Preparo de soluções-padrão

As soluções-padrão estoque dos agrotóxicos estudados, na concentração de 1000 mg L-1, foram preparadas pela solubilização de cada padrão analítico em metanol. As demais soluções foram preparadas a partir da diluição das soluções-padrão estoque, com o mesmo solvente, e armazenadas em geladeira à temperatura de aproximadamente 4 °C.

29

2.2.4 Síntese do sorvente Si-Al(PMTDS)

A fase polimérica poli(metiltetradecilsiloxano) imobilizada termicamente sobre sílica aluminizada, Si-Al(PMTDS), sintetizada por Renata Cristiano Nome, aluna de doutorado do grupo do Laboratório de Pesquisa em Cromatografia Líquida (LABCROM), do Instituto de Química da UNICAMP, orientada pela professora doutora Carol Hollingworth Collins, foi empregada para verificar a possibilidade de aplicação como sorvente no preparo de amostra, utilizando a técnica por dispersão de matriz em fase sólida. No preparo deste material, foram utilizados os mesmos materiais e procedimentos para a síntese de fase estacionária empregada em cromatografia líquida de alta eficiência realizada no trabalho de doutorado da aluna. No entanto, foi necessária a utilização de sílica de maior tamanho de partícula.

2.2.4.1 Preparo do suporte

O preparo do suporte de sílica aluminizada, Si-Al, foi adaptado do procedimento descrito por Faria et al. (2005), utilizado na síntese de suporte de sílica zirconizada.

Inicialmente, certa quantidade de sílica, com tamanho de partícula de 35-70 µm e tamanho de poro 6 nm, contida em um frasco, foi colocado em estufa a 140 °C por 24 horas para ativação de sua superfície. Após este tempo, o frasco contendo sílica ativada foi colocado em dessecador até atingir a temperatura ambiente. A cada síntese, 1,00000 g de sílica ativada foram adicionados ao tubo de reação de 50 mL de capacidade contendo solução constituída por 3,70000 g de isopropóxido de alumínio dissolvidos em 15 mL de tolueno anidro. Após agitação em vórtex por 10 minutos e ultrassom por 20 minutos, a mistura foi colocada num banho termostático a 40 °C durante três horas, sendo que a cada 15 minutos a mesma era retirada do banho e agitada em vórtex por 30 minutos. Após o período da reação, a solução foi agitada em vórtex e centrifugada por 20 minutos a 6000 rpm, o sobrenadante foi descartado e o sólido resultante submetido a cinco etapas sucessivas de lavagem com tolueno anidro, para a remoção de resíduos orgânicos. Cada etapa de lavagem consistiu da adição de 15 mL de solvente anidro, agitação em vórtex, centrifugação por 20 minutos a 6000 rpm

30

e descarte do sobrenadante. Em seguida, o material foi seco sob fluxo de gás nitrogênio, sendo adionados posteriormente 15 mL de solução aquosa de ácido nítrico, 10-3 mol L-1, para hidrólise dos grupos alcóxidos residuais do sólido. A mistura foi agitada em vórtex, centrifugada por 20 minutos a 6000 rpm e o sobrenadante descartado. A parte sólida foi lavada novamente, desta vez com água deionizada. Neste caso, cada lavagem consistiu da adição de 15 mL de água, agitação em vórtex, centrifugação por 20 minutos a 6000 rpm e descarte do sobrenadante. Então, o sólido foi colocado em estufa a 100 °C por 12 horas, para secagem.

As Equações 2.1 e 2.2 sugerem as reações envolvidas no preparo do suporte.

n ≡ SiOH + Al(OCH(CH3)2)3 → (≡ SiO)nAl(OCH(CH3)2)3 - n + n(CH3)2CHOH

(≡ SiO)nAl(OCH(CH3)2)3 - n + (3 - n)H2O → (≡ SiO)nAl(OH)3 - n + (3 - n)(CH3)2CHOH

2.2.4.2 Sorção e imobilização térmica do polímero sobre o suporte

Inicialmente, em béquer contendo 15 mL de hexano foram adicionados 1,00000 g de sílica aluminizada,previamente ativada em estufa a 140 °C por 12 horas, sendo a mistura agitada em ultrassom por 10 minutos. Baseado em cálculos, determinou-se que a quantidade de 0,60000 g de poli(metiltetradecilsiloxano) seria necessária para o preenchimento dos poros da sílica. Portanto, 1,00000 g de polímero, quantidade em excesso, foram adicionados em outro béquer contendo 15 mL de hexano, sendo a mistura posteriormente agitada por 10 minutos, por agitação magnética. Em seguida, a solução de sílica aluminizada em hexano foi transferida para o béquer contendo o polímero também em hexano. A solução resultante foi agitada magneticamente por três horas. Após este tempo de reação, o béquer coberto com uma folha de alumínio perfurado para permitir a evaporação lenta do solvente, permaneceu na capela por seis dias para que ocorresse a auto-imobilização do polímero sobre a sílica aluminizada. Após reação de auto-imobilização, o material sorvente resultante, aproximadamente 2,00000 g, foi acondicionado em uma coluna de aço inoxidável (150 x 100 mm), conectada a um forno tubular, de maneira a passar fluxo de nitrogênio através da

(2.1)

31

coluna, submetida a tratamento térmico a 100 °C por 12 horas. Após imobilização térmica do polímero sobre suporte, um tubo de aço inoxidável contendo o material sintetizado foi conectado a uma bomba cromatográfica e a um forno para a extração do polímero não imobilizado, passando hexano a 0,5 mL/min, a 50 °C por quatro horas. Após a extração, o sorvente foi seco sob fluxo de gás nitrogênio e reservado para ser utilizado no preparo de amostra.

A Figura 2.1 apresenta a estrutura do polímero poli(metiltetradecilsiloxano).

Figura 2.1 – Estrutura do poli(metiltetradecilsiloxano) (m = 13 e n: monômeros).

2.2.5 Equipamentos e instrumentos

Foram utilizados multiprocessador (Faciclic, Arno), balança analítica, com precisão de 5 casas decimais (CP225D, Sartorius), micropipetas de 0,50 - 10,00 µL, 10,0 - 100,0 μL, 100 - 1000 μL e 500 - 5000 μL (Eppendorf Research), sistema de filtração à vácuo de vidro, bomba de vácuo (N° WP6111560, Millipore), sistema de vácuo (Manifold, Supelco), estufa a vácuo (ADP21, Yamato), agitador vórtex (Genius 3, Ika), ultrassom (T14, Thornton), banho termostático (MA120, Marconi), centrífuga (Rotofix 32 A, Analítica), agitador magnético (752, Fisatom), forno tubular (10P-S, EDG) e sistema de extração composto por bomba cromatográfica (510, Waters) e forno com controle de temperatura (CH-150, Eldex Laboratories).

Nas análises cromatográficas foi utilizado o sistema composto por cromatógrafo a líquido (Alliance 2695, Waters), coluna cromatográfica analítica C18 (4 μm de diâmetro de partícula, 150 mm de comprimento, 3,9 mm de diâmetro interno) (Nova-Pak

CH3 Si O (CH2)m H₃C CH₃ Si H3C CH3 Si H3C CH3 O CH₃ n

32

C18, Waters), coluna de guarda (4 μm de diâmetro de partícula, 20 mm de comprimento, 3,9 mm de diâmetro interno) (Nova-Pak C18, Waters), e holder para coluna de guarda (20 mm de comprimento, 3,9 mm de diâmetro interno) (Waters) acoplado a um espectrômetro de massas sequencial (Micromass Quattro MicroTM API, Waters), triplo quadrupolo, com interface Z-spray por ESI (ESCiTM multi-mode ionization), operando nos modos positivo e de aquisição por MRM. Nitrogênio foi utilizado como gás do cone, de dessolvatação e para secar os extratos, e argônio como gás de colisão, a uma pressão constante de 2,45 x 10-3 mbar. A aquisição e o tratamento dos dados foram realizados utilizando-se o software MassLynx V. 4.1.