R e v is t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 8 (4 ) : 2 4 3 - 2 4 6 , O u t- D e z , 1 9 8 5
L E I S H M A N I A M E X I C A N A
I N
P R O E C H I M Y S I H E R I N G I D E N I G R A T U S
M O O J E N
( R O D E N T I A , E C H I M Y I D A E ) I N A R E G I O N E N D E M I C F O R A M E R I C A N
C U T A N E O U S L E I S H M A N I A S I S
1
Air C. Barretto2, Norman E. Peterson2, Ednaldo Lago2, Ana C. Rosa2,
Rosely S.M. Braga3, Cesar A.C. Cuba2, Julio A. Vexenat
2
and Philip D.
Marsden
2
Three iso la tes
o / L e i s h m a n i awere recoveredfrom fiv e o f 2
7specim en s o fth e rodent
P r o e c h i m y s i h e r i n g i d e n i g r a t u sM o o jen ca p tu red n ea r T rês B ra ç o s in the A tla n tic F o rest
region o f B ah ia, B ra zil. Two o fth e s e iso la tes were recovered fr o m ham sters in ocu lated
with a p o o le d tritu rate o f liver, spleen a n d sk in tissu e fr o m a p p a ren tly h ealth y
P . i. d e n ig r a t u s .The th ird iso la te w as recovered fr o m a tritu rate o f o n ly skin tissue fro m
another. M e ta s ta s is w as observed in the in o cu la ted ham sters, the p a r a s ite s grew
a b u n d a n tly in a rtific ia l m ed ia a n d a ty p ic a l su p r a p y la ria l p a tte rn o f infection in
L u t z o m y i a l o n g i p a l p i sw as p ro d u c e d in dicatin g th a t the p a r a s ite s belong to the
L e i s h m a n i a m e x i c a n acom plex. A li isolates reacted with
L e i s h m a n i a m e x i c a n a m e x i c a n aa n d
L e i s h m a n i a m e x i c a n a a m a z o n e n s i sm o n o clo n a l a n tibodies. The iso en zym e a n a lysis
differentiated these isolates fr o m sta n d a rd isolates
o / L . m . m e x i c a n a , L . m . a m a z o n e n s i s , L . m . a r i s t e d e s i , L . m . p i f a n o i , L . m . g a r n h a m ia n d
L . m . s s p.(G o iá s -W . B arbosa). These
iso la tes seem to be a su bspecies
o / L . m e x i c a n avery clo sely rela ted to
L . m . a m a z o n e n s i sfr o m which they differ by decrea sed electroph oretic m o b ility o f GPI, P E P a n d A L A T .
This is the fir s t record o f the isolation o f a p a ra site o f thegenus
L e i s h m a n i ain a rodent
ca p tu red in the S ta te o f B ah ia.
K e y words:
L e i s h m a n i a m e x i c a n assp. N a tu ra l reservoir. F ie ld study. B ahia,
B razil.
I n T r ê s B r a ç o s , B a h i a , a n a r e a in w h i c h c u t a n e o u s l e i s h m a n i a s i s i s e n d e m i c , t h e p a r a s i t e m o s t c o m m o n l y i s o l a t e d f r o m s k i n l e s i o n s o f m a n 4 a n d t h e d o g 1 2 4 h a s b e e n b i o l o g i c a l l y , b i o c h e m i c a l l y
( i s o e n z y m e s ) a n d i m m u n o l o g i c a l l y ( m o n o c l o n a l a n t i b o d i e s ) i d e n t i f i e d a s
L eish m a n ia b ra zilien sis
braziliensis.
T h e r e h a v e b e e n o n l y t w o e x c e p t i o n s : o n e i s o l a t i o n o f L .m exican a a m a zo n e n sis
( M H O M / B R / 7 6 / L T B - 1 6 ) a n d a n o t h e r o fL . m exican a
s s p . ( M H O M / B R / 7 8 / L T B - 5 5 ) . B o t h w e r e f r o m c u t a n e o u s l e s i o n s o f h u m a n s 4 5 .I n a n a t t e m p t t o f i n d t h e p r im a r y r e s e r v o i r s o f t h e s e p a r a s i t e s , m o r e t h a n 6 0 0 w i l d a n i m a i s , p r i n -c i p a l l y r o d e n t s , m a r s u p i a i s , r a b b it s a n d e d e n t a t e s , h a v e b e e n e x a m i n e d ( u n p u b l i s h e d d a t a ) . T h i s p a p e r d e s c r i b e s t h r e e i s o l a t e s w h i c h w e r e r e c o v e r e d f r o m r o d e n t s .
1 . T h i s s t u d y w a s f u n d e d b y t h e C o n s e l h o N a c i o n a l d e D e s e n v o l v i m e n t o C i e n t í f i c o e T e c n o l ó g i c o ( C N P q ) 4 0 3 6 9 0 / 8 2 , U S P u b l i c H e a l t h S e r v i c e A I - 1 6 2 8 2 , U . S . A r m y M e d i c a i R e s e a r c h a n d D e v e l o p m e n t C o m m a n d D A M D 1 7 - 8 4 - G - 4 0 0 4 , M i n i s t é r i o d a S a ú d e ( S U C A M ) a n d t h e F u n d a ç ã o S e r v i ç o s d e S a ú d e P ú b l i c a . T h e v i e w s o f t h e a u t h o r s d o n o t p u r p o r t t o r e f l e c t t h e p o s i t i o n o f t h e a b o v e n a m e d a g e n c i e s .
2 . F a c u l d a d e d e C i ê n c i a s d a S a ú d e , N ú c l e o d e M e d i c i n a T r o p i c a l e N u t r i ç ã o , U n i v e r s i d a d e d e B r a s í l i a , D F . 7 0 9 1 0 B r a z i l .
3 . U n i d a d e d e E s t u d o s E s p e c i a i s , I n s t i t u t o E v a n d r o C h a g a s , F u n d a ç ã o S E S P , B e l é m , P a r á 6 6 0 0 0 B r a z i l . R e c e b i d o p a r a p u b l i c a ç ã o e m 1 7 / 1 2 / 1 9 8 4 .
M A T E R I A L S A N D M E T H O D S
T h e r o d e n t s w e r e l i v e t r a p p e d in t h e t a l l f o r e s t h a b i t a t o f t h e c a c a o g r o w i n g r e g i o n o f T r ê s B r a ç o s , in t h e m u n i c i p a l i t i e s o f U b a i r a a n d W e n c e s l a u G u i m a r ã e s , B a h i a , B r a z i l . T h i s a r e a is l o c a t e d 1 5 0 k m s o u t h w e s t o f S a l v a d o r , l a t i t u d e 1 3 ° 3 2 ’ s o u t h a n d l o n g i t u d e 3 9 ° 4 5 ’ w e s t . T h e a n i m a i s w e r e a n e s t h e t i z e d w i t h c h l o r o f o r m a n d n e c r o p s i e d . A l i m a m m a l s n e -c r o p s i e d w e r e p r e s e r v e d e i t h e r a s s k i n a n d s k u l l s p e c i m e n s o r in f o r m a l i n f o r f u t u r e p o s i t i v e i d e n t i f i -c a t i o n . P o r t i o n s o f s k i n t i s s u e f r o m t h e n o s e a n d b a s e o f t a i l , a s w e l l a s l i v e r a n d s p l e e n , w e r e r e m o v e d f o r
im p r in t s m e a r s a n d l a t e r t r i t u r a t e d w i t h s a l i n e s o l u t i o n a n d i n o c u l a t e d i n t o t h e f o o t p a d s o f h a m s t e r s . I n s o m e c a s e s t h e s k i n a n d v i s c e r a w e r e b o t h i n o c u l a t e d in t o o n e h a m s t e r , in o t h e r c a s e s t h e s k i n w a s i n o c u l a t e d i n t o o n e h a m s t e r a n d t h e v i s c e r a i n t o a n o t h e r . W h e n t h e a p p e a r a n c e o f a c u t a n e o u s l e s i o n i n d i c a t e d a n i n o c u l a t e d h a m s t e r w a s h a r b o r i n g a n i n f e c t i o n , s a m p l e s w e r e t a k e n f o r i m p r i n t s m e a r s , i n o c u l a t i o n s in n e w h a m s t e r s a n d i s o l a t i o n a t t e m p t s in D i f c o b l o o d a g a r c u l t u r e m e d i a 1 3 .
S p e c i m e n s o f
L u tz o m y ia lo n g ip a lp is
, f r o m t h e c o l o n y m a i n t a i n e d in o u r l a b o r a t o r y , w e r e f e d o n t h e l e s i o n s a n d d i s s e c t e d f o l l o w i n g o v i p o s i t i o n ( 4 o r 5 d a y s a f t e r f e e d i n g ) t o o b s e r v e t h e d e v e l o p m e n t p a t t e r n o f t h e p a r a s i t e s in t h e d i g e s t i v e t u b e 1 1 .A b a t t e r y o f s e v e n m o n o c l o n a l a n t i b o d i e s , s p e c i e s a n d s u b s p e c i e s s p e c i f i c f o r t h e
L. m exicana
a n dL . b ra zilien sis
c o m p l e x e s , w e r e e m p l o y e d t o a n a l y z e t h e t h r e e i s o l a t e s o fL eish m a n ia
b y in d i r e c tB a r r e t t o A C , P e t e r s o n N E , L a g o E , R o s a A C , B r a g a R S M , C u b a C A C , V e x e n a t J A , M a r s d e n P D . L c i s h m a n i a m e x i c a n a i n
P r o e c h i m y s i h e r i n g i d e n i g r a t u s M o o j e n ( R o d e n t i a , E c h i m y i d a e ) i n a r e g i o n e n d e m i c f o r A m e r i c a n c u t a n e o u s l e i s h m a n i a s i s . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 8 : 2 4 3 - 2 4 6 , O u t - D e z , 1 9 8 5
i m m u n o f l u o r e s c e n c e 1 T h e a n t i b o d i e s w e r e f r o m c l o n e s V I 4 B 9 D 1 0 , X I I I 3 F 4 F 6 , X I I I 3 E 6 B 1 1 , X I I I 2 A 5 A 1 0 , I X 1 F 9 D 8 , L X V I I 1 D 7 B 8 a n d L X V I I I 4 E 1 2 D 8 , b e i n g o n e s p e c i f i c f o r L .
b ra zilien sis,
t h r e e s u b s p e c i f i c f o r L .b. b r a z ilie n sis,
o n e s u b s p e c i f i c f o r L .m exicana a m a zo n en sis
a n d t w o s u b s p e c i f i c f o r L .m.
m exicana.
P r o m a s t i g o t e s c u l t i v a t e d in S c h n e i d e r ’s m é d i u m ^ w e r e u s e d a s a n t i g e n . F l u o r e s c e n t I g G a n t i -m o u s e c o n j u g a t e ( C a p p e l L a b o r a t o r i e s , U S A ) w a s u s e d a t a 1 : 2 0 d i l u t i o n . T h e i s o l a t e s u s e d a s C o n t r o ls w e r e M H O M / B R / 8 3 / L T B - 3 6 3 ( L .b. b ra z ilie n sis
) a n d M H O M / B R / 7 5 / L - 3 ( J o s e f a ) ( L .m. a m a z o
nensis),
b o t h o f h u m a n o r i g i n . P r e l i m i n a r y d a t a h a v e b e e n p r e v i o u s l y r e p o r t e d ^ .T h e i s o e n z y m e a n a l y s i s o f t h e i s o l a t e s , u s i n g t h e t h i n s t a r c h g e l e l e c t r o p h o r e s i s t e c h n i q u e , w a s c o n -d u c t e -d a t t h e U n i -d a -d e -d e E s t u -d o s E s p e c i a i s , I n s t i t u t o E v a n d r o C h a g a s , B e l é m , b y R . S . B r a g a . T h e f o l l o w i n g e n z y m e s w e r e u s e d : G 6 P D , M D H , M P I , A S A T , 6 P G D H , P G M , G P I , A L A T a n d P E P .
R E S U L T S
A l t h o u g h n o n e o f t h e i m p r i n t s m e a r s o f s k i n a n d v i s c e r a l t i s s u e c o n t a i n e d a m a s t i g o t e s , t h r e e i s o l a t e s o f
L eish m an ia
( M P R O / B R / 8 3 / M T B - 5 8 1 / 5 8 3 , M P R O / B R / 8 3 / M T B - 5 8 4 / 5 8 5 a n d M P R O / B R / 8 3 / M T B -5 7 4 ) w e r e r e c o v e r e d f r o m f i v e o f 2 7 s p e c i m e n s o f t h e r o d e n tP roech im ys iheringi den igratu s
M o o j e n ( i d e n t i f i e d b y D r . A l f r e d L . G a r d n e r , N a t i o n a l M u s e u m o f N a t u r a l H i s t o r y , W a s h i n g t o n , D . C . , U S A ) . M T B - 5 8 1 / 5 8 3 w a s i s o l a t e d w h e n t h e p o o l e d t r it u r a t e o f li v e r a n d s p l e e n t i s s u e a n d s k i n f r o m t h e n o s e a n d t a i l o f t w o a p p a r e n t l y h e a l t h y r o d e n t s w a s in o c u l a t e d i n t o t h e f o o t p a d s o f a h a m s t e r . M T B -5 8 4 / -5 8 -5 w a s i s o l a t e d in t h e s a m e m a n n e r f r o m t w o o t h e r a n i m a i s . M T B - 5 7 4 w a s i s o l a t e d w h e n a t r it u r a t e o f a p p a r e n t l y n o r m a l s k i n f r o m t h e n o s e a n d b a s e o f t h e t a i l o f a r o d e n t w a s i n j e c t e d i n t o t h e f e e t o f a h a m s t e r . T h e in j e c t i o n o f t r i t u r a t e o f l i v e r a n d s p l e e n t i s s u e o f t h i s s a m e a n i m a l i n t o a n o t h e r h a m s t e r p r o d u c e d n o a p p a r e n t i n f e c t i o n , a n d a f t e r a y e a r o f o b s e r v a t i o n t h e h a m s t e r w a s n e c r o p s i e d . T h e s k i n , l i v e r a n d s p l e e n s h o w e d n o p a r a s i t e s u p o n m i c r o s c o p i c e x a m i n a t i o n a n d c u lt u r e . T h e s e r e s u l t s i n d i c a t e t h a t t h e i n f e c t i o n w it h a t l e a s t o n e o f t h e s e i s o l a t e s w a s f r o m t h e s k i n o ft h e r o d e n t .
T h e i n c u b a t i o n p e r i o d o b s e r v e d in t h e h a m s t e r s i n o c u l a t e d w i t h t i s s u e f r o m t h e s e
P roech im ys
( M T B -5 8 1 / -5 8 3 , M T B - -5 8 4 / -5 8 -5 a n d M T B - -5 7 4 ) v a r i e d f r o m 2 . 5 t o 6 m o n t h s . I n s u b s e q u e n t i n o c u l a t i o n s , t h i s p e r io d d e c r e a s e d t o l e s s t h a n 1 m o n t h . T h e l e s i o n s w e r e s i m i l a r t o t h o s e w h i c h o c c u r in a n i m a i s i n o c u la t e d w it h p a r a s i t e s o f t h e L .m exicana
c o m p l e x w i t h la r g e , n o n u l c e r a t e d h i s t i o c y t o m a s r ic h in l a r g e a m a s-t i g o -t e f o r m s . M e -t a s -t a s i s -t o -t h e n o s e , f e e -t a n d -t e s -t e s w a s o b s e r v e d in t h e a n i m a i s ( F i g u r e 1 ) , b u t n o v i s c e r a -li z a t i o n o c c u r r e d . N o i n f e c t i o n w a s o b t a i n e d in S w i s s 4 4 w h i t e m i c e i n o c u l a t e d i n t r a c u t a n e o u s l y .
T h e p a r a s i t e s g r e w a b u n d a n t l y in b o t h m e d i a u s e d . A f t e r a n i n i t i a l f a i l u r e t o i n f e c t
L u tzo m y ia
F i g u r e 1. H a m s t e r i n o c u l a t e d s u b c u t a n e o u s t y ( j i r s t p a s s a g e )
i n t o t h e t w o h i n d f e e t w i t h t h e s t r a i n M P R O / B R /
8 3 M T B - 5 8 1 / 5 8 3 ("L. m e x i c a n a s s p . ) s h o w i n g l a r g e n o n u l c e r a t e d h i s t i o c y t o m a s ( 5 m o n t h s p o s t
-i n o c u l a t -i o n ) . P o s -i t -i v e s m e a r s a n d m e t a s t a s -i s w e r e f i r s t o b s e r v e d 3 0 d a y s a f t e r i n o c u l a t i o n .
lon gipalpis
( 0 / 3 0 p o s i t i v e ) , a t y p i c a l s u p r a p y l a r i a p a t t e r n o f i n f e c t i o n w a s o b s e r v e d in 1 5 / 1 8 , 2 5 / 2 6 a n d 1 2 / 1 7 o f t h i s p h l e b o t o m i n e s p e c i e s w i t h t h e i s o l a t e s M T B 5 8 1 / 5 8 3 , M T B 5 8 4 / 5 8 5 a n d M T B 5 7 4 r e s -p e c t i v e l y . N o n e o f t h e t h r e e i s o l a t e s f r o m t h eP roech im ys
r e a c t e d w i t h t h e s p e c i f i c o r s u b s p e c i f i c L .b ra zilien sis
m o n o c l o n a l a n t i b o d i e s . A l i i s o l a t e s r e a c t e d w i t h a n t i b o d i e s o f L .m. a m a zo n e n sis
a s w e l l a s L .m. m e x ic a n a
, a n d c o u l d n o t b e d i f f e r e n t i a t e d s u b s p e c i f i c a l l y . O n e o f t h e L .m. m exican a
a n t i b o d i e s ( L X V I I I 4 E 1 2 D 8 ) d i d n o t r e a c t w i t h e i t h e r t h e i s o l a t e s f r o m t h e r o d e n t s , o r t h o s e o f h u m a n o r i g i n ,( T a b l e 1 ) .
T h e i s o e n z y m e a n a l y s i s d e m o n s t r a t e d t h a t t h e t w o i s o l a t e s ( M T B - 5 8 1 / 5 8 3 a n d M T B - 5 7 4 ) w e r e i n d i s t i n g u i s h a b l e f r o m e a c h o t h e r a n d d i f f e r e d f r o m s t a n d a r d i s o l a t e s o f L .
m. m exican a, L . m. a m a
zo n en sis, L. m. aristedesi, L. m. p ifa n o i, L. m.
g a m h a m i
a n d L .rn.
s s p . ( G o i a s - W . B a r b o s a ) w h e n t h e f o l l o w i n g e n z y m e s w e r e u s e d : G 6 P D , M D H ,B a r r e t t o A C , P e t e r s o n N E , L a g o E , R o s a A C , B r a g a R S M , C u b a C A C , V e x e n a t J A , M a r s d e n P D . L e i s h m a n i a m e x i c a n a i n
P r o e c h i m y s i h e r i n g i d e n i g r a t u s M o o j e n ( R o d e n t i a , E c h i m y i d a e ) i n a r e g i o n e n d e m i c f o r A m e r i c a n c u t a n e o u s i e i s h m a n i a s i s . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 8 : 2 4 3 - 2 4 6 , O u t - D e z , 1 9 8 5
T a b l e 1 -
R e a c tiv ity o f p ro m a stig o te s o f iso la tes
o / L e i s h m a n i afr o m the ro d en t
P r o e c h i m y s ih e r i n g i d e n ig r a t u sfr o m T rês B raços, B ah ia, B r a z il to m o n o clo n a l a n tib o d ies by in direct im m unofluorescence.
I s o l a t e s o f L e i s h m a n i a
C l o n e C o d e ( * )
M P R O / B R / 8 3 / S p e c i f i c i t y M T B - 5 7 4
M P R O / B R / 8 3 /
M T B - 5 8 1 / 3
M P R O / B R / 8 3 / M T B - 5 8 4 / 5
M H O M / B R / 8 3 / M H O M / B R / 7 5 /
L T B - 3 6 3 ( * * ) L - 3 ( * * * )
V I 4 B 9 D 1 0 L . b r a z i l i e n s i s - _ + +
X I I I 3 F 4 F 6 L . b . b r a z i l i e n s i s - _ — + +
_
X I I I 3 E 6 B 1 1 L . b . b r a z i l i e n s i s - - + + +_
X I I I 2 A 5 A 1 0 L . b . b r a z i l i e n s i s -+ +
I X 1 F 9 D 8 L . m . a m a z o n e n s i s + + + ■ ■ + + + _ ■ ■ L X V I I 1 D 7 B 8 L . m . m e x i c a n a + + + + + + + + _ + + + L X V I I I 4 E 1 2 D 8 L . m . m e x i c a n a - - -
-( * ) M c M a h o n P r a t t a n d D a v i d 12
( * * ) C o n t r o l : h u m a n i s o l a t e o f L . b . b r a z i l i e n s i s
( * * * ) C o n t r o l : h u m a n i s o l a t e o f L . m . a m a z o n e n s i s ( J o s e f a )
M P I , A S A T , 6 P G D H , P G M , G P I , A L A T , a n d P E P . T h e s e i s o l a t e s s e e m t o b e a s u b s p e c i e s o f
L.
m exicana
v e r y c l o s e l y r e l a t e d t oL. m. am azon en sis,
f r o m w h i c h t h e y d i f f e r b y d e c r e a s e d e l e c t r o p h o r e t i c m o b i l i t y o f G P I , P E P a n d A L A T . A l s o , t h e s e t w o i s o l a t e s d i f f e r e d f r o mL. m. a risted esi
b y d e c r e a s e d m o b i l i t y o f M P I a n d g r e a t e r m o b i l i t y o f A S A T .D I S C U S S I O N
S p e c i e s o f t h e g e n u s
P roech im ys
h a v e b e e n p r e v i o u s l y f o u n d í n f e c t e d w i t h p a r a s i t e s o f t h eL.
mexicana
c o m p l e x .P roechim ysguyannensis
( G e o f f r o y ) is c o n s i d e r e d t o b e t h e p r i m a r y r e s e r v o i r o fL. m.
a m a zo n en sis
i n t h e S t a t e o f P a r á , B r a z i l 1 0 . a n dP roech im ys sem isp in o su s
( T o r r e s ) , in P a n a m a , w a s f o u n d t o b e i n f e c t e d w i t h aL e ish m a n ia
9 w h i c h w a s l a t e r d e s i g n a t e d a sL . m. a r is te d e s i
1 1 . R e c e n t l y D e d e t e t a l 7 e x a m i n e d a n e w r o d e n t s p e c i e s ,P ro ech im ys
cuvieri
P e t t e r , f r o m w h i c h a p a r a s i t e w a s i s o l a t e d f r o m n o r m a l s k i n a n d i d e n t i f i e d b y i s o e n z y m e s a sL. m.
a m a z o n e n sis.
N i n e e n z y m e s w e r e u s e d , a n d f i v e o f t h e m ( M D H , M P I , P G M , 6 P G D H a n d G P I ) c o i n c i d e d w i t h t h o s e u s e d in t h i s s t u d y . W h i l e t h e G P I e n z y m e d i d n o t d i f f e r e n t i a t e t h eP. cu vieri
i s o l a t e f r o m L .m.
a m a z o n e n sis
, t h i s s a m e e n z y m e a l o n g w i t h A L A T a n d P E P w e r e a b l e t o s e p a r a t e t h eL eish m a n ia
i s o l a t e d f r o m t h eP. i. den igratu s
f r o mL. m.
a m azon en sis.
O n t h e o t h e r h a n d , C h r i s t e n s e n e t a l 6 w e r e a b l e t o d i s t i n g u i s h e l e c t r o p h o r e t i c a l l y a P a n a -m a n i a n s t r a in o fL . m. a riste d e si
f r o mL. m. a m a z o
nensis.
T h e f o r m e r h a s a m o r e r a p id a n o d i c m i g r a t i o n f o r A L A T a n d a s l o w e r a n o d i c m o b i l i t y f o r m a l i c e n z y m e ( M E ) . I n o u r l a b o r a t o r y w e d i d n o t o b s e r v e a n y d i f f e r e n c e s b e t w e e n e l e c t r o p h o r e t i c m o b i l i t i e s o f t w o s t r a i n s ( M T B - 5 7 4 a n d M T B - 7 6 3 / 7 6 6 ) ( * ) i s o l a t e d( * ) O n e s t r a i n , M P R O / B R / 8 4 / M T B - 7 6 3 / 7 6 6 , w a s i s o l a t e d a f t e r t h i s m a n u s c r i p t w a s s u b m i t t e d . I t is m e n t i o n e d h e r e t o s u b s t a n t i a t e o u r o r i g i n a l f m d i n g s .
f r o m
P. i. den igratu s
a n d t w o s t r a i n s o fL. m.
a m a zo n en sis
f o r m a l i c e n z y m e ( M E ) ( F i g u r e 2 ) u s i n g t h e c e l l u l o s e - a c e t a t e p l a t e t e c h n i q u e . T h e e x a m i n a t i o n o f a la r g e r n u m b e r o f e n z y m e s w i l l b e n e c e s s a r y f o r a b e t t e r c h a r a c t e r i z a t i o n o f t h i s p a r a s i t e .T h e s e i s o l a t e s a p p a r e n t l y r e p r e s e n t t h e t h i r d s u b s p e c i e s o f t h e
L . m exican a
c o m p l e x i s o l a t e d in t h e T r ê s B r a ç o s r e g i o n . I t d i f f e r s in i s o e n z y m e c h a r a c t e-r i s t i c s a n d i n -r e a c t i v i t y w i t h m o n o c l o n a l a n t i b o d i e s f r o m L T B - 1 6
(L. m. a m a zo n en sis)
a n d L T B - 5 5 ( L .m exican a
s s p . ) , b o t h o f h u m a n o r i g i n , r e p o r t e d e a r l i e r 4 5 . B i o l o g i c a l l y ( g r o w t h in c u l t u r e , i n o c u l a t i o n in h a m s t e r s a n d d e v e l o p m e n t in t h e d i g e s t i v e t u b e o fLu. lo n g ip a lp is),
t h e i s o l a t e s f r o m t h e r o d e n t s a r e1
2
3
4
F i g u r e 2 . C e l l u l o s e - a c e t a t e p l a t e e l e c t r o p h o r e s i s s h o w i n g
t h e m o b i l i t i e s o f t h e m a l i c e n z y m e ( M E ) : ( 1 ) L . m . a m a z o n e n s i s , 1 3 6 2 4 1 , ( 2 ) L . m e x i c a n a s s p . , M P R O / B R / 8 3 / M T B - 5 8 4 / 5 8 5 , ( 3 ) L . m e x i c a n a
s s p . , M P R O / B R / 8 3 / M T B - 7 6 3 / 7 6 6 , a n d ( 4 ) L . m . a m a z o n e n s i s , M H O M / B R / 7 5 / L - 3 J o s e f a . T h e L . m . a m a z o n e n s i s s t r a i n s a r e u s e d a s s t a n d a r d r e f e r e n c e s i n o u r l a b o r a t o r y .
B a r r e t t o A C , P e t e r s o n N E , L a g o E , R o s a A C , B r a g a R S M , C u b a C A C , V e x e n a t J A , M a r s d e n P D . L e is h m a n ia m e x ic a n a in P r o e c h im y s ih e rin g i d e n ig r a tu s M o o j e n ( R o d e n t i a , E c h i m y i d a e ) i n a r e g i o n e n d e m i c f o r A m e r i c a n c u t a n e o u s l e i s h m a n i a s i s . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 8 : 2 4 3 - 2 4 6 , O u t - D e z , 1 9 8 5
i n d i s t i n g u i s h a b l e f r o m L T B 1 6 , b u t d i f f e r f r o m L T B -5 -5 w h i c h h a s c h a r a c t e r i s t i c s o f b o t h L . m . a m a z o n e n s i s a n d L . b . b r a z i l i e n s i s - .
T h i s is t h e f i r s t r e c o r d o f t h e i s o l a t i o n o f a
p a r a s i t e o f t h e g e n u s L e i s h m a n i a in a r o d e n t c a p t u r e d in t h e S ta t e o f B a h i a . A s f a r a s w e c a n d e t e r m i n e , t h i s is a l s o t h e f i r s t t i m e t h a t a n a t u r a l i n f e c t i o n o f L . m e x i c a n a h a s b e e n r e p o r t e d in P r o e c h i m y s i h e r i n g i d e n i g r a t u s .
R E S U M O
T r ê s i s o l a d o s d e L e i s h m a n i a f o r a m o b t i d o s d e c i n c o e n t r e 2 7 e x e m p l a r e s d o r o e d o r P r o e c h i m y s i h e r i n g i d e n i g r a t u s , c a p t u r a d o s n a r e g i ã o d e T r ê s B r a ç o s , n a m a t a a t l â n t i c a d o E s t a d o d a B a h i a , B r a s i l . O i s o l a m e n t o d e s s e p a r a s i t o f o i f e i t o a t r a v é s d e i n o c u l a ç ã o d e t r i t u r a d o d e p e l e , b a ç o e f í g a d o e m p a t a s d e h a m s t e r s . E m p e l o m e n o s u m d o s c a s o s , ( M T B 5 7 4 ) , o p a r a s i t o f o i i s o l a d o d a p e l e . M e t a s -t a s e f o i o b s e r v a d a n o s h a m s -t e r s i n o c u l a d o s , o s p a r a s i t o s c r e s c e r a m a b u n d a n t e m e n t e e m m e i o s a r t i f i c i a i s d e c u l t u r a e u m p a d r ã o s u p r a p a p i l a r i o t í p i c o f o i o b t i d o e m L u t z o m y i a l o n g i p a l p i s , i n d i c a n d o q u e o p a r a s i t o p e r t e n c e a o c o m p l e x o L . m e x i c a n a .
T o d o s o s i s o l a d o s r e a g i r a m p o s i t i v a m e n t e c o m a n t i c o r p o s m o n o c l o n a i s d e L . m . m e x i c a n a e L . m . a m a z o n e n s i s . A a n á l i s e i s o e n z i m á t i c a d i f e r e n c i o u o p a r a s i t o d e i s o l a d o s p a d r õ e s d e L . m . m e x i c a n a . L . m .
a m a z o n e n s i s . L. m . a r i s t e d e s i . L . m . p i f a n o i . L . m . g a r n h a m i e L . m . s s p ( G o i á s - W . B a r b o s a ) . O p a r a s i t o p a r e c e s e r u m a s u b e s p é c i e d e L . m e x i c a n a m u i t o p r ó x i m a à L . m . a m a z o n e n s i s , d a q u a l d i f e r e p e l a m e n o r m o b i l i d a d e e l e t r o f o r ê t i c a d e G P I , P E P e A L A T .
E s t e e o p r i m e i r o r e g i s t r o d o i s o l a m e n t o d e u m p a r a s i t o d o g ê n e r o L e i s h m a n i a e m u m r o e d o r c a p t u r a d o n o E s t a d o d a B a h i a .
P a l a v r a s c h a v e s : L e i s h m a n i a m e x i c a n a s s p . R e s e r v a t ó r i o n a t u r a l . E s t u d o d e c a m p o . B a h i a , B r a s i l
R E F E R E N C E S
1. B a r r e t t o A C , C u b a C A C , M a r s d e n P D , V e x e n a t J A , M a g a l h ã e s A V . I d e n t i f i c a ç ã o d e L e i s h m a n i a b r a z i l i e n s i s b r a z i l i e n s i s e m c ã e s n a t u r a l m e n t e i n f e c t a d o s e m u m a r e g i ã o e n d ê m i c a d e l e i s h m a n i o s e c u t ã n e o - m u c o s a . I n : R e s u m o s d a I X R e u n i ã o A n u a l d e P e s q u i s a B á s i c a e m D o e n ç a d e C h a g a s ( C o m u n i c a ç ã o 1 3 5 ) C a x a m b u , M i n a s G e r a i s , p . 1 0 9 , 1 9 8 2 .
2 . B a r r e t t o A C , C u b a C C , V e x e n a t J A , R o s a A C , M a r s d e n P D , M a g a l h ã e s A V . C a r a c t e r í s t i c a s e p i d e m i o l ó g i c a s d a l e i s h m a n i o s e t e g u m e n t a r a m e r i c a n a e m u m a r e g i ã o e n d ê m i c a d o E s t a d o d a B a h i a . I I L e i s h m a n i o s e c a n i n a . R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 7 : 5 9 - 6 5 . 1 9 8 4 .
3 . B a r r e t t o A C . P e t e r s o n N . R o s a A C . C u b a C C . V e x e n a i J A . M a r s d e n P D . C a r a c t e r i z a ç ã o d e e s t o q u e s d e
L e i s h m a n i a i s o l a d o s d e c ã o e d e r o e d o r ( P r o e c h i m y s i n h e r i n g i d e n i g r a t u s ) d a r e g i ã o s u d e s t e d a B a h i a , a t r a v é s d e a n t i c o r p o s m o n o c l o n a i s . I n : R e s u m o s d o X X C o n g r e s s o d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l . S a l v a d o r . B a h i a . p . 8 8 . 1 9 8 4 .
4 . C u b a C A C . M i l e s M . V e x e n a t A . B a r k e r D C . B u t c h e r J . M c M a h o n P r a t t D . B a r r e t t o A C . M a r s d e n P D . A f o c u s o f m u c o c u t a n e o u s l e i s h m a n i a s i s in T r è s B r a ç o s . B a h i a - B r a z i l : c h a r a c t e r i z a t i o n a n d i d e n t i f i c a t i o n o í X m / í / n a / i / a s t o c k s i s o l a t e d f r o m m a n a n d d o g s . T r a n s a c t i o n s o f t h e R o v a l S o c i e t v o t T r o p i c a l M e d i c i n e a n d H y g i e n e 7 9 : 5 0 0 - 5 0 7 . 1 9 8 5 .
5 . C u b a C A C . B a r r e t t o A C . M a r s d e n P D . L e i s h m a n i a m e x i c a n a : a s p e c t o s t a x o n o m i c o s y r a r e z a d e Ia i n f e c c i o n h u m a n a e n T r è s B r a ç o s . B a h i a . B r a s i l , R e v i s t a d a S o c i e d a d e B r a s i l e i r a d e M e d i c i n a T r o p i c a l 1 7 : 1 1 5 - 1 2 2 . 1 9 8 4 .
6 . C h n s t e n s e n H A . F a i r c h i l d G B . H e r r e r A . J o h n s o n C M . Y o u n g D O . V a s q u e / A M . T h e e c o l o g y o f c u t a n e o u s l e i s h m a n i a s i s in t h e R e p u b l i c o f P a n a m a . J o u r n a l o f M e d i c a i E n t o m o l o g y 2 0 : 4 6 3 - 4 8 4 . 1 9 8 3 .
7 . D e d e t J P . D e s j e u x P . G o y o t P . G r o s s e l i n H . I n f e s t a t i o n n a t u r e l l e d e P r o e c h i m y s c u v i e r i P e t t e r , 1 8 7 8 ( R o n g e u r s , E c h i m y i d e s ) p a r L e i s h m a n i a m e x i c a n a a m a z o n e n s i s
L a i n s o n e t S h a v v 1 9 7 2 ( K i n e t o p l a s t i d e . T r y p a n o s o m a t i d e ) e n G u y a n e F r a n ç a i s e . C o m p t e s R e n d u e s d e l 'A c a - d e m i e d e s S c i e n c e s d e P a r i s . I. 2 9 8 . S e r i e I I I . N o . 4 : 8 5 - 8 7 . 1 9 8 4 .
8 . H e n d r i c k s L D . W o o d D E . H a j d u k M E . H a e m o - f l a g e l l a t e s : c o m m e r c i a l l y a v a i l a b l e l i q u i d m e d i a f o r r a p i d c u l t i v a t i o n . P a r a s i t o l o g y 7 6 : 3 0 9 3 1 6 . 1 9 7 8 .
9 . H e r r e r A . T e l t o r d S R . C h r i s t e n s e n H A . K n z o o t i c c u t a n e o u s l e i s h m a n i a s i s in e a s t e r n P a n a m a . I. I n v e s t i g a t i o n o f t h e i n f e c t i o n a m o n g f o r e s t m a m m a l s . A n n a l s o f T r o p i c a l M e d i c i n e a n d P a r a s i t o l o g y 6 5 : 3 4 9 - 3 5 8 . 1 9 7 1 . 1 0 . L a i n s o n R . L e i s h m a n i a l p a r a s i t e s o f m a m m a l s in r e l a t i o n
t o h u m a n d i s e a s e . S y m p o s i u m o f t h e Z o o l o g i c a l S o c i e t y . L o n d o n 5 0 : 1 3 7 - 1 7 9 . 1 9 8 2 .
1 1. L a i n s o n R . S h a v v J J . T h e r o l e o f a n i m a i s in t h e e p i d e - m i o l o g y o f S o u t h A m e r i c a L e i s h m a n i a s i s . I n : L u m s d e n W H R . E v a n s D A ( e d ) B i o l o g y o f t h e K i n e t o p l a s t i d a . A c a d e m i c P r e s s . L o n d o n . p. 1-1 1 6 . 1 9 7 9 .
1 2 . M c M a h o n P r a t t D , D a v i d J R . M o n o c l o n a l a n t i b o d i e s t h a t d i s t i n g u i s h b e t w e e n N e w W o r l d s p e c i e s o f l e i s h m a n i a . N a t u r e 2 9 1 : 5 8 1 - 5 8 3 . 1 9 8 1 .
1 3 . W a l t o n B C . S h a w J J . L a i n s o n R . O b s e r v a t i o n s o n in v i t r o c u l t i v a t i o n o f L e i s h m a n i a b r a z i l i e n s i s . J o u r n a l o f P a r a s i t o l o g y 6 3 : 1 1 1 8 - 1 1 1 9 . 1 9 7 7 .
