Primeiro caso de tuberculose ganglionar diagnosticado por Teste Rápido
Molecular para Tuberculose (TRM-TB) em Roraima
First case of ganglionar tuberculosis diagnosed by Rapid Molecular Test for
Tuberculosis (TRM-TB) in Roraima
Recebimento dos originais: 12/01/2019 Aceitação para publicação: 15/02/2019
Maria Soledade Garcia Benedetti UFRR - Universidade Federal de Roraima
Endereço: Avenida EneGarcêz, sn, Campus doParicarana. Boa Vista, Roraima, Brasil. CGVS/SESAU - Coordenadoria Geral de Vigilância em Saúde/ Secretaria de Saúde do Estado de
Roraima
Endereço: Rua Dr Arnaldo Brandão com a avenida Capitão Júlio Bezerra, 826, São Francisco, Boa Vista, Roraima, Brasil.
Email: soledadebenedetti@hotmail.com Cássio Alencar Meira
SMSA - Secretaria Municipal de Saúde de Boa Vista
Endereço: Avenida Getúlio Vargas, s/n, São Pedro, Boa Vista, Roraima, Brasil. Email: cassioa.meira@hotmail.com
Elba Urzedo de Freitas Lamounier
CGVS/SESAU - Coordenadoria Geral de Vigilância em Saúde/Secretaria de Saúde do Estado de Roraima
Endereço: Rua Dr Arnaldo Brandão com a avenida Capitão Júlio Bezerra, 826, São Francisco, Boa Vista, Roraima, Brasil.
Email: tuberculoserr@bol.com.br RESUMO
Introdução:O teste rápido molecular para tuberculose (TRM-TB) é um teste de ampliação de ácidos nucléicos utilizado para detecção de DNA do Mycobacterium tuberculosis e para triagem de cepas resistentes à rifampicina pela técnica de reação em cadeia de polimerase (PCR) em tempo real. O TRM-TB para o diagnóstico da doença começou a ser utilizada no Brasil em 2014. Objetivo: Descrever os procedimentos técnicos realizados para o diagnóstico de tuberculose ganglionar por meio do TRM-TB em um laboratório de referência secundária localizado em Boa Vista, Roraima. Metodologia: Estudo descritivo e qualitativo. A amostra utilizada foi um gânglio linfático (linfonodo) processado no laboratório de referência secundária. A amostra (gânglio linfático) foi processada com a adição de solução fisiológica e de reagente de amostra (na proporção de 2:1) e realizado a maceração do gânglio linfático com pistilo. O material foi transferido para o tubo falcon e agitado em vórtex por um minuto, duas vezes, com intervalo de 10 minutos. Ficou em repouso por cinco minutos e agitada novamente no vórtex por um minuto. Após sedimentação das partículas sólidas, foi pipetado 2ml do sobrenadante e adicionado no cartucho do aparelho Genexpert® para análise. Resultados: No resultado foi detectável MT (muito baixa/verylow) sem resistência à rifampicina. Discussão/Conclusão: O TRM-TB permitiu agilidade na confirmação de tuberculose em amostra extrapulmonar além do perfil de resistência à rifampicina permitindo o início rápido do tratamento da paciente.
Palavras-chaves: Roraima, Teste Rápido Molecular, Tuberculose. ABSTRACT
Introduction: Rapid molecular assay for tuberculosis (TRM-TB) is a nucleic acid amplification test used to detect DNA from Mycobacterium tuberculosis and to screen rifampicin-resistant strains by polymerase chain reaction (PCR) real. Objective: To describe the technical procedures performed for the diagnosis of ganglionar tuberculosis through TRM-TB in a secondary reference laboratory located in Boa Vista, Roraima, Brazil. Methodology: Descriptive and qualitative study. The sample used was a lymph node (lymph node) processed in the secondary reference laboratory. The sample (lymph node) was processed with the addition of physiological and sample reagent solution (2: 1 ratio) and pistillate lymph node maceration. The material was transferred to the falcon tube and vortexed for one minute, twice, with a 10 minute interval. She lay for five minutes and was agitated again in the vortex for a minute. After sedimentation of the solid particles, 2 ml of the supernatant was pipetted and added into the Genexpert® apparatus cartridge for analysis. Results: MT (very low / verylow) was found without resistance to rifampicin. Discussion / Conclusion: The TRM-TB allowed agility in the confirmation of tuberculosis in extrapulmonary sample besides the profile of resistance to rifampicin allowing the rapid onset of the treatment of the patient.
Keywords: Roraima, Rapid Molecular Test, Tuberculosis. 1 INTRODUÇÃO
Os testes laboratoriais, como a baciloscopia e a cultura (este, o padrão-ouro para o diagnóstico da tuberculose pulmonar), são atualmente preconizados pelo Ministério da Saúde (MS) para confirmar os casos suspeitos de tuberculose pulmonar, caracterizados por sintomatologia clínica ou pelo exame de imagem do tórax. Uma nova opção laboratorial, o teste Xpert® MTB/RIF, é um teste de amplificação de ácidos nucléicos utilizado para detecção do complexo
Mycobacteriumtuberculosise para a triagem de tuberculose resistente a fármacos. O teste consiste
na purificação, concentração e amplificação de ácidos nucléicos por reação em cadeia da polimerase (PCR) em tempo real, e tem como principal benefício apresentado a integração e automatização dos três processos (preparação de amostras, amplificação e detecção) necessários para a PCR em tempo real baseada em testes moleculares (BRATS, 2011).
Em 2010, a Organização Mundial de Saúde (OMS) endossou o uso do teste molecular Xpert MTB/RIF (Cepheid Inc., Sunnyvale, CA, EUA) para o diagnóstico da tuberculose (WORLD HEALTH ORGANIZATION, 2011).
No Brasil, o diagnóstico de tuberculose, até julho de 2014, era baseado no quadro clínico-radiológico e em testes fenotípicos (baciloscopia e cultura para micobactérias) (CONDE et al., 2009). O Teste Rápido Molecular para Tuberculose (TRM-TB) para o diagnóstico da doença começou a ser utilizada no Brasil em 2014.
Nesse sentido, o presente estudo tem o objetivo de descrever os procedimentos técnicos realizados para o diagnóstico de tuberculose ganglionar por meio do TRM-TB em um laboratório de referência secundária localizado em Boa Vista, Roraima.
2 METODOLOGIA
Estudo descritivo e qualitativo. A amostra utilizada foi um gânglio linfático (linfonodo) processado e analisado no laboratório de tuberculose da referência secundária localizado em Boa Vista (RR), no ano de 2018.
A amostra foi recebida em coletor universal com cerca de 5ml de solução de NaCl 0,9%, transportada adequadamente. O gânglio linfático foi transferido para um coletor universal, adicionado 2ml da solução fisiológica do coletor primário, e mais 4ml de reagente de amostra (na proporção de 2:1) e realizado a maceração do gânglio linfático com pistilo.
Figura 1 – Fluxograma do procedimento realizado.
O material foi transferido para o tubo falcon e agitado em vórtex por um minuto, duas vezes, com intervalo de 10 minutos. Ficou em repouso por cinco minutos e agitada novamente no vórtex por um minuto. Após sedimentação das partículas sólidas, foi pipetado 2ml do sobrenadante e adicionado no cartucho do aparelho Genexpert® para análise (Figura 1).
3 RESULTADOS
No resultado foi detectável MT (muito baixa/verylow) sem resistência à rifampicina.
4 DISCUSSÃO
OTRM-TBestá indicado, prioritariamente, para o diagnóstico de tuberculose pulmonar e laríngea, mas pode ser utilizado para o diagnóstico de algumas formas de tuberculose extrapulmonar no líquor, gânglios linfáticos e outros tecidos como foi o caso deste estudo.
Após a recomendação da OMS, muitos países têm incorporado essa tecnologia na rotina de diagnóstico de tuberculose, substituindo a baciloscopia (BOEHME et al., 2010). Muitos estudos tenham mostrado a alta sensibilidade e especificidade desse teste no diagnóstico da tuberculose e na detecção de resistência à rifampicina (CASELA et al., 2018).
No Brasil, havia o anseio de incorporação de novas tecnologias de diagnóstico no sistema de saúde pública brasileiro, incluindo os testes genotípicos, tanto para tuberculose pulmonar quanto para tuberculose extrapulmonar(CASELA et al., 2018). A dificuldade de acesso à saúde e a má percepção dos sintomas por parte dos pacientes foram identificados como importantes fatores para retardo do diagnóstico e, consequentemente, do início do tratamento (CONDE et al., 2009). Adicionalmente, alguns estudos têm demonstrado que o teste Xpert MTB/RIF é uma estratégia de diagnóstico para tuberculose custo-efetiva(CASELA et al., 2018). Durovnie colaboradores (2014) observaram uma taxa de acréscimo de casos com confirmação laboratorial de 59% e redução do tempo do início do tratamento de 11 para 8 dias.
No ensaio clínico realizado em duas cidades brasileiras com elevada incidência de tuberculose (Rio de Janeiro e Manaus), no período de pré-implantação do Xpert MTB/RIF no sistema de saúde pública, observaram um valor de acréscimo de diagnóstico bacteriologicamente confirmado de 59% (Durovni et al., 2014). Os autores compararam dados do momento basal (durante o qual o diagnóstico era realizado pelo método de baciloscopia convencional em duas amostras) com aqueles encontrados após a implantação substitutiva do Xpert MTB/RIF (CASELA et al., 2018).
No estudo de Caselae colaboradores (2018) conduzido em condições de rotina laboratorial em um hospital de referência terciária para tuberculose na Bahia, o Xpert MTB/RIF foi capaz de detectar 254 casos de tuberculose negativos na baciloscopia de escarro, o que representou um acréscimo de diagnóstico biologicamente confirmado de 59,9% similar aos dados encontrados no Rio de janeiro e Manaus. Os autores destacam que é relevante avaliar sua utilização na rotina de programas locais, considerando que muitas barreiras logísticas e do sistema de saúde podem
Uma ampla variabilidade de proporção de ganho diagnóstico foi observada em diversos estudos publicados comparando os dois métodos (CASELA et al., 2018).Ngbonzizae colaboradores (2016), em Ruanda, encontraram um acréscimo diagnóstico de 32,3%, e Cowane colaboradores (2015),em Moçambique, relataram uma proporção de 69% de ganho diagnóstico.
Considerando os estudos acima e o resultado encontrado no presente estudo, concluímos que oTRM-TB é importante para agilizar a confirmação de tuberculose em amostra extrapulmonar além de demonstrar o perfil de resistência aos fármacos (rifampicina) permitindo assim a instituição mais rápida do tratamento.
REFERÊNCIAS
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