ANÁLISES HISTOLÓGICAS E HISTOMORFOMÉTRICAS

A análise histológica das lâminas coradas com H.E permitiu a avaliação qualitativa do processo cicatricial por meio da investigação do processo inflamatório e de remodelação. Os achados histológicos são mostrados na figura 2 para os dois períodos de tratamento.

Figura 2. Aspectos qualitativos do processo cicatricial de queimaduras tratadas com

Biocompósitos de ZnO/AgNPs/X. americana nos períodos experimentais de 7 e 14 dias. As setas indicam células inflamatórias.

No tocante à análise qualitativa do processo inflamatório, observou-se que, no tempo experimental de sete dias, os espécimes do grupo tratado com o biocompósito da casca (BC) apresentaram uma menor quantidade de tecido de granulação, presença de fibroblastos e uma melhor organização das fibras colágenas quando comparados aos animais do grupo BF, caracterizando, portanto, a fase de proliferação no processo de cicatrização.

Aos 14 dias, o processo inflamatório nos animais do grupo CN foi reduzido e o número de fibroblastos foi aumentado, apresentando ainda tecido de granulação. Os animais do grupo BC apresentaram fibroblastos maduros, ausência de infiltrado inflamatório e uma completa modelação das fibras colágenas, quando comparados aos demais grupos, evidenciando nesse tratamento a concretização da fase de remodelação do processo de cicatrização normal do tecido.

O processo de cicatrização foi avaliado ainda de forma quantitativa e o número total de células inflamatórias é apresentado na figura 3.

Figura 3. Quantificação do número de células inflamatórias (und/20.000 μm2_{) nos grupos}

estudados em períodos experimentais de 7 e 14 dias.

Em análise da figura 3, observa-se que no período de 7 dias, os grupos tratados com os biocompósitos da casca e folha de X. americana apresentaram redução no número de neutrófilos quando comparados aos grupos controles. No período de 14 dias, há novamente diminuição no número de neutrófilos, indicando que nos tempos de tratamento investigado, o grupo tratado com a associação ZnO/AgNP/Casca do caule de X. americana apresenta a maior redução do processo inflamatório.

A ação anti-inflamatória do biocompósito pode ser associada, por exemplo, à presença de metabólitos secundários na X. americana. Estudos anteriores com a mesma espécie reportam a sua ação anti-inflamatória no processo de tendinite experimental em ratos (LEAL et al., 2016). Além disso, as propriedades bactericidas das substâncias inorgânicas utilizadas também podem justificar a redução do processo inflamatório, dado que a ausência de infecção por microrganismos patógenos sinaliza um menor recrutamento de células inflamatórias. A prata já é utilizada na formulação de cremes e pomadas com fins cicatrizantes (CHERNOUSOVA; EPPLE, 2013). No entanto, quando em escala manométrica, seu potencial bactericida é potencializado (MARAMBIO-JONES; HOEK, 2010). O ZnO também assume propriedades bactericidas, favorecendo junto à prata o processo de cicatrização através da diminuição da infiltração de linfócitos e aumento da reepitelização (PATI et al., 2014).

O processo de cicatrização das queimaduras foi avaliado ainda pela investigação da fase de remodelação. A figura 4 traz a quantificação para o número total de fibroblastos.

Figura 4. Quantificação do número de fibroblastos (und/20.000 μm2_{) nos grupos estudados}

em períodos experimentais de 7 e 14 dias.

Observa-se na figura 4 que no período de 7 dias de tratamento, os grupos biocompósitos da casca e folhas de X. americana apresentaram maior número de fibroblastos diferenciando-se significativamente do grupo controle negativo. Aos 14 dias, o aumento no número de células fibroblásticas é novamente maior nos grupos BC e BF, havendo diferença significativa entre BC e CN. Esses dados revelam que o biocompósito

formado por ZnO/AgNPs/Casca do caule de X. americana contribui de forma positiva no processo de remodelação do tecido.

Os fibroblastos são os principais responsáveis pela síntese de colágeno e regeneração da matriz extracelular, funcionando como indicadores da evolução do processo de cicatrização em análises histológicas (FERREIRA; PAULA, 2013).

4. CONCLUSÃO

Pela análise dos dados é possível inferir que a associação entre ZnO/AgNPs, extratos etanólicos das cascas do caule e folhas de X. americana atuaram positivamente no processo de cicatrização de queimaduras cutâneas induzidas em camundongos. Os achados macros e microscópicos indicam que o biocompósito das cascas do caule da X. americana se destacou através da redução da área da lesão em valores significativamente superiores aos grupos controles, além da redução do processo inflamatório e maior deposição de células fibroblásticas de forma organizada à superfície cutânea. Os resultados da pesquisam apontam que a utilização de plantas medicinais associadas a outras substâncias bactericidas mostram-se eficazes no processo de cicatrização de injúrias por queimaduras, podendo se tornar promissores bioprodutos na área biomédica.

5. REFERÊNCIAS

BARROS, E. M. L.; SANTOS, D. K. B.; COELHO, N. P. M. F.; REIS, M. R; BEZERRA, B. G..Efeitos da Passiflora edulis S. no processo de cicatrização em queimaduras induzidas em camundongos. ConScientiae Saúde, v. 15, n. 1, p. 122-128, 2016.

BRASILEIRO, M. T. Padronização, atividade biológica e desenvolvimento de formas

farmacêuticas semi-sólidas à base de Ximenia americana L. (Dissertação) Mestrado em

Ciências Farmacêuticas - Universidade Federal de Pernambuco, Recife, 2008.

BRASILEIRO, M. T.; EGITO, A. A.; LIMA, J. R.; RANDAU, K. P.; PEREIRA, G. C.; NETO, P. J. R. Ximenia americana L.: botânica, química e farmacologia no interesse da tecnologia farmacêutica. Revista Brasileira de Farmácia, v. 89, p. 164-167, 2008.

BRASSOLATTI, P. Efeitos da terapia laser de baixa intensidade e de membranas de

celulose bacteriana no tratamento de queimaduras de terceiro grau em ratos. (Tese)

BRETT, D. W. A. Discussion of silver as an antimicrobial agent: Alleviating the confusion,

Ostomy Wound Manage, v. 52, n. 1, p. 34-41, 2006.

CARVALHO, G, F. S.; MARQUES, L. K.; SOUZA, H. G.; SILVA, L. R.; FERREIRA, D. C. L.; AMARAL, F. P. M.; et al. Phytochemical study, molecular docking, genotoxicity and therapeutic efficacy of the aqueous extract of the stem bark of Ximenia americana L. in the treatment of experimental COPD in rats. Journal of Ethnopharmacology, v. 247, p. e112259, 2020.

CHERNOUSOVA, S.; EPPLE, M. Silver as antibacterial agent: ion, nanoparticle, and metal.

Angewandte Chemie, v. 52, p. 1636–1653, 2013.

CLARK, R. A.; GHOSH, K.; TONNESEN, M. G. Tissue engineering for cutaneous wounds. Journal of Investigative Dermatology, v. 127, n. 5, p. 1018-1029, 2007.

DIAS, T. L. M. F.; MELO, G. M. A.; SILVA, Y. K. C.; QUEIROZ, A. C.; GOULART, H. F.; ALEXANDRE-MOREIRA, M. S.; et al. Antinociceptive and anti-inflammatory activities of the ethanolic extract, of fractions and of epicatechin isolated from the stem bark of Ximenia americana L. (Oleacaceae). Revista Virtual de Química, v. 10, n. 1, p. 86-101, 2018. FERREIRA, F. V.; PAULA, L. B. Sulfadiazina de prata versus medicamentos fitoterápicos: estudo comparativo dos efeitos no tratamento de queimaduras. Revista Brasileira de

Queimaduras, v. 12, n. 3, p. 132-139, 2013.

GUO, S. A.; DIPIETRO, L. A. Factors affecting wound healing. Journal of Dental Research, v. 89, n. 3, p. 219-229, 2010.

LANSDOWN, A. B. G. Silver in health care: antimicrobial effects and safety in use. Current

Problems in Dermatology, v. 33, p. 17-34, 2006.

LEAL, S. S.; UCHÔA, V. T.; SILVA, J. F.; SOARES, R. B.; MOTA, D. M.; ALENCAR, R. C.; et al. Eficácia da fonoforese com Ximenia americana L. na inflamação de tendão de ratos,

Revista Brasileira de Medicina do Esporte, v. 22, n. 5, p. 355-360, 2016.

MAJNO, G.; JORIS, I. Cells, tissues and disease: principles of general pathology. Blackwell Science: Cambridge, 1996.

MAO, C., XIANG, Y., LIU, X., CUI, Z., YANG, X., YEUNG, K. W. K.; et al. Photo-Inspired

antibacterial activity and wound healing acceleration by hydrogel embedded with Ag/Ag@AgCl/ZnO nanostructures. ACS Nano, v. 11, p. 9010-9021, 2017.

MARAMBIO-JONES, C.; HOEK, E. M. A. review of the antibacterial effects of silver

nanomaterials and potential implications for human health and the environment. Journal of

Nanoparticle Research, v. 12, p. 1531–1551, 2010.

MATOS, F. J. A. Plantas medicinais: guia de seleção e emprego das plantas usadas em

fitoterapia no Nordeste do Brasil. 3ª ed, Imprensa Universitária: Fortaleza, 2007.

MAYRINCK, C.; RAPHAEL, E.; FERRARI, J. L.; SCHIAVON, M. A. Síntese, propriedades e

aplicações do ZnO nanoestruturado. Revista Virtual de Química, v.6, n. 5, p. 1185-1204, 2014.

MOLA, R.; FERNANDES, F. E. C. V.; MELO, F. B. S.; OLIVEIRA, L. R.; LOPES, J. B. S. M.; ALVES, R. P. C. N. Características e complicações associadas às queimaduras de pacientes em unidade de queimados. Revista Brasileira de Queimaduras, v. 17, n. 1, p. 8-13, 2018.

OGUNLEYE, D.S.; IBITOYE, S.F. Studies of antimicrobial activity and chemical constituents of Ximenia americana. Tropical Journal of Pharmaceutical Research, v. 2, n. 2, p. 239- 241, 2003.

PALMA , A. F. M.; MARQUES, L. K. M.; CARNEIRO, R. S.; CARVALHO, G. F. S.; FERREIRA, D. C. L.; SANT’ANA, A. E. G.; et al. avaliação dos extratos hidroalcoólicos do caule e folhas da Ximenia americana L. na cicatrização de feridas excisionais aguda em pele de camundongos. Revista Virtual de Química, v. 12, p. 37-50, 2020.

PATI, R.; MEHTA, R. K.; MOHANTY, S.; PADHI, A.; SENGUPTA, M.; VASEEHARAN, B.; et al. Topical application of zinc oxide nanoparticles reduces bacterial skin infection in mice and exhibits antibacterial activity by inducing oxidative stress response and cell membrane disintegration in macrophages. Nanomedicine: Nanotechnology, Biology and Medicine, v. 10, n. 6, p. 1195–1208, 2014.

RODRIGUES, D. F.; MENDES, F. F.; FILHO, A. D. F. N.; SILVA, J. A.; SILVA, L. A. F. O extrato da casca de barbatimão, Stryphnodendron adstringens (Martius) Coville, na cicatrização de feridas em animais. Enciclopedia Biosfera, Centro Científico Conhecer, v. 9, p. 1586, 2013.

ROQUE, A. A.; ROCHA, R. M.; LOIOLA, M. I. B. Uso e diversidade de plantas medicinais da Caatinga na comunidade rural de Laginhas, município de Caicó, Rio Grande do Norte (nordeste do Brasil). Revista Brasileira de Plantas Medicinais, v. 12, n. 1, p. 31-42, 2010.

SHETTAR, A. K.; KOTRESHA, K.; KALIWAL, B. B.; VEDAMURTHY, A. B. Evaluation of in

vitro antioxidant and anti-inflammatory activities of Ximenia americana extracts. Asian

Pacific Journal of Tropical Disease, v. 5, n. 11, p. 918-923, 2015.

UCHÔA, V. T.; SOUSA, C. M. M.; CARVALHO, A. A.; SANTANA, A. E. G.; CHAVES, M. H. Free radical scavenging ability of Ximenia americana L. stem bark and leaf extracts. Journal

of Applied Pharmaceutical Science, v. 6, p. 91-96, 2016.

EFEITOS DO EXTRATO DO ABACAXI - Ananas comosus (L.)