R ev is ta d a S o c i e d a d e B r a s ile ir a d e M e d i c i n a T r o p ic a l 2 9 ( 1 ) :4 7 - 4 9 , j a n - f e v , 1 9 9 6 .
N O T A P R É V IA
TREATMENT OF
T. CRUZI
INFECTED HUMAN PLATELET
CONCENTRATES W ITH AMINOMETHYLTRIMETHYL
PSORALEN (AM T)AND ULTRAVIOLETA (UV-A) LIGHT:
PRELIMINARY RESULTS
H é lio M oraes-S ou za, J o sé O rla n d o B o rd in , L eslie B a rd o ssy
a n d M orris A. B la jch m a n
l h e p r e s e n t m e a s u r e s a d o p t e d to p r e v e n t t r a n s f u s i o n - a s s o c i a t e d C h a g a s ' d is e a s e i n c l u d e s c r e e n i n g o f b lo o d d o n o r s . a n c l/o r th e i n a c t i v a t i o n q/'T. cr u z i in c o lle c te d b lo o d u s in g g e n t i a n v io le t (G V ). a s a t i y p a n o c i d a l a g e n t. í n th is s tu d y , ive in v e s t ig a te d th e e f f i c a c y o f th e c o m b i u e d u s e o f A M T a n d U V-A in i n a c t i r a t i n g T. cru zi in in fe c t e d h u m a n p l a t e l e t c u n c e n t r a te s . H u m a n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s w e r e i n f e c t e d u i t h T. cru zi
( 2 x 1 (T7m l ) o f t h e Y s tr a in . t r a n s f e r e d to PL 2 6 9 ( F e n w a l L a b o r a to r ie s ) c o n t a in e r s . a n d t r e a t e d w i th G V ( 2 5 0 /tg ,/m l) . a n d a s c o r b ic a c i d ( l m g / m l ); G V. a s c o r h ic a c i d a n d (IV-A; G V a n d U V-A; A M T ( 4 0 / t G / m l ) a n d a s c o r b ic a c id ; A M T , a s c o r b ic a c i d a n d UV-A; A M T a n d UV-A; U V -A a lo n e ; a n d u n t r e a t e d ( c o n tr o l) . A li U V-A tr e a t e d p la te le t c o n c e n t r a te s w e r e e x p o s e c l to U V -A d o s e s o f 2 4 , 9 2 , 184, 2 7 6 , J 6 8 a n d 6 4 4 k j / m 2. a n d th e m i c r o s c o p ic a l r e s e a r c h o f a c t iv e T. cr u z i w a s p e r fo r m e d , u s i n g th e m i c r o h e m a t o c r i t te c h n iq u e , 1, 6 a n d 2 4 h o u r s a f t e r e a c h t r e a tm e n t . A h ig h n u m b e r o f a c t iv e f o n n s o f T. cr u z i iv a s o b s e r v e d i n a l i c o n d i c ti o n s , e x c e p t iv h e n G V w a s u s e d a s t h e t r y p a n o c i d a l a g e n t, p r o v i d i n g e v i d e n c e o f t h e f a i l u r e o f A M T a n d U V-A in i n a c t i v a t i u g T c r u z i in i n f e c t e d h u m a n p l a te le t c o n c e n tr a te s .
K e y - w o r d s ; T r a n s fu s io n - a s s o c ia te d C h a g a s ’ d is e a s e . P h t o d y n a m i c tr e a t m e n t . U V-A a n d C h a g a s ’ d is e a s e . C h e m o p r o p h y la x is . B l o o d t r a n s fu s io n .
A m e r i c a n t r y p a n o s o m i a s i s ( C h a g a s ’ d i s e a s e ) i s a z o o n o s i s c a u s e d b y t h e p r o t o z o a n p a r a s i t e T r y p a n o s o m a c r u z i (
T. c r u z i ) .
I t h a s b e e n e s t i m a t e d t h a t a p p r o x i m a t e l y 6 0 % o f t h e 1 8m i l l i o n p e o p l e i n f e c t e d w i t h
T. c r u z i
h a v e m i g r a t e d f r o m r u r a l e n d e m i c a r e a s o f L a t i n A m e r i c a t o u r b a n a r e a s o f e n d e m i c a n d n o n -e n d e m i c c o u n t r i e s 1 7. S i n c e m o s t o f t h e s e i n d i v i d u a i s a r e s i l e n t c h r o n i c c a r r i e r s t h e y p o t e n t i a l l y j e o p a r d i z e t h e l o c a l b l o o d s u p p l y , a n d b l o o d r e c i p i e n t s a r e s t i l l b e i n g i n f e c t e d b y
T. c r u z i.
T h e p r e v e n t i o n o f t h e t r a n s f u s i o n - a s s o c i a t e d C h a g a s ’ d i s e a s e ( T A - C D ) h a s b e e n d o n e b y c l i n i c a i a n d s e r o l o g i c a l s c r e e n i n g o f b l o o d d o n o r s 12, a n d / o r i n a t i v a t i o n o f
T. c r u z i
i n c o l l e c t e d b l o o d u s i n g g e n t i a n v i o l e t ( G V ) a s a t r y p a n o c i d a l a g e n t 6.D e p a r tm en t o f P a th o lo g y , M cM a ster U n iv e r sity a n d th e C an adian R ed C r o ss S o c iety , H a m ilto n , O n ta r io , C anada; F a cu ld a d e d e M e d ic in a d o T riâ n g u lo M in eir o /F u n d a ç ã o H em o m in a s, U b era b a , M G , Brazil; a n d U n iv e r sid a d e F ed eral d e São P a u lo /E s c o la P a u lista d e M ed ic in a .
E n d e r e ç o p a r a c o r r e s p o n d ê n c i a: P rof. H é lio M o ra es-So u za. H e m o c e n tr o R e g io n a l d e U b era b a , R. G e tú lio G u aritá 2 5 0 , 3 8 0 2 5 -4 4 0 U b era b a , M G.
R e c e b id o p ara p u b lic a ç ã o e m 2 7 / 1 2 / 9 5 .
R e c e n t l y , t h e c o m b i n a t i o n o f u l t r a v i o l e t
l i g h t ( U V - A ) a n d a m i n o m e t h y l t r i m e t h y l
p s o r a l e n ( A M T ) h a s b e e n s h o w n t o b e a b l e t o
i n a c t i v a t e v i r u s i n f e c t i n g c e l l u l a r b l o o d
p r o d u c t s ’ . I n t h i s s t u d y , v v e i n v e s t i g a t e d t h e
e f f i c a c y o f t h e c o m b i n e c l u s e o f A M T a n d U V -
A i n i n a c t i v a t i n g
T. c r u z i
i n c o n t a m i n a t e dh u m a n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s .
M A T E R I A L A N D M E T H O D S
H u m a n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s w e r e i n f e c t e d
w i t h
T. c r u z i
o f t h e Y s t r a i n ( 2 x 1 0 “ p a r a s i t e sp e r m l ) , t r a n s f e r r e d i n t o U V - p e r m e a b l e
p l a t e l e t s t o r a g e P L 2 6 9 c o n t a i n e r s ( B a x t e r
H e a l t h C o r p o r a t i o n , F e n w a l D i v i s i o n ) a n d
t r e a t e d u n d e r o n e o f t h e f o l l o w i n g c o n d i t i o n s :
1 ) U n t r e a t e d
2 ) G V ( 2 5 0 p g / m l ) + A s c o r b i c A c i d ( l m g / m l )
3 ) G V ( ( 2 5 0 p g / m l ) + A s c o r b i c A c i d ( l m g / m l ) +
U V - A
4 ) G V ( 2 5 0 p g / m l ) + U V - A
5 ) A M T ( 4 0 p g / m l ) + A s c o r b i c A c i d ( l m g / m l )
6 ) A M T ( 4 0 p g / m l ) + A s c o r b i c A c i d ( l m g / m l ) +
U V - A
N o ta P r e v ia . M o n t e s - S o u z a H , B o r d i n J O , B a r d o s s y L, B l a j c h m a n M A . T r e a t m e n t o f T . c r u z i i n f e c t e d h u m a n p l a te le t c o n c e n t r a te s w i th a m i n o m e t h y l t r i m e t h y l p s o r a l e n ( A M T ) a n d u l t m i i o l e t A (U V - A ) lig h t: p r e l i m i n a r y
r e su lts . R e v is ta d a S o c i e d a d e B r a s ile ir a d e M e d i c i n a T r o p ic a l 2 9 : 4 7 - 4 9 , j a n - f e i \ 1 9 9 6 .
7 ) A M T ( 4 0 p g / m l ) + U V -A 8 ) U V -A o n l y
T h e U V - A i r r a d i a t i o n w a s d e l i v e r e d a t d o s e s o f e i t l i e r 2 4 , 9 2 , 1 8 4 , 2 7 6 , 3 6 8 , o r 6 4 4 k J / m 2
u s i n g a p r o t o t y p e u l t r a v i o l e t i r r a d i a t o r ( F e n w a l
L a b o r a t o r i e s ) c o n t a i n i n g t w o b a n k s o f s i x U V - A b u l b s ( I 3 L E - 1 T 1 5 1 ) ; ( S p e c t r o n i c s C o r p o r a t i o n ) .
T h e m i c r o s c o p i c e x a m i n a t i o n o f a c t i v e
c i r c u l a t i n g f o r m s o f
T. c r u z i
i n p l a t e l e ts u . s p e n s i o n . s w a s p e r f o r m e d u s i n g t h e m i c r o h e m a t o c r i t t e c h n i q u e 1' a t 1 , 6 , a n d 2 4
h o u r s a f t e r p r o t o c o l i n c u b a t i o n .
R E S U L T S
A s e x p e c t e d , t h e i n a c t i v a t i o n o f
T. c r u z i
p a r a s i t e s a s d e f i n e d b y a b s e n c e o f a c t i v ec i r c u l a t i n g p a r a s i t e s , w a s o b s e r v e d i n a l i
p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s t r e a t e d w i t h p r o t o c o l s
c o n t a i n i n g G V ( p r o t o c o l s 2 , 3 a n d 4 )
i m m e d i a t e l y a f t e r 1 h o u r o f t r e a t m e n t i n c u b a t i o n . T h i s
T. c r u z i
i n a c t i v a t i o n w a sc o n f i n n e d b y a n i m a l e x p e r i m e n t s i n w h i c h S w i s s i n i c e i n o c u l a t e d w i t h p l a t e l e t
s u s p e n s i o n s s u b m i t t e d t o s u c h t r e a t m e n t p r o t o c o l s d i d n o t d e v e l o p a
T. c r u z i
i n f e c t i o n .I n c o n t r a s t , a c t i v e f o r m s o f
T. c r u z i
w e r eo b s e r v e d , u n t i l a f t e r 2 4 h o u r s o f i n c u b a t i o n , i n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s l e f t u n t r e a t e d ( p r o t o c o l
1 ) ; t r e a t e d w i t h A M T p l u s A A ( p r o t o c o l 5 ) ; o r
t r e a t e d w i t h U V - A w i t h o u t a s s o c i a t i o n w i t h G V
( p r o t o c o l s 6 , 7 a n d 8 ) .
T h e r e s u l t s o f t h e s t u d y a r e s u m m a r i z e d i n T a b l e 1.
' í a h l e / . T r e a t m e n t o f T . c r u z i c o n t a m i n a t e d h n m a n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s w i t h A M T a n d l ' \ ' - A lis>ht.
T r e a t m e n t A c t i v e c i r c u l a t i n g f o r m s o f '/'. c r u z i
p r < > t o a > l 1 h o u r a f l c r 6 h o u r s a f t e r 2 4 h o u r s a f t e
i r e a t m e m t r e a t m e n t t r e a t m e n t
I J n t r c a t L - d P< i . s i m v P o s i t i v e P o s i t i \ e
r . v + A A N e g a t i v e N e g a t i v e N e g a t i v e
G V + A A + U V - A N e g a t i v e N e g a t i v e N e g a t i v e
G V + U V - A N e g a t i v e N e g a t i v e N e g a t i v e
A M T + A A P c > s i t i v e P o s i t i v e P ( i s i t i v e
A M T + A A + 1 1 V - - A P o s i t i v e P o s i t i v e P o s i t i v e
A M T + 1 ' V - A P ( i s i t i v e P< > s i t i \ e P o s i t i v e
U V - A o n l y P o s i t i v e I ^ o s i t i v e P< > s i t i v e
I : Y - A l i ^ h t t l o s e t e s t e t l = 2 - i. V I . IH-i. . H f t . a n d 644
D I S C U S S I O N
A l l o g e n e i c b l o o d t r a n s f u s i o n i s t h e m a i n r o u t e o f t r a n s m i s s i o n o f C h a g a s ’ d i s e a s e i n
u r b a n a r e a : ; o f b o t l i e n d e m i c a n d n o n - e n d e m i c
c o u n t r i e s . T h e e x c l u s i o n o f d o n o r s w h o i m m i g r a t e d f r o m e n d e m i c a r e a s b y u s i n g a
q u e s t i o n n a i r e c a n s i g n i f i c a n t l y r e d u c e t h e b l o o d s u p p l y i n c e r t a i n a r e a s . M o r e o v e r , t h e
s e r o l o g i c d i a g n o s i s o f C h a g a s ’ d i s e a s e i s
c o m p l e x y i e l c l i n g b o t h f a l s e p o s i t i v e a n d f a l s e n e g a t i v e r e s u l t s . T h u s , t h e i n v e s t i g a t i o n o f
m e t h o d s t o i n a c t i v a t e
T. c r u z i
t l i a t m i g h t b ep r e s e n t i n b l o o d p r o d u e t i s e s s e n t i a l . W e c o u l d
s h o w r e c e n t l y . t h a t t h e a s s o c i a t i o n o f G V , A A a n d p h o t o i r r a d i a t i o n w i t h v i s i b l e l i g h t e f f i c i e n t l y s t e r i l i z e d
T.
c n í z i - i n f e c t e d b l o o da f t e r t r e a t m e n t i n c u b a t i o n t i m e s h o r t e r t h a n 3 0 m i n u t e s \ I n t h e p r e s e n t s t u d v , w e i n v e s t i g a t e d
t h e e f f e c t i v e n e s s o f t h e c o m b i n a t i o n o f A M T a n d U V - A i r r a d i a t i o n i n i n a c t i v a t i n g
T. c r u z i
i nc o n t a m i n a t e d h u m a n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s , s i n c e i t h a s b e e n d e m o n s t r a t e d , i n a r a b b i t
m o d e l , t h a t A M T / U V - A t r e a t e d p l a t e l e t
s u s p e n s i o n s r e t a i n h e m o s t a t i c f u n c t i o n " .
T h e d a t a f r o m o u r e x p e r i m e n t s c o n f i r m t h e
t r y p a n o c i d a l a c t i v i t y o f t h e g e n t i a n v i o l e t ,
a l o n e o r c o m b i n e d w i t h a s c o r b i c a c i d . I n c o n t r a s t , i d e n t i c a l n u m b e r s o f a c t i v e c i r c u l a t i n g f o r m s o f
T. c r u z i
w e r e o b s e r v e d u n d e r a l it r e a t m e n t c o n d i t i o n s i n c l u d i n g t h e v a r i o u s d o s e s o f U V - A i r r a d i a t i o n r a n g i n g f r o m 2 4 t o
6 4 4 k J / n V . T h e p r e s e n t d a t a p r o v i d e e v i d e n c e . t h e r e f o r e , o f t h e l a c k o f t r y p a n o c i d a l a c t i v i t y o f
A M T a n d U V - A i n i n a c t i v a t i n g
T. c r u z i
p r e s e n ti n c o n t a m i n a t e d h u m a n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s .
A g a i n s t o u r r e s u l t s , G o t t l i e b e t a l 3 s h o w e d
t h a t A M T t o g e t h e r w i t h U V - A w e r e a b l e t o i n a c t i v a t e 5 l o g o f
T. c r u z i
i n p l a t e l e tc o n c e n t r a t e s .
F u r t h e r s t u d i e s a r e b e i n g d e v e l o p e d i n o u r
l a b o r a t o r y i n o r d e r t o e l u c i d a t e t h e r o l e o f U V - A i n
T. c r u z i
i n a c t i v a t i o n .R E S U M O
A s m e d i d a s a d o t a d a s a t u a l m e n t e p a r a p r e v e n i r a d o e n ç a d e C h a g a s t r a n s f u s i o n a l i n c l u e m a s e le ç ã o d o s d o a d o r e s d e s a n g u e e / o u a i n a t i v a ç â o d o T. cru zi n o s a n g u e c o le ta d o a tr a v é s d o u s o d a v io le ta d e g e n c i a n a ( V G ) c o m o a g e n t e tr i p a n o s o m i c i d a . N e ste e s tu d o , n ó s i n v e s t ig a m o s a e f i c á c i a d o u s o c o m b i n a d o d o A M T e d a U V-A p a r a a n e u t r a l i z a ç ã o d o T . cru zi e m c o n c e n t r a d o s d e p l a q u e t a s h u m a n a s in fe c ta d o s . O s c o n c e n t r a d o s d e p l a q u e t a s i n f e c t a d o s c o m ce p a Y d e T. cru z i ( Z x l ( T / m l ) f o r a m tr a n s fe r i d o s p a r a r e c ip ie n te s PI. 2 6 9 ( F e n w a l L a b o r a to r ie s ) e tr a t a d o s c o m VG ( 2 5 0 / i g / m l j e á c i d o a s c ó r b ic o ( I m g / i n l j ; VG. á c i d o a s c ó r b ic o e U V-A; G V e U \'-A ;
N o ta P r é v ia . M o r a e s - S o u z a H , B o r d i n JO , B a r d o s s y L, B l a j c h m a n M A . T r e a t m e n t o f T. c r u z i i n f e c t e d h u m a n p l a t e l e t c o n c e n t r a t e s w i th a m i n o m e t h y l t r i m e t h y l p s o r a l e n ( A M T ) a n d u ltr a v io le t A (U V -A ) lig h t: p r e l i m i n a r y
r e su lts. R e v is ta d a S o c i e d a d e B r a s il e ir a d e M e d i c i n a T r o p ic a l 2 9 : 4 7 - 4 9 , j a n - f e v , 1 9 9 6 .
A M T ( 4 0 } iG /m l) e á c i d o a s c õ r b ic o ; A M T , á c i d o a s c ó r b ic o e U V-A; A M T e UV-A; s o m e n t e U V-A; e n ã o t r a t a d o ( c o n t r o l e ) . T o d o s o s c o n c e n t r a d o s d e p l a q u e t a s f o r a m e x p o s to s a d o s e s d e 2 4 , 9 2 , 1 8 4 , 2 7 6 , 3 6 8 e 6 4 4 k f / m 2 d e U V -A , e a p e s q u i s a m ic r o s c ó p ic a d o T . c r u z i f o i r e a l i z a d a p e l a té c n ic a d o m ic r o h e m a tó c r ito , 1, 6 e 2 4 h o r a s a p ó s c a d a t r a t a m e n t o . G r a n d e n ú m e r o d e f o r m a s a t i v a s d e T. cru z i f o i o b s e r v a d o e m to d o s o s e x p e r im e n to s , e x c e to q u a n d o f o i u s a d a a V G c o m o o a g e n t e t r i p a n o s o m i c i d a , e v i d e n c i a n d o a i n e f i c á c i a d o A M T e d a l u z u l tr a v io l e ta e m i n a t i v a r o T. cr u z i n o s c o n c e n t r a d o s d e p l a q u e t a s h u m a n a s in fe c ta d o s .
P a la ir a s -c h a v e s : D o e n ç a d e C h a g a s tr a n s f u s i o n a l . Q u i m i o p r o f i l a x i a . T r a t a m e n t o f o t o d i n â m i c o . L u z u ltr a v io l e ta e d o e n ç a d e C h a g a s . T r a n s fu s ã o d e s a n g u e .
R E F E R E N C E S
1. A p p le m a n M D , S h u lm a n IA, S a x en a S, K ir ch h o ff LV U s e o f a q u e s tio n n a ir e t o id e n tify p o te n tia l b l o o d d o n o r s a t risk f o r in f e c t io n w i t h
T i y p a n o s o m a c r u z i. T ra n s fu s io n 3 3 :6 1 6 4 ,1 9 9 3 -2. C a m a rg o ME. S er o lo g ic a l d ia g n o s is .A n ap pra isal o f C h a g a s ’ d is e a s e s e r o d ia g n o s is . In : W en d el S, B r en er 2 , C a m a rg o ME, R assi A ( e d s ) C h ag a s d is e a s e (A m e r ic a n tr y p a n o so m ia sis): its im p a c t o n tr a n sfu sio n a n d c lin ic a i m e d ic in e . S ão P a ulo, p . 1 6 5 - 1 7 8 ,1 9 9 2 .
3. G o ttlie b P, B en -H u r E, L u stigm an S, M argolis-N u n n o H , H o r o w itz B. P ara site in a ct iv a tio n in red b l o o d c e l l s a n d p la t e le t c o n c e n t r a t e s b y
p hotodyn am ic treatm ent.Transfusion 3 4 ( s u p p l): 4 3 5 , 1 9 9 4
4 . K ir c h h o ff LV. A m e rica n tr y p a n o s o m ia s is (C h a g a s’ d is e a s e ). A tro p ic a l d is e a s e n o w in t h e U n ited S ta tes. T h e N e w E n gla n d J o u rn a l o f M e d ic in e 3 2 9 : 6 3 9 - 6 4 4 ,1 9 9 3 .
5. M a rg o lis-N u n o H ,W illia m s B, R y w k in S, G e a c in to v N , H o r o w itz B. V iru s s te r iliz a tio n in p la te le t c o n c e n t r a te s w it h p s o r a le n a n d u ltr a v io let A lig h t in t h e p r e s e n c e o f q u e n c h e r s . T r a n s f u s io n 3 2 : 5 4 1 - 5 4 7 ,1 9 9 2 .
6 . R am irez LE, L ages-Silva E, P ia n etti GM , R a b elo RMC, B o rd in JO , M ora es-S o u za H. P r e v e n tio n o f t r a n s f u s i o n - a s s o c i a t e d C h a g a s ’ d i s e a s e b y s t e r iliz a tio n o f T. c r u z i- in f e c t e d b lo o d w it h g e n t i a n v i o l e t , a s c o r b i c a c i d a n d l i g h t . T r a n sfu sio n 35: 2 2 6 - 2 3 0 ,1 9 9 5 .
7 . S ch m u n is GA. T i y p a n o s o m a c r u z i, t h e e t io lo g ic a g e n t o f C h a g a s ’ d is ea s e: sta tu s in th e b lo o d s u p p ly in e n d e m ic a n d n o n e n d e m ic c o u n tr ie s . T ra n sfu sio n 3 1 : 5 4 7 - 5 5 7 ,1 9 9 1 .
8 . W a g n er S, B a rd o ss y L, M o r o ff G, D o d d y RY, B la jch m a n MA. A s s e s s m e n t o f th e h e m o s ta tic e f f e c t iv e n e s s o f h u m a n p la te le t tre a te d w ith a m in o m e th y ltr im e th y l p s o r a le n an d UV-A lig h t u s in g a ra bb it ea r b le e d in g tim e t e c h n iq u e . B lo o d 8 2 : 3 4 8 9 - 3 4 9 2 ,1 9 9 3 .
9 . W o o P TK . E v a lu a t io n o f t h e h e m a to c r it c e n tr ifu g e a n d o t h e r te c h n iq u e s fo r th e field d i a g n o s i s o f h u m a n t r y p a n o s o m i a s i s a n d fila r ia sis.A cta T ro p ic a 2 8 : 2 9 8 - 3 0 3 ,1 9 7 1 .
