Rev. Soc. Bras. Med. Trop. vol.11 número4

THE EFFECT OF A DIALYZABLE TRANSFER FACTOR (TFd) IN THE

EXPERIMENTAL AMERICAN TRYPANOSOMIASIS OF MICE*

(Preliminary report)

Humberto Menezes**

A dialyzable transfer factor (TFd) was obtained from spleen cells, o f mice

vaccinated w ith the avirulent

P F

strain o f

T r y p a n o s o m a c r u z i .

This factor reduced significahtly the parasitemia o f anima/s treated before o r

after the infection w ith a virulent strain o f the same parasite, b u t does n o t reduced

the m o rta lity rate to a levei lower than that o f the co n tro l mice.

I t is expected that in a next future, new techniques in the use ofsuch factor

w ill bring better resutts.

T h e k n o w le d g e o f t h e c e l l u l a r i m m u n i t y

has p r o g r e s se d g r e a t l y s i n c e L a n d s t e i n e r a n d

Ch a se ( in 6 ) d e m o n s t r a t e d t h a t t h e d e l a y e d

h y p e r s e n s i t iv it y c o u l d b e t r a n s f e r e d b y c e lls .

I n s p it e o f t h e o p i n i o n o f s o m e i n v e s t i-

g a t o r s1 t h a t d e l a y e d h i p e r s e n s i t i v i t y a n d

c e llu la r i m m u n i t y a r e n o t i d e n t i c a l , i t is

a c c e p t e d b y o t h e r s 2 ' 3 , 6 t h a t b o t h a r e a l i k e .

I n 1 9 7 3 , R i b e i r o d o s S a n t o s 9 h a s d e ­

m o n s t r a t e d e x p e r i m e n t a l l y t h a t t h e i m m u ­

n i t y i n t h e a m e r i c a n t r y p a n o s o m i a s i s is

p r e d o m i n a n t ly c e l l u l a r a n d c o u l d b e t r a n s -

f e r e d b y c e l ls . I d e n t i c a l c o n c l u s i o n w a s

d r a w n , i n d e p e n d e n t l y , f r o m t h e e x p e r i m e n t s

o f R o b e r s o n a n d H a n s o n 1 0 .

T h e u se o f a d i a l y z a b l e e x t r a c t o f

l y m p h o c y t e s i n t h e t r a n s f e r o f c e l l u l a r

i m m u n i t y b y L a w r e n c e e t a is . 4 a n d t h e

o b s e r v a t io n a b o v e m e n t i o n e d s t i m u l a t e d t h e r e a li z a t io n o f t h i s w o r k i n w h i c h I t r i e â t o

v e r if y t h e e x i s t e n c e o f a n y p o s s i b l e s t im u -

la t io n o f t h e i m m u n o l o g i c d e f e n s e s o f e x p e ­

r im e n t a l a n i m a i s b y a d i a l y z a b l e e x t r a c t o f

s e n s it iz e d c e lls .

M A T E R I A L A N D M E T H O D S

Trypanosoma cruzi

o f t h e a v i r u l e n t s t r a i n

PF1

, h a r v e s t e d in W a r r e n l i q u i d m é d i u m 11

f o l l o w i n g t h e N a k a m u r a t e c h n i q u e 8 w a s

w a s h e d t h r e e t im e s i n s t e r i l e s a lin e s o l u t i o n

( N a CI 0 , 1 5 M ) a n d f i n a l l y s u sp e n d e d i n id e n ­

t i c a l s o l u t i o n .

A b o u t 5 0 % o f t h e p a r a s it e s w e r e m o b i l e

f o r m s a n d o n l y 2 % o f t r y p o m a s t i g o t e s .

F r o m t h i s s u s p e n s i o n 3 . 5 0 0 f l a g e l la t e s p e r

g / b o d y w e i g h t w e r e i n j e c t e d , s u b c u t a -

n e o u s l y , i n 4 0 a l b i n o m i c e w i t h lO g e a c h .

F i f t e e n d a y s « f t e r , a l i t h e a n i m a i s w e r e

k i l l e d b y c e r e b r a l c o n c u s s i o n a n d t h e sp le e n s

c o l l e c t e d a s s e p t i c a l l y .

T h e t o t a l w e i g h t o f t h e m a t e r ia l w a s 6 g

t h a t w a s g r i n d e d i n 6 0 m l o f d i s t i l l e d w a t e r ,

i n a P o t t e r - E l v e h j e n h o m o g e n i z e r . T h i s su s-

p e n s i o n w a s p l a c e d in a c e l lo p h a n e sa c a n d

d i a l y z a t e d , a g a in s t 6 0 m l o f N a C I ( 0 . 1 5 M )

p l u s B P S ( 0 , 0 5 M ) , p H 7 , 2 , d u r i n g 2 4 h o u r s

a t 4 ° C .

T h e d i a l y z a t e w a s i n j e c t e d , b y s u b c u t a -

n e o u s r o u t e , i n 1 0 m i c e w i t h 1 0 g o f b o d y

w e i g h t , 0 , 2 m l , O ^ m l a n d 0 , 1 m l i n t h e t h r e e

s u b s e q u e n t d a y s , r e s p e c t i v e ly .

T w e l v e d a y s l a t e r t h e a n i m a i s w e r e

c h a l le n g e d w i t h 3 . 8 0 0 p a r a sit e s/ g o f t h e

v i r u l e n t

Y

s t r a i n , b l o o d f o r m s f r o m m i c e in

t h e 8 d a y o f i n f e c t i o n . T h e i n f e c t i o n w i t h

t h e v i r u l e n t p a r a s i t e s w a s b y s u b c u t a n e o u s

r o u t e .

* Presented pa rt ially t o t he 6 ? Cong. Lat inoem ericano de Farm acologia. 0 4 / 1 2 / 1 9 7 6 . Busnos Aires. Argent ina.

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Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

Vol. XI — N? 4

T e n m i c e C o n t r o l s w e r e i n o c u l a t e d a s

a b o v e a n d t e n o t h e r s , t h e s e c o n d e x p e r i ­

m e n t a l g r o u p , w e r e i n f e c t e d i n t h e s a m e

w a y . T h is l a t e r g r o u p , 5 d a y s a f t e r t h e

i n f e c t i o n , w a s t r e a t e d w i t h t h e d i a l y z a t e ,

0 , 2 m l e v e r y d a y , d u r i n g t h e f o l l o w i n g 1 0

d a y s.

P a r a s i t e m ia o f a l i g r o u p s w a s d o n e 8 , 1 5

a n d 3 0 d a y s a f t e r t h e v i r u l e n t i n f e c t i o n . T h e

c u m u l a t i v e m o r t a l i t y r a t e w a s s e t t le d o n t h e

sa m e d a y s , t o o .

R E S U L T S

T h e r e s u lt s w e r e m e a g e r i f w e c o n s i d e r

t h e m o r t a l i t y r a t e o f t h e T F d t r e a t e d a n i ­

m a is b u t g o o d a c c o r d i n g t o t h e p a r a s i t e m i a

t h a t w a s s t a t i s t i c a l l y s i g n i f i c a n t i n t h e I S* * 1

d a y ( G r a p h I ) t o b o t h t r e a t e d g r o u p s .

T .2 0 0 0 * A P H I

0 • 15 JO

DAYS APTBl n rtC T IO B

G r a p h I — Pa r a s i t e m ia 15* * 1 d a y

C / l - T F d X 1 = 8 , 6

C / T F d - l X 2 = 7 , 8

X 2 ( d f = 1 ) = 3 , 8 ( 5 % ) a n d 6 , 6 ( 1 % ) . D I S C U S S I O N

I n s p it e o f t h e t e p o o r r e s u lt s i t se e m s t o

m e t h a t m o r e r e s e a r c h m u s t b e d o n e , w i t h

n e w t e c h n i q u e s o f i n f e c t i o n a n d t r e a t m e n t .

U s i n g a s m a ll d o s e o f t h e T F d b e f o r e t h e

i n f e c t i o n I o b t a i n e d a l m o s t t h e sa m e r e s u lt s

a s t r e a t i n g t h e i n f e c t e d m i c e w i t h a la r g e r

d o se .

I n a n e w s c h e m a , w i t h a lo n g e r p r e -

t r e a t m e n t , t b e T F d w i l l h a v e , p e r h a p s , a

b e t t e r a c h i e v e m e n t in t h e p r e v e n t i o n o f a

e x p e r i m e n t a l t r y p a n o s o m i a s i s i n f e c t i o n . T h e n a t u r e a n d p r o p e r t i e s o f t h e T F d

w e r e e x t e n s i v e l y e x a m in e d b y L a w r e n c e et

a is. w h o s e p a p e r s I r e c o m m e n d t o t h o s e

Julho-Agosto, 1977

Rev. Soc. Bras. Med. Trop.

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RESUMO

Um fa to r dialisavel capaz de transferir a imunidade de células sensibilizadas

fo i o btido de camundongos vacinados com a cepa

P F .

Este fa to r fo i capaz de reduzir significantemente a parasitemia de animais

previamente tratados com o mesmo e depois infectados ou de camundongos

infectados inicialmente c depois tratados.

Os resultados foram considerados pobres com respeito

a

mortalidade dos

tratados, mas não dcsencorajadores, esperando-se melhores conclusões no futuro.

R E F E R E N C E S

1 . B A R R E T T , J , T . — T c x t b o o k o f I m m u -

n o l o g y . 1 9 7 0 , T h e C . V . M o r s h y C o . S t .

L o u i s .

2 . B E L L A N T i ; J . A . — I m m u n o l o g y . 1 9 7 1 .

W . B , S a u r . d e r s C o . P h i l a d e l p h i a .

3 . F U D E N B E R G , H . H . ; S T I T E S , D . P. ;

C A L D W E L L , J . L & W E L L S , J . V . -

B a s ic a n d C l i n i c a i I m m u n o l o g y . 1 9 7 6 .

L a n g e M e d , P u b l i c . L o s A l t o s . C a l i f ó r n i a .

4 . L A W R E N C E , H . S . — T r a n s f e r F a c t o r ,

A d v e n c e s I m m u n o l . 1 1 : 1 9 5 - 1 9 6 9

5 . L A W R E N C E , H . S . — T r a n s f e r F a c t o r . I n

M e d i a t o r s o f C e l l u l a r I m m u n i t y . H . S .

L a w r e n c c & M . L a n d y . E d . 1 9 6 9 . A c a -

d e m i c Pr e ss. N . Y o r k

6 . L A E R E N C E , H . S . — T r a n s f e r F a c t o r .

a n d C e l l u l a r I r n m u n i t y . I n I m m u n o -

b i o l o g y . R

J \.

G o o d & D . W . F i s c h e r . E d .

1 9 7 4 . S i n a u e r A s s o c . I n c . P u b l i s h .

S u n d e r i a n d . M a s s a c h u s s e t t s .

7 . M E N E Z E S , H . — T h e u n - i n f f íc t i v i t y o f

t h e

PF

c u i t i v a t e d s t r a i n o f

Trypanosoma

cruzi

t o m i c e . e v a l u a t i o n t h r o u g h a o n e y e a r p e r i o d b y b f o o d c u l t u r e s a n d

h i s t o p a t h o l o g y .

Rev. Soc. Bras. Med.

Trop.

S ; 1 - 1 5 , 1 9 7 5 .

8 . N A K A M U R A , M . — C u l t i v a t i o n o f

Trypanosoma cruzi

i n a P r o t e i n - f r e e d i a l y z a t e m e d i u m .

Proc. Soc. Exp. Biol.

Med. 1 25 :

7 7 9 - 7 8 0 . 1 9 6 7 .

9 . R I B E I R O D O S S A N T O S , R . - C o n t r i ­

b u i ç ã o a o e s t u d o d a i m u n i d a d e n a f a se

a g u d a d a D o e n ç a d e Ch a g a s e x p e r i ­

m e n t a l . T é s e . 1 9 7 3 . F a c . C i ê n c i a s M e d .

U N I C A M P . B r a s i l

1 0 . R 0 8 E R S 0 N , E . L . & H A N S O N , W . L . -

Pa s siv e t r a n s f e r o f i m m u n i t y t o

Trypa­

nosoma cruzi. Trans. fíoy. Soc. Trop.

Med. & Hyg.

« 5 ( 4 ) : 3 3 8 . 1 9 7 4 ( Co r r e s- p o n d e n c e ) .