Rafaela Venançoni Matoso2, Anna Carolina Pereira Staico2, Flávio Rodrigo Gandolfi
Benites3, Fausto Souza Sobrinho3
1Trabalho parcialmente financiado com recursos do CNPq e Fapemig.
2Aluna de graduação do curso de Biologia do Centro de Ensino Superior (CES) de Juiz de
Fora. e-mail: matosorv@gmail.com
3Embrapa Gado de Leite. e-mail: flavio.benites@embrapa.br; fausto.souza@embrapa.br
Resumo: O objetivo deste trabalho foi avaliar a eficiência do armazenamento de pólen de Brachiaria em condições ambientais. Foram avaliados três genótipos de Brachiaria (duas
plantas de B. ruziziensis e a B. decumbens cultivar Basilisk) e quatro dias de armazenamento de inflorescências em condições ambientais. A coleta de pólen foi realizada diariamente pela manhã, procedendo-se à fixação e coloração do mesmo em lâminas. Os resultados evidenciaram a existência de diferenças entre os genótipos para a viabilidade do pólen. Observou-se uma queda de sete pontos percentuais na viabilidade do pólen após quatro dias de armazenamento das inflorescências em condições ambientais. Constatou-se, portanto, que é possível armazenar inflorescências de Brachiaria após a retirada das plantas, mantendo-se a viabilidade do pólen elevada.
Palavras–chave: conservação, hibridação, viabilidade polínica.
Abstract: The objective of this study was to evaluate the efficiency of Brachiaria pollen
storage under environmental conditions. Three different genotypes of Brachiaria (two plants of B. ruziziensis and B. decumbens cv Basilisk) and four days of inflorescences storage under environmental conditions. The pollen was collected and fixed every morning. The results showed the existence of differences among genotypes for the viability of pollen. There was a drop of seven percentage points in pollen viability after four days of the inflorescences storage under ambient conditions. It was found, therefore, it is possible to store inflorescences Brachiaria after removal of the plants, while maintaining the high pollen viability.
Keywords: conservation, hyridization, pollen viability
Introdução
O melhoramento genético vegetal utiliza como uma das principais estratégias a realização de hibridações ou de cruzamentos intra ou interespecíficos. Quando os cruzamentos a serem realizados são controlados, exige-se, na maioria das vezes a coleta de pólen. Em alguns casos, o armazenamento deste pólen pode ser essencial para a viabilização dos cruzamentos em função, por exemplo, do florescimento não sincronizado dos parentais envolvidos.
Informações sobre a viabilidade e armazenamento de pólen em Brachiaria são escassas na literatura e o programa de melhoramento de B. ruziziensis, conduzido pela Embrapa Gado de Leite, necessita delas para maior sucesso nos cruzamentos realizados. O objetivo, portanto, foi avaliar a eficiência do armazenamento de pólen de Brachiaria em condições ambientais.
Material e Métodos
Foram utilizados dois genótipos de Brachiaria ruziziensis (plantas CIG2010#104 e JAG2010#33) e a cultivar comercial (Basilisk) de B. decumbens. Esses genótipos foram escolhidos de acordo com a disponibilidade de inflorescências no período de condução do experimento, que foi na primeira quinzena de novembro de 2011. As plantas de B.
ruziziensis eram mantidas em casa de vegetação, em vasos (5L) contendo como substrato
uma mistura de terra, areia e esterco (1:1:1). No final de outubro e início de novembro ocorreu o florescimento fora de época de algumas plantas de B. ruziziensis, favorecendo a realização do experimento. Nesta época as plantas de B. decumbens também se encontravam em pleno florescimento.
As inflorescências das plantas foram coletadas pela manhã do dia 07/11/2011, cortando-se pelo menos 30 cm de caule para formar um conjunto. Cada conjunto de inflorescências foi colocado dentro de um erlenmeyer contendo água, onde permaneceu por 5 dias. Por quatro dias consecutivos (8 a 11/11/2011), sempre na parte da manhã, procedeu-se a retirada do pólen. Cada conjunto foi colocado sobre uma folha de papel branco e as inflorescências foram balançadas para a liberação do pólen. Este, por sua vez, foi recolhido em placa de vidro (placas de Petri).
Imediatamente após a coleta procedeu-se a fixação do pólen em lâminas utilizando o corante de Alexander conforme recomendado por Timbó et al. (2011). De cada material genético, em cada um dos dias de coleta, foram preparadas nove lâminas (repetições). Estas foram armazenadas em geladeira (8oC) por 24h para posterior contagem dos grãos
de pólen viáveis empregando-se microscópio. Em cada uma das lâminas foi realizada a avaliação de cinco campos, considerando-se como viáveis os grãos de pólen que apresentavam a coloração roxa, e inviáveis os verdes.
Os dados da porcentagem de pólen viáveis foram submetidos à análises de variância considerando-se o delineamento de blocos casualisados, em esquema fatorial (3 genótipos e 4 dias de armazenamento). As médias dos diferentes tratamentos foram comparadas utilizando o teste de Scott-Knott.
Resultados e Discussão
Os resultados das análises de variância mostraram efeitos significativos para genótipos e dias de armazenamento, evidenciando que a viabilidade do pólen é influenciada pelo material genético e pelo tempo de armazenamento. A interação entre estes dois fatores, por outro lado, não foi significativa, indicando que a viabilidade dos diferentes genótipos é consistente ao longo do período de armazenamento avaliado (Tabela 1).
Tabela 1. Resumo dos resultados da análise de variância para a porcentagem de
viabilidade do pólen de genótipos de Brachiaria, considerando-se o armazenamento das inflorescências em condições ambientais
A média da porcentagem de grãos de pólen viáveis dos três genótipos considerando-se todo o período de armazenamento das inflorescências foi de 88,1%. A amplitude de variação observada foi de 13 pontos percentuais, sendo o genótipo CIG 2010#104 o que apresentou a maior viabilidade do pólen (94%). A B. decumbens apresentou viabilidade intermediária entre os dois genótipos de B. ruziziensis (Tabela 2). Esses valores são semelhantes a resultados da literatura para genótipos de B. ruziziensis (TIMBÓ et al., 2011) e superior quando envolve genótipos oriundos de cruzamentos interespecíficos de Brachiaria (RISSO-PASCOTTO et al., 2005).
FV GL QM Pr > Fc Rep Genótipo Dia Genótipo*Dia Erro 5 2 3 6 15 36,8337 384,3899 87,9359 26,8563 22,2016 0,2051 0,0001 0,0290 0,0290 0,3542 Total corrigido 31 CV (%) 5,35 Média geral 88,1484
Tabela 2. Porcentagem de viabilidade do pólen de acordo com cada genótipo e dia de
armazenamento
Genótipo % Viabilidade Scott-Knott*
JAG 33 81,64 c Decumbens 87,24 b CIG 104 94,62 a Data 4 83,30 b 3 85,86 b 1 90,26 a 2 90,32 a
* Médias seguidas por letras diferentes na coluna indica diferença significativa pelo Teste de Scott-Knott com 5% de probabilidade.
Em termos médios, observou-se uma queda de sete pontos percentuais na viabilidade do pólen após quatro dias de armazenamento das inflorescências em condições ambientais. Mesmo assim a germinação do pólen após esse período pode ser considerada bastante elevada, compatível com resultados da literatura para o gênero (TIMBÓ et al., 2011; RISSO-PASCOTTO et al., 2005). Constata-se, portanto, que o armazenamento das inflorescências dentro de recipientes com água por um período de até quatro dias permite a coleta de pólen viável para a realização de cruzamentos controlados em Brachiaria. Essa metodologia facilita a realização de alguns cruzamentos, principalmente quando os diferentes genitores envolvidos não se encontram no mesmo local. Além do mais, permite a coleta de inflorescências de cada parental masculino apenas uma vez na semana, proporcionando coletas de pólen com alta germinação para realização de cruzamentos nesse período.
Conclusões
A viabilidade dos grãos de pólen de Brachiaria é elevada.
É possível armazenar inflorescências de Brachiaria após a retirada das plantas, mantendo-se a viabilidade do pólen elevada.
Agradecimentos
À Fapemig
Literatura Citada
RISSO-PASCOTTO, C.; PAGLIARINI ,M. S.; VALLE, C. B. Multiple spindles and cellularization during microsporogenesis in an artificially induced tetraploid accession of
Brachiaria ruziziensis (Gramineae). Plant Cell Rep, v. 23, n. 8, p. 522–527, 2005.
TIMBÓ, A. L. ; PEREIRA, R. C. ; DAVIDE, L. C. ; SOBRINHO, F. S. Viabilidade polínica em plantas de Brachiaria ruziziensis tetraploidizadas artificialmente. In: CONGRESSO DE PÓS- GRADUAÇÃO DA UFLA, 20., 2011, Lavras, MG. Anais... Lavras, 2011. p. 1.