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Malgré de nombreuses analogies avec les cellulases, les

enzymes xylanolytiques sont clairement un groupe distinct.

Contrairement à la dégradation de la cellulose où seulement des

enzymes coupant les liaisons p-1,4-glucosidiques sont requises, le

système xylanolytique est beaucoup moins bien défini suite à la

complexité du xylane. La présence de substituants variés

comprenant les groupes arabinofuranosyl, glucuronyl et acétyl a

une forte influence sur les propriétés structurales et chimiques et

aussi sur la biodégradabilité du xylane (Broda, 1992).

La P-1,4-endoxylanase et la P-xylosidase sont les enzymes

principales dans le processus de la dépolymérisation du xylane.

Elles catalysent l'hydrolyse des liaisons P-l,4-xylosidiques du

polymère. Les enzymes de débranchement telles que l’a-

arabinofuranosidase, l'a-glucuronidase et l'acétylestérase viennent

augmenter par synergie l'action dégradative des deux premiers

composants (Poutanen et al., 1987; Smith et al., 1991). Très peu

d'informations sont disponibles sur leur mécanisme d'action. Un

modèle de dégradation complète du xylane acétylé est explicité

dans le schéma 1.4 (Biely, 1985).

Le rôle de ces enzymes dans des procédés technologiques tels

que la production des sucres fermentescibles, le blanchiment de la

pâte à papier, la clarification de jus de fruit, la prédigestion

(conversion enzymatique de l'hémicellulose en pentoses substrat

fermentescible dans l'alimentation pour bétail) ou encore la

macération commence à être pris en considération.

2 0

Araf

or

AC 1 .

Il lO

3 3

-4Xyl/31-4Xyl01-4Xyli31-4Xyl|31-4Xyl/31-

2a 2

l<] Il

V Ac

MeGIcA

-4Xylj31-4Xyl/î1-4Xyi/31-4Xyl/31-

4Xyl|31-!<i

1

MeG°lcA

endo-1,4-|3-xylanase (EC 3.2.1.8)

-xylosidase (EC 3.2.1.37)

Xyl)31-4Xylj31-a-glucuronidase (EC 3.2.1. )

-O a-L-arabinofuranosidase (EC 3.2.1.55)

-m-

acetylesterase (EC 3.1.1.6) or acetyl xylan esterase ?

Fig. 3.2. A hypothetical plant xylan and the sites of its attack by microbial xylanolytic enzymes.

The fragment comprising five D-xylose units is presented in the upper part of the figure. Ac,

---Acetyl Group: Araf, L-arabinofuranose; MeGlcA, 4-O-methyl-D-glucuronic acid; Xyl, D-xylose

Les xylanases sont largement produites à partir de différentes

sources: champignons, bactéries, actinomycètes, levures, et les

microorganismes du rumen (Biely, 1985). Certains insectes,

mollusques et crustacées seraient également producteurs de ces

enzymes via leur microflore symbiotique (Dekker et Richards,

1976).

Les actinomycètes sont des sources importantes d'enzymes

impliquées dans la dégradation de la lignocellulose et dont l'activité

envers le xylane est particulièrement répandue (McCarthy, 1987).

Plus de 200 actinomycètes ont été isolés pour leur activité

xylanolytique (McCarthy et Bail, 1987).

1.2.5.1. Endoxylanases (B-xylanase)

Les endoxylanases sont actives vis-à-vis de xylanes de

sources différentes et leur accessibilité au substrat dépend de la

nature de celui-ci. Elles hydrolysent au hasard les liaisons 1,4-P-D-

xylosidiques du xylane plus ou moins substitués tels que L-arabino-

D-xylane, L-arabinoglucurono-D-xylane et D-glucurono-D-xylane.

Certaines endoxylanases sont capables de libérer l'arabinose mais

cette propriété ne semble pas répandue.

Certaines endoxylanases bactériennes ont été isolées et

caractérisées. Les xylanases bactériennes les plus étudiées excepté

celles des actinomycètes, proviennent du genre Bacillus. Les

produits d'hydrolyse ont un degré de polymérisation (DP) allant de

1 à 5 unités selon la classe d'activité. Un composant xylanase (pl

5,3) a été isolé et caractérisé à partir du Bacillus sp. Son optimum

de pH se présente sous forme d'une zone large mais avec une

activité relativement plus élevée dans la région basique. Cette

enzyme hydrolyse l'arabinoxylane de bois de mélèze en xylobiose

(X2) et xylotriose (X3) comme produits majeurs et de petites

quantités des xylooligosaccharides sont présentes. La libération de

l'arabinose n'a pas été démontrée (Nakamura et al., 1993).

Deux composants xylanases de Bacillus sp W1 et W2, purifiés

et caractérisés, hydrolysent le xylane du bois de mélèze. Les

produits d'hydrolyse du composant I sont X2, X3, X4 et X5 et ceux

du composant II, XI, X2, X3 et X5. Une activité transférase est

associée aux deux composants. La présence de cette activité peut

fortement influencer la composition des produits d'hydrolyse

(Okazaki et al., 1985). Un phénomène tout à fait particulier a été

démontré pour le système xylanolytique de Bacillus subtilis. En

effet, la xylanase est glucuronosyl dépendante; c'est-à-dire que

l'enzyme exige une région du substrat avec un résidu d'acide

glucuronique (Nishitani et Nevins, 1991). Les xylanases des autres

bactéries telles que de Bacillus circulans (Râttô et al., 1992) ou de

Bacillus polymyxa (Pinaga et al., 1993) ont été également étudiées.

-Les xylanases sécrétées par la levure sont souvent des

enzymes glycosylées. Morosoli et al. (1986a) ont montré que la

présence d'hydrates de carbone peut influencer l'activité de

l'enzyme. La xylanase glycosylée (48 KDa), sécrétée par le

Cryptococcus albidus, est 2,5 fois plus active que la xylanase non

glycosylée (40 KDa) sécrétée après traitement à la tunicamycine

(Morosoli et al., 1988). Les xylanases de levure ne semblent pas

libérer le L-arabinose de l'arabinoxylane.

Une xylanase (27.000 PM), purifiée à partir de la levure

Cryptococcus albidus (Biely et al., 1980a), est active vis-à-vis du p-

nitrophényl-P-D-xylose. Le mécanisme d'hydrolyse est complexe; la

fréquence de coupure d'une liaison xylosidique dépend de la

concentration et de la longueur du substrat. A de faibles

concentrations, c'est la rupture hydrolytique de la seconde liaison

xylosidique à partir de l'extrémité réductrice de

xylooligosaccharides de DP 4-8 et de la première liaison du X3

(DP3) qui est favorisée. A des concentrations élevées de X3 comme

substrat (par exemple, plus de 5mM de X3), l'enzyme manifeste une

activité xylosyltransférase à partir du produit de la réaction comme

c'est le cas avec des xylanases de Bacillus sp. W1 et W2 (ci-dessus)

où X2 devrait être le produit principal de la réaction. Cependant, X4

est parmi les produits qui ont été démontrés (Biely et al., 198la,b;

Okazaki et al., 1985).

- Les endoxylanases de champignons. Parmi les endoxylanases

sécrétées par les champignons, deux types sont reconnaissables: (a)

les xylanases débranchantes et (b) les xylanases non

débranchantes.

(a) Les xylanases fongiques débranchantes hydrolysent les

liaisons 1,4-p-D-xylosidiques ainsi que les liaisons a-1,3 entre

l'arabinose latéral et le xylose de la chaîne principale. Deux sites

catalytiques ont été démontrés chez la xylanase débranchante (pl

9,17) de Ceraîcystis paradoxa. La présence de deux sites est

possible, puisque les sucres impliqués ont des structures

dissemblables et ne peuvent stériquement pas s'adapter au même

site. Le D-xylose existe sous la forme pyranoside tandis que le L-

arabinose est généralement présent sous la forme furanoside

(Dekker et Richards, 1975). Cinq xylanases isolées d'un Aspergillus

niger ont leur activité optimale de pH 4 à 6,5. Toutes sont capables

de libérer l'arabinose à partir de l'arabinoxylane. Les produits

principaux d'hydrolyse sont L-Ara, XI, X2 et un mélange

d'oligosaccharides plus ou moins ramifiés d'arabinose-xylose (John

et al., 1979).

Pénicillium funiculosum, en présence de la paille de blé,

produit le complexe cellulase et les enzymes xylanolytiques. Deux

activités xylanases isolées hydrolysent le xylane en XI, X2, X3, X4

et X5 et Ara. La présence de l'arabinofuranose parmi les produits

d'hydrolyse montre que les xylanases de Pénicillium funiculosum

sont capables d'hydrolyser les sites ramifiés par la

L-a-1,3-arabinofuranosyl (Mishra et al., 1985).

(b) Les xylanases fongiques non débranchantes. Il s'agit des

xylanases qui ne sont pas capables de libérer l'arabinose de

l'arabinoxylane. Elles constituent de loin le groupe de xylanases le

plus important dans la dégradation du polymère. Deux xylanases de

Trichoderma lignorum ne libèrent pas l'arabinose. Une dégrade

l'arabinoxylane en X2, araX4, araX5 et XI comme produits

d'hydrolyse; l'autre produit principalement X2. L'activité

transférase serait associée à cette dernière (John et al., 1981).

Plusieurs xylanases des champignons sont coproduites avec le

complexe cellulase. Les Trichoderma harzianum e t konigii

produisent des xylanases et cellulases durant leur croissance sur

cellulose ou sur xylane (Senior et al., 1989; Huang et al., 1991).

Cette coproduction rend souvent difficile l’étude de la régulation

des enzymes. Deux des xylanases d'Aspergillus niger dégradent la

cellulose cristalline (John et al., 1979). De même, certaines cellulases

et glucosidases fongiques montrent des activités croisées vis-à-vis

du xylane. Une glucanase non-spécifique de Trichoderma reesei

catalyserait l'hydrolyse de cellulose et de xylane via le même site

actif (Biely et al., 1991). Une xylanase non spécifique de

Trichoderma sp peut attaquer la cellulose, la CMC, le p-nitrophényl-

p-glucoside, les cellooligomères, le cellobiose, la laminarine (GlcPl-

6Glc)et le p-nitrophényl-P-cellobioside (Biely et al., 1991;

Lappalainen, 1986). Il est néanmoins à remarquer que les critères

de pureté des enzymes présentés par les auteurs ne sont pas

toujours satisfaisants, ce qui complique le problème.

-Endoxylanases des actinomycètes. Les études analogues sur

les activités xylanases des actinomycètes qui font l'objet de cette

thèse sont encore rares. Toutefois, les xylanases de certaines

espèces ont été étudiées. Par exemple, les Thermomonospora sp,

longtemps étudiés pour leur activité cellulolytique, ont été

examinés pour leur activité xylanolytique (McCarthy et al., 1985).

Le Streptomyces roseiscleroticus est caractérisé par sa forte

production de xylanase par rapport à la cellulase, produite à un

taux négligeable. La xylanase produite est capable de libérer

l'arabinose de l'arabinoxylane (Grabski et Thomas, 1991). Quelques

études au niveau moléculaire ont été réalisées particulièrement

avec Streptomyces lividans. Trois gènes distincts codant pour trois

xylanases de cet organisme ont été clonés et séquencés; les enzymes

ont été purifiées et caractérisées (Shareck et al., 1991; Kluepfel et

al., 1990, 1992; Vats-Mehta et al., 1990). Comme décrit sur les

xylanases de Cryptococcus albidus (voir ci-dessus), les enzymes de

Streptomyces lividans hydrolysent préférentiellement la deuxième

et la troisième liaisons xylosidiques à partir de l'extremité

réductrice. Il a été suggéré que les xylanases auraient des sous-

sites de liaison aux xylooligosides. De même, ces enzymes possèdent

l'activité transférase conduisant aux produits plus larges que le

substrat du départ (Moreau et al., 1994; Arhin et al., 1994).

Multiplicité des xylanases

Comme les cellulases, beaucoup de xylanases sont des

isoenzymes qui peuvent montrer des propriétés physico-chimiques,

enzymatiques ou génétiques plus au moins différentes.

Des techniques de purification et de zymogramme révèlent

que des nombreux microorganismes élaborent des formes multiples

d’activité xylanase; par exemple, les Streptomyces lividans et

cyaneus produisent, tous deux, trois xylanases (Kluepfel et al., 1992;

Arhin et al. 1994; Wang et al. 1993). Cette multiplicité enzymatique

est probablement liée à la complexité structurale du xylane.

L'accessibilité des enzymes aux liaisons xylosidiques ne semble pas

toujours s'opérer de la même façon et peut changer au cours de

l'hydrolyse. D'autre part, le processus peut se compliquer, par

exemple, par l'existence d'une activité transferase (Moreau et al.

1994).

De nombreux autres microorganismes xylanolytiques ont

montré cette multiplicité enzymatique. Par exemple, cinq xylanases

ont été isolées à partir d'AspergHIus niger (John et al., 1979) et de

Streptomyces ostreogriseus (Park et Toma, 1982) ou encore trois

xylanases de Streptomyces sp(Nakanishi et al., 1992).

Les enzymes multiples sont également rencontrées chez

d'autres activités comme les xylosidases (Win et al., 1987) et les

acétylestérases (Iwai et al., 1983).

Comme pour les cellulases, plusieurs processus peuvent donc

expliquer la multiplicité des xylanases. Wong et al. (1988) ont

suggéré que les xylanases multiples sont des produits de

dégradation d'une xylanase majeure ou sont élaborées par des

gènes distincts.

Produits de dégradation d'une xvlanase majeure. La

multiplicité des xylanases peut résulter d'une modification

posttraductionnelle (protéolyse ou glycolyse différentielle) à partir

d'un gène. Beaucoup de xylanases sont manifestement glycosylées

(Morosoli et al., 1986a; Bérenger et al., 1985; Bernier et al., 1983)

dont certaines seraient de précurseurs de xylanases multiples. Trois

xylanases glycosylées de Clostridium stercorarium ont des

propriétés physico-chimiques et immunologiques identiques; elles

seraient des formes différentes d'une même polypeptide (Bérenger

et al., 1985).

Les produits de gènes distincts. La multiplicité des xylanases

dans un organisme comme produits des gènes distincts a été

rapportés chez Trichoderma harzianum. De cet organisme, trois

xylanases isolées ont une composition en acides aminés différentes

(Wong et al., 1986). D'autres études ont démontré des différences

immunologiques entre les xylanases de Streptornyces 3137 (Marui

et al., 1985b). Trois gènes (Xln A, XlnB et XlnC) codant pour trois

différentes xylanases (A, B, C) de Streptornyces lividans ont été

rapportés (Shareck et al., 1991; Kluepfel et al. (1992; Arhin et al.,

1994). Les xylanases B et C ont des propriétés physico-chimiques,

immunologiques et mode d'action liés mais différents de xylanase

A. Cette différence des produits des gènes suggère qu'une xylanase

prise individuellement a des propriétés distinctes qui

contribueraient spécifiquement à l'hydrolyse du xylane.

La multiplicité des xylanases peut être aussi le résultat du

manque de spécificité de certaines cellulases. Des cellulases

hautement purifiées sont en effet capables d'hydrolyser le xylane

(Shikata et Nisizawa, 1975).

Wong et al. (1988) regroupent les xylanases en deux familles:

la famille F comprend des protéines acides de haut poids

moléculaire et la famille G, des protéines basiques de petit poids

moléculaire. BacUlus sp par exemple, produit une xylanase basique

(pl 8,3) avec un petit poids moléculaire (PM 22 kDa) et une autre

acide (pl 3,7) avec un poids moléculaire élevé (PM 50 kDa) (Okazaki

et al., 1985). Cette classification des P-xylanases est aussi confirmée

Shareck et al., 1991). Les critères d'homologie des séquences sont

actuellement utilisés pour distinguer davantage les deux familles d e

glycanases (Shareck et al., 1991).

1.2.5.2. Exoxylanases

Les exoxylanases dégradent le xylane et les

xylooligosaccharides de degré de polymérisation élevé à partir d e

l'extrémité non réductrice en libérant principalement du xylose.

Plusieurs enzymes décrites comme des P-xylosidases possèdent des

propriétés différentes de ce type d'enzyme et s'avéreraient être des

exoxylanases vraies. C'est le cas des exoxylanases de Malbranchea

pulchella ( Matsuo et al., 1977) et de Bacillus pumilus (Kerster

1969). Ces enzymes. contrairement aux

P-possèdent pas d'activité transférase et sont

> par le xylose. Ces propriétés rendraient ce

préférable aux xylosidases dans les applications

industrielles.

1.2.5.3. 13-Xylosidases

Les P-D-xylosidases hydrolysent les fragments

xylooligosaccharides solubles et xylobiose en xylose. Elles sont

essentielles pour la dégradation complète du xylane. Leur rôle en

concertation avec la xylanase n'a pas fait l'objet de beaucoup de

recherches. Néanmoins, quelques études ont été réalisées avec

Neurospora crassa (Deshpande et al., 1986), Penicillum funiculosum

(Seeta et al., 1989) et Aureobasidium pullulans (Dobberstein et

Emeis, 1991). Les xylosidases ont montré plusieurs propriétés

différentes comparées aux exoxylanases. Elles sont souvent associées

aux activités transférases. Cette dernière activité a été trouvée liée à

une xylosidase purifiée d'Aspergillus niger (Shinoyama et Yasui.,

1988) et aux quatre xylosidases isolées de Penicillum wortmanni

(Win et al., 1987). Dobberstein et Emeis et al. (1991) ont montré

qu'une liaison P-1,4-xylosidique peut être synthétisée à partir de

xylobiose et xylotriose pour donner des xylooligosaccharides de

poids moléculaire élevé. La présence de l'activité transférase peut

aussi expliquer pourquoi la synergie de xylanase avec le P-

xylosidase n'est pas aussi efficace que la cellulase avec la P-

glucosidase (Deshpande et al., 1986; Seeta et al., 1989).

La plupart des P-xylosidases montrent une haute activité vis-

à-vis du xylobiose et non pas avec le xylane. Leur activité envers

les xylooligosaccharides semble diminuer avec l'augmentation de la

longueur de la chaîne (Van Doorslaer et al., 1985). La xylosidase de

Trichoderma viride hydrolyse les xylooligosaccharides dans l'ordre

préférentiel de X2, X3, X4, X5 (Matsuo et Yasui, 1984a).

Les xylosidases peuvent montrer d'autres activités. Uzii et al.

(1985), par exemple, ont trouvé que la P-xylosidase purifiée de

Chaetomium trilatérale pouvait hydrolyser les liaisons P-

xylosidiques et glucosidiques. Poutanen et Puis (1988) ont purifié

une P-xylosidase (PM 100 kDa, pl 4,7) de Trichoderma reesei qui

montre aussi une activité a-arabinofuranosidase.

Les xylosidases ont généralement un poids moléculaire élevé

en comparaison avec les endoxylanases. Le poids moléculaire de

xylosidases fongiques peuvent aller de 100 à 360 kDa. L'enzyme

peut être sous forme monomérique {Penicillum wortmanni et

Trichoderma viride) (Deleyn et al., 1978; Matsuo et Yasui, 1984a),

dimérique {Ernericella nidulans) (Matsuo et Yasui, 1984b),

trimérique ou tetramérique {Aspergillus fumigatus)

(Kitpreechavanich et al., 1986). Les P-D-xylosidases bactériennes

sont habituellement des dimères et tétramères qui peuvent

atteindre 240 kDa (Claeyssens et al., 1975). La production de

xylosidase par les actinomycètes a été montrée, par exemple, chez

Streptomyces sp et Thermomonospora fusca (Nakanishi et al., 1987;

1.2.5.4. g-L-Arabinofuranosidases

L'g-arabinofuranosidase excise les résidus arabinofuranosyls

à partir d'arabinane, d'arabinoxylane et d'arabinogalactane (Greve

et al., 1984). Les résidus a-L-arabinofuranosyls du xylane sont

habituellement liés en position g-1,3 à la chaîne P-1,4-

xylopyranosyl (Aspinall, 1980). La présence d'g-

arabinofuranosidase augmente la vitesse d'hydrolyse enzymatique

des hémicelluloses par les xylanases et la |3-xylosidase (Brice et

Morrison, 1982).

Le rôle de l'g-arabinofuranosidase dans la dégradation de la

lignocellulose a été très peu étudié. L'g-arabinofuranosidase (PM

305 kDa) d'une bactérie du rumen, Ruminococcus albus a été

isolée et purifiée (Greve et al., 1984). La présence d'g-

arabinofuranosidase et celle de xylanase augmente la quantité des

substrats fermentescibles dans la flore du rumen. Le Clostridium

acetobutylium produit une g-arabinofuranosidase de poids

moléculaire 94 kDa (Lee et Forsberg, 1987b). L'g-

arabinofuranosidase trouvée chez Trichoderma reesei est capable

de libérer l'arabinose de préférence à partir de xylooligosaccharides

substitués (Poutanen, 1988). L'g-arabinofuranosidase a été détectée

chez quelques actinomycètes (Kaji et al., 1981; Komae et al., 1982;

Bachmann et McCarthy, 1991).

1.2.5.5. AcétyUxvlanelestérases

Des groupes acétyls sont fixés au C2 et C3 de résidus xylose

(Bouveng, 1961) tandis que des acides phénoliques sont estérifiés

via leur groupes carboxyles au C5 d'unité arabinose de

l'arabinoxylane et peuvent aussi former de liaisons avec la lignine

et le xylane (Kato et Nevins, 1985; Scalbert et Montiers, 1986).

C'est pourquoi les estérases sont aussi nécessaires pour une

hydrolyse complète du xylane. Les estérases sont classifiées selon la

spécificité de leur substrat. Les acétylxylanestérases peuvent être

classifiées sensu-stricto comme des acétylestérases. Les estérases

agissant sur le groupe phényl appartiennent à la classe des

Les appellations d'acétylxylanestérase et d'acéty lestérase

restent souvent confuses: les estérases qui excisent le groupe

acétylé du polymère xylane sont des vrais acétylxylanestérases et

seraient au moins partiellement différentes des acéty lestérases

moins spécifiques (Smith et al., 1991)

La production d'acétylxylanestérases par plusieurs

champignons hémicellulolytiques a été rapportée par Biely et al.

(1985c). Poutanen et Sundberg (1988) ont purifié une

acétylestérase (PM 45 kDa par SDS ou 67 kDa par gel de filtration) à

partir de Trichoderma reesei. Cette activité a été séparée en deux

isoenzymes (pl 6,8 et 6,0). Quatre activités estérases de pl 3,6 à 3,9

ont été purifiées à partir d'un Aspergillus niger (Iwai et al., 1983).

Les actinomycètes produisent des estérases. Trois

acétylxylanestérases et une acétylestérase ont été détectées de

Streptomyces olivochromogene (Johnson et al., 1988b). Différents

Streptomyces et certaines bactéries des rumens sont rapportés

comme sécrétant des acétylxylanestérases (Smith et al., 1991). Ces

enzymes faciliteraient la digestion des substrats lignocellulosiques

en éliminant les groupes acétylés.

Biely et al. (1986) ont démontré que l’hydrolyse de

l'acétylxylane par la xylanase seule est extrêmement lente.

Lorsqu'il y a une combinaison des activités xylanase et

acétylestérase, cette hydrolyse devient nettement importante.

1.2.5.6. g-Glucuronidases

Les groupements 4-o-méthylglucuroniques forment un des

substituants majeurs du xylane du bois. Des ponts esters entre

l'acide uronique et la lignine constituent l'une des liaisons les plus

fréquentes entre les parois cellulaires de ces polymères. Leur

présence limite considérablement l'hydrolyse du polymère par les

xylanases. Les résidus 4-o-glucuroniques et 4-o-méthyl-D-

glucuroniques sont liés à la chaîne (3-D-xylopyranoside en position

C2 et le degré de substitution dépend de la source d’hémicellulose.

Les groupes substitués sont libérés du polymère grâce à

l'action de l'a-glucuronidase. L'existence de l'a-glucuronidase

comme représentant d'une activité distincte au sein de la famille

des enzymes xylanolytiques a été démontrée. Néanmoins, elle reste

l'enzyme la moins étudiée du système. Ceci serait dû à la complexité

du dosage enzymatique; les sucres résultant de l'hydrolyse devant

être convertis en oximes silylés et analysés par chromatographie en

phase gazeuse (Fontana et al., 1988).

Les méthodes pour la quantification de l'activité

glucuronidase sont adaptées au substrat utilisé. Par exemple, le 4-

o-méthyl-D-glucurono arabinoxylobiose est le substrat spécifique

de l'enzyme é'Af^aricus hisporus (Puis et al., 1987) et le 4-o-

méthyl-D-glucurono arabinoxylitol de Tyramyces palustris

(Ishihara et Shimizu, 1988). Le p-nitrophenyl-a-glucuroside a aussi

été suggéré pour le dosage de l'a-glucuronidase, mais reste parfois

indifférent à l'action de l'enzyme. Par exemple, le surnageant de

Strepromyces olivochromogene qui a montré une activité

significative envers le substrat naturel (son de blé) est faiblement

actif vis à vis de ce substrat synthétique (Fontana et al., 1988). Le

résultat de différents groupes de recherche ne sont pas toujours

comparables et certaines observations qui semblent être

contradictoires au premier abord peuvent s'expliquer par la

différence de substrat utilisé.

La présence d'acides uroniques libre dans les cultures des

microorganismes sur xylane suggère la présence d'activité a-

glucuronidase. Ceci a été démontré chez deux champignons

(Poutanen et al., 1986) et un Strepromyces (MacKenzie et al.,

1987). La présence d'une telle enzyme chez les actinomycètes a été

montrée dans le milieu de culture de Strepromyces

olivochromogene et Strepromyces flavogriseus 45-CD (Johnson et

al., 1988a) mais le pic de production déclinait rapidement suggérant

que l'activité enzymatique est instable ou que des changements

physiologiques durant la croissance entraînent sa diminution.

Agaricus hisporus et Pleurotus ostreatus (deux champignons

d'a-glucuronidase; ces deux champignons ne produisant par contre que

peu d'activité xylanase et P-xylosidase (Schmidt et al., 1979).

Puis et al. (1987) ont purifié à partir A'Agaricus bisporus une

a-glucuronidase de haut poids moléculaire (PM 450 kDa). L'enzyme

qui agit en synergie avec la xylanase libère l'acide

4-o-méthylglucuronique à partir de xylooligomères substitués. Une a-

glucuronidase de poids moléculaire 91 kDa a été purifiée à partir de

Trichoderma reesei (Siika-aho et al., 1994). Le Clostridium

thermocellum est déficient en activité a-glucuronidase; les

xylooligomères substitués en acide uronique s'accumulent dans le

liquide de fermentation alors que les xylooligomères neutres

extraits de bois de bouleau sont digérés (Dekker, 1983).

La production des enzymes du système xylanolytique à

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