Afonchikova, Klimov

Lomonosov Moscow State University,GSP-1, Leninskie Gory, Moscow, 119991, Russian Federation, Biological Faculty

Introduction: Panic disorder (PD) is a severe and chronic psychiatric disorder with genetic compo- nents underlying in its etiology.

The cholecystokinin (CCK) is thought to play a role in the pathogenesis of panic disorder (Ashmarin et al., 2004). Koszycki et al. (1998) investigated administration of CCK‑4 healthy people reliably provokes panic attacks. Hattori et al. (2001) identified a polymorphic compound short tandem repeat (STR) in the 5’‑regulatory region of the CCK gene, and showed that when the STRs were classified into three groups (L‑long, M‑medium, S‑short) based on length and linkage with the medium class

The monoamine oxidase A (MAOA) gene has been reported to be associated with different psychi- atric disorder. A functional variable number of tandem repeats (VNTR) polymorphism of the promoter region of the MAOA gene has been described and many studies have investigated the association of this polymorphism with human behaviors, as well as with PD. A study found the functionally‑more‑

active, longer alleles (3.5, 4, and 5) significantly associated with PD.

In the present study, we genotyped for this STR CCK and VNTR МАОА polymorphisms.

Method: A sample of 74 patients represents people living in Moscow and the Moscow Region with PD was investigated in this study. The control group consisted of 155 unrelated anonymous blood donors living in Moscow and the Moscow Region.

Results: The analysis identified the combination of alleles: STR in CCK gene (M/M) and VNTR in MAOA gene (S/M) is more common in patients with PD compared to the controls.

Conclusion: This may be due to the presence of epistatic interactions between MAOA and CCK genes.

ВОЗМОЖНОСТИ ИСПОЛЬЗОВАНИИ ЛИПОСОМАЛЬНОГО ПРЕПАРАТА ДЛя ЛЕЧЕНИя ЖЕЛЧНОКАМЕННОЙ БОЛЕЗНИ

Азатян К.А.Алексеев А.В.Зубарева Г.М.Халяпина я.М.

ГБОУ ВПО Тверская ГМА Минздрава России, 170100, г. Тверь, ул. Советская, д. 4

Согласно проведенным исследованиям, в настоящее время по частоте возникновения жел- чнокаменная болезнь выходит на первое место среди заболеваний пищеварительной систе- мы. В основе камнеобразования лежит нарушение равновесия между стабилизаторами желчи (желчные кислоты и лецитин) и количеством растворенных в ней веществ (карбонат кальция, билирубин и холестерин). Исследование неорганической составляющей желчных камней дало следующие результаты, которые представлены на диаграмме.

Неорганическая часть желчных камней в наибольшем количестве содержит Ca²⁺ и Mg²⁺, в меньшем количестве содержится Sr²⁺ и железо. Органическая составляющая желчных камней была нами изучена с помощью методов ИК‑спектрометрии. Выведение кальция и его соеди- нений, магния и других металлов из состава камней приводит к их распаду. В качестве связы- вающего минеральную часть вещества нами использовалась лимонная кислота. В присутствии кальция лимонная кислота образует с ним устойчивый комплекс – цитрат кальция, который растворим в воде, и легко усваивается организмом человека. Быстрый метаболизм и поглоще- ние тканями лимонной кислоты, сильнокислая pH среды раствора, большая потребность в ней других тканей – делают невозможным доставку лимонной кислоты до печени и желчного пузы- ря. Предлагаемая нами, липосомальная форма лимонной кислоты позволяет доставить ее прак-

тически в неизмененном виде до клеток печени и до желчи. Более того, лецитин, из которого состоят липосомы – переводит кристаллический холестерин желчных камней в растворенное состояние. Таким образо, разработка липосомальной формы лимонной кислоты – как раство- рителя желчных камней смешанного типа, откроет в будущем широкие возможности для кон- сервативного лечения ЖКБ.

POSSIBLE USE OF LIPOSOMAL DRUG FOR THE TREATMENT OF GALLSTONE DISEASE Azatyan K.A., Alekseev A.V., Zubareva G.M.. Khalyapina Ya.M.

Tver State Medical Academy.

Russia, 170100, Tver, Sovetskaya street, 4

According to the conducted research, nowadays the incidence of gallstone disease takes the first lace among the disease of digestive system. In the basis of stone formation there is the balance dis- order among stabilizators of bile (bile acids and lecithin) and the quantity of substances dissolved in it (calcium carbonate, bilirubin and cholesterol). The research of inorganic constituent of gallstones gave the following results which are presented in the diagram.

Inorganic part of gallstones contains Ca²⁺ and Mg²⁺ in the most quantity, and Sr²⁺ and iron in the least quantity.

Organic constituent of gallstones was studied by us with the help of ir‑spectrometry (infrared spectrometry) methods. Excretions of calcium and its compounds, magnesium and other metals out of the stone composition leads them to breakage. As part of the mineral‑binding agents, we used citric acid.

In the presence of calcium citric acid forms a steady complex with it – calcium citrate which is soluble in water and is easily digested by the man’s organism. Rapid metabolism and absorption of citric acid by tissues, highly acidic pH of fluid environment, high requirement of other tissues in it – make the delivery of citric acid to the liver and gall‑bladder impossible.

Liposomal form of citric acid offered by them allows to deliver citric acid to the liver cells in prac- tically unchanged form and in accordance to the bile. More than that, lecithin, of which liposome’s consist, slag’s off crystalline cholesterol of gallstones into the dissolved condition. According to the abovementioned, the development of liposomal form of citric acid as the solvent of gallstones of mix- ing type will open manifold possibilities for conservative treatment of gallstone disease in future.

ОСОБЕННОСТИ ПРОЛИФЕРАцИИ КАРцИНОМ МОЛОЧНОЙ ЖЕЛЕЗЫ

ПОЛОЖИТЕЛЬНЫХ ПО ЭКСПРЕССИИ HER-2/NEU И С АМПЛИФИКАцИЕЙ ГЕНА HER-2

Бриллиант А.А., Сазонов С.В., Засадкевич Ю.М.

ГБУЗСО Институт медицинских клеточных технологий, 620036, г. Екатеринбург, ул. Соболева 25,

тел.(343)3769828 e-mail: alex_brilliant@mail.ru

Состояние пролиферативных процессов в ткани опухоли является прогностическим факто- ром, влияющим на исход заболевания пациентов с карциномой молочной железы. В ходе работы были изучены 362 случая инфильтративных карцином молочной железы. Целью исследования было изучение состояния пролиферативных процессов в клетках карциномы молочной железы в зависимости от экспрессии белка Her‑2/neu и амплификации гена HER‑2. Определение экс- прессии Her‑2/neu на клетках карцином молочной железы проводили иммуногистохимическим методом в автостейнере “Dako” с помощью поликлональных антител Polyclonal Rabbit Anti‑

Human с‑erb‑2 Oncoprotein (DAKO, Дания). Оценка уровня мембранной экспрессии Her‑2/neu в опухолевых клетках производилась по шкале от 0 до 3+. Случаи оцененные как 3+ расценивают как позитивные по наличию рецепторов Her‑2/neu. Все случаи оцененные как 2+ для выявления наличия амплификации гена Her‑2 исследовались методом FISH («HER2 FISH pharmDx Kit», Dako) с использованием микроскопа “ZeissYmagerM” (Германия). Уровень пролиферативной активности оценивали по ядерному индексу пролиферации клеток опухоли – Ki‑67(антитела Mouse Anti – Human KI‑67 Antigen фирмы DAKO, Дания). По процентному отношению числа окрашенных ядер клеток карциномы к неокрашенным можно судить о пролиферативной актив- ности исследуемой опухоли. В результате исследования было выявлено, что средний индекс пролиферативной активности карцином, оцененных как 3+ по уровню экспрессии Her‑2/neu, составляет 26,00±0,08%. Индекс пролиферативной активности карцином, оцененных как 2+ по уровню экспрессии рецепторов Her‑2/neu, равен 23,0±0,9%. Среднее значение индекса пролифе- рации карцином 2+ с аплификацией гена HER‑2 составляет 24,0±0,2%, неамплифицированных случаев – 23,0±0,2%. Наличие амплификации гена не влияет на изменение пролиферативной активности карциномы молочной железы.

PECULIARITIES OF PROLIFERATION OF BREAST CANCER CARCINOMAS POSITIVE TO HER-2/NEU EXPRESSION WITH HER-2 GENE AMPLIFICATION

Brilliant A.A., Sazonov S.V., Zasadkevich Y.M.

GBUZSO Institute of medical cell technologies, 620036, Soboleva str. 25, Ekaterinburg,

tel.+7(343)3769828 e-mail: alex_brilliant@mail.ru

The condition of proliferative processes in tumor tissue is a prognostic factor, which influences on the disease outcome of patients with breast carcinoma. In the research 362 cases of infiltrative breast carcinoma were studied. The aim of the study was to examine the condition of the prolifera- tive processes on breast carcinoma cells depending on protein Her‑2/neu expression and Her‑2 gene amplification. Her‑2/neu expression on breast carcinoma cells was determined by immunohistochemi- cal method in autostainer “Dako” with polyclonal antibodies Polyclonal Rabbit Anti‑Human с‑erb‑2 Oncoprotein (DAKO, Denmark). A level of Her‑2/neu membrane expression on tumor cells was eval- uated on the scale from 0 to 3+. The cases evaluated as 3+ were estimated as positive for the presence of Her‑2/neu receptors. All the cases evaluated as 2+ were studied for detection of Her‑2 gene ampli-

fication by FISH method (“HER2 FISH pharmDx Kit”, Dako) using the microscope “ZeissYmagerM”

(Germany). A proliferative activity level was estimated by tumor cells proliferative index – Ki67 (with antibody Mouse Anti‑Human KI‑67 Antigen, “Dako”, Denmark). Proliferative activity of the explored tumor can be evaluated by percentage ratio of stained nuclei of carcinoma cells to unstained.

It was identified that the average carcinoma proliferative activity index evaluated as 3+ for Her‑2/neu expression was 26.00±0.08%, the average carcinoma proliferative activity index evaluated as 2+ for Her‑2/neu expression was 23.0±0.9%. The average carcinoma proliferative activity index with Her‑2 gene amplification was 24.0±0.2%, without Her‑2 gene amplification – 23.0±0.2%. Presence of the gene amplification does not influence on alteration of proliferative activity of breast carcinoma.

ПРЕОДОЛЕНИЕ УСТОЙЧИВОСТИ ОПУХОЛЕВЫХ КЛЕТОК ТОЛСТОЙ КИШКИ К TRAIL С ПОМОЩЬЮ МУТАНТНОГО ВАРИАНТА цИТОКИНА СЕЛЕКТИВНОГО К РЕцЕПТОРУ СМЕРТИ DR5

Бычков М.Л., Гаспарян М.Э., Долгих Д.А.

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова Российской академии наук(ИБХ РАН)

117997, Москва, Россия

TRAIL индуцирует апоптоз в опухолевых клетках через рецепторы смерти DR4 и DR5, и не проявляет токсичность по отношению к нормальным клеткам. Однако, более половины ли- ний опухолевых клеток нечувствительны к TRAIL, отчасти из‑за взаимодействия цитокина с рецепторами‑ловушками (DcR1, DcR2 и OPG). Мы получили мутантный вариант цитокина TRAIL DR5‑B, который связывается с рецептором DR5 так же эффективно как и с диким ти- пом, однако практически не взаимодействует с рецепторами‑ловушками и с рецептором смерти DR4. На клетках карцином толстой кишки НСТ116 препарат DR5‑B в 4 раза эффективнее вы- зывает апоптоз по сравнению с TRAIL дикого типа. Методом проточной цитометрии была по- казана, что эти клетки экспрессируют все 4 мембраносвязанные рецепторы DR5, DR4, DcR1 и DcR2 на поверхности клеток в соотношении 41, 32, 20 и 6%, соответственно. При совместном воздействии с бортезомибом (10 нМ) и таксолом (1 нМ) эффективные дозы ED₅₀ препарата DR5‑B уменьшились 5 – 10 раз, тогда как у TRAIL дикого типа этот параметр не изменился.

В этих условиях максимальная гибель клеток составила 95% и 40% при концентрациях 50 нг/

мл DR5‑B и TRAIL дикого типа, соответственно.

Препарат DR5‑B в концентрации 100 нг/мл индуцировал апоптоз 45% клеток колоректаль- ной аденокарциномы НТ29, а аналогичная концентрация TRAIL дикого типа вызывала гибель всего 7% клеток. Химиопрепараты бортезомиб, таксол, доксорубицин и цисплатин совместно с препаратами DR5‑B и TRAIL дикого типа вызывали апоптоз у 90% и 37% клеток, соответ- ственно.

Цитотоксичность белков DR5‑В сравнивали с TRAIL дикого типа на клетках HFF (фибро- бласты крайней плоти) человека. Оба препараты не вызывали гибель этих клеток при концен- трациях меньше в 20 мкг/мл, что 2000 раз превышает эффективные дозы препаратов. Таким образом, DR5‑B может служить эффективним средством для терапии опухолей толстой кишки устойчивые к TRAIL дикого типа.

OVERCOMING THE RESISTANCE OF COLON TUMOR CELLS TO TRAIL USING A DR5 DEATH RECEPTOR SELECTIVE MUTANT VARIANT OF CYTOKINE

M.L. Bychkov, M.E. Gasparian, D.A. Dolgikh

Federal State Institution of Science Institute of Bioorganic Chemistry.

Academics MM Shemyakin Ovchinnikov, Russian Academy of Sciences (Institute of Bioorganic Chemistry), 117997, Moscow, Russia

TRAIL induces apoptosis in tumor cells through death receptors DR4 and DR5 and shows no tox- icity to normal cells. However, more than half of the tumor cell lines are insensitive to TRAIL, in part because of the interaction of a cytokine with decoy receptors (DcR1, DcR2 and OPG). We obtained a mutant version of the cytokine DR5‑B which binds to the receptor DR5 as efficiently as wild‑type TRAIL, but practically it does not interact with the decoy receptors and death receptor DR4. In colon carcinoma cells HCT116 DR5‑B induced apoptosis 4‑fold more efficient than wild‑type TRAIL. Flow cytometry analysis demonstrated that these cells express all membrane‑bound receptors DR5, DR4, DcR1 and DcR2 in the ratio of 41, 32, 20 and 6%, respectively. Combined treatment of the HCT116 cells with bortezomib (10 nM) and taxol (1 nM) decreased effective doses (ED₅₀) of DR5‑B 5 ‑10 fold, whereas this parameter was not changed for wild‑type TRAIL. In these conditions, the maximum cell death was 95% and 40% for DR5‑B and wild type TRAIL, respectively at concentrations of 50 ng/ml of ligand.

DR5‑B preparation at a concentration of 100 ng /ml induced apoptosis 45% of colorectal ad- enocarcinoma HT29 cells, while similar concentration of wild‑type TRAIL caused only 7% death.

Chemotherapy agents, such as bortezomib, taxol, doxorubicin, and cisplatin in combination with prep- arations DR5‑B and wild‑type TRAIL induced 90% and 37% apoptosis of HT29 cells, respectively.

Cytotoxicity of DR5‑B was compared with wild‑type TRAIL on the HFF (human foreskin fibro- blasts) cells. Both preparations did not cause cell death at concentrations less than 20 µg/ml, which is 2000 times higher than the effective doses. Thus, DR5 selective mutant variant of TRAIL DR5‑B can be used as a powerful tool in therapy of wild type TRAIL resistant colon cancers.

AНТИБИОТИК БАТУМИН – СЕЛЕКТИВНЫЙ ИНГИБИТОР БАКТЕРИЙ РОДА STAPHYLOCOCCUS

Чуркина Л.Н.¹, Киприанова Е.А.¹, Ванечуте М.², Авдеева Л.В.¹, Перунова Н.Б.³

1Институт микробиологии и вирусологии НАН Украины, ул. Академика Заболотного, 154, Киев 03680, Украина;

2Лаборатория бактериологических исследований,

Гентский университет, Gent, Blok A, De Pintelaan 185, Belgium;

3Институт клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН, ул. Пионерская, 11, Оренбург 460000, Российская Федерация

Батумин, выделенный из Pseudomonas batumici в ИМВ НАН Украины и широко исследован- ный на протяжении последних десятилетий, высокоактивен в отношении представителей рода Staphylococcus, включая метициллинрезистентные штаммы S. aureus.

Род Staphylococcus состоит из 11 РНК‑комплексов, объединяющих более 40 видов. Нами проанализирована чувствительность к батумину 30 видов стафилококков, представленных как типовыми штаммами, так и клиническими изолятами. Большинство из них были чувствитель- ны к антибиотику в концентрации 0,25 мкг/мл. Для видов комплекса S.epidermidis (S.caprae, S.capitis, S.epidermidis) МПК составляла 0,0625‑0,125 мкг/мл. Высокочувствительным к бату- мину оказался и Macrococcus caseolyticus – вид, недавно образовавший новый род семейства

Staphylococcaceae. Батумин является селективным и высоко‑активным ингибитором бакте- рий, входящих в состав названного семейства, но не действует на представителей семейства Bacillaceae, эволюционно близкого стафилококкам.

Батумин действует и на атипичные трудно идентифицируемые формы стафилококков, так называемые small colony variants, выделяемые при кистозном фиброзе легких и остеомиелитах.

При использовании батуминсодержащих дисков (5 μg на диск) зоны задержки роста SCV_s S.

aureus, S.haemolyticus и S. еpidermidis составляют не менее 25 мм, что облегчает и упрощает их диагностику.

Интересным направлением является изучение влияния батумина на образование биопленки стафилококками. При внесении в среду ½ МПК антибиотика этот процесс существенно сни- жался у 80% штаммов назальных стафилококков с исходно высокой способностью к биоплен- кообразованию.

ANTIBIOTIC BATUMIN – THE SELECTIVE INHIBITOR OF BACTERIA BELONGING TO THE GENUS STAPHYLOCOCCUS

Churkina L.N.¹, Vaneechoutte M.², Kiprianova E.A.¹, Avdeeva L.V.¹, Perunova N.B.³

1Institute of Microbiology and Virology, National Academy of Sciences of Ukraine, Zabolotnogo st. 154, Kyiv 03680, Ukraine;

2Laboratory Bacteriology Research, University of Gent, 3 Blok A, De Pintelaan 185, 9000 Belgium,

3Institute of Cellular and Intracellular Symbiosis, Ural Branch of Russian Academy of Sciences,

Pionerskaya st. 11, Orenbourg 460000, Russian Federation

Batumin isolated from Pseudomonas batumici in the Institute of Microbiology and Virology of the Ukrainian Academy of Sciences and widely studied during the last decades is highly active against bacteria of the genus Staphylococcus, including the methicillin‑resistant strains of S. aureus.

The genus Staphylococcus consists of 11 RNA‑complexes and comprises more than 40 species.

We have analysed the sensitivity to batumin of 30 Staphylococcus species, which were represented by both the type strains and clinical isolates. Most of them were sensitive to 0.25 µg/ml of antibiotic.

MIC ranged between 0.0625 and 0.125 µg/ml for the species of the S. epidermidis complex (S. caprae, S. capitis, S. epidermidis). Macrococcus caseolyticus – the species which recently formed a new ge- nus within the family Staphylococcaceae also proved to be highly sensitive to batumin. Batumin is a selective and highly active inhibitor of Staphylococcaceae but it is not active against the representa- tives of the Bacillaceae, which is evolutionary the family closest to the Staphylococcaceaee.

Batumin is also effective against atypic difficult‑to‑identify staphylococcal forms, the so‑called small colony variants (SCV_s) isolated from cystic fibrosis and osteomyelitis patients. Use of a di- agnostic preparation (consisting of 5 μg batumin paper disks) gives growth inhibition zones around SCV_s variants of S. aureus, S. haemolyticus and

S. еpidermidisof at least 25 mm, which simplifies and reduces cost of their identification.

The influence of batumin on biofilm formation by staphylococci is also an interesting line of inves- tigation. Inoculation of ½ of the batumin MIC to the culture media with staphylococci considerably reduced biofilm formation in 80% of nasal strains which had a high initial level of biofilm forma- tion.

КУРИНЫЕ яЙцА КАК ИСТОЧНИК СПЕцИФИЧНЫХ АНТИТЕЛ ДЛя БИОМЕДИцИНСКИХ ИССЛЕДОВАНИЙ

Егорова Е.А.^1,2, Ботин Д.Э.¹, Копылов А.Т.¹, Колесанова Е.Ф.¹

1Федеральное государственное бюджетное учреждение

«Научно-исследовательский институт биомедицинской химии имени В.Н. Ореховича Российской академии медицинских наук, Москва, 119121 ул. Погодинская, 10;

2ООО «ПостгенТех», Москва, 119992, ул. Погодинская, 10, корп.1.

Были исследованы несколько методов получения иммуноглобулинов Y (IgY) из желтков кури- ных яиц. Наиболее чистый препарат IgY (по данным диск‑электрофореза и масс‑спектрального анализа) был получен при предварительном удалении липопротеидов желтка осаждением декстран‑сульфатом.

Показано, что синтетические пептидные конструкции, составленные из фрагментов белка Е2 вируса гепатита С (ВГС), ранее проявлявших иммуногенность у мышей и крыс, вызывали образование специфичных антител и у кур. Секретированные в желток IgY специфично взаи- модействовали не только с пептидами, использованными для иммунизации, но и с оболочеч- ным белком Е2 и с гетеродимером Е1Е2 ВГС. Иммунный ответ, выражаемый титром антител против белка Е2 в расчёте на 1 мг препарата IgY, достигал пика на начало 3‑й недели после окончания иммунизации и был постоянным в течение одной недели, после чего снижался. От каждой курицы в ходе одного цикла иммунизации было получено в среднем 1000 мг очищен- ного препарата специфичных IgY. Эти специфичные IgY могут использоваться для разработки иммунотест‑систем для выявления оболочечных белков ВГC и вирусных частиц, получения аффинных сорбентов для выделения антигенов, а также при исследованиях с использованием культур клеток, вирусных частиц и в гистохимических анализов, где важным преимуществом IgY является отсутствие их связывания с белками системы комплемента млекопитающих.

HEN EGGS AS A SOURCE OF SPECIFIC ANTIBODIES FOR BIOMEDICAL RESEARCH E.A. Egorova^1,2, D.E. Botin¹, A.T. Kopylov¹, E.F. Kolesanova¹.

1Orekhovich Institute of Biomedical Chemistry of Russian Academy of Medical Sciences;

10, Pogodinskaya str., 119121 Moscow, Russia;

2”PostgenTech” Ltd., 10, bld.1, Pogodinskaya str., 119992 Moscow, Russia

Several methods of immunoglobulin (IgY) preparation from hen egg yolk were tested. The purest IgY preparation (according to disc electrophoresis and mass‑spectral analysis data) was obtained with the preliminary removal of yolk lipoproteins by dextran sulfate precipitation

It was shown that synhtetic peptide constructs composed of hepatitis C virus protein E2 fragments that previously demonstrated immunogenicity in mice and rats, raised specific antibodies in hens as well. IgY, secreted into yolk, specifically interacted not only with the peptides used for immuniza- tion, but also with hepatitis C virus envelope protein E2 and E1E2 heterodimer. Immune response, expressed as titer of anti‑protein E2 antibodies per 1 mg IgY, reached its maximum at the beginning of the third week after the immunization, was stable for one week, and then slowly declined. On the average, about 1000 mg of purified specific IgY preparation was received from one hen in a single immunization cycle. These specific IgYs can be used for the development of immunoassay systems for the detection of HCV envelope proteins and viral particles, for obtaining affinity sorbents for antigen separation, as well as for studies using cell cultures, viral particles and in histochemical

analysis, where the inability of IgY to bind mammalian complement system proteins is an important advantage.

РИСКИ ПРИ ОБРАЩЕНИИ ФИТОПРЕПАРАТОВ Габидова А.Э.,

Центр внедрения инновационных медицинских и фармацевтических технологий ГОУ ВПО Российского научно-исследовательского медицинского университета им. Н.И. Пирогова г.Москва, ул. Островитянова, 1.

Развитие цивилизаций происходит при постоянном использовании растений. Они со- ставляют значительную и принципиальную часть пищи, используются как специи, припра- вы, деликатесы и в напитках. Весьма распространено и использование технических культур и изделий из них (хлопок, конопля, бумага, пробка, строительная или отопительная древе- сина). Другую особую группу образуют растения, которые обладают фармакологическими свойствами. В биосфере циркулирует огромное количество микроорганизмов и синтети- ческих химических веществ. Микробная контаминация растений зависит от окружающей среды (почва, воздух, вода). Лекарственное растительное сырье (ЛРС), составляющее осно- ву фитопрепаратов, по своему происхождению наиболее контаминировано микрофлорой и является наиболее вероятным переносчиком спор микроорганизмов. На растениях и внутри них может быть найдено широкое разнообразие патогенных и условно‑патогенных микро- организмов, а также патогенные соединения, т.е. должна формироваться стратегия действий по устранению или снижению риска.Микробный риск, возникающий в процессе переработ- ки лекарственных растений, может изменяться на различных стадиях производства,но не возможность стерилизовать или обрабатывать ЛР не сопровождается снижением количе- ства микроорганизмов в готовой продукции. Анализ высушенного растительного сырья по- казывает, что микроорганизмы и особенно их споровые формы могут сохраняться в течение длительного периода.

Спорообразующие микроорганизмы, способны начать активно развиваться в лекарственных средствах при их хранении, или в организме пациента, причем этот процесс может протекать как в аэробных, так и в анаэробных условиях. В ряде исследований показано, что анаэробные микроорганизмы широко распространены в окружающей среде, следовательно, опасность по- падания их в лекарственные средства довольно высока. Спорообразующие анаэробы отличают- ся высокой степенью выживаемости. Чрезвычайную актуальность представляет более глубокое изучение анаэробной микробиоты лекарственных средств в связи с тем, что: они представля- ют большую опасность здоровью человека из‑за наличия у них токсигенных и аллергенных свойств, значительная жизнеспособность спорообразующих анаэробных микроорганизмов;

широкое распространение в окружающей среде отдельных представителей анаэробных микро- организмов и опасность попадания их в лекарственные средства. Анаэробные микроорганиз- мы в лекарственных средствах (ЛС) в настоящее время не идентифицируются. Только в Европейской и Британской фармакопеях представлен метод количественного определения Clostridium perfringens, как одного из наиболее патогенных и распространенных анаэробов‑

контаминантов.

Clostridium perfringens широко распространена во внешней среде (вода, почва, человек, ки- шечник человека), где она преимущественно является сапротрофом, но может вызывать различ- ные заболевания. В почве, пыли помещений Clostridium perfringens встречается почти в 100%

исследованных проб, в воздухе предприятий обнаруживается в 10‑12% случаев, на оборудова-