Revista da Sociedade Brasileira de Medicina Tropical 26(1):61, jan-m ar, 1993
RESUMO DE TESE
ANÁLISE D A ESTRUTURA E
EXPRESSÃO DO ÇENE PARA UM
ANTÍGENO PRINCIPAL DO
TEGUMENTO DO
SCHISTOSOMA
M ANSO NI
E s ta te s e d iz re s p e ito à a n á lise d a e s tru tu ra e e x p re ssã o d o g e n e q u e c o d ific a o p re c u rs o r de S m l5 , u m a n tíg e n o te g u m e n ta r n ão g lic o sila d o do
S. mansoni.
O p o n to in ic ia l p a ra o p ro je to foi u m c D N A p a rc ia l d e n o m in a d o A 7 0 , iso lad o co m a n tic o rp o s c o n tra a n tíg e n o s d e m e m b ra n a do te g u m e n to d o v e rm e a d u lto , an tes d o in ício de m eu s e s tu d o s . A id e n tific a ç ã o d e S m l5 com o a n tíg e n o te g u m e n ta r foi re a liz a d a a tra v é s d e u m a c o m b in a ç ã o d e e x p e rim e n to s e n v o lv e n d o W e ste rn b lo ts , im u n o flu o re s c ê n c ia e im u n o m a rca ção c o m ' o u ro c o lo id a l. O s e stu d o s c o m o u ro c o lo id a l ao n ív e l d a m ic ro s c o p ia e le trô n ic a in d ic a ra m q u e as p a rtíc u la s d e oU ro esta v a m asso c ia d as à m atriz te g u m e n ta r e p o ss iv e lm e n te a o s c o rp o s d iscó id es.A s e q ü ê n c ia o b tid a c o n té m 4 7 0 0 n u cleo tíd eo s e re p re se n ta p ro v a v e lm e n te o “ o p e n re a d in g fram e” to ta l d o g e n e , c o d ific a n d o u m a p ro te ín a d e 1032 a m in o á c id o s e u m a m a ssa m o le c u la r d e 1 1 6 .9 0 0 D a . C o n s e q u e n te m e n te , o g e n e c o d ific a u m a p ro te ín a m u ita m ais lo n g a q u e S m l5 , su g e rin d o q u e o p r e c u rs o r é p ro c e ssa d o p ro te o litic a m e n te . A l é m d i s t o , u m a r e g i ã o d e r e p e t i ç õ e s c o m p re e n d e n d o 9 6 4 b p fo i e n c o n tra d a n o m eio do q u a d ro d e le itu ra .
S m l 5 é d e te c ta d o e m v e rm e s c o m id ad e v a r ia n d o d e 2 a 6 s e m a n a s , m a s n ã o e m e s q u is to s s ô m u lo s . A n á lise s u tiliz a n d o N o rth e rn b lo ts , ju n ta m e n te c o m o p a d rã o d e ex p ressão d e S m l5 e o u tro s p ro v á v e is p ro d u to s d o p re c u rs o r s u g e rira m q u e: a) o g e n e é re g u la d o ao n ív e l de tra n s c riç ã o d u ra n te o d e se n v o lv im e n to , e b ) o p r o c e s s a m e n t o p r o t e o l í t i c o d o p r e c u r s o r é d ife re n c ia lm e n te re g u la d o d u ra n te a m atu ra ção .
O tr a b a lh o f u tu r o s e r á o rie n ta d o p a r a a in v e s tig a ç ã o d o re la c io n a m e n to e n tre o p re c u rs o r e se u s p ro d u to s e d a p o ssív e l im p o rtâ n c ia d o s p ro d u to s p ro c e s s a d o s , e e m p a rtic u la r, d a re g iã o d e re p e tiç ã o p a ra a im u n id a d e p ro te to ra c o n tra o p a ra s ita .
ANALYSIS OF THE STRUCTURE
AND EXPRESSION OF THE GENE
FOR A MAJOR TEGUMENTAL
ANTIGEN OF
SCHISTOSOMA
MANSONI
T h e su b je c t o f th is th e s is is th e an a ly sis o f th e stru c tu re a n d e x p re ssio n o f th e g e n e e n c o d in g th e p re c u rs o r fo r S m l5 , a n o n -g ly c o s y la te d 15 k D a teg u m en tal a n tig e n o f 5.
mansoni.
T h e sta rtin g p o in t fo r th is p ro je c t w a s a p a rtia l c D N A , A 7 0 , iso la te d w ith an ti-te g u m e n ta l m e m b ra n e a n tib o d ie s p r io r to th e s ta rt o f m y w o rk . S m l5 w a s id e n tifie d as a teg u m en tal a n tig e n u sin g a n tib o d ie s a ffin ity p u rifie d fro m an tite g u m e n ta l m e m b ra n e a n ti-s e ra w ith th e g alac to sid a se fu s io n p ro te in o f A 7 0 , in a c o m b in a tio n o f e x p e r i m e n t s i n v o l v i n g W e s t e r n b l o t s , im m u n o flu o re sc e n c e a n d g o ld im m u n o la b e llin g . A t th e u ltra s tru c tu ra l lev ei th e g o ld p a rtic le s w e re asso c ia te d w ith th e te g u m e n ta l m a trix a n d p o ssib ly w ith th e d isc o id b o d ie s.T h e c o lla te d seq u e n c e c o n ta in s 4 7 0 0 n u cle o tid e s a n d re p re se n ts th e p u ta tiv e fu ll le n g th o p e n re a d in g fram e o f th e g en e , e n c o d in g a p ro te in o f 103 2 am in o ac id s w ith a ca lc u la te d m o le c u la r m ass o f 1 1 6 ,9 0 0 D a . T h u s, th e g e n e en c o d e s a m u c h lo n g e r p ro te in
th a n th a t id e n tifie d in th e te g u m e n ta l m e m b ra n e s, s u g g e stin g th a t th e p re c u rs o r is h ig h ly p ro c e sse d . A 9 6 4 b p re g io n o f re p e a ts w a s fo u n d to b e p re se n t w ith in th e tra n sla te d fram e.
S m l5 is p re s e n t in 2 w e e k to 6 w e e k o ld w o rm s b u t n o t n e w l y t r a n s f o r m e d o r l u n g s t a g e sch isto so m u la . N o rth e rn b lo t a n a ly s is to g e th e r w ith th e p a tte m o f e x p re s s io n o f S m l5 a n d ad d itio n a l p u ta tiv e p ro d u c ts o f th e p r e c u rs o r s u g g e ste d th at: a) th e g en e is d e v e lo p m e n ta lly re g u la te d , a n d b ) th e p ro teo ly tic pro cessin g o f th e p re c u rso r is d ifferen tially
re g u la te d d u rin g m a tu ra tio n .
F u tu re w o rk w ill b e d ire c te d a t in v e stig a tin g p re c u rs o r-p ro d u c ts re la tio n s h ip s a n d th e p o ssib le ro le o f th e p ro c e sse d p ro d u c ts , a n d in p a rtic u la r th e r e p e titiv e a m in o a c id s e q u e n c e , in p r o te c tiv e im m u n ity .
Frederico G. C. Abalh
T e s e a p re s e n ta d a a o N a tio n a l In stitu te f o r M e d ic a i R e s e a rc h , p a r a a o b te n ç ã o d o T ítu lo d e P h D (D o u to ra d o )
M ill H ill, L o n d re s , 199 2 .
R e c e b id o p a r a p u b lic a ç ã o e m 2 4 /1 1 7 9 2 .
