6. Hematologia
6.1. Hemograma
O hemograma permite quantificar e avaliar qualitativamente os eritrócitos, leucócitos e plaquetas, sendo um dos exames laboratoriais mais frequentemente
requisitados. É, portanto, um exame fundamental para o estudo da função hematológica e para o diagnóstico de doenças com esta relacionadas. (37)
O hemograma inclui o eritrograma, o leucograma e o plaquetograma. No laboratório de Hematologia, o hemograma é realizado no equipamento automático Beckman Coulter UniCel DxH 800 que, para além dos parâmetros acima referidos, permite também realizar a contagem de reticulócitos e de outros parâmetros relacionados com estes, bem como a contagem de eritroblastos.
6.1.1. Contador Hematológico Beckman Coulter UniCel DxH 800
O UniCel DxH 800 é um analisador hematológico automático que se baseia no princípio de Coulter e na tecnologia VCS (Volume, Condutividade, Scatter). No laboratório de Hematologia, existem dois analisadores UniCel DxH 800 que estão conectados e que são utilizados pelo laboratório de Hematologia de rotina e pelo laboratório de Urgência.
O princípio de Coulter, ou princípio da impedância, permite fazer contagens celulares através da medição de variações de impedância que ocorrem quando uma partícula (como uma célula sanguínea), suspensa numa solução isotónica e boa condutora de eletricidade, atravessa um pequeno orifício situado entre dois elétrodos. A passagem de cada célula pelo orifício aumenta a impedância (resistência) da corrente elétrica entre os dois elétrodos, gerando um pulso elétrico. O número de pulsos indica o número de células e a amplitude de cada pulso é proporcional ao volume da célula.
A tecnologia VCS é aplicada na contagem diferencial de leucócitos. Após a adição de um reagente que provoca a lise dos eritrócitos (necessário para realizar a contagem total dos leucócitos), as células são submetidas a três medições: volume, condutividade e dispersão de luz laser (scatter). Esta tecnologia é ainda utilizada para realizar a contagem de eritroblastos e reticulócitos. Para a contagem de reticulócitos é utilizado Novo Azul de Metileno, um reagente que precipita e cora o RNA citoplasmático presente nos reticulócitos. (36,38)
A quantificação da hemoglobina é realizada após a lise dos eritrócitos. O reagente que provoca a lise dos eritrócitos converte também a hemoglobina num pigmento estável que é doseável espectrofotometricamente a 525nm, sendo que a absorvância do pigmento é diretamente proporcional à concentração de hemoglobina na amostra. (36,38)
Este equipamento aspira uma amostra de sangue total e realiza um esfregaço numa lâmina de microscópio, permitindo a adaptação do aspeto do esfregaço e metodologia de coloração de acordo com as preferências do utilizador. (38)
6.1.2. Eritrograma
O eritrograma diz respeito ao estudo da série eritrocitária e inclui a determinação de parâmetros quantitativos como a contagem de eritrócitos, a concentração de hemoglobina e o hematócrito, e a determinação dos índices eritrocitários, como o Volume Globular Médio (VGM), a Hemoglobina Globular Média (HGM) e a Concentração de Hemoglobina Globular Média (CHGM). Os índices eritrocitários permitem avaliar as características qualitativas dos eritrócitos, sendo utilizados na caracterização morfológica das anemias.(1,34,39)
Contagem de eritrócitos
A contagem de eritrócitos diz respeito ao número de eritrócitos existentes num dado volume de sangue. É expressa em número de células por litro e constitui um indicador de disfunção da produção de eritrócitos e/ou do seu tempo de vida. (40)
Concentração de Hemoglobina
A hemoglobina (Hb) é uma proteína cuja principal função é ligar-se ao oxigénio proveniente dos pulmões e transportá-lo para os tecidos. A quantificação da Hb tem grande utilidade na deteção e avaliação do grau de anemias, uma vez que nestas ocorre uma diminuição da concentração da Hb. Esta diminuição poderá ocorrer também associada a uma redução do hematócrito e/ou da contagem de eritrócitos. A concentração de Hb é normalmente expressa em g/dL. (40)
Hematócrito
O hematócrito (Ht) corresponde ao volume ocupado pelos eritrócitos em relação ao volume de sangue total. É expresso em L/L e a sua determinação é feita pelo equipamento através de um cálculo matemático.
O Ht pode indicar alterações no número de eritrócitos e no seu volume, ou no volume do plasma, sendo útil na deteção de anemias e poliglobulias. (38,40)
Volume Globular Médio (VGM)
O volume globular médio indica o volume médio dos eritrócitos de um indivíduo. Este parâmetro é determinado automaticamente pelo equipamento, sendo expresso em fentolitros (fL). O VGM avalia o tamanho dos eritrócitos, sendo útil na classificação das anemias em microcíticas, macrocíticas ou normocíticas. (37,38)
Hemogobina Globular média (HGM)
A hemoglobina globular média representa o peso médio da hemoglobina contida num eritrócito, expressa em picogramas (pg). O HGM é determinado pelo equipamento através de um cálculo matemático: (37)
𝐻𝐺𝑀 (𝑝𝑔) = ( 𝐻𝑏 (𝑔 𝑑𝐿)⁄
𝐺𝑉 (𝑥 1012⁄𝐿)) 𝑥 10
Concentração de Hemoglobina Globular Média (CHGM)
A CHGM corresponde à concentração média de hemoglobina por unidade de volume de eritrócitos. É expressa em g/dL e a sua determinação é feita pelo equipamento através da seguinte fómula:
𝐶𝐻𝐺𝑀 (𝑔 𝑑𝐿⁄ ) = 𝐻𝑏 (𝑔 𝑑𝐿)⁄ 𝐻𝑡 (𝐿 𝐿)⁄
Este parâmetro é utilizado para classificar as anemias em hipocrómicas ou normocrómicas. (37)
Índice de dispersão eritrocitária (RDW)
O índice de dispersão eritrocitária corresponde ao coeficiente de variação da distribuição do volume eritrocitário. O RDW é determinado automaticamente pelo equipamento, sendo expresso em percentagem (%). Este parâmetro mede a variação do tamanho dos eritrócitos, pelo que um valor de RDW aumentado é indicativo de anisocitose.(37,38)
6.1.3. Leucograma
O estudo da série leucocitária é feito através do leucograma, que engloba a contagem total de leucócitos e a fórmula leucocitária.
Contagem total de leucócitos
A contagem total de leucócitos diz respeito ao número de leucócitos existentes num dado volume de sangue e é expressa em número de células por litro. Este parâmetro é útil no diagnóstico de infeções e processos inflamatórios, bem como de outras doenças que afetem os leucócitos. (1,37)
Fórmula Leucocitária
A fórmula leucocitária, ou contagem diferencial de leucócitos, consiste na determinação de cada um dos tipos de leucócitos: neutrófilos, eosinófilos, basófilos, monócitos e linfócitos. Os resultados são expressos em valor absoluto (número de células por litro) e em percentagem (%).
A fórmula leucocitária permite identificar qual ou quais os leucocócitos que se encontram em número alterado e permite também detetar e identificar células imaturas e células anormais presentes no sangue, tendo por isso grande utilidade no diagnóstico e monitorização de patologias que afetam os leucócitos. (34,40,41)
6.1.4. Plaquetograma
O estudo da série plaquetária é feito através do plaquetograma, que inclui a contagem de plaquetas e a determinação do Volume Plaquetário Médio. (1,35,39,40)
Contagem de Plaquetas
A contagem de plaquetas diz respeito ao número de plaquetas existentes num dado volume de sangue e é expressa em número de células por litro. A quantificação das plaquetas é útil no rastreio e diagnóstico de doenças que afetem as plaquetas e a formação do coágulo, bem como na monitorização do tratamento dessas doenças e de terapêuticas que afetem as plaquetas.
Nos casos em que a contagem de plaquetas está muito diminuída e não se enquadra na história clínica do doente, é importante verificar se existe um coágulo na amostra, uma vez que estes poderão induzir um resultado falsamente diminuído. (34,42)
Volume Plaquetário Médio (VPM)
O volume plaquetário médio indica o volume médio das plaquetas de um indivíduo e é expresso em fL. É determinado automaticamente pelo equipamento, sendo útil no diagnóstico diferencial de trombocitopenias. Nos indivíduos saudáveis, existe uma relação
inversa entre o VPM e a contagem de plaquetas, pelo que estes dois parâmetros devem ser analisados em conjunto. (35,36,41)
6.1.5. Reticulócitos
Os reticulócitos são eritrócitos imaturos, que não têm núcleo mas que ainda contêm RNA no citoplasma. A contagem de reticulócitos indica o número de reticulócitos presentes num determinado volume de sangue e é expressa preferencialmente em número de células por litro de sangue, ou em percentagem (%). A quantificação dos reticulócitos reflete a atividade eritropoiética da medula óssea, sendo por isso útil na avaliação de anemias, uma vez que permite distinguir entre anemias regenerativas e arregenerativas, e na monitorização do tratamento de anemias. (35,41)