 9 C

f

+ R 1 1 0 8 1 0

8 R . Q . V . 3 4

9

. . . R 0 0 0 2 0 2 0

9 L . C . S . 3 6

9

. . . R 0 0 0 6 6

1 0 O . P . S . 3 5

cr

-i - R 0 0 0 2 2

11 A . A . 4 6

cr

+ R 0 0 0 6 6

1 2 M . F - O . 2 3

9

-t- R 0 1 0 3 4

1 3 R . A . C . 5 2

9

+ R 0 0 0 3 3

1 4 S . A . O . 5 2

cr

. . . R 0 0 0 1 0 1 0

1 5 M . C . O . 4 1

cr

+ R 0 0 0 6 6

1 6 I . G . C . 6 6

9

. . . R 0 0 0 6 6

1 7 A . M . 3 9

cr

R 0 0 1 1 1 1 2

1 8 A . F . M . 5 0

cr

. . . R 0 0 5 7 1 2

1 9 F. F . S . 4 4

9

. . . R 0 0 0 6 6

2 0 A . M . L . 3 2

9

+ R 1 0 0 3 4

T O T A L 3 8 1 4 # 1 2 1 1 4 6

2 5

* 6 T U B O S P O S I T I V A R A M - S E N O S E D I M E N T O D O M A T E R I A L C E N T R I F U G A D O R = R E A T I V A

0 = N E G A T I V O

c a r á t e r v a r iá v e l d e p a c ie n t e a p a c ie n t e . N o c a s o R . Q . V . n ã o o b tiv e m o s n e n h u m r e s u lt a d o p o s itiv o a p e s a r d e 10 t e n t a t i v a s , e n q u a n to q u e a p a c ie n t e G .G .S . a p r e s e n ­ t o u 8 d e 14 h e m o c u l t u r a s p o s itiv a s (5 7 ,2 % ), o p a c ie n t e A. M ., 5 d e 6 (83 ,3 % ) e a p a ­

c ie n te O . D . R . m o s tr o u p o s itiv id a d e n a s 3 h e m o c u l t u r a s a q u e se s u b m e te u .

A G R A D E C IM E N T O S

A s r t a . M a r ia d e L o u r d e s F e r r e i r a p o r a j u d a t é c n i c a .

S U M M A R Y

T h e a u t h o r s h a v e d e v e l o p e d a p r o c e s s t o m a k e h e m o c u l t u r e s i n c h r o n i c p h a s e o f h u m a n C h a g a s ’ d i s e a s e .

(6)

S i x p o s i t i v e c a s e s (3 0 % ) w e r e â e t e c t e d w i t h o n l y o n e h e m o c u l t u r e .

I n c r e a s i n g t h e n u r r ib e r o f h e m o c u l t u r e s (1 t o 1 4 ) 9 o u t o f 2 0 c a s e s w e r e p o s i t i v e s ( 4 5 % ) . I n 7 c a s e s 4 o r m o r e h e m o c u l t u r e s (4 , 5, 6 , 10, 1 4 ) w e r e m a ã e a n d 5 o f t h e m w e r e p o s i t i v e s ( 7 1 , 4 % ) .

T h e a u t h o r s r e c o m e n d t h e m e t h o d f o r r o u t i n e a s a p r a c t i c a l a n ã e a s y m e -t h o d .

188_____________________ Rev. Soc. Bras. Med. Trop.__________ Vol. IX — N.° 4

R E F E R Ê N C IA S B IB L IO G R Á F IC A S

1. A L B U Q U E R Q U E , R . D . R . , F E R N A N ­ D E S , L . A. R ., F U N A Y A M A , G . K ., F E R R IO L I, F . F . e S IQ U E IR A , A. F . — H e m o c u ltu r a s s e r ia d a s c o m m e io d e W a r r e n e m p a c ie n t e s c o m r e a ç ã o d e G u e r r e ir o - M a c h a d o p o s itiv a . R e v . I n s t . M e d . t r o p . S ã o P a u l o , 1 4 :1-5, 1972.

2 . C H IA R I, E . & B R E N E R , Z . — C o n t r i ­ b u iç ã o a o d ia g n ó s tic o p a r a s ito ló g ic o d a D o e n ç a d e C h a g a s n a f a s e c r ô n ic a . R e v . i n s t . M e d . t r o p ., S ã o P a u l o , 8 :134- -148, 1966.

3 . F E R N A N D E S , J . F . & C A S T E L L A N I, O . — P e rs ip e c tiv a d e v a c in a ç ã o c o n t r a a m o lé s tia d e C h a g a s . X V I R e u n iã o a n u a l d a S . B . P . C . , R ib e ir ã o P r e to , S ã o P a u lo , 1964,

4 . F R E IT A S , J . L . P . — C o n tr ib u iç ã o p a r a o e s tu d o d o d ia g n ó s tic o d a m o ­ lé s t i a d e C h a g a s p o r p ro c e s s o s d e la b o ­ r a t ó r i o . S ã o P a u lo , F a c u l d a d e d e M e ­ d ic in a d a U n iv e r s id a d e d e S ã o P a u lo . 1947. 160 p . T e s e .

5. F R E IT A S , J . L . P . — O d ia g n ó s tic o d e

la b o r a t ó r i o d a m o l é s t ia d e C h a g a s . R e v . C l í n . S ã o P a u l o , 2 5 :1 -1 0 , 1952. 6 . F R E IT A S , J . L . F . — P r o c e s s o s d e l a ­

b o r a tó r io p a r a o d ia g n ó s tic o d a m o lé s ­ t i a d e C h a g a s . R e v . G o i a n a M e d . 4 -135-147, 1958.

7 . M O U R Ã O , O. G . — D ia g n ó s tic o p a r a s i ­ to ló g ic o d a D o e n ç a d e C h a g a s n a f a s e c r ô n ic a . M é to d o p a r a a v a lia ç ã o d a t e ­ r a p ê u t i c a n o h o m e m . B e lo H o r iz o n te , F a c u l d a d e d e M e d ic in a d a U . F . M . G . , 1966, 69 p . T e s e .

8 . M O U R Ã O , O . G . & C H IA R I E . — C o m ­ p r o v a ç ã o p a r a s i to l ó g i c a d a D o e n ç a d e C h a g a s n a f a s e c r ô n ic a , p o r h e m o c u l­ t u r a s s e r ia d a s e m m e io L IT . R e v . S o c . B r a s . M e d . t r o p . ( i n p r e s s).

Referências

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