ESTUDOS SOBRE A EXISTÊNCIA DE CORRELAÇÃO ENTRE OS
DA-DOS BIOMÉTRICOS E O GRAU DE PATOGENICIDADE DE AMOS
TRAS HUMANAS DO
TRYPANOSOMA CRUZI
CHAGAS, 1809 *
Fr a n cisco M iguel Beida Neto * *
T r a b a l h a n d o c o m d e z a m o s t r a s d o T . c ru z i i s o l a d a s d e c a s o s h u m a n o s d e d o e n ç a d e C h a g a s , e m c o n d i ç õ e s t ã o p a d r o n i z a d a s q u a n t o o p o s s í v e l , r e a l i z a m o s u m e s t u d o m o r f o - b l o m é t r i c o e b i o l ó g i c o d a s d i v e r s a s a m o s t r a s v i s a n d o a v e r i f i c a ç ã o d a e x i s t ê n c i a d e c o r r e l a ç ã o e n t r e o s m e s m o s . P a r a t a n t o , t o m a m o s c o m o c r i t é r i o s d e a v a l i a ç ã o : a ) o s d a d o s b i o m é t r i c o s ; b ) a p a t o g e n i c i d a d e p a r a a n i m a i s d e l a b o r a t ó r i o ; c ) a i n f e c t i v i d a d e p a r a t r i a t o m i n e o s e d ) a c u l t i v a b i l i d a d e e m m e i o s l i q u i d o ( W a r r e n ) e d i f á s i c o ( N N N ) . O s r e s u l t a d o s o b t i d o s f o r a m c o n f r o n t a d o s e m o s t r a r a m a i n e x i s t ê n c i a d e c o r r e l a ç ã o e s t r e i t a e n t r e o s c a r a c t e r e s m o r f o l ó g i c o s , b i o l ó g i c o s e p a t o g ê n i c o s d a s d i v e r s a s a m o s t r a s e s t u d a d a s .
INTRODUÇÃO
D esde a s p rim e ira s o b se rv açõ es, te m -s e discutido so b re a s v a ria ç õ e s m o rfo ló g ic a s, p rin c ip a lm e n te d o c o m p rim e n to e la r g u r a , dos trip a n o s s o m o s iso la d o s t a n t o d e p o r ta dores d a d o e n ç a de C h a g a s co m o d e a n i m ais s ilv e s tre s . E s sa s o b se rv açõ es d e s p e r ta ra m a a te n ç ã o d o s in v e s tig a d o re s p a r a a possib ilid ad e d a c a ra c te r iz a ç ã o e sp e c ífic a das d iv e rsa s a m o s tr a s d e trip a n o s s o m o s a tra v é s d e s e u a s p e c to m o rfo ló g ic o , u m a vez que, a t é e n tã o , h a v ia d ific u ld a d e n a id e n tific a ç ã o dos trip a n o s s o m o s iso la d o s de a n im a is silv e s tre s co m o T . c r u z i .
O e s tu d o b io m é tric o do T . c r u z i fo i in i
ciado p o r D ias (10) e D ia s & F r e ita s (11). E stes a u to r e s e s ta b e le c e ra m a m e n s u ra ç ã o do c o m p rim e n to d o c o rp o e do fla g e lo , além d e c a lc u la re m o ín d ic e n u c le a r, ou seja, a re la ç ã o e n tr e a d is tâ n c ia q u e v a i d a e x tre m id a d e p o s te rio r d o c o rp o a o m e io do n ú c le o e a d is tâ n c ia e n tr e o m e io do n ú cleo e a e x tre m id a d e a n te r io r do co rp o ,
r e la ç ã o q u e d e fin e a p o siç ã o d o n ú c le o em u m d a d o fla g e la d o . D esd e e n tã o , te m -s e re a liz a d o o e s tu d o b io m é tric o d a s d iv e rsa s a m o s tr a s d e trip a n o s s o m o s p a r a a s u a c a ra c te riz a ç ã o , p r in c ip a lm e n te v is a n d o à id e n tific a ç ã o d a s m e :m a s co m o T . c r u z i .
P a r a t a n to , v á rio s m é to d o s tê m sid o e m p re g a d o s (7, 11, 16, 17, 18, 20), to d o s b a se a d o s n a m e n s u ra ç ã o d e d e se n h o s, o b tid o s p o r m ic ro p ro je ç ã o o u a tr a v é s d e c â m a r a c la r a , de trip a n o s s o m o s c o n tid o s e m e s fre - g a ç o s fix a d o s e c o ra d o s .
F lo c h e cols. (14) c o n c e b e ra m o ín d ic e n u c le a r m é d io e d ã o g ra n d e im p o rtâ n c ia ao re fe rid o ín d ic e , o m e sm o fa z e n d o Z ele- d o n & V ieto (2 1 )) q u e c o n c lu e m q u e a r e la tiv a c o n s tâ n c ia do m e sm o fa z co m q u e ele s e ja , p o r si só, c a p a z d e p e r m itir a d is tin ç ã o s e g u ra e n tr e d u a s esp écies p ró x im a s d e trip a n o s s o m o s : o T . c r u z i e o T . v e s p e r -t i l i o n i s .
B a r r e tto (4 ), a n a lis a n d o d e m o ra d a m e n - te o p ro b le m a d a id e n tific a ç ã o dos t r ip a - n c sso m o s co m o T . c r u z i , c o n c lu i d a n e c e s
-* T ra b a lh o realizad o , em p a rte , n o L ab o rató rio d e P a ra sito lo g ia d a F a c u ld a d e de M edicin a de R ib eiráo P re to . R esu m o d a te se de d o u to ra m e n to a p re se n ta d a à F a c u ld a d e d e F a rm á c ia e O do n to lo gia de A ra- r a q u a r a .
** P ro fessor A ssiste n te d o D e p a rta m e n to de C iências B iológicas d a F a c u ld a d e d e F a rm á c ia e O dontologia d e A ra ra q u a ra .
s id a d e de se re a liz a r u m e s tu d o c o n ju n to d a s c a r a c te r ís tic a s m o rfo ló g ic a s e b io ló g i c a s de u m a d e te r m in a d a a m o s tra , p a r a a id e n tific a ç ã o d a m e sm a co m ra z o á v e l m a r g em de s e g u ra n ç a .
E m t r a b a lh o re c e n te , F e rrio lli, B a rre to & C a rv a lh e iro (13) fa z e m u m a re v isã o d o p ro b le m a d a v a ria ç ã o d o s c a r a c te r e s b io - m étric0 3 d e d iv e rsa s a m o s tr a s do T . c r u z i ,
is c la d a s de c aso s h u m a n o s d e d o e n ç a de C h a g a s, e m o s tra m q u e e s te s c a ra c te re s , em p a r tic u la r o c o m p rim e n to t o ta l m é d io e o ín d lc s n u c le a r m é d io , v a ria m d e n tr o de lim ite s b em a m p lo s .
Z eletíón & V ieto (2 1 ), e m tr a b a l h o a n
te rio r, a v e n ta r a m u m a h ip ó te se , se g u n d o a q u a l h a v e ria u m a c o rre la ç ã o e n tr e o v a lo r do ín d ic e n u c le a r m é d io e o g r a u de v ir u lê n c ia de d e te r m in a d a a m o s tr a . A a d a p ta ç ã o d e ssa a m o s tr a a u m d e te rm in a d o h o sp s d e iro s e ria a c o m p a n h a d a de d im i n u iç ã o d a a g re s s iv id a d e e d a m ig ra ç ã o do n ú c le o p a r a a p a r te p o s te rio r do fla g e la d o , re s u lta n d o d a í u m a d im in u iç ã o d o ín d ic e n u c le a r m é d io ; a s s im se n d o , q u a n to m e n o r fosse o ín d ic e n u c le a r, t a n t o m e n o r se r ia a p a to g e n ic id a d e d a a m o s tr a . L e v a n d o a h ip ó te s e à s ú ltim a s c o n s e q ü ê n c ia s , h a v eria, n o ca so do T . c r u z i , a m o s tr a s (p o p u
laçõ es, r a ç a s ou s u b -e sp é c ie s? ) d iv e rsa s, c a - ra c te riz á v e is m o rf o - b io lo g ic a m e n te .
A co n tece, p o ré m , q u e F e rrio lli, B a r r e tto & C a rv a lh e iro (13) n e g a m a a s s e r tiv a de Z eled ón & V ieto (21), a p o n ta n d o u m f a to so b e ja m e n te c o n h e c id o : a a m o s tr a Y , de o rig e m h u m a n a , te m p e q u e n o ín d ic e n u c le a r m é d io (in fe rio r à u n id a d e ) e, n o e n ta n to , é d o ta d a de g ra n d e a g re s s iv id a d e p a r a a n im a is d e la b o r a tó rio . D e m a is, F u - n a y a m a (15), e s tu d a n d o d iv e rsa s a m o s tra s is o la d a s d e m o rc eg o s, m o s tro u q u e a s m e s m a s tê m p e q u e n o ín d ic e n u c le a r m é d io e sã o m u ito p a to g ê n ic a s p a r a c a m u n d o n g o s. P o r o u tro la d o , F e rrio lli, B a r r e tto & C a r v a lh e iro (13) a f ir m a m q u e u m a a m o s tr a iso la d a d o h o m e m , a a m o s tr a L ao s, te m m a io r ín d ic e n u c le a r m é d io e é p o u c o p a to g ê n ic a p a r a a n im a is de la b o ra tó rio .
S e g u n d o B r e n e r (5) e B r e n e r & C h ia ri ( 6), a s c a r a c te r ís tic a s d a in fe c ç ã o e x p e ri m e n ta l p e lo T . c r u z i e s tã o n a d e p s n d ê n c ia
d a c e p a d o p a r a s ita e o p o lim o rfism o s a n - g u íc o la te m sig n ific a d o bio ló g ico a in d a n ã o c la ra m e n te d e fin id o .
R ib siro (19), t r a b a lh a n d o co m a m o s tr a s do T . c r u z i iso la d a s d e ro e d o re s silv e stre s,
n ã o e n c o n tro u c o rre la ç ã o e n tr e os d a d o s
b io m é tric o s e o g r a u de a g re s s iv id a d e d a s r e fe rid a s a m o s tr a s .
D o e x p o .to , c o n c lu i-s e d a e x is tê n c ia de u m a g r a n d e v a ria ç ã o d o s c a r a c te r e s m o r- fológicos d a s d iv e rsa s a m o s tr a s do T . c r u z i ,
iso la d a s t a n t o d e c a so s h u m a n o s d e d o e n ç a de C h a g a s co m o d e a n im a is s ilv e s tre s . P o r c u tr o la d o , os c a r a c te r e s bioló g ico s, p rin c i- p a lm e n ts o g r a u d e p a to g e n ic id a d e d a s d i v e rs a s a m o s tra s , ta m b é m a p r e s e n ta m e n o r m e v a ria ç ã o . A d iv e rsid a d e de o p in iã o d o s v á rio s a u to r e s a re s p e ito d a v a ria ç ã o dos d a d o s b io m é tric o s e d o c o rre la c io n a m e n to d e ste s, p r in c ip a lm e n te do c o m p rim e n to t o t a l m é d io , d a la r g u r a m é d ia d o c o rp o e do ín d ic e n u c le a r m é d io , e o g r a u de v ir u lê n c ia de d e te r m in a d a a m o s tra , le v o u -n o s a o e s tu d o do a s u n to . A ssim , p ro p u s e m o -n o s a in v e s tig a r d iv e rs a s a m o s tr a s d o T . c r u z i ,
d e o rig e m h u m a n a , t a n to b io m é tric a com o b io lo g ic a m e n te , n a te n ta ti v a d e v e rific a r se a u m d e te rm in a d o a s p e c to m o rfo ló g ic o , d e fin id o p elo s d a d o s b io m é tric o s, c o rre s p o n d e u m c e rto c o m p o rta m e n to , d e fin id o p elo g r a u d e a g re s s iv id a d e d o p a ra s ito , p r o c u ra n d o , c o m isto , c o n tr ib u ir p a r a o e s c la re c im e n to d o p ro b le m a d a e x is tê n c ia ou n ã o de p o p u la ç õ e s, r a ç a s ou su b ssp é c ie s c a ra c te riz á v e is m o rfo -b io lo g ic a m e n te . M A TE R IA L E M ÉTO D O S
As a m o s tr a s d o T . c r u z i u s a d a s n a r e a
liz a ç ã o d e s te tr a b a lh o , f o ra m is o la d a s d e p o rta d o re s d e in fe c ç ã o c h a g á s ic a , a g u d a ou c rô n ic a , m e d ia n te o e m p re g o d e h e m o c u l- t u r a , x e n o d ia g n ó s tic o e in o c u la ç ã o d e t r i - p a n o sso m o s e m c a m u n d o n g o s b ra n c o s e r a to s W is ta r co m v in te d ia s d e id a d e . F o r a m a s s im c o n s e g u id a s :
1 — a m o s tr a P R E M IO — iso la d a e m c a -m u n d o n g o p o r in o c u la ç ã o d e s a n g u e , d e u m c a so a g u d o de in fe c ç ã o c h a g á s ic a p r o c e d e n te de U b e ra b a , M .G., e m 1962.
2 — a m o .t r a G .G . — is o la d a d e u m c a so c rô n ic o de d o e n ç a d e C h a g a s , a tr a v é s d e h e m o c u ltu r a , n o H . C . R ib e irã o P re to , S.P., e m 1967.
3 — a m o s tr a C .L .Z . — is o la d a d e u m c a so a g u d o de d o e n ç a d e C h a g a s , a tr a v é s d e h e m o c u ltu r a , p ro c e d e n te d e B a ta ta is , S . P . , e m 1969.
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5 — a m o stra C .M .S .P . — iso la d a d e c a so crô n ico d e d o e n ç a d e C h a g a s , a tra v é s d e h e m o c u ltu r a , n o H . C . R ib sirão P re to , S . P . , e m 1970. 6 — a m o s tra A D E R A SI — iso la d a a tr a v é s
de x e n o d ia g n ó s tic o a p lic a d o e m p o r ta d o r de in fe c ç ã o c h a g á s ic a c rô n ic a , de G o ia n a ,G .O ., e m 1971.
7 — a m o s tra E . F . S . — iso la d a a tra v é s de h e m o c u ltu ra , d e u m c a so a g u d o de d o e n ç a d e C h a g a s , p ro c e d e n te d e U b erab a, M .G ., e m 1972.
8 — a m o s tra J . L . P . — is o la d a a tr a v é s de h e m o c u ltu ra , de u m c a so de in f e c ção c h a g á s ic a c rô n ic a , p ro c e d e n te de G o ia n a , G .O ., e m 1972.
9 — a m o s tra J . B . S . — iso la d a de caso crô n ico de d o e n ç a de C h a g a s , a tr a v é s de h e m o c u ltu r a , n o H . C. R ib e irã o P reto , S .P ., e m 1972.
10 — a m o s tra L .R .O . — is o la d a a tra v é s de h e m o c u ltu r a , d e u m caso d e i n fecção c h a g á s ic a c rô n ic a , n o H . C . R ib e irã o P r e to , S . P . , e m 1972.
U m a vez iso la d a s , a s a m o s tr a s fo ra m m a n tid as r e g u la r m e n te a tr a v é s d e s u b in o - culações de s a n g u e , p o r v ia in tr a p e n to n e a l, em c a m u n d o n g o s jo v e n s .
Como e le m e n to s d e e s tu d o d a s a m o s tras, lev am o s e m c o n s id e ra ç ã o o s d iv e rso s critérios d is c u tid o s e a c e ito s co m o f u n d a m entais p o r B a r r e tto (3, 4 ) . P a r a t a n to , usam os os m é to d o s d e s c rito s p o r F e rrio L i & B a rre tto (12) e A lb u q u e rq u e & B a r r e tto (1, 2) p a ra : a) o b te n ç ã o d o s d a d o s b io m é tri cos, em p a r tic u la r o c o m p rim e n to t o ta l m é dio, a l a r g u r a m é d ia e o ín d ic e n u c le a r m é dio; b) v e rific a ç ã o d a p a to g e n ic id a d e p a r a an im ais de la b o ra tó rio , c a m u n d o n g o s e r a tos, com m u ltip lic a ç ã o n o s te c id o s d esses an im ais so b a fo r m a d e le is h m â n ia s ; c) observação de in fe c tiv id a d e p a r a tr ia to m í- neos com d e se n v o lv im e n to d e tr ip a n o s s o mos m e ta cíc lico s n o in te s tin o p o s te rio r d e s ses a n im a is; d ) c o m p ro v a ç ã o d a c u ltiv a b i- lidade em m e io d ifá s ic o (N N N )) e líq u id o (W a rre n ). T o d a s a s o b se rv açõ es f o ra m d e vidam ente ta b e la d a s e c o n fro n ta d a s , v i sando a p o ssib ilid a d e de c o rre la ç ã o m o rfo - -biom étrica e b io ló g ic a .
RESULTADOS E D ISC U SSÃ O
M o r f o l o g i a e b i o m e t r i a d o s t r i p a n o s s o m o s s a n g u í c o l a s : — O a s p e c to m o rfo ló g ic o
d o s e le m e n to s s a n g u íc o la s d a s d iv e rsa s a m o s tr a s e s tu d a d a s a p re s e n to u - s e a lg o v a riá v e l, p o ré m co m a s c a r a c te r ís tic a s m a r c a n te s d o T . c r u z i : fla g e la d o re la tiv a m e n te
p e q u e n o , a p r e s e n ta n d o - s e co m a s p e c to de C e S itá lic o s, n ú c le o ovóide ou re n ifo rm e s itu a d o n o te rç o m é d io d o co rp o , c in e to - p Ias to v o lu m o so e de lo c a liz a ç ã o te r m in a l ou s u b te rm in a l, m e m b r a n a o n d u la n te d e lic a d a e co m p e q u e n o n ú m e ro de o n d u la ções e fla g e lo liv re re la tiv a m e n te c u rto . O b se rv a m o s trip a n o s s o m o s d elg a d o s, i n t e r m e d iá rio s e la rg o s . D e u m m o d o g e ra l, em tc d a s a s a m o s tr a s h á u m c e rto p o lim o rfis - m o , e m b o ra e m d e te r m in a d a a m o s tr a h a j a p re d o m in â n c ia d e u m a ou de o u tr a fo rm a . A ssim , n a s a m o s tr a s d e s ig n a d a s E . F . S . e G .G . h á u m n ítid o p re d o m ín io d e fo rm a s lc n g a s e d e lg a d a s ao la d o de a lg u m a s de l a r g u r a in te r m e d iá r ia ; j á n a s a m o s tra s F R E M IO , B . P .O . e J . L . P . e n c o n tra m o s e le m e n to s de m a io r l a r g u r a .
O e s tu d o b io m é tric o , b a s e a d o n a m ic ro - m e tr ia d e 30 trip a n o s s o m o s d e c a d a a m o s t r a , fo rn e c e u os re s u lta d o s s u m a ria d o s n o Q u a d ro I.
O s re s u lta d o s a p re s e n ta d o s n e sse Q u a d ro m o s tra m , n a s d iv e rsa s a m o s tra s , v a r ia ções b e m a m p la s do c o m p rim e n to to ta l m é d io , la r g u r a m é d ia d o c o rp o e ín d ic e n u c le a r m é d io , e m g e ra l d e n tr o d o s lim ite s de v a ria ç ã o a m o s tr a i o b se rv a d o s p o r F e rrio lli, B a r r e tto & C a rv a lh e iro (1 3 ). V e rific a m o s v a lo re s e n tr e os s e g u in te s lim ite s : c o m p ri m e n to to t a l m é d io d e 17,27/t (a m o s tra C . M . S . P .) a 22,67/í ( a m o s tr a J . B . S . ) ; l a r g u r a m é d ia d o c o rp o d e 1 ,16/t (a m o s tra
E . F . S . ) a 3,49/j. ( a m o s tr a B . P . O . ) e ín d ic e n u c le a r m é d io d e 0,90 (a m o s tr a G . G . ) a 1,32 ( a m o s tr a J . B . S . ) .
P a t o g e n i c i d a d e p a r a a n i m a i s d e l a b o r a t ó r i o : — T o d a s a s a m o s tr a s iso la d a s fo ra m
c a p a z e s d e i n f e c ta r os a n im a is in o c u la d o s q u e r a u a n d o u tiliz a m o -n o s de f o rm a s m e - ta c íc lic a s o riu n d a s d e tria to m ín e o s o u d e f o rm a s s a n g u íc o la s p ro v e n ie n te s d e a n i m a is in f e c ta d o s , m o s tr a n d o - s e p a to g ê n ic a s p a r a c a m u n d o n g o s b ra n c o s jo v e n s, e m b o ra co m g r a u v a riá v e l d e a g re s s iv id a d e com o a p re s e n ta m o s n o Q u a d ro I I .
RE SU LT A D O S D A S M EN SU RA ÇÕ ES F E IT A S SO B R E T R IP A N O SS O M O S SA N G U ÍC O LA S D E CA M U N D O NG O S IN O C U LA D O S COM A S D I V ERSA S A M O ST R A S D O T . C R U Z I .
M e d id a s C o m p r. do D is tâ n c ia D is tâ n c ia C o m p r. do C o m p r. L a r g u r a do D iâ m e tro Ín d ic e m é d ia s F lag elo P N N A C orpo T o ta l C o rp o C in e to p l. N u c le a r A m o stra s \ ( /• ) ( m) ( /í) (n) (i i) (/» ) ( jtí ) P N /N A
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dias após a in o c u la ç ã o . O p e río d o p r e p a te n - te médio, c a lc u la d o p a r a a s d iv e rsa s a m o s tras, v ario u e n tr e os lim ite s d e 2.,90 d ia s
(am ostra J .B .S .) e 4,20 d ia s ( a m o s tra ADERASI).
A p a ra s ite m ia , o b se rv a d a n o s d iv e rso s anim ais in o c u la d o s co m a s d iv e rsa s a m o s tras, a p re s e n to u v a ria ç õ e s b e m a m p l a s . E m dada a m o s tra v e rific a m o s ín d ic e s p a r a s itê - micos m á x im o s d a o rd e m de 50 fla g e la d o s por m m 3 d e s a n g u e e u m a s é rie de v a lo res cre sc e n te s a té a tin g ir , e m d e te r m in a d a am ostra, n ív e is a ltís s im o s d e m a is d e 21.000 tripanossom os p o r m m 3 d e s a n g u e . V ale assin alar, a in d a , q u e d e n tr e os a n im a is in o culados c o m u m a m e s m a a m o s tr a d o T . c r u z i e n c o n tra m o s .níveis p a r a s itá r io s b a s
tan te v a riá v e is. A ssim , co m re s p e ito à p a rasitem ia m á x im a , e n c o n tr a m o s ín d ic e s, de um m odo g e ra l, b a ix o s p a r a a lg u m a s a m o s tras, ta is co m o a P R E M IO e A D E R A SI, q u e não a tin g ira m , e m n e n h u m a n im a l in o - culado, a c if r a d o s 500 fla g e la d o s p o r m m 3 de san g u e ; e m o u tr a s a m o s tra s , co m o a G .G ., a C .L .Z ., a L .R .O . e a B . P . O ., apenas a lg u n s c a m u n d o n g o s tiv e r a m p a r a sitem ia n o n ív e l d o s 1.000 trip a n o s s o m o s por m m 3 de s a n g u e ; a in d a , a s a m o s tra s C .M .S .P . e E .F .S . a p r e s e n ta r a m , de u m modo g e ra l, p a r a s ite m ia s m á x im a s s u p e rio res a 1.000 p a r a s ita s p o r m m 3 d e s a n g u e e, fin a lm e n te , a s a m o s tr a s J . L . P . e J . B . S . d e m o n s tra ra m n ív e is p a ra s itê m ic o s m á x i mos g e ra lm e n te s u p e rio re s a 5 .000 t r i p a nossom os p o r m m 3 d e s a n g u e e, e m a lg u n s an im ais, a tin g ir a m v a lo re s a c im a d o s ___ 10.000, 15.000 e 20.000 p a r a s ito s p o r m m 3 de san g u e .
O d ia d a p a r a s ite m ia m á x im a ta m b é m variou d e a m o s tr a p a r a a m o s tr a e m e sm o e n tre os v á rio s a n im a is in o c u la d o s co m um a d a d a a m o s tr a . C u m p re r e s s a lta r , e n tre ta n to , q u e e m a lg u m a s a m o s tra s , co m o a G .G ., a E . F . S . e a J . L . P . , h o u v e p r e dom ín io d e p a r a s ite m ia s m á x im a s p re c o ces, e n q u a n to e m o u tra s , co m o a P R E M IO , a C .L .Z . e a C . M . S . P ., os n ív e is p a r a s i têm ico s m á x im o s o c o rre ra m ta r d ia m e n te . Os d ia s d a p a r a s ite m ia m á x im a o s c ila ra m e n tre os lim ite s d e 7 e 69 d ia s a p ó s a in o c u la ç ã o .
O s tip o s d e c u rv a s p a r a s itê m ic a s v a r ia ra m m u ito . D e u m m o d o g e ra l, c a ira m d e n tro dos e s q u e m a s e sta b e le c id o s p o r R i b eiro (19) e F u n a y a m a (1 5 ): 1) a sc e n s ã o e q u e d a re g u la re s ; 2 ) a s c e n s ã o r e g u la r e
q u e d a ir r e g u la r ; 3) a s c e n s ã o ir r e g u la r e q u e d a re g u la r ; 4) a s c e n s ã o e q u e d a ir r e g u la r e s e 5) c o m p le ta ir r e g u la r id a d e . C o n v em o b s e rv a r q u e n ã o 'h á tip o d e c u rv a p e c u lia r p a r a e s ta o u a q u e la a m o s tra , se b em q u e e m a lg u m a s a m o s tr a s o b se rv a m o s n í tid o p re d o m ín io d e d e te rm in a d o tip o de c u rv a p a r a s itê m ic a . F in a lm e n te , e n tr e os a n im a is in o c u la d o s co m u m a d a d a a m o s t r a , tiv e m o s a o p o r tu n id a d e d e v e rific a r a té q u a tr o tip o s d is tin to s d e c u rv a s p a r a s i tê m ic a s .
D as d ez a m o s tra s in v e s tig a d a s , e m q u a t r o d e la s : G . G . , E . F . S ., J . L . P . e J . B . S . n ã o c o n se g u im o s d e te r m in a r a d u ra ç ã o d a fa s e a g u d a , p o is os c a m u n d o n g o s in o c u la dos n ã o c o n s e g u ira m a tin g ir a c ro n ic id a - de, v in d o a m o r r e r p re c o c e m e n te q u a n d o a in d a e x ib ia m fla g e la d o s n a c o rre n te c ir c u la tó r ia . R e s s a lta m o s q u e a d u ra ç ã o d a fa s e a g u d a m o s tro u -s e v a riá v e l c o n fo rm e a a m o s tr a e s tu d a d a e, ta m b é m , d e a n im a l p a r a a n im a l d e n tr e os in o c u la d o s co m u m a m e sm o a m o s tr a . E n tr e ta n to , de u m m odo g e ra l, p o d e m o s c o n s id e ra r a fa s e a g u d a d a s v á r ia s a m o s tr a s r e la tiv a m e n te lo n g a , osci la n d o e n tr e 30 e 89 d ia s a p ó s a in o c u la ç ã o .
O ín d ic e d e le ta lid a d e a p re s e n to u - s e v a riá v e l: e m q u a tr o a m o s tra s fo i d a o rd e m de 100,00% — G . G . , E . F . S . , J . L . P . e J . B . S . . — e o b se rv a m o s v a lo re s d e c re s c e n te s de 93,33% — L .R .O . — , 50,00% — C .M .S .P . — , 40,00% — B . P .O . — , 13,33% — A D E- R A S I — , 6,66% — C .L .Z . — , a té u m ín d ic e n u lo p a r a a a m o s tr a P R E M IO , e m q u e t o d o s os c a m u n d o n g o s in o c u la d o s c o n se g u i r a m so b re v iv e r à in fe c ç ã o .
P a r a s i t i s m o t i s s u l a r : — F o ra m e x a m i
n a d o s te c id o s de v á rio s a n im a is e x p e rim e n ta lm e n te in f e c ta d o s e s a c rific a d o s n a fa se a g u d a d a in fe c ç ã o . E m to d a s a s a m o s tra s in v e s tig a d a s e n c o n tr a m o s n in h o s de le ish - m â n ia s , p r in c ip a lm e n te n o c o ra ç ã o . N o s s a s o b se rv açõ es c o n tin u a m , n o s e n tid o de e s tu d a r m a is d e ta lh a d a m e n te a in te n s id a d e d e s te p a r a s itis m o n a s v á r ia s a m o s tra s .
I n f e c t i v i d a ã e p a r a t r i a t o m í n e o s : — É
f a to c o n h e c id o e tid o co m o u m d o s c a r a c te r e s d o T . c r u z i , e m b o ra n ã o lh e s e ja e x
clu siv o , a c a p a c id a d e de i n f e c ta r tr ia to m í n e o s n o s q u a is se m u ltip lic a p ro d u z in d o fo rm a s m e ta c íc lic a s n o in te s tin o p o ste rio r. E n tr e ta n to , e s s a c a p a c id a d e v a r ia se g u n d o a a m o s tr a do T . c r u z i e a e sp écie do in s e to
CA R A C TER ES G E R A IS DA IN FEC Ç Ã O D E CA M UNDONGOS COM A S A M O STRA S D O T . C R U Z I .
C a ra c te re s d a in fe c ç ã o
A m o stra s
% de in fe c ç ã o
P e río d o p r e p a te n te (d ia s)
L im ite d e v a ria ç ã o d a p a r a s ite m ia m á x im a
D u ra ç ã o d a fa s e a g u d a
T a x a de L e ta lid a d e
m ín im o m á x im o m éd io n ? /m m 3 d ia (d ia s) (% )
P R E M IO ... 100,00 3 5 3,53 49 — 322 219 _ 430 35 — 61 0,00 G . G ... 100,00 3 6 3,36 70 — 2303 7? — 149 — 100,00 C .L .Z ... 100,00 3 5 3,46 91 — 1267 12° _ 699 48 — 89 6,66 B . P . O ... 100,00 3 6 4,06 210 — 4410 199 _ 389 37 — 59 40,00 C . M . S . P ... 100,00 3 5 3,36 70 — 5670 139 _ 459 38 — 60 50,00 A D E R A SI ... 100,00 3 6 4,20 35 — 252 179 — 369 30 — 51 13,33 E . F . S ... 100,00 2 5 3,00 406 — 4515 79 — 169 — 100,00 J . L . P ... 100,00 3 4 3,13 952 — 17031 79 — 289 — 100,00
Jan.-Fev., 1974
Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
33
cru zi, h a v e r d is p o n ib ilid a d e d e n in f a s n o
In setário d o L a b o ra tó r io d e P a ra s ito lo g ia da F a c u ld a d e de M e d ic in a d e R ib e irã o P r e to, p ro c u ra m o s r e a liz a r, ta m b é m , p ro v a s de in fe c tiv id a d e d a s m e sm a s , f r e n te à s am ostras e m e stu d o . N o x e n o d ia g n ó s tic o foram u sa d o s, p a r a c a d a a m o s tr a , lo te s d e 30 tria to m ín e o s d e c a d a e sp écie e os re s u l tados o b tid o s, tr a d u z id o s e m ín d ic e s d e i n fecção são a p re s e n ta d o s n o Q u a d ro I I I .
Esses re s u lta d o s a te s ta m o b o m d e s e n volvim ento d a s d iv e rs a s a m o s tr a s d e r .
cr u zi n a s esp écies d e tr ia to m ín e o s u tiliz a
das e a e x is tê n c ia d e v a ria ç õ e s i n t r a - -am ostrais e in tra - e s p e c íf ic a s , e m b o ra a s diferenças o b s e rv a d a s n o ín d ic e d e in f e c ção n ão te n h a m sid o tã o a m p la s q u a n to a s obtidas p o r R ib e iro (19) e F u n a y a m a (15) em a m o stra s iso la d a s de 'h o sp ed eiro s silv e s tres.
. O c o n fro n to d o s ín d ic e s d e in fe c ç ã o p a r a triatom íneos e os d a d o s b io m é tric o s d a s d i versas a m o s tra s , d e m o n s tra m a in e x is tê n cia de c o rre la ç ã o e n tr e a c a p a c id a d e q u e tem d e te rm in a d a a m o s tr a d e i n f e c ta r t r i a - tomíneos e os seu s c a r a c te r e s b io m é tric o s. Assim, o P . m e g i s t u s é in f e c ta d o co m a
mesma fa c ilid a d e p o r to d a s a s a m o .t r a s e s tudadas que se a p r e s e n ta r a m b a s ta n t e d i versas q u er n o e s tu d o b io m é tric o , q u e r n a verificação d a a g re ssiv id a d e .
C u l t i v à b i i i d a ã e : — O c o m p o rta m e n to
das v árias a m o s tra s do T . c r u z i e m m e io s
artificiais líq u id o s (W a rre n ) ou se m isó li- dos (N N N ) te m sid o c o m u m , isto é, to d a s as a m o stra s in v e s tig a d a s f o r a m c u ltiv a d a s facilm ente e n o s re p iq u e s su cessiv o s, r e a li zados em in te rv a lo s re g u la re s , o b ;e rv a m o s sempre b o m c re s c im e n to .
C o r r e la ç ã o e n t r e o s c a r a c t e r e s ã a i n f e c çã o : — A n a li;a n d o -s e os r e s u lta d o s obt'.dos
no estud o d a in fe c ç ã o p a r a os v á rio s a n i mais in o c u la d o s co m a s d iv e rsa s a m o s tra s do T . c r u z i , p o d e m o s a f ir m a r d a e x is tê n c ia
de c o rrelaçã o e n tr e os c a r a c te r e s d a in f e c ção em a lg u m a s a m o s tr a s . A ssim , n a am ostra J . B . S . v e rific a m o s u m a in fe c ç ã o c ara c te riz a d a p o r u m p e río d o p r e p a te n te médio d e c u r ta d u ra ç ã o , p a r a s ite m ia s a l tíssim as e a l t a t a x a d e le ta lid a d e . P o r o u tro lado, a s in fe c ç õ e s p ro d u z id a s p e la am ostra A D E R A SI c a r a c te r iz a m - s e p o r u m período p r e p a te n te m a is lo n g o , b a ix a s p a rasitem ias e p e q u e n a t a x a de le ta lid a d e .
T al c o rre la ç ã o , e n tr e ta n to , e m o u tr a s am ostras n ã o e x is te . A ssim , a s a m o s tr a s
C .M .S .P . e G .G . a p r e s e n ta r a m p e río d o p r e p a te n te m é d io ig u a is, a lta s p a r a s ite m ia s e t a x a de le ta lid a d e d e 50,00% p a r a a a m o s t r a C .M .S .P . e p a r a s ite m ia s m a is b a ix a s e 100,0 0 % d e le ta lid a d e p a r a a a m o s tr a G .G .
E sse s re s u lta d o s v ã o d e e n c o n tr o à s a firm a ç õ e s d e D a r m a n (9) a re s p e ito d a in e x is tê n c ia d e c o rre la ç ã o e s tr e ita e n tr e a v iru lê n c ia , tr a d u z id a p e la ta x a d e le ta li d a d e e a in te n s id a d e d o p a ra s itis m o s a n g u ín e o .
C o r r e l a ç ã o e n t r e a s c a r a c t e r í s t i c a s m o r -f o l ó g i c a s e o g r a u d e p a t o g e n i c i d a d e : —
É f o ra d e d ú v id a s a im p o r tâ n c ia d o s c a r a c te r e s m o rfo -b io m é tric o s q u a n d o e s tu d a d o s c o n ju n ta m e n te co m o u tro s c rité rio s b io ló gicos, p r in c ip a lm e n te o g r a u de a g re ssiv i d a d e p a r a a n im a is d e la b o ra tó rio , p a r a a c a ra c te r iz a ç ã o d a s d iv e rsa s a m o s tra s d e trip a n o s s o m o s (1, 2, 3, 4, 8 , 12, 15, 1 9 ). P o r o u tro la d o , a e x is tê n c ia de c o rre la ç ã o e n tr e e s te s c rité rio s d e a v a lia ç ã o e m u m a d e te r m in a d a a m o : t r a é, a in d a , a s p e c to p assív el de in v e s tig a ç ã o , u m a vez q u e h á d is c o rd â n c ia n o s a c h a d o s e in te rp re ta ç õ e s d o s v ário s A u to re s (3, 5, 6, 13, 14, 15, 19, 21) q u e se d e d ic a m ao a s s u n to .
N a s a m o s tr a s d o T . c r u z i , d e o rig em
h u m a n a , p o r n ó s e s tu d a d o s , o b se rv am o s u m a g r a n d e v a ria ç ã o d o s c a r a c te r e s m o r- fológ ico s e b io ló g ico s c o n fo rm e os r e s u lta dos a p r e s e n ta d o s . E n c o n tra m o s fo rm a s c o n s id e ra d a s d e lg a d a s, in te r m e d iá r ia s e l a r g a s . P e r o u tro la d o , o b se rv a m o s a m o s tra s b a s ta n te a g re ;s iv a s , p o u c o v ir u le n ta s ou d e s titu íd a s d e a g re s s iv id a d e .
T o m a n d o os v a lo re s o b tid o s p a r a a l a r g u r a m é d ia do c o rp o dos trip a n o s s o m o s d a s d iv e rsa s a m o s tra s , v e rific a m o s q u e os m e s m o s n ã o a p r e s e n ta m c o rre la ç ã o e s tr e ita c o m a a g re s s iv id a d e d a s a m o s tra s , p o is a q u e la s q u s a p r e s e n ta r a m p re d o m n â n c ia d e e le m e n to s d e lg a d o s ( a m o s tr a E . F . S . — l a r g u r a m é d ia = 1,16 a m o s tr a G .G . — la r g u r a m é d ia = 1,30 /i) m o s tr a r a m - s e tã o
p a to g ê n ic a s p a r a o c a m u n d o n g o q u a n to as q u e e x ib ira m g ra n d e q u a n tid a d e d e fo rm a s la r g a s (a m o s tr a J . B . S . — la r g u r a m é d ia = 2,18 n \ a m o s tr a J . L . P . — la r g u r a m é d ia =
2,27 fi) . D em ai:-, a a m o s tr a B . P . O ., q u e
VARIAÇÕES D O S ÍN D IC E S D E IN FEC Ç Ã O E X P E R IM E N T A L SE G U N D O A E SP É C IE D E TR IA T O M 1N E O S E A A M O STR A D O T . C R U Z I .
T ria to m ín e o s
A m o stra s d o T . c r u z i
ín d ic e s de in fe c ç ã o de tr ia to m ín e o s
V a ria ç ã o in te r -a m o s tr-a l
P . m e g i s t u s T . v i t t i c e p s T . s ó r d i d a R . n e g l e c t u s
P R E M IO ... 100,00 100,00 93,33 100,00 93,33 — 100,00 G . G ... 90,00 83,33 86,66 83,33 83,33 — 90,00 C .L .Z ... 100,00 100,00 73,33 100,00 73,33 — 100,00 B . P . O ... 100,00 86,66 80,00 93,33 80,00 — 100,00 C . M . S . P ... 100,00 100,00 86,66 90,00 86,66 — 100,00 A D E R A SI ... 90,00 100,00 86,66 86,66 86,66 — 100,00 E . F . S ... 100,00 86,66 90,00 86,66 86,66 — 100,00 J . L . P ... 100,00 100,00 83,33 83,33 83,33 — 100,00 J . B . S ... 100,00 100,00 93,33 100,00 93,33 — 100,00 L . R . O ... 100,00 100,00 100,00 90,00 90,00 — 100,00
Jan.-Fev., 1974
que as a m o s tra s r e s ta n te s q u e se a p r e s e n taram m a is d e lg a d a s.
> A a n á lise d o s d iv e rso s v a lo re s o b tid o s para o c o m p rim e n to t o ta l m é d io e m c o n fronto com o g r a u d e p a to g e n ic id a d e d a s am cntras, ta m b é m m o s tr a a im p o s sib ilid a de de c o rre la ç ã o d ir e ta d o s m e sm o s . A s sim a m o s tra s q u e a p r e s e n ta r a m os m a io res c o m p rim e n to s to ta is m é d io s (a m o s tr a J .B .S . — c o m p rim e n to t o ta l m é d io = 22,67 n) a m o s tr a J . L . P . — c o m p rim e n to
total m édio = 21,56 jt) m o - tr a r a m - s e b a s tan te p a to g ê n ic a s p a r a o c a m u n d o n g o . P o r outro lado, a a m o s tr a C . M .S . P . q u e a p r e sentou o m e n o r c o m p rim e n to t o t a l m é d io
(17,27 /í) , m o s tro u -s e m a is a g re s s iv a q u e . várias a m o s tra s ( a m o s tra B . P .O . — c o m
prim ento t o t a l m é d io = 19,36 n ; a m o s tr a
PREMIO — c o m p rim e n to t o t a l m é d io = 19,90 p \ a m o s tr a C .L .Z . — c o m p rim e n to
total m édio = 21,37 p ) q u e e x ib ira m u m
maior c o m p rim e n to t o t a l m é d io .
F in a lm e n te , o ín d ic e n u c le a r m é d io e n contrado p a r a a s v á r ia s a m o s tr a s n ã o a p r e sentou c o rre la ç ã o c o m a a g re s á v id a d e d a s m esm as. P o r e x em p lo , a a m o s tr a G . G . , que a p re s e n to u o m e n o r ín d ic e n u c le a r m é dio (0,90) é tã o p a to g ê n ic a p a r a c a m u n - ; dongos q u a n to a a m o s tr a J . B . S . , q u e te m i o m aio r ín d ic e n u c le a r m é d io (1,32) p o r nós o b se rv a d o . A lém d isso , a a m o s tr a i
E.
F .S . (ín d ic e n u c le a r m é d io = 1,17) m o s -I trou-se m a is p a to g ê n ic a q u e a s a m o s tr a s
f L .R .O . (ín d ic e n u c le a r m é d io = 1,05) e
| C .M .S .P . (ín d ic e n u c le a r m é d io = 1,15)
35
q u e a p r e s e n ta r a m m e n o re s ín d ic e s n u c le a re s m é d io s e, q u e a s a m o s tra s P R E M IO ( ín d ice n u c le a r m é d io = 1,29) e C .L .Z . ( ín d ice n u c le a r m é d io = 1,29) q u e a p r e s e n ta r a m ín d ic e s n u c le a re s m é d io s s u p e rio re s ao s e u .
CONCLUSÕES
•
O s c a r a c te r e s m o rfo -b io m é tric o s , b io ló g icos e p a to g ê n ic o s d a s a m o s tra s d o T . c r u z i , iso la d a s de c aso s h u m a n o s d e d o e n ç a
d e C h a g a s , a p r e s e n ta m u m a a c e n tu a d a v a ria b ilid a d e . A a n á lis e d o s re s u lta d o s o b ti d o s p a r a os d a d o s b io m é tric o s, e m p a r t i c u la r do c o m p rim e n to t o ta l m é d io , la r g u r a m é d ia e ín d ic e n u c le a r m é d io d a s d iv e rsa s a m o s tra s , e m c o m p a r a ç ã o a o s o b tid o s n o c o m p o rta m e n to b iológico, p r in c ip a lm e n te o g r a u d e a g re s s iv id a d e d a s m e sm a s , m o s tra q u e n ã o 'h á c o rre la ç ã o e s tr e ita e n tr e os c a r a c te r e s m o rfo ló g ic o s, b io ló g ico s e p a to g ê n ic o s e a s d if e re n ç a s o b s e rv a d a s e n tr e as c a r a c te r ís tic a s d a s d iv e rsa s a m o s tra s p a r e c e m t r a d u z ir a p e n a s v a ria ç õ e s in tra e s p e c í- fic a s, n ã o s e p o d e n d o , n o e s ta d o a tu a l d e n o sso s c o n h e c im e n to s, a tr ib u ir a q u e la s d i fe re n ç a s à d iv e rsid a d e s u b e sp e c ífic a ou r a c ia l.
A G R A D E C IM E N T O
Ao P ro f. D r. M a u ro P e r e ir a B a r r e tto , d a F a c u ld a d e d e F a r m á c ia e O d o n to lo g ia de R ib e irã o P r e to , a g ra d e c e m o s o e stím u lo , o rie n ta ç ã o e c o n fia n ç a d e p o sita d o s.
Rev. Soc. Bras. Med. Trop.
S U M M A R Y
W o r k i n g w i t h t e n s t r a i n s o f T . c ru z i i s o l a t e d f r o m h u m a n c a s e s o f C h a g a s’ D i s e a z e , i n s t a n d a r d c o n d i c t i o n s , t h e a u t h o r m a d e a m o r p h o b i o m e t r i c a n d b i o -lo g ic s t u d i e s o f t h e s t r a i n s t o v e r i f y t h e p o s s i b i W . y o f e x i s t e n c e o f r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e i r c h a r a c t e r i s l i c s . S t u d i e s o n t h e b i o m e t r i c d a t a , p a t h o g e n i c i t y t o b a b y m i c e s , i n f e c t i v i t y t o t r i a t o m i n e s a n d c u l t i v a t i o n i n a r t i f i c i a l m e d i a ( W a r r e n a n d N N N ) m e r e m a d e . T h e r e s u l t s s h o w e d n o e x i s t e n c e o f r e l a t i o n s h i p b e t w e e n t h e m o r p h o l o g y a n d t h e p a t h o g e n i c i t y o f t h e s e v e r a l s t r a i n s s t u d i e d .
R E F E R Ê N C IA S B IB L IO G R Á F IC A S
ALBUQ U ERQ U E, R . D . R . & B A R - r a to d á g u a , N e c t o m y s s q u a m i p e s s q u a
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