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Extração de DNA

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Academic year: 2021

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FACULDADE ALIANÇA FACULDADE ALIANÇA

DISCIPLINA.: BASES BIOLÓGICAS DOS EXERCÍCIOS FÍSICOS DISCIPLINA.: BASES BIOLÓGICAS DOS EXERCÍCIOS FÍSICOS TURNO.: TARDE/NOITE CARGA HORÁRIA.: 45 hs

TURNO.: TARDE/NOITE CARGA HORÁRIA.: 45 hs CURSO DE EDUCAÇÃO FÍSICA

CURSO DE EDUCAÇÃO FÍSICA

PROFESSORA: MSc. ADRIANA SARAIVA DOS REIS PROFESSORA: MSc. ADRIANA SARAIVA DOS REIS

RELATÓRIO REFERENTE À AULA PRÁTICA: EXTRAÇÃO DE DNA RELATÓRIO REFERENTE À AULA PRÁTICA: EXTRAÇÃO DE DNA LINA TAINÁ LINA TAINÁ MARÇO/2012 MARÇO/2012 LINA TAINÁ LINA TAINÁ

RELATÓRIO REFERENTE À AULA PRÁTICA: EXTRAÇÃO DE DNA RELATÓRIO REFERENTE À AULA PRÁTICA: EXTRAÇÃO DE DNA

Relatório apresentado como parte dos requisitos para a aprovação na Disciplina Bases Relatório apresentado como parte dos requisitos para a aprovação na Disciplina Bases Biológica dos Exercícios Físicos, oferecida no bloco I

Biológica dos Exercícios Físicos, oferecida no bloco I pelo curso de Bacharelado em pelo curso de Bacharelado em EducaçãoEducação Física

Física – – Faculdade Aliança Faculdade Aliança TERESINA/PIAUÍ TERESINA/PIAUÍ 2012 2012 INTRODUÇÃO INTRODUÇÃO

Durante a evolução da célula formou-se uma molécula, que hoje sabemos ser o ácido Durante a evolução da célula formou-se uma molécula, que hoje sabemos ser o ácido desoxirribonucléico (DNA ou ADN): molécula longa, constituída por

desoxirribonucléico (DNA ou ADN): molécula longa, constituída por uma seqüência deuma seqüência de nucleotídeos, que por sua vez é formado por três diferentes tipos de moléculas: um açúcar nucleotídeos, que por sua vez é formado por três diferentes tipos de moléculas: um açúcar (pentose), um grupo fosfato, e uma base nitrogenada (

(pentose), um grupo fosfato, e uma base nitrogenada (Fig.1Fig.1). Essa importante molécula). Essa importante molécula contém as informações básicas para a formação de um ser vivo e para sua reprodução. contém as informações básicas para a formação de um ser vivo e para sua reprodução. Como já disse, o DNA é formado por nucleotídeos,existem quatro tipos de nucleotídeos, Como já disse, o DNA é formado por nucleotídeos,existem quatro tipos de nucleotídeos, representados pelas letras A, C, G e T (

representados pelas letras A, C, G e T (Fig.2Fig.2). As formas como esses nucleotídeos se). As formas como esses nucleotídeos se arrumam é que faz com que os seres vivos sejam diferentes um dos outros. E por isso, as arrumam é que faz com que os seres vivos sejam diferentes um dos outros. E por isso, as mínimas mutações ocorridas em apenas um nucleotídeo de sua fita, pode alterar a produção mínimas mutações ocorridas em apenas um nucleotídeo de sua fita, pode alterar a produção de uma proteína importante e causar doenças genéticas, que podem comprometer o ser vivo. de uma proteína importante e causar doenças genéticas, que podem comprometer o ser vivo.  Assim, os quatro tipos de nucleotídeos se arrumam de diversas maneiras na molécula de DNA,  Assim, os quatro tipos de nucleotídeos se arrumam de diversas maneiras na molécula de DNA,

formando os diferentes seres vivos. formando os diferentes seres vivos.

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Uma molécula de DNA é formada por duas fitas de nucleotídeos, que ligados pelas pontes de hidrogênio, forma o que é chamado de dupla hélice (Fig 3). O modelo da dupla-hélice de Watson e Crick foi prontamente aceito pela comunidade científica; ele explicava pelo menos três características fundamentais do material genético: a capacidade de duplicação, a

capacidade de conter informações para a produção de proteínas e a capacidade de sofrer mutação. Nessa fita, as bases nitrogenadas seguem o seguinte padrão de combinação: A (adenina) sempre se liga com T (timina), e C(citosina) com G (guanina). A simples combinação dessas letras é o que forma os seres vivos (Fig 4).

Pouco mais de 50 anos se passaram desde a descoberta da estrutura de DNA, e hoje

assistimos a um espantoso avanço nesta área de pesquisa. As discussões sobre o DNA estão em toda parte: clonagem, Projeto Genoma, alimentos transgênicos, testes de paternidades; são várias as aplicações desse novo conhecimento, que também levanta questões éticas fundamentais que os cientistas tentam responder.

OBJETIVOS:

 A extração das moléculas de DNA de células do bulbo da cebola. Aplicando os conhecimentos adquiridos em aula sobre o DNA, esse experimento serve como complemento para as

atividades realizadas em classe e para enriquecimento da aprendizagem. MATERIAL E MÉTODOS

» Cebola grande - 250 gramas » Sal de cozinha - 3gramas » Detergente neutro - 10ml » Álcool etílico 95% gelado » Papel filtro

» Almofariz

» Tubos de ensaio

» funil banho-maria a 60°C

Picou-se a cebola em pedaços pequenos. Em seguida iniciou-se a maceração, Misturou-se em um béquer 3g de NaCl, e 10ml de detergente e completou-se com água até obter 100 mL de solução. A solução com a cebola foi levada ao banho maria a 60ºC durante 15 minutos. Após este período resfriou-se colocando o recipiente em gelo. Coou-se a mistura em papel de filtro,

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sendo despejado em um tubo de ensaio. E delicadamente, o etanol 95% foi posto no tubo de ensaio. Na sequencia, o DNA subiu para o etanol, no qual é insolúvel, ficando preservado e visível.

RESULTADOS

Os esquemas abaixo são relativo a extração de DNA da cebola,realizado em laboratório.

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Fig. 2 – Cadeia de DNA

DISCUSSÃO

PERGUNTAS PARA FIXAÇÃO DO ASSUNTO DA AULA EXTRAÇÃO DE DNA NA CEBOLA:

1°. Qual a função de cada regente usado na extração simplificada do DNA explanada nesta aula prática?

R= A adição do sal (NaCl) no início da experiência proporciona ao DNA um ambiente favorável. O sal contribui com íons positivos e negativos. Os positivos neutralizam a carga negativa do DNA, e os negativos as histonas, permitindo que o complexo DNA+Histonas não se repila mais e então se enovele. Se não fosse a presença do sal, ele poderia desintegra-se. Um outro fato, é que o sal aumenta a densidade do meio, o que facilita a migração do DNA para o álcool. Odetergente afeta a permeabilidade das membranas, que são constituídas, em parte, por lipídeos. Com a ruptura das membranas os conteúdos celulares, incluindo as proteínas e o DNA, são liberados e dispersam-se na solução. A função de algumas dessas proteínas é manter o DNA enrolado numa espiral muito apertada. O álcool etílico permite uma maior desidratação das moléculas.

2°. O que se consegue ver seria o DNA puro?

R= É possível a observação do DNA (emaranhado), que se apresenta por filamentos

esbranquiçados; porém a observação das hélices só é possível através do uso de aparelhos sofisticados.

3°. Como se sabe que os filamentos são moléculas de DNA?

R= Porque, a partir de estudos das propriedades químicas dos filamentos sabe-se que estes têm as mesmas propriedades das moléculas de DNA. Por exemplo, o RNA não se enrolaria no palito, o DNA não é solúvel em álcool, é menos denso que a água, tem grande absorção de luz UV, quando corado com brometo de etídio mostra-se fluorescente em luz UV.

4°. Se fosse RNA seria possível enrolá-lo como foi feito para o DNA? Porque?

R= O RNA é formado por uma cadeia simples de nucleotídeos, e não uma de dupla hélice como o DNA. Um filamento de RNA pode se dobrar de tal modo que parte de sua próprias bases se pareiam umas com as outras. Tal pareamento intramolecular de bases é um

determinante importante da forma do RNA. Assim, formando pontes intracadeia o RNA é capaz de assumir uma variedade muito maior de formas moleculares tridimensionais complexas do que a dupla hélice de DNA .

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BIBLIOGRAFIA Disponível na URL: http://www.universitario.com.br/celo/topicos/subtopicos/genetica/dna/dna.html  Acesso às 19:30 do dia 11/04/12 Disponível na URL: http://pt.scribd.com/doc/30280669/Relatorio-de-Extracao-de-DNA  Acesso às 19:56 do dia 11/04/12 Disponível na URL: http://www.notapositiva.com/pt/trbestbs/biologia/11extrdnacelveg.htm  Acesso às 20:04 do dia 11/04/12 Disponível na URL: http://www.biomol.org/historia/propduplahelice.shtml  Acesso às 20:17 do dia 11/04/12 Disponível na URL:

JUNQUEIRA, L. C.; CARNEIRO J. Biologia Celular e Molecular. Rio de Janeiro: 8ª ed. Guanabara. 2005.

 Acesso às 10:43 do dia 12/04/12 Disponível na URL:

MENCK, Carlos Frederico Martins.Estudo de reparo d e DNA e suas conseqüências biológicas. Projetos de pesquisa temáticos. Disponível em:

http://www.bv.fapesp.br/projetos-tematicos/1865/estudos-reparo-dna-consequencias-biologicas/  Acesso às 11:05 do dia 12/04/12

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CONCLUSÃO

Esta aula prática teve como objetivo conhecer os princípios básicos da extração do material genético da cebola, a partir dos tecidos do bulbo.Através desse experimento pude concluir que a molécula do DNA:

- É pouco solúvel (pois não se dissolve facilmente)

- É muito pouco denso (dirigiu-se em direção ao álcool, que já por si é muito pouco denso) - Possui ligações muito fracas, pois partem-se com muita facilidade, isto porque estas são feitas através de pontes de hidrogénio (as ligações através do hidrogênio são pouco intensas do ponto de vista energético).

--- ANEXOS

---Fig. 1 -Nucleotídeo de DNA

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Fig. 3 -Dupla-hélice do DNA

Referências

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