ApresentacaoFRAUDES

Novas Tecnologias para

Detecção de Fraudes no Leite

Sebastião Cesar Cardoso Brandão, Ph.D. Professor Titular - Aposentado

Significado de Fraude



Dicionário Houaiss da Língua Portuguesa:

“qualquer ato ardiloso,

enganoso, de má fé, com o

intuito de lesar ou ludibriar

outrem, ou de não cumprir

determinado dever.”

Aurélio



- Fraude

1. L

ogro

.

2.Abuso de confiança; ação

praticada de má-fé. 3.Contrabando, clandestinidade. 4.Falsificação, adulteração.

-

Portanto, fraude é uma

palavra que associamos a:

ações ilícitas, ilegais, contravenção,

e que sempre atribuímos a práticas cometidas por criminosos,

pessoas desonestas, que não fazem parte de nosso convívio diário, que estão sempre muito

distantes de nós, que fazem parte de um outro grupo social.

Código Penal

Fraude :



s.f. Todo artifício empregado com o fim de

enganar uma pessoa e causar-lhe prejuízo.



- A fraude traduz a intenção de procurar uma vantagem indevida, patrimonial ou não.



- O Código Penal Brasileiro, nos artigos 171 e seguintes, prevê diversas modalidades de fraude, comparáveis ao estelionato.

Definição de Fraude

- Subterfúgio para alcançar um fim ilícito, ou ainda, o engano

dolosamente provocado,

o malicioso induzimento em erro ou aproveitamento de

pré-existente erro alheio, para o fim do

RIISPOA Art. 530

Considera-se fraudado, adulterado ou falsificado o leite que:

1 - for adicionado de água;

2 - tiver sofrido subtração de qualquer dos seus componentes, exclusive a gordura nos tipos "C" e "magro";

3 - for adicionado de substâncias conservadoras ou de quaisquer elementos estranhos à sua composição;

4 - for de um tipo e se apresentar rotulado como de outro de categoria superior;

5 - estiver cru e for vendido como pasteurizado;

6 - for exposto ao consumo sem as devidas garantias de inviolabilidade.

Consulta Pública:

RIISPOA



Art. 714. Além dos casos específicos

previstos neste Regulamento, são considerados matérias-primas ou produtos fraudados aqueles que apresentarem:

alterações, adulterações

Leite



- Leite alterado:

- acidez titulável elevada,

- população excessiva de bactérias, - CCS acima do normal,

- outros.



- Leite adulterado:

- adição de soda;

Aurélio: Adulteração

. Falsificação, contrafação, corrupção; . Adição fraudulenta de substância

imprópria ou desnecessária a outra substância (medicamento,

Fraude Econômica



- Existe a intenção de fraudar;



- Exemplos de Fraude econômica:

- Adição de água; - Adição de soro;

- Classificação do leite; - Outras.

Fraudes do Leite



- Só favorece a quem frauda;



- Prejudica:

- Consumidor;

- Concorrentes honestos; - Estado;

- Propaganda negativa.



- Gera lucratividade absurdamente alta;

A fraude do leite



- Tem de ser combatida,

caso contrário somente os

fraudadores irão sobreviver

no ambiente comercial.

Possíveis Locais da

Adulteração



- No produtor de leite;



- No tanque comunitário;



- No transporte;



- No leite spot;



- Na indústria;



- No comércio.

Produtos lácteos que podem

ser fraudados



- Leite cru;



- Leite pasteurizado;



- Leite UHT;



- Leite em pó;



- Iogurte;



- Bebida láctea;



- Gordura láctea;



- Outros (doce de leite, queijo etc.)

Tipos de Adulterações e

Fraudes do Leite



- Adição de água;



- Adição de soro;



- Alteração da composição;



- Adição de reconstituintes;



- Adição de neutralizantes;



- Adição de conservantes;



- Adição de leite de espécies diferentes;



- Adição de gorduras não lácteas;



- Marca (falsificação);

Fraude com Água



-Reconstituintes de crioscopia;

- Sacarose: HPLC (Fase Normal); - Cloreto de sódio: Det. cloretos; - Soro em pó: HPLC (GF);

- Etanol: - Outros.

Fraude com água + etanol

+ + + +

-

Fraude do leite com água



- Reconstituintes de densidade: - Soro em pó; - Maltodextrina; - Amido; - Outros.

Adição de Soro ao Leite



- O soro tem propriedades físico-químicas

próximas às do leite;



- Leite adicionado de soro está

adulterado e impróprio para consumo como leite;

Fraude com Soro



- Possibilidades de ocorrência: - Leite cru; - Leite Pasteurizado; - Leite UHT; - Leite em pó; - Doce de leite; - Iogurte; - Outros.

Métodos para comprovar

fraude com soro



- Crioscopia: só é útil quando se usa alta % de

soro, e não se usa reconstituinte de crioscopia;



- Densidade: só é útil para altas % de adição;



- Ácido siálico:

- Também detecta leite de vacas com mastite (CCS elevado);

- Qualitativo: visual de cor;

- Quantitativo: espectrofotométrico; - Pode ser usado como screening;

Qualidade Mínima do Leite



- Índice de CMP – HPLC-GF

- Metodologia oficial (IN 68/2006); - Limites (IN 69/2006):

de 0 a 30 mg/L, de 30 até 75 mg/L

Método para confirmar

fraude com soro

Método para confirmar

fraude com soro



- HPLC – com detecção por

XIC of +Q1 MI (4 ions): 1697.4 amu from Sample 33 (Leite UHT IT. -incubação 0 dias + 10% de soro) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) Max. 1.5e5 cps. 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 Time, min 0.0 1.0e4 2.0e4 3.0e4 4.0e4 5.0e4 6.0e4 7.0e4 8.0e4 9.0e4 1.0e5 1.1e5 1.2e5 1.3e5 1.4e5 1.5e5 1.5e5 In te n s it y , c p s 20.42

HPLC / MS

10% Soro

XIC of +Q1 MI (4 ions): 1697.4 amu from Sample 42 (Leite UHT IT. -incubação 8 dias + 5% de soro) of DataSET1.wiff (Turbo Spray) Max. 1.5e5 cps. 10 12 14 16 18 20 22 24 26 28 30 32 34 36 Time, min 0.00 5.00e4 1.00e5 1.50e5 2.00e5 2.50e5 3.00e5 3.50e5 4.00e5 4.50e5 5.00e5 5.50e5 6.00e5 6.50e5 7.00e5 7.50e5 8.00e5 8.50e5 9.00e5 9.50e5 1.00e6 1.05e6 In te n s it y , c p s 20.48 15.64

HPLC –Espectrometria de Massa

5% Soro + proteólise

Custo da análise

Método Oficial do MAPA para

confirmação da fraude com soro.

IN 7/2010



- Se CMP maior do que 25 mg/L:

Coletar fração com CMP e fazer

Eletroforese Capilar e/ou HPLC com Espectrometria de Massa.

IN 07 – 2010

CE



- Sistema de eletroforese capilar modular.



- BGE Tetraborato de sódio 20mM, pH 10,0



- Voltagem 10 KV



- Injeção Modo hidrodinâmica em 90 segundos



- Capilar Sílica fundida, 42cm (efetivo), 50 m

IN 07 – 2010

LC-MS/MS



- HPLC Agilent 1100 Series,

fluxo de fase móvel em 0,5 mL.min-1



- Espectrômetro de massas API 5000 – Applied Biosystems (ou similar).



- Colunas

Coluna C8, 150 X 4,6 mm.

Coluna fenil-hexil, 150 X 4,6 mm.

Coluna PLRP-S 150 X 4,6 mm, 300 Å



- Fonte de ionização Electrospray em modo positivo (ESI+)

Confirmação da fraude

com soro – IN 07/2010

*fragmento de CMP (clivagem entre os AAs 105-106 da k-caseína) **fragmento de Pseudo-CMP (clivagem entre os AAs 106 -107 da k

Confirmação da fraude

com soro – IN 07/2010

Fraudes do Leite em Pó

- Fraude por adição de soro em pó; - Fraude por adição de amido;

- Fraude por adição de maltodextrina; - Fraude por adição de açúcar;

- Troca de embalagem de leite vencido; - Falsificação de embalagens;

Adição de leite de vaca em

leite de outros animais



- Imunodifusão radial em ágar de anticorpos policlonais contra proteínas do soro detecta 3% de leite de vaca em leite de ovelha;



- O método ELISA é o mais usado para detectar proteínas do leite de vaca em leite de outros animais. É simples, sensível, rápido,

acreditável, e versátil.



- ELISA = Produção de cor por um anticorpo marcado com enzima (fosfatase ou

Adição de

outras gorduras



- Gordura Láctea – Portaria 146/96;



- Modifica perfil de ácidos graxos:

Análises: - Cromatografia gasosa FIL 54:1969; 14:0/18:1 = 0,30 12:0/10:0 = 0,95 a 1,3 14:0/12:0 = 3,0 a 4,1 10:0/8:0 = 1,85 a 2,3 - TLC – FIL 38:1966 - Índice de saponificação = 218 a 325; - Índice de Polenske = 1,3 a 3,7; - Índice de Reichert-Meissl = 24 a 36; - Índice de iodo – 28 a 38.

Adição de maltodextrinas



- Maltodextrinas são produtos da

hidrólise do amido. Existem vários graus de hidrólise (DE).



- Cromatografia em Camada Delgada

Detecta menos de 1% de adição de pó no leite em pó e de adição no leite

líquido.

1.Lactose 1,0% (m/v); 2. Lactose 4,5% (m/v); 3. (LPI) (13g/100mL); 4. LPI c/ 5,0% Malt 5. LPI c/ 3,0% Malt 6. LPI c/ 2,0% Malt 7. LPI c/ 1,5% Malt 8. LPI c/ 1,0% Malt 9. LPI c/ 0,75% Malt 10. LPI c/ 0,50% Malt 11. LPI c/ 0,25% Malt 12. LPIR c/ 2,0% Malt 13. LPIR c/ 1,0% Malt 14. LPIR c/ 0,75% Malt 15. LPIR c/ 0,50% Malt 16. LPIR c/ 0,25% Malt 17. LPIR c/ 0,10% Malt 18. LPIR c/ 0,05% Malt 19. LPIR c/ 0,025%Malt TLC

Adulteração com alcalinos

Adulteração da acidez titulável.



- Determinação da concentração real

de ácido lático por HPLC-IE;



- Método detecta se o leite tiver

sofrido acidificação excessiva (alterado), mesmo se tiver sido

adicionado de compostos alcalinos (adulterado).

Sobreposição de cromatogramas: Amostra de leite sobre padrão de

Perfil cromatográfico (HPLC-IE ) de amostras com acidez titulável de 0,15 a 0,20 % (m/v)

Y = 141,07X - 17,746 R2 = 0,9929 0 2 4 6 8 10 12 0,15 0,16 0,17 0,18 0,19 0,2 0,21 Acidez titulável (g/100mL) C o n c e n tr a ç ã o r e a l d e á c id o l á ti c o (m m o l/ )

Regressão Linear da correlação entre a acidez titulável e a concentração de ácido

0 5 10 15 20 25 0,14 0,16 0,18 0,2 0,22

Teor de fermentação do leite expressa ácido lático (g/100mL )

C o n c e n tr a ç ã o r e a l d e á c id o lá tic o e m m m o l/L

Relação entre a concentração de ácido lático determinada pelo método de acidez titulável

(▬) e concentração de ácido lático

determinada por HPLC-IE (▬).

Acidez titulável

Sobreposição: leite acidificado e leite acidificado + NaOH

Riscos de Fraudes



- Pessoas que fraudam o leite podem

adicionar qualquer produto ilegal, inclusive produtos que causam

problemas de saúde aos consumidores.



- exemplos: formol, água oxigenada,

soda cáustica, antibióticos, entre muitos outros.

Divulgação na Imprensa:

Propaganda Negativa



- A divulgação da ocorrência de fraude do leite causa propaganda negativa;



- Por outro lado, a ocorrência da fraude

causa graves problemas de saúde humana, e de competitividade comercial.



- Não se pode culpar a imprensa.



- “Não se consegue fazer omelete sem quebrar os ovos”.

A fraude do leite na China

em 2004

“Leite em Pó” com

pouco valor nutricional

China



Adição de melamina para não

permitir que a determinação de proteínas pelo método de Keldahl fosse utilizada para determinar a

Métodos que nossos laboratórios desenvolveram nos últimos 10 anos

para determinar a fraude do leite



- Álcool (etanol): químico;



- Maltodextrinas: camada fina (TLC);



- Leitelho: espectrofotométrico;



- Soro:

- HPLC – Filtração em gel; - Eletroforese capilar;

- HPLC – Espectrometria de massa;

A fraude do leite tem de acabar



- O Governo (como um todo) tem que se

organizar para acabar com a fraude: - usar informações,

- usar inteligência, - usar planejamento,

- e todo os seus recursos.



- O governo tem de aumentar o risco de

Conclusão



- Se o governo não agir com inteligência,

se os fraudadores não forem pegos e punidos, e só ficarmos desenvolvendo métodos de análises laboratoriais, eles continuarão a mudar a forma de

fraudar, e a fraude nunca vai acabar.



- Acreditar que somente análises

laboratoriais irão acabar com a fraude do leite é fazer o jogo dos fraudadores.