N O S O M A C R U Z I .
VI — INDUCED IMMUNOTOLERANCE IN MICE
BY A VERY HIGH INOCULUM.
Humberto Menezes (*>
I m m u n o s u p p r e s s i o n b p i m m u n o t o l e r a n c e w a s o b t a i n e d i n m i c e b y i n o c u l a t
i n g
T r y p a n o s o m a c r u z ia v i r u l e n t P F s t r a i n i n h i g h d o s e s t o m i c e .
D i r e c t a n d i n d i r e c t l a b o r a t o r y t e s t s lo e r e u s e d t o d e m o i i s t r a t e t h e a b o v e
s t a t e m e n t s .
S i n c e o u r f i r s t w o r k s o n a v i r u l e n c e o f t h e
T . c r u z i
P F s t r a i n w e w e r e s u r p r i s e d t o f i n d s o m e v a c c i n a t e d a n i m a l s w i t h p o s i t i v e b l o o d c u l t u r e s a n d o n l y r a r e l y w i t h p o s i t i v e p a r a s i t e m i a s ( 1 1 , 13, 14) .A l t h o u g h w e c o u l d n ’t d e f i n e p r e c i s e l y t h e r e a l n a t u r e o f t h e f a c t , b y t h e n , w e h a d a l r e a d y c o n c l u d e d t h a t t h e o b s e r v e d p a r a s i t e s s h o u l d b e t h e s a m e i n o c u l a t e d a s v a c c i n e . T h e s e t r y p a n o s o m e s d i d n o t i n f e c t y o u n g m i c e .
A m o n g t h e v a r i o u s c i r c u m s t a n c e s i n w h i c h t h e f a c t h a p p e n e d , o n e s p e c i a l l y c a l l e d o u r a t t e n t i o n — t h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n i t a n d t h e n u m b e r o f p a r a s i t e s i n o c u l a t e d a s v a c c i n e .
F o r t h i s r e a s o n w e d e c i d e d t o v e r i f y i f t h e p h e n o m e n o n c o u l d b e r e p r o d u c e d a n d e x p l a i n e d a s d u e t o i m m u n o l o g i c a l t o l e r a n c e .
M A T E R I A L A N D M E T H O D S
N i n e t y t h r e e a l b i n o m i c e w e i g h i n g lO g e a c h w e r e d i v i d e d i n t h r e e g r o u p s — t h e f i r s t g r o u p w i t h 3 4 a n i m a l s , t h e s e c o n d o n e w i t h 3 5 a n d t h e t h i r d w i t h 2 5 .
T h e f i r s t g r o u p w a s v a c c i n a t e d , s u b - c u t a n e o u s l y , w i t h 1 0 7 l i v i n g t r y p a n o s o m e s o f t h e P F s t r a i n f r o m a c u l t u r e 19 d a y s o l d i n W a r r e n m e d i u m .
T h e s e c o n d g r o u p w a s v a c c i n a t e d w i t h 1 0 11 p a r a s i t e s j u s t t h e s a m e a n d b y t h e s a m e r o u t e .
T h e t h i r d g r o u p w a s h e l d a s c o n t r o l . E i g h t a n d f i f t e e n d a y s a f t e r v a c c i n a t i o n a p e r i p h e r a l b l o o d s e a r c h w a s p e r f o r m e d f o r t r y p a n o s o m e s i n t h e v a c c i n a t e d m i c e
O n t h e f i f t e e n t h d a y , f r o m e a c h v a c c i n a t e d g r o u p , 10 a n i m a l s w e r e s e l e c t e d a t r a n d o m a n d b l e d t o d e a t h . F r o m t h e l i r s t
"* U S P . F a c u l d a d e d e M e d i c i n a . R i b e i r ã o P r ê t o . S . P a u l o . B r a s i i .
P r e s e n t e d t o t h e V I I I C o n g r e s s o Soc. B r a s . M e d . I r o p . , B e l o H o r i z o n t e , F e b r u a r y 11)72.
l in :
i n k
1
2
3 4 5 6 78
910
1112
13 14 15 16 17 18 19 2 021
2 2 23 2 4 25 26 27 28 2 9 3 0 31 32 33 3 4 : d i ii r - t - .
M I C E V A C C I N A T E D W I T H 1 0 : P F P A R A S I T E S A N D C O N T R O L S
P a r a s i t e m i a A f t e r B l o o d P a r a s i t e m i a B l o o d C o n t r o l s
V a c c i n a t i o n C u l t u r e A f t e r I n f e c t i o n C u l t u r e P a r a s i t e m i a A i t e r I n f e c t i o n
F o u r W e e k s
A f t e r V a c c . ' i I
8 d a y s 15 d a y s 15 d a y s 8 d a y s 15 d a y s j 3 0 d a y s 3 0 d a y s 8 d a y s ! 15 d a y s 3 0 d a y s
0 0 0 35 0 ! 3 . 2 6 0
0 0 105 0 0 3 . 5 7 0
0 0 35 0 0 3 . 5 7 0
0 0 C 0 0 0 3 . 7 1 0
0 0
0
0 S g> O SOD
0 140 0 0 0 0
3 . 9 2 0 4 . 3 7 5
0 0 0 0 0 5 . 3 5 5
0 0 tf_( C-H ^
o ^ 0 35 0 5 . 8 3 0
0 0 O ^ ! 70 70 0 6 . 3 0 0
0 0 £O ^ o 0 0 0 ! 6 . 6 8 0
0 0
0 0
+ 3 a - ° S o »
140 0 0 70 0 0
7 . 3 5 0 7 . 9 8 0 0 0 0 0 0 n 0 0 0 0
_ o
£ C3
-2.S a
0 70 35 0 0 3 5 2 1 0 3 5 0 0 0 0 0 0 0 o
0 17 :
ft
• ü S g
1 0 . 5 0 0 1 1 . 6 0 0 1 1 . 9 0 0 1 2 . 6 7 0 1 4 . 0 0 0 0 0 0 0 0 0
' E ça = CD ^ O a « °
G 0 35 0 0 7 0 35 0 0 0
S o cu z ° i !
1 5 . 7 5 0 1 7 . 5 0 0 1 7 . 7 1 0
0 0 35 0 0 1 8 . 6 2 0
0 0 hH 2 1 0 0 0 2 2 . 7 5 0
0 0 ' ____________ ____ ____ 4 . 8 3 0 2 4 . 5 0 0
0 0 <L; 3 2 . 2 0 0
0 0
0 0
0 0 d> O
0 0 >
-----' D .
0 0 O o
0 0 D Q *2r1
0 0 £ 0£
^ 73
0 0 O i
0 0 '
!
0 0 CQ
0 0 0 0 0 9 . 2 4 0
0
':-; 0 ° ; o r ’< 4 7 4 7 0 72 5 . 3 4 0
2 8 . 0 0 0
1 . 0 1 5
4 . 3 7 5
3 . 2 9 0
4 . 3 7 5
g r o u p a b l o o d p o o l w a s m a d e a n d t h e s e r u m , a f t e r b e i n g c e n t r i f u g e d a t 1 . 5 0 0 r . p . m . ,
h a d i t s s e d i m e n t c u l t i v a t e d i n 10 W a r r e n
m e d i u m t u b e s .
F r o m
t h e
s e c o n d g r o u p a t o t a l b l o o d c u l t u r e w a s d o n e i n t h e s a m e m e d i u m ( t w ot e s t t u b e s f o r e a c h a n i m a l ) .
T h e b lo o d p o o l s e r u m o f e a c h g r o u p w a s u s e d f o r t h e a g g l u t i n a t i o n t e s t u s i n g
t h e t e c h n i q u e d e s c r i b e d b y M u n i z ( 1 8 ) .
T h e b l o o d c u l t u r e s r e a d i n g s w e r e m a d e a f t e r 3 0 d a y s . T h e p o s i t i v e o n e s , a f t e r c e n t r i f u g a t i o n , w e r e i n o c u l a t e d i n t r a p e r i -
t o n e a l l y i n 10 b a b y m i c e .
A f t e r 15 d a y s o f t h i s i n o c u l a t i o n a l l 10
a n i m a l s w e r e b l e d t o d e a t h a n d f r o m t h e
s e d i m e n t o f t h e s e r u m p o o l a n e w c u l t u r e
i n 10 t e s t t u b e s o f W a r r e n m e d i u m w a s
m a d e .
F o u r w e e k s l a t e r , a l l r e m a i n i n g m i c e ,
f r o m t h e o r i g i n a l v a c c i n a t i o n , i n c l u d i n g
t h o s e k e p t a s c o n t r o l s w e r e i n f e c t e d w i t h
b l o o d f o r m s o f t h e Y v i r u l e n t s t r a i n o f
T ' r y p a n o s o v i a c r u z i .
T h e in o c u l a t i o n w a s m a d e i n t r a p e r i t o n e a l l y a t a d o s e o f 5 . 0 0 0p a r a s i t e s p e r g r a m o f b o d y w e i g h t .
E i g h t , f i f t e e n a n d t h i r t y d a y s a f t e r t h e
i n f e c t i o n , p a r a s i t e m i a s b y t h e P i z z i - B r e n e r
t e c h n i q u e <3) w e r e d e t e c t e d i n t h e m i c e
o f a l l t h e t h r e e g r o u p s .
T en a n i m a l s o f t h e f i r s t v a c c i n a t e d g r o u p a n d f o u r t e e n o f t h e s e c o n d o n e w e r e
k i l l e d b y h e a r t p u n c t u r e a t t h e 3 0 t h d a y
o f i n f e c t i o n .
T h e bl o o d s e r u m p o o l o f e a c h g r o u p w a s c e n t r i f u g e d a n d c u l t i v a t e d a s i n t h e
p r e v i o u s c a s e s .
R E S U LTS
A s o b s e r v e d p r e v i o u s l y <10, 1 5 ) a l l t h e P F s t r a i n v a c c i n a t e d a n i m a l s h a d n e g a t i v e
p a r a s i t e m i a s 8 a n d 1 5 d a y s a f t e r v a c c i n a t
i o n (Ta b l e s 1 & 2 ) .
T h e b l o o d c u l t u r e o f t h e m i c e v a c c i n a t e d w i t h 1 0 7 t r y p a n o s o m e s w a s n e g a t i v e
15 d a y s a f t e r v a c c i n a t i o n , w h i l e 2 o u t o f
1 0 o f t h e 10'' t r y p a n o s o m e s v a c c i n a t e d m i c e
w e r e p o s i t i v e .
T h e p a r a s i t e s f r o m t h e s e p o s i t i v e b l o o d c u l t u r e s w e r e n ’t a b l e t o p r o d u c e i n f e c t i o n
i n 1 0 b a b y m i c e w h i c h h a d n e g a t i v e b l o o d
c u l t u r e s a f t e r b e i n g i n o c u l a t e d w i t h t h e m
(Ta b l e 2 ) .
T h e a g g l u t i n a t i o n t e s t f o r
T. c r u z i
p r e - s e n t e n d t i t r e s o f 1 / 3 2 0 f o r t h e f i r s t g r o u po f m i c e , 15 d a y s a f t e r v a c c i n a t i o n , a n d
1 / 1 6 0 f o r t h e s e c o n d o n e .
T h e m e d ia n o f t h e p a r a s i t e m i a s p e r f o r m e d i n t h e f i r s t g r o u p o f a n i m a l s 8. 15
a n d 3 0 d a y s a f t e r i n f e c t i o n w a s n e g a t i v e .
T ha t o f t h e s e c o n d g r o u p w a s p o s i t i v e a t t h e 8 t h d a y ( 3 5 p a r a s i t e s f o r 5 m m :; o f
b l o o d ) a n d n e g a t i v e o n t h e 1 5 t h a n d 3 0 t h
d a y s o f i n f e c t i o n .
T h e b l o o d c u l t u r e s m a d e 3 0 d a y s a f t e r i n f e c t i o n w e r e n e g a t i v e i n t h e m i c e v a c
c i n a t e d w i t h 1 0 r p a r a s i t e s a n d p o s i t i v e i n
t h o s e p r e v i o u s l y v a c c i n a t e d w i t h 1 0 !l t r y
p a n o s o m e s .
T h e mo r t a l i t y r a t e w a s a l i k e i n b o t h v a c c i n a t e d g r o u p s ( 4 ) .
T h e co n t r o l a n i m a l s p r e s e n t e d v e r y h i g h p a r a s i t e m i a s a n d m o r t a l i t y p e r c e n t a g e s t h a t a t t a i n e d 1 0 0 c r o n t h e 3 0 t h d a y
o f i n f e c t i o n .
D I C U S S I O N A N D C O N C L U S I O N S
M e t c h n i k o f f i n 1 8 8 3 ( i n 7 ) h a d a l r e a d y
m e n t i o n e d t h a t a v e r y h i g h i n f e c t i o n d o s e
o f y e a s t , i n d a p h n i a , i m p a i r e d p h a g o c i t o s i s
a n d p e r m i t s t h e m u l t i p l i c a t i o n o f t h e i r s p o r e s .
B o r d e t i n 1 8 9 7
( i n
7 ) o b s e r v e d t h a t g u i n e a p i g s i n f e c t e d w i t h h i g h i n o c u l u m o fS t r e p t o c o c c u s
d o n o t f o r m a n t i b o d i e s a g a i n s t t h e s e b a c t e r i a b u t c o u l d d o i ta g a i n s t o t h e r m i c r o - o r g a n i s m s i n j e c t e d i n
o p t i m a l q u a n t i t y .
F e l t o n i n 1 9 4 8 ( 7 ) v e r i f i e d t h a t h i g h d o s e s o f P n e u m o c o c c u s p o l y s a c c h a r i d e s
h a v e t h e s a m e e f f e c t a n d d e s i g n a t e d t h e
p h e n o m e n o n —
i m m u n o l o g i c p a r a l y s i s .
I n a w o r k t h a t b e c a m e a c l a s s i c i n I m
m u n o l o g y , F i s c h m a n i n 1 9 6 1 ( 8 ) , d e m o n s
t r a t e d t h a t t h e a n t i b o d y p r o d u c t i o n a g a i n s t
T 2 ba c t e r i o p h a g e , i n c u l t u r e s o f l y m p h n o d e c e l l s f r o m n o r m a l a n i m a l s , f a i l l e d t o o c c u r i f m o r e t h a n a n o p t i m a l a m o u n t o f
T 2 ba c t e r i o p h a g e w a s a d d e d t o t h e m a c r o p h a g e s .
S i m i l a r p h e n o m e n o n h a s b e e n o b s e r v e d
b y t h e u s e o f o t h e r a n t i g e n s ( 6 , 17, 2 0 ) .
I m m u n o t o l e r a n c e i s a w o r d u s e d w i t h
d i f f e r e n t s i g n i f i c a n c e s .
F o r s o m e a u t h o r s ( 2 , 1 9 ) i t r e p r e s e n t s
t h e c o m p l e t e l a c k o f i m m u n o l o g i c r e s p o n s e
t o a c e r t a i n a n t i g e n i c s u b s t a n c e .
F o r t h e m a j o r i t y , o n t h e o t h e r h a n d ,
t h i s u n r e s p o n s i v i t y c a n b e o f s h o r t o r l o n g
-M I C E V A C C IN A T E D W I T H 10" P F P A R A S I T E S A N D C O N T R O L S
P a r a s i t e m i a B l o o d B l o o d P a r a s i t e m i a B l o o d C o n t r o l s
A n i m a l A f t e r V a c c i n a t i o n C u l t u r e S u b - I n o C u l t u r e F o u r A f t e r I n f e c t i o n C u l t u r e P a r a s i t e m i a A f t e r I n f e c t i o n
c u l a t i o n W e e k s
1
I n M i c e A f t e r
N u m b e r 8 d a y s 15 d a y s 15 d a y s ( 1 0 ) 15 d a y s V a c c . 8 d a y s 15 d a y s 3 0 d a y s 3 0 d a y s 8 d a y s 1 5 d a y s 3 0 d a y s
1 0 0
a
0 0 0 3 . 2 6 0 2 5 . 3 4 02 0 0
a
35 0 0 3 . 5 7 03 0 0 w 3 8 5 1 0 5 0 3 . 5 7 0
4 0 0 K, , 2 1 0 0 0 3 . 7 1 0
5 0 0 —
1
i 105 0 0 3 . 9 2 06 0 0 +-> G . ^br ; 0 3 5 0 4 . 3 7 5 2 8 . 0 0 0
7 0 0 p—CL) -N •'-< h <\2 GJ 1 . 9 3 0 4 2 0 0 5 . 3 5 5
8 0 0 3 3 £
U
fc. ^ 0 35 0 5 . 8 3 09 0 0 2 4 0 0 0 6 . 3 0 0 1 . 0 1 5
10 0 0 <4-1 fc-s OF- ‘ ^ 35 0 0 6 . 6 8 0
11 0 0 O 0 0 0 7 . 3 5 0
12 0 0 G ° bX) 2 4 5 105 0 7 . 9 8 0 4 . 3 7 5
13 0 0 . 2 y ?
• p d o a f i -+->
CD S-h •,-H
0 3 5 0 CD 1 0 . 5 0 0
14 0 0 0 0 0 1 1 . 6 0 0
15 0 0 c =4H r a 0 0 0 1 1 . 9 0 0
16 0 0 T3 cd 70 0 0 CD O
1 2 . 6 7 0 17
18 19 20
0 Ü 0 0
0 0 0 0
cS q <i> -= ; o G . o o o o
• r*
35 0 105 0
70 3 5 70 70
0 0 0 0
M R ° O s-1
CL, , 3 t o o
1 4 . 0 0 3 1 5 . 7 5 0 1 7 . 5 0 0 1 7 . 7 1 0
21 0 0 CU ~
p ,
ci
35 0 0
s
1 8 . 6 2 022 0 0 35 0 0 2 2 . 7 5 0
23 0 0
£
0 0 0 2 4 . 5 0 02 4 0 0 0 0 0 3 2 . 2 0 0 3 . 2 9 0
2 5 0 0 70
2 6 0 0 N e g a t i v e N e g a t i v e
27 0 0 1- ( P o o l )
2 8 0 0 t
-2 9 0 0 0
3 0 0 0 0
31 0 0 0
3 2 0 0 0 j
3 3 0 0 1
3 4 0 0 0
3 5 0 0 0
M e d i a n 0 0 0 35 0 0 9 . 2 4 0 4 . 3 7 5
p l e t e b r e a k o r a r e d u c t i o n o f t h e i m m u n o
l o g i e r e s p o n s e ( 5 ) .
T h e d e gr e e a n d d u r a t i o n o f t h e n o n r e s p o n s e d e p e n d s o f t h e h o s t , o f t h e a n t i
g e n a n d s o m e t i m e s o f t h e v i a o f t h e i n j e c t
i o n a n d o f t h e m e t h o d s u s e d t o i n v e s t i g a t e
t h e i n c a p a c i t y o f t h e i m m u n o l o g i c r e s
p o n s e ( 2 1 )
I n t h i s p a p e r i m m u n o t o l e r a n c e m e a n s
a s t a t e o f c o m p l e t e l a c k o r r e d u c t i o n o f
a n a n t i g e n s p e c i f i c i m m u n o l o g i c r e s p o n s e ,
o f s h o r t o r l o n g d u r a t i o n , t o a s u b s t a n c e
t h a t o t h e r w i s e i s a n t i g e n i c .
C o n s e q u e n t l y i t i s s y n o n y m u s o f i m
m u n o l o g i c p a r a l y s i s , i m m u n o l o g i c s u p p r e s
s i o n a n d i m m u n o l o g i c u n r e s p o n s i v e n e s s .
I n o u r e x p e r i m e n t s w h e n w e v a c c i n a t e d
a n i m a l s w i t h d o s e s e q u a l o r s u p e r i o r t o 1 0 “
a v i r u l e n t F F s t r a i n t r y p a n o s o m e s w e s o m e
t i m e s h a d p o s i t i v e b l o o d c u l t u r e s , w h i l e a l l
t h o s e p e r f o r m e d w i t h s m a l l e r a m o u n t w e r e
n e g a t i v e ( 1 4 ) .
T h e l o w e r a g g l u t i n a t i o n t i t r e f o r
T.
c r u z i ,
15 d a y s a f t e r v a c c i n a t i o n a n d p o s i t i v e p a r a s i t e m i a a t t h e 8 t h d a y o f i n f e c t i o ni n t h e a n i m a l s v a c c i n a t e d a n d c h a l l e n g e d ,
a l t h o u g h n o t s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t s e e m s
t o b e r a t h e r m o r e t h a n m e r e c o i n c i d e n c e
w h e n i t o c c u r s e x a c t l y i n t h e m i c e v a c c i
n a t e d w i t h 1 0 !l t r y p a n o s o m e s , i . e . , i n t h e
g r o u p o f a n i m a l s t h a t p r e s e n t e d p o s i t i v e
b l o o d c u l t u r e s a f t e r v a c c i n a t i o n a n d a f t e r
c h a l l e n g e .
T h is m e a n s t h a t t h e s e a n i m a l s b e c a m e t o l e r a n t t o a f u r t h e r v i r u l e n t i n f e c t i o n
w i t h t r y p a n o s o m e s .
W e h a v e a l r e a d y s h o w n t h a t t h i s t o l e
r a n c e i s l o w a n d o f s h o r t d u r a t i o n ( 1 3 , 1 4 ) .
N o n e o f t h e t o l e r a n t a n i m a l s d i e d o f t h e
v i r u l e n t i n f e c t i o n , n o r d o a l l o f t h e m s h o w
u l t e r i o r p o s i t i v e b l o o d c u l t u r e s ( 1 4 ) .
A n e x c e l l e n t d e g r e e o f i m m u n i t y w e
h a v e o b t a i n e d i n m i c e w i t h o n l y t h e i n
j e c t i o n o f 1 0 : P F s t r a i n t r y p a n o s o m e s ( 1 2 ) .
I n o c u l a o n e m i l l i o n h i g h e r c o n s t i t u t e a
f a c t o r o f i m m u n o d e p r e s s i o n a n d a r e r e s
p o n s i b l e f o r t h e p o s i t i v e r e s u l t s o b s e r v e d
i n s u c h c i r c u m s t a n c e s .
W e b e l i v e t h a t , b e s i d e s t h e c h e m i c a l i m m u n o s u p p r e s s i o n a l r e a d y d e m o n s t r a t e d
w i t h t h e P F s t r a i n ( 1 6 ) , b i o l o g i c a l i m m u n o
s u p p r e s s i o n b y i m m u n o t o l e r a n c e c a n a l s o
b e i n d u c e d i n m i c e .
W i t h t h e p r e s e n t r e s u l t s w e a r e s u r e t h a t , o n c e m o r e , t h e a v i r u l e n c e o f t h e
T r y
p a n o s o m a c r u z i
P F s t r a i n i s c o n f i r m e d a s w e l l i t s i m m u n o g e n i c c a p a c i t y , w h e n t h ev a c c i n e i s u s e d i n a p p r o p r i a t e d d o s a g e .
R E S U M O
I m u n o s u p r e s s ã o p o r i m u n o t o l e r â n c i a f o i o b t i d a e m c a m u n d o n g o s p e l a i n j e
ç ã o d e a l t a s d o s e s d a c e p a a v i r u l e n t a P F d o
Tr y p a n o s o m a c r u z i .T e s t e s p a r a s i t o l ó g i c o s , d i r e t o s e i n d i r e t o s , f o r a j n u t i l i z a d o s c o m o o b j e t i v o
d e d e m o n s t r a r a r e f e r i d a t e s e .
R E F E R E N C E S
1 — B A K R ET , J. T. — T e x t bo o k o f I m m u n o l o g y . C . V . M c s b y C o . S t . L o u i s . 1 9 7 0 .
2 — B IR O , C . — To l e r a n c i a i n m u n o l o g i c a .
R e v . l a t . a v i e r . M i c r o b i o l . 12:
2 3 7 - 2 4 2 , 1 9 7 0 ,3 — BR E N E R , Z . — C o n t r i b u i ç ã o a o e s t u d o d a t e r a p ê u t i c a e x p e r i m e n t a l d a D o e n ç a d e C h a g a s .
T e s e .
B e l o - H o r i - z o n t e . F a c . F a r m . O d o n t . U n i v . M i n a s G e r a i s , 1 9 5 1 .4 — C O R E O B A , F . — I m m u n o g e n i c i d a d .
R e v . l a t . a m e r . M i c r o b i o l . 12:
2 3 7 - 2 4 2 ,1 9 7 0 .
5 — C R O W L E , A . J . - - T h e r o l e o f i m m u n o l o g i c t o l e r a n c e i n i m m u n o l o g i c r e s p o n s e .
A n n . A l l e r g y
,24:
1 9 5 - 2 1 4 , 1 9 6 66 — D I X O N , F . J . & M A UR E R , p . H . — I m m u n o l o g i c u n r e s p o n s i v e n e s s i n d u c e d b y p r o t e i n a n t i g e n s .
J . E x p .
M e d . 101:
2 4 5 - 2 5 7 , 1 9 5 5 .7 — F E LTO N , L . D . — T h e s i g n i f i c a n c e o f a n t i g e n i n a n i m a l t i s s u e s .
J.
I m m u n o l . 61:
1 0 7 - 1 1 7 , 1 9 4 9 .9 — H U MP HR E Y , J . H . & W H IT E , R . G . — I n m u n o l o g i a m e d i c a . E d . To - r a y S / A . B a r c e l o n a , 1 9 6 4 . P a g . 4 0 1 e t s e q .
10 - M E N E Z E S , H . — P r o t e c t i v e e f f e c t o f a n a v i r u l e n t ( c u l t i v a t e d ) s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a c r u z i
a g a i n s t e x p e r i m e n t a l i n f e c t i o n i n m i c eR e v . I n s t .
M e d . t r o p . S ã o P a u l o .
10:
1 - 4 , 1 9 6 8 .11 — M E N E Z E S , H . — A c t i v e i m m u n i z a t i o n o f d o g s w i t h a n o n v i r u l e n t s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a c r u z i . R e v . I n s t . M e d .
t r o p . S ã o P a u l o . 11:
2 5 8 - 2 6 3 , 1 9 6 9 .12 — M E N E Z E S , H . — I m u n i z a ç ã o d e c a m u n d o n g o s c o m “ v a c i n a ” v i v a a v i r u - l e n t a d e
T r y p a n o s o m a c r u z i .
I — E n s a i o d a a v a l i a ç ã o d o m e n o r i n o c u l o e f i c i e n t e .R e v . S o c . B r a s . M e d . T r o p .
3:
2 9 7 - 3 0 3 , 1 9 6 9 .13 — M E N E Z E S , H . — I — T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d Y s t r a i n o f
T r y p a
n o s o m a c r u z i . R e v . I n s t . M e d . t r o p .
S ã o P a u l o . 12:
6 4 - 6 8 , 1 9 7 0 .14 — M E N E Z E S . H . & R I B E I R O , R . —
T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d P F s t r a i n o f
T r y p a n o s o m a c r u z i .
V —T h e e va l u a t i o n o f p a r a s i t o l o g i c t e s t s a f t e r v a c c i n a t i o n o f d i f f e r e n t a n i m a l s p e c i e s .
R e v . S o c . B r a s . M e d . T r o p .
6:
4 1 - 4 8 , 1 9 7 2 .15 — M E N E Z E S , H . — I m u n i z a ç ã o a t i v a c o n t r a a t r i p a n o s o m o s e a m e r i c a n a . S í n t e s e d a n o s s a e x p e r i ê n c i a .
R e v .
B r a s . M e d .
( i n p r e s s ) ,16 — M E N E Z E S , H . — T h e a v i r u l e n c e o f t h e c u l t i v a t e d Y s t r a i n o f
T r y p a n o
s o m a c r u z i .
I V — T h e e f f e c t o f i m m u n o s u p p r e s s i v e a g e n t s i n m i c e .R e v .
S o c .
B r a s .
M e d .
T r o p .
5:
2 1 3 - 2 3 3 , 1 9 7 1 .1 7 — M IT C HI S O N , N . A . — I n d u c t i o n o f i m m u n o l o g i c a l p a r a l y s i s i n t w o z o n e s o f d o s a g e .
P r o c . R o y , S o c . i B i o l . i 161:
2 7 5 - 2 9 2 , 1 9 6 4 .18 — M U N I Z , J , — C o n t r i b u i ç ã o p a r a o d i a g n o s t i c o d a D o e n ç a d e C h a g a s p e l a s r e a ç õ e s d e i m u n i d a d e .
M e m .
I n s t . O s i o a l d o C r u z 41:
3 0 3 - 3 3 3 , 1 9 4 4 .1 9 — M U N I Z , J . : S OA R E S , R . R . L . ; S O U Z A , M . A . & Q UI N T Ã O , L . E . - T r i p a n o s s o m i a s e a m e r i c a n a ( D o e n ç a d e C h a g a s ) d e n t r o d o s c o n c e i t o s d a i m u n o p a t o l o g i a .
R e v . B r a s . M a l .
D o e n ç a s T r o p . 22:
3 5 5 - 4 1 0 , 1 9 7 0 , 2 0 — N O S S A L , G . J . V . — I m m u n o l o g i c a lt o l e r a n c e : a n e w m o d e l s y s t e m f o r l o w z o n e i n d u c t i o n .
A n n . N . Y o r k
A c a d e m y S c . 129:
8 2 2 - 8 3 3 , 1 9 6 6 . 21 — W E I G L E , W . O . — F a l t a d e r e s-p u e s t a i n m u n o l o g i c a . I n P . A . M i s - c h e r & H . J . M i i l l e r - E i e r h a r d — T r a t a d o d e I n m u n o p a t o l o g i a . E d . C i e n t i f i c o - M é d i c a . B a r c e l o n a , 1 9 7 1 . T o m o I . P a g s . 6 7 - 8 3 .
